Mapping a Th17 network: microRNA and Polycomb in cell fate specification

Host detection of foreign pathogens can trigger both innate and adaptive immune responses; CD4+ T helper (Th) cells play a critical role in the latter. Upon encountering its cognate antigen and receiving appropriate co-stimulatory signals, a naïve CD4+ Th cell can differentiate into a variety of effector subsets that include, but are not limited to, CD4+ Th1, Th2, Th17, Tfh, and iTregs. This dissertation focuses on the regulatory circuitry that enables the differentiation of distinct CD4+ Th cell lineages; concentrating on the role of microRNA (miRNA) in this T cell fate decision. Experimentally, in vitro polarization of primary murine CD4+ Th cells by addition of exogenous cytokines is used to decipher the molecular and signaling events that control the differentiation process of each subset. Examination of Th1, Th2, and Th17 cells deficient in Signal Transducers and Activators of Transcription (STAT) signaling, reveals the critical function of these transcription factors in inducing expression of non-coding RNA. Focusing on the CD4+ Th17 cell subset, a key role for STAT3 is identified in regulating the expression of miR-29 and miR-155. We find that miR-29 expression in Th17 cells prevents aberrant cytokine expression, and this miRNA has a further role in the in vivo generation of pathogenic Th17 cells during autoimmune disease. Moreover, we show that miR-155 promotes Th17 cytokine expression by altering the chromatin state through the inhibition of Jarid2 expression. In the context of embryonic stem cells, Jarid2 recruits the Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2) to epigenetically silence key developmental genes by catalyzing the trimethylation of H3K27. We find that high expression of miR-155 in Th17 cells alleviates Jarid2-PRC2 inhibition of genes encoding Th17 signature cytokines. Thus, miR-155 targeting of Jarid2 favors a more open chromatin state at both cytokine loci and genes promoting Th17 cell development. Through collaboration with the National Center for Advancing Translational Sciences (NCATS), the translational aspects of these research questions were investigated. MiR-155 and Th17 cells are highly expressed in many autoimmune diseases and Th17 cells have a detrimental role in such diseases. By examining the molecular networks involving miRNAs in CD4+ Th cell development, our goal is to find new drugs that can target mir-155 for therapeutic purposes and potentially alleviate disease progression

ENFOQUES DE EXTENSION Y ADOPCION DE TECNOLOGIAS DE CONSERVACION DE SUELOS. ESTUDIOS DE CASOS CON ONGs DE ESTELI, BOACO Y MATAGALPA

En Nicaragua, las entidades que promueven tecnologías de conservación de suelos y aguas (CSA) a los productores utilizan diferentes enfoques en el proceso de extensión. En algunos casos los han fusionado o complementado creando un enfoque particular. El objetivo de este estudio realizado en el 2001 - 2002, fue analizar la relación entre los enfoques de extensión y la adopción de tecnologías de conservación de suelos, mediante información obtenida en FIDER, ASPRODIC y ADDAC. La metodología utilizada fue el estudio de caso, que incluyó la realización de entrevistas a coordinadores de proyectos, técnicos extensionistas y agricultores en San Ramón (Matagalpa), La Trinidad (Estelí) y Santa Lucía (Boaco) donde inciden las entidades FIDER, ADDAC y ASPRODIC respectivamente. Además, el estudio incluyó la observación directa en las parcelas. Se determinó que los enfoques de extensión influyen positivamente en la implementación de tecnologías de CSA, ya que éstos determinan los participantes en el proceso de extensión, las estrategias, los insumos necesarios y los conocimientos prácticos y teóricos que se requiere compartir con los productores. Las entidades en estudio emplean diferentes enfoques de extensión y la combinación éstos, según la filosofía y necesidades de cada entidad, el enfoque basado en la capacitación y visitas es común en las tres entidades. Se confirma que la adopción de tecnologías es un fenómeno multicausal en el que influyen los enfoques de extensión, pero también depende de otros factores internos y externos a los sistemas de producción

