Development of gold core silica shell nanospheres for cancer therapy

Currently, cancer is major public health problem, presenting an increasing incidence and mortality rate that affects the worldwide population. Among the treatments used in the clinic, chemotherapy is the most commonly used anticancer therapy, despite its low therapeutic efficacy. This scenario can be explained by rapid degradation, reduced solubility, and selectivity of chemotherapeutic drugs to cancer cells. Additionally, cancer cells can develop resistance to multiple drugs, which highlights the necessity to develop novel and more effective anti-cancer approaches. Combinatorial therapies based on the simultaneous administration of multiple drugs can lead to synergistic effects, which consequently increase the therapeutic efficiency of chemotherapy. However, chemotherapeutic drugs present limitations that impair their intravenous administration. Thus, despite the need to found novel drug combinations with high therapeutic potential, it is crucial to develop delivery systems capable of increasing the drugs’ therapeutic selectivity and efficacy while simultaneously decreasing their systemic toxicity. Among the drug delivery systems that have been developed so far, gold core silica shell (AuMSS) nanoparticles present excellent physicochemical and biological properties that allow their simultaneous application in chemotherapy and bioimaging. Thus, the research work developed during the second year of my master’s degree aimed to design a dual drug combination based on Doxorubicin (DOX) and Acridine orange (AO) to be encapsulated in AuMSS nanospheres. Moreover, a novel AuMSS surface modification using 3-(Triethoxysilyl)propyl isocyanate-Poly(ethylene glycol)-4- Methoxybenzamide (TPANIS) was developed to improve nanoparticles’ blood circulation time and specificity to cancer cells. The 4-Methoxybenzamide or Anisamide (ANIS) was selected due to its specificity for sigma receptors that are overexpressed in the cancer cells’ membranes. On the other hand, PEG was selected due to its amphiphilic nature and high solubility, that lead to a reduce protein adsorption on nanoparticles’ surface, and consequently increase its blood circulation time. The obtained results demonstrated that the DOX:AO drug combination can mediate a synergistic therapeutic effect in both HeLa and MCF-7 cells, particularly at the 2:1, 1:1, and 1:2 ratios. Otherwise, AuMSS nanoparticles’ functionalization with the TPANIS promoted a slight increase in the nanoparticles’ size and stability. The successful incorporation of the polymers on nanoparticles surface was also confirmed by thermogravimetric analysis (TGA) and by Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Additionally, both the DOX and AO were successfully encapsulated on the AuMSS-TPANIS nanospheres. In in vitro studies, nanoparticles demonstrated to be biocompatible when in contact with healthy cells (fibroblasts) and cancer cells (HeLa and MCF-7) up to the maximum tested concentration of 200 µg/mL. Moreover, the AuMSS nanospheres' functionalization with TPANIS significantly increased their internalization by MCF-7 cells. This selectivity towards MCF-7 (overexpressing sigma receptors) also resulted in an enhanced cytotoxic effect against this cell line. In summary, the presented results confirm the successful functionalization of AuMSS nanoparticles with PEG and ANIS. Additionally, the therapeutic potential of the DOX:AO drug combination as well as the targeting capacity of AuMSS-TPANIS nanospheres were also demonstrated. Such supports the application of AuMSS-TPANIS nanoparticles for cancer-targeted chemotherapy based on the DOX:AO drug combination.Atualmente o cancro é um dos principais problemas de saúde pública, apresentando uma elevada incidência e taxa de mortalidade crescente na população mundial. Entre as opções de tratamento disponíveis, a quimioterapia é a terapia anticancerígena mais comummente aplicada na clínica, contudo apresenta uma baixa eficácia terapêutica. Este cenário é explicado pela rápida degradação, reduzida solubilidade e seletividade dos fármacos quimioterapêuticos usados em meio clínico para eliminar as células cancerígenas. Por outro lado, as células cancerígenas têm a capacidade de desenvolver resistência a múltiplos fármacos, o que reforça a necessidade de desenvolver abordagens terapêuticas mais eficazes. Assim sendo, as terapias combinatórias baseadas na administração simultânea de múltiplos fármacos surgem como uma abordagem promissora, uma vez que a combinação de fármacos pode levar a um efeito terapêutico sinérgico, incrementando a eficácia da quimioterapia. Além disso, as terapias combinatórias possibilitam a redução das doses dos fármacos administrados, minimizando assim os seus efeitos colaterais. Contudo, os fármacos quimioterapêuticos apresentam limitações que condicionam a sua administração intravenosa. Assim, a par da necessidade de desenvolver novas combinações de medicamentos com alto potencial terapêutico, é crucial desenvolver sistemas de entrega capazes de aumentar a seletividade, eficácia terapêutica, e ainda reduzir a sua toxicidade sistémica. Dentro dos sistemas de entrega de fármacos que tem vindo a ser desenvolvidos destacam-se as nanopartículas de ouro com revestimento de sílica (AuMSS). Estes nanosistemas apresentam propriedades físico-químicas e biológicas que permitem a sua aplicação não só como transportadores dos agentes terapêuticos, mas também como agentes de imagiologia. O trabalho de investigação desenvolvido durante o meu 2 º ano de mestrado teve como objetivo desenvolver uma nova combinação de fármacos à base de doxorrubicina (DOX) e laranja de Acridina (AO) para ser entregue a células cancerígenas por AuMSS esféricas. Por outro lado, foi ainda desenvolvido um revestimento de superfície baseado em Polietilenoglicol (PEG) e Anisamida (ANIS) com o intuito de aumentar o tempo de circulação na corrente sanguínea e a seletividade do nanosistema para as células cancerígenas. A ANIS foi selecionada devido à sua especificidade para os recetores sigma que estão sobreexpressos em alguns dos tipos de cancro. Por outro lado, o PEG foi selecionado devido à sua natureza anfifílica e elevada solubilidade, o que permite reduzir a adsorção de proteínas na superfície das nanopartículas, e consequentemente aumentar o seu tempo de circulação na corrente sanguínea. Os resultados obtidos neste estudo demonstraram que a combinação DOX:AO pode mediar um efeito terapêutico sinérgico tanto em células cancerígenas do colo do útero (HeLa) como em células do cancro da mama (MCF-7), principalmente quando são usados rácios 2:1, 1:1 e 1:2. A funcionalização das AuMSS com PEG e ANIS (AuMSS-TPANIS) resultou num aumento do tamanho médio destes nanosistemas (para 190 nm), mas também lhes conferiu uma maior estabilidade coloidal. O sucesso da ligação dos polímeros às nanopartículas foi ainda confirmado por análise termogravimétrica (TGA) e por espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier (FTIR). Nos estudos in vitro, as nanopartículas mostraram ser biocompatíveis quando em contacto com células saudáveis (fibroblastos) e células cancerígenas (HeLa e MCF-7) até à máxima concentração testada de 200 µg/mL. Verificou-se ainda que a funcionalização das nanopartículas com ANIS aumentou a sua internalização pelas células MCF-7 (linha celular que sobreexpressa os recetores sigma). Esta maior seletividade para as células MCF-7 traduziu-se também num maior efeito citotóxico nestas células cancerígenas, quando comparado com o observado nas células HeLa. Em suma, os resultados apresentados confirmam a funcionalização das nanopartículas com o PEG e ANIS, o potencial terapêutico da combinação DOX:AO e ainda a capacidade de direcionamento para as células cancerígenas das AuMSS-TPANIS

Andando pela estrada da memória: uma abordagem de realidade virtual para suporte ao estudo do ajuste mnemónico para a contaminação

Biologically, humans have evolved to adapt against pathogens but, since fighting them can have negative implication to the body, a set of mechanisms have evolved towards avoiding contamination, called the Behavioral Immune System (BIS). To better understand the BIS, Experimental Psychology studies its impact by conducting experiments where a participant is exposed to several objects some of which are presented as having been in contact with a source of contamination (e.g., a sick person).To ensure the safety of the participants, these experiments typically rely on photographs of the objects and individuals and on background stories establishing the connection between both, which requires some imagination effort, from the participant, and affects the realism of the experiment. To move the research on BIS and memory into a potentially more ecologically-valid setting, the current work proposes a Virtual Reality (VR) based approach where 360º videos are used as stimuli, during the experiments. To this end, a set of tools were devised to support creating and cataloging videos, and to configure and control their presentation to the participant, in the virtual environment. At an early stage, a partial version of the platform served as grounds for a pilot study aiming to assess the overall adequateness of the proposal and validate acquisition parameters for the stimuli. The positive outcomes of this study informed the development of the complete Experiment Support System and, at its current stage, results from an evaluation with ten users show a good level of usability. Considering that the proposed system already supports the implementation of the designed experimental protocol, it establishes a promising ground for further evolving the research regarding the Mnemonic Tuning for Contamination.Biologicamente, os seres humanos evoluíram para se adaptarem contra os agentes patogénicos, mas, uma vez que combatê-los pode ter implicações negativas no corpo, um conjunto de mecanismos evoluiu para evitar a contaminação, chamado Sistema Imunológico Comportamental (BIS). Para melhor compreender o BIS, a Psicologia Experimental estuda o seu impacto através da realização de experiências em que um participante é exposto a vários objetos, alguns dos quais são apresentados como tendo estado em contacto com uma fonte de contaminação (por exemplo, uma pessoa doente). Para garantir a segurança dos participantes, estas experiências normalmente contam com fotografias dos objetos e indivíduos e em histórias de fundo que estabelecem a ligação entre ambos, o que requer algum esforço de imaginação, do participante, e afeta o realismo da experiência. Para mover a pesquisa sobre o BIS e a memória para um cenário potencialmente mais válido ecologicamente, o trabalho atual propõe uma abordagem baseada em Realidade Virtual (VR) onde vídeos de 360º são usados como estímulos, durante as experiências. Para tal, foi concebido um conjunto de ferramentas para apoiar a criação e catalogação de vídeos, e para configurar e controlar a sua apresentação ao participante, no ambiente virtual. Numa fase inicial, uma versão parcial da plataforma serviu de base a um estudo piloto com o objetivo de avaliar a adequação global da proposta e validar os parâmetros de aquisição para os estímulos. Os resultados positivos deste estudo informaram o desenvolvimento do sistema completo de suporte a experiências e, na sua fase atual, uma avaliação com dez utilizadores mostrou um bom nível de usabilidade. Tendo em conta que o sistema proposto já apoia a implementação do protocolo experimental concebido, estabelece um terreno promissor para uma maior evolução da investigação do ajuste mnemónico para a contaminação.Mestrado em Engenharia de Computadores e Telemátic