El proceso creativo y de realización del cortometraje "Tercer Acto" desde guion, dirección y producción

“Tercer Acto” es un cortometraje de ficción del género drama que presenta a Isabella, una mujer profesional que antes se desempeñaba en el rubro del arte, pero se vio en la necesidad de buscar otra manera de solventarse económicamente al no tener los resultados esperados en su vocación artística. Mediante los acontecimientos por los que pasa la protagonista se busca explorar en temas como las decisiones de vida, la noción de éxito, las percepciones respecto al arte y la relación entre una madre y su hija, quienes perciben y dan significado a la vida de manera distinta, así se invita a los espectadores a reflexionar sobre sus decisiones a lo largo de su vida y sobre las que realizarán en el futuro. Partiendo de la concepción de la premisa hasta los toques finales, el equipo de Tercer Acto ha de tener presente que este proyecto aborda temas que se centran en la respuesta emocional de cada personaje, y cada área se desempeña alineada a esta idea. Dentro del presente trabajo se encuentra el desglose de las áreas de dirección general, producción y guionización, y el detalle de sus labores alrededor de la pre-producción, producción y post-producción del cortometraje. Finalmente, el resultado del cortometraje refleja la situación que puede presentarse en la vida de algunas personas y como los objetivos cambian conforme pasa el tiempo y se ajustan a las necesidades; sin embargo, se dejan abiertas muchas posibilidades a las que toca enfrentarse en un nuevo ciclo de decisiones y experiencias."Third Act" is a fictional short film of the drama genre that presents Isabella, a professional woman who previously worked in the field of art, but found herself in need of finding another way to support herself financially by not having the expected results in his artistic vocation. Through the events that the protagonist goes through, it seeks to explore topics such as life decisions, the notion of success, perceptions regarding art and the relationship between a mother and her daughter, who perceive and give meaning to life in a different way. different, thus viewers are invited to reflect on their decisions throughout their lives and on those they will make in the future. Starting from the conception of the premise to the final touches, the Third Act team must keep in mind that this project addresses themes that focus on the emotional response of each character, and each area performs in line with this idea. Within the present work is the breakdown of the areas of general direction, production and scriptwriting, and the detail of their work around the pre-production, production and post-production of the short film. Finally, the result of the short film reflects the situation that can arise in the lives of some people and how the objectives change as time goes by and adjust to the needs; however, many possibilities are left open that have to be faced in a new cycle of decisions and experiences.Trabajo de investigació

ANKRD26 and Its Interacting Partners TRIO, GPS2, HMMR and DIPA Regulate Adipogenesis in 3T3-L1 Cells

Partial inactivation of the Ankyrin repeat domain 26 (Ankrd26) gene causes obesity and diabetes in mice and increases spontaneous and induced adipogenesis in mouse embryonic fibroblasts. However, it is not yet known how the Ankrd26 protein carries out its biological functions. We identified by yeast two-hybrid and immunoprecipitation assays the triple functional domain protein (TRIO), the G protein pathway suppressor 2 (GPS2), the delta-interacting protein A (DIPA) and the hyaluronan-mediated motility receptor (HMMR) as ANKRD26 interacting partners. Adipogenesis of 3T3-L1 cells was increased by selective down-regulation of Ankrd26, Trio, Gps2, Hmmr and Dipa. Furthermore, GPS2 and DIPA, which are normally located in the nucleus, were translocated to the cytoplasm, when the C-terminus of ANKRD26 was introduced into these cells. These findings provide biochemical evidence that ANKRD26, TRIO, GPS2 and HMMR are novel and important regulators of adipogenisis and identify new targets for the modulation of adipogenesis

Determinación de ectoparásitos en roedores plaga del mercado municipal de Panajachel, Sololá.

En este estudio se realizó la captura de 100 roedores por medio de muestreo por conveniencia, obteniendo una muestra homogénea entre sexo y edad de las dos especies capturadas: Rattus rattus y Mus musculus. Las variables estadísticas que se midieron fueron: presencia de ectoparásitos de la familia Pulicidae, orden Mallophaga y Anoplura, ectoparásitos según sexo, edad y especie de los roedores estudiados. Se determinó la presencia de la pulga Xenopsylla cheopis en los roedores capturados de la especie Rattus rattus. Así mismo pulgas de la especie Ctenocephalides felis y Pulex irritans. Estadísticamente no hay diferencia en la presencia de los ectoparásitos y la edad y el sexo de los roedores capturados en el mercado municipal de Panajachel, Sololá

Mapping a Th17 network: microRNA and Polycomb in cell fate specification

Host detection of foreign pathogens can trigger both innate and adaptive immune responses; CD4+ T helper (Th) cells play a critical role in the latter. Upon encountering its cognate antigen and receiving appropriate co-stimulatory signals, a naïve CD4+ Th cell can differentiate into a variety of effector subsets that include, but are not limited to, CD4+ Th1, Th2, Th17, Tfh, and iTregs. This dissertation focuses on the regulatory circuitry that enables the differentiation of distinct CD4+ Th cell lineages; concentrating on the role of microRNA (miRNA) in this T cell fate decision. Experimentally, in vitro polarization of primary murine CD4+ Th cells by addition of exogenous cytokines is used to decipher the molecular and signaling events that control the differentiation process of each subset. Examination of Th1, Th2, and Th17 cells deficient in Signal Transducers and Activators of Transcription (STAT) signaling, reveals the critical function of these transcription factors in inducing expression of non-coding RNA. Focusing on the CD4+ Th17 cell subset, a key role for STAT3 is identified in regulating the expression of miR-29 and miR-155. We find that miR-29 expression in Th17 cells prevents aberrant cytokine expression, and this miRNA has a further role in the in vivo generation of pathogenic Th17 cells during autoimmune disease. Moreover, we show that miR-155 promotes Th17 cytokine expression by altering the chromatin state through the inhibition of Jarid2 expression. In the context of embryonic stem cells, Jarid2 recruits the Polycomb Repressive Complex 2 (PRC2) to epigenetically silence key developmental genes by catalyzing the trimethylation of H3K27. We find that high expression of miR-155 in Th17 cells alleviates Jarid2-PRC2 inhibition of genes encoding Th17 signature cytokines. Thus, miR-155 targeting of Jarid2 favors a more open chromatin state at both cytokine loci and genes promoting Th17 cell development. Through collaboration with the National Center for Advancing Translational Sciences (NCATS), the translational aspects of these research questions were investigated. MiR-155 and Th17 cells are highly expressed in many autoimmune diseases and Th17 cells have a detrimental role in such diseases. By examining the molecular networks involving miRNAs in CD4+ Th cell development, our goal is to find new drugs that can target mir-155 for therapeutic purposes and potentially alleviate disease progression

Enfoque de extensión y adopción de tecnología de conservación de suelos. Estudios de casos con ONGs de Estelí, Boaco y Matagalpa

En Nicaragua, las entidades que promueven tecnologías de conservación de suelos y aguas (CSA) a los productores uti lizan diferentes enfoques en el proceso de extensión. En al gunos casos los han fusionado o complementado creando un enfoque particular. El objetivo de este estudio realizado en el 2001 - 2002, fue analizar la relación entre los enfoques de extensión y la adopción de tecnologías de conservación de suelos, mediante información obtenida en FIDER, ASPRODIC y ADDAC. La metodología utilizada fue el estudio de caso, que incluyó la realización de entrevistas a coordinadores de proyectos, técnicos-extensionistas y agricultores en San Ramón (Matagalpa), La Trinidad (Estelí) y Santa Lucía (Boaco) donde inciden las entidades FIDER, ADDAC y ASPRODIC respectivamente. Además, el estudio incluyó la observación directa en las parcelas. Se determinó que los enfoques de extensión influyen positivamente en la implementación de tecnologías de CSA, ya que éstos determinan los participan tes en el proceso de extensión, las estrategias, los insumos necesarios y los conocimientos prácticos y teóricos que se requiere compartir con los productores. Las entidades en estudio emplean diferentes enfoques de extensión y la combinación éstos, según la filosofía y necesidades de cada entidad, el enfoque basado en la capacitación y visitas es común en las tres entidades. Se confirma que la adopción de tecnologías es un fenómeno multicausal en el que influyen los enfoques de extensión, pero también depende de otros factores internos y externos a los sistemas de produccion

Análisis y rehabilitación del equipo de medición de temperatura (RTMB) en los generadores síncronos de la Central Hidroeléctrica 15 de Septiembre de El Salvador

Para un país como el nuestro es de mucha importancia la generación de energía eléctrica pues es un factor que tiene una incidencia directa en el desarrollo tecnológico de una nación subdesarrollada como El Salvador, es por ello que hemos desarrollado el presente trabajo. En los últimos años la comisión hidroeléctrica del Rio Lempa (CEL), ha explotado los recursos naturales presentes como son las centrales hidroeléctricas y geométricas; es por ello que todos estos medio de producción tienen que estar bien protegidos de cualquier problema técnico, el objetivo del presente trabajo es analizar y rehabilitar el equipo de medición de temperatura (RTMB) de los generadores sincronos de la central hidroeléctrica 15 de septiembre de El Salvado

Relación entre los enfoques de extensión y la adopción de prácticas de conservación de suelos en ONGs que trabajan en laderas en Estelí, Boaco y Matagalpa

Las entidades que transfieren tecnologías a los productores han venido adoptando diferentes enfoques en dicha transferencia; en algunos casos los han fusionado o complementado creando un enfoque particular. Se considera que Jos enfoques de extensión influyen en el nivel de adopción de las tecnologías promovidas, hipótesis que se trata de comprobar en el presente trabajo, el cual se realizó en los departamento de Esteli, Matagalpa, Boaco, utilizando información obtenida en las entidades: Fundación para la Investigación y Desarrollo Rural (FIDER), Asociación para la Promoción y Desarrollo Integral comunitario (ASPRODIC), y Asociación para la Diversificación y Desarrollo Agrícola Comunal (ADDAC) quienes contaban con estudios de adopción realizados con anterioridad. La información de los estudios de adopción fue completada con entrevistas para caracterizar el enfoque de extensión de cada entidad. El estudio logra comprobar que cada institución utiliza una combinación de diferentes enfoques, de acuerdo a las condiciones en que se desempeña y políticas de la entidad; sin embargo, el enfoque basado en la capacitación y visitas es común en las tres entidades. Además, se logra confirmar que la adopción de tecnologías de conservación de suelos y aguas es un fenómeno multicausal en el que intervienen, en mayor o menor grado, los diferentes métodos y medios de extensión empleados por las entidades: capacitación, incentivos, demostraciones, intercambios

Active and Repressed Chromatin Domains Exhibit Distinct Nucleosome Segregation During DNA Replication

Chromatin domains and their associated structures must be faithfully inherited through cellular division to maintain cellular identity. Yet, accessing the localized strategies preserving chromatin domain inheritance, specifically the transfer of parental, pre-existing nucleosomes with their associated post-translational modifications (PTMs) during DNA replication is challenging in living cells. We devised an inducible, proximity-dependent labeling system to irreversibly mark replication-dependent H3.1 and H3.2 histone-containing nucleosomes at single desired loci in mouse embryonic stem cells such that their fate after DNA replication could be followed. Strikingly, repressed chromatin domains are preserved through the local re-deposition of parental nucleosomes. In contrast, nucleosomes decorating active chromatin domains do not exhibit such preservation. Notably, altering cell fate leads to an adjustment in the positional inheritance of parental nucleosomes that reflects the corresponding changes in chromatin structure. These findings point to important mechanisms that contribute to parental nucleosome segregation to preserve cellular identity