Untersuchung der extrazellulären Matrix des Gehirns und Anwendung experimenteller MRT zum Verständnis der Krankheitsentwicklung in einem Mausmodell der Multiplen Sklerose

Multiple sclerosis (MS) is a chronic neuroimmunological disease with growing incidence in which autoimmune-driven inflammation leads to damage to the central nervous system and demyelination. Although identification of demyelinating lesions by conventional magnetic resonance imaging (MRI) is paramount for diagnosis and prognosis of MS, the lack of consistent correlation with disease activity and progression motivates the search for complimentary imaging tools. Neuroinflammatory processes, anteceding demyelination and neurodegeneration, are known for exerting a significant effect on extracellular matrix (ECM) composition and can be imaged by MR elastography (MRE) and magnetic nanoparticle-based MRI. Hence, this thesis aimed at using these alternative imaging tools to investigate brain inflammation and the associated remodeling of its ECM. The studies compiled here examined the neuropathological processes behind alterations of the mechanical properties of the brain in association with accumulation of europium-doped very small superparamagnetic iron oxide particles (Eu-VSOP) and remodeling the ECM using the mouse model of MS, experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE). Additionally, characterization of alterations in glycosaminoglycans (GAGs) associated with disease development and progression was investigated. The results demonstrated that focal neuroinflammation resulted in microstructural changes affecting the mechanical properties of the brain tissue. Intense perivascular infiltration of inflammatory cell as well as inflammation at the periventricular space visualized by Eu-VSOPs are characterized by marked tissue softening compared with areas of disseminated inflammation. Furthermore, a quantitative mapping of brain stiffness revealed that MRE is able to detect region-specific alterations in tissue microstructure, revealing reduced cortical stiffness at peak EAE. These changes were associated with overexpression of laminin 4 and 5 as well as collagen type VI and downregulation of fibronectin. Finally, changes in GAG composition and metabolism indicate that early alterations in gene expression are followed by modifications in chondroitin sulfate (CS) and hyaluronic acid (HA) GAG fractions. Upregulation of genes associated with GAG degradation and HA synthesis persisted in inflammatory stages but was reduced in the remission phase. In agreement, quantification of CS and HA disaccharides by high performance liquid chromatography showed a reduction of CS-4S, the most abundant CS GAG fraction, and an increase in HA during peak EAE. Taken together, the presented results indicate that in vivo assessment of tissue microstructure using MRE may aid monitoring the pathological processes underlying disease development. Moreover, GAGs remodeling of within the ECM could be interesting targets for development of imaging probes or for interventional therapies able to hinder disease progression.Multiple Sklerose (MS) ist eine chronisch-neuroimmunologische Erkrankung, bei der autoimmunbedingte Entzündungen zu Demyelinisierung und Schäden im zentralen Nervensystem führen. Grundlage der MS-Diagnose ist die Identifizierung demyelinisierender Läsionen durch konventionelle Magnetresonanztomographie (MR). Diese korrelieren jedoch nicht mit der Krankheitsaktivität, was die Suche nach ergänzender Bildgebung motiviert. Neuroinflammatorische Prozesse, die Demyelinisierung und Degeneration begünstigen, wirken sich auf die Zusammensetzung der extrazellulären Matrix (ECM) aus und können mittels MR-Elastographie (MRE) und nanopartikelbasierter MRT abgebildet werden. Ziel dieser Arbeit war es, diese alternativen Verfahren zur Untersuchung von Inflammation und begleitendem ECM- Umbau im Gehirn einzusetzen. Die zusammengestellten Studien untersuchen anhand des Mausmodells der MS, der experimentellen Autoimmun-Enzephalomyelitis (EAE), neuropathologische Prozesse, die hinter den mechanischen Veränderungen des Gehirns in Verbindung mit der Akkumulation von Europium-dotierten sehr kleinen superparamagnetischen Partikeln (Eu-VSOP) und dem Umbau der EZM stehen. Zusätzlich wurden Glykosaminoglykan(GAG)-Veränderungen charakterisiert, die mit der Krankheitsentwickulung in Verbindung stehen. Die Ergebnisse zeigten, dass fokale Neuroinflammation zu Veränderungen der Mikrostruktur des Hirngewebes und der mechanischen Eigenschaften führt. Die mittels Eu-VSOPs sichtbar gemachte perivaskuläre Infiltration von Entzündungszellen sowie Entzündung im periventrikulären Raum zeichneten sich im Vergleich zu Arealen disseminierter Entzündung durch eine Gewebeerweichung aus. Eine quantitative Kartierung der Hirnsteifigkeit zeigte, dass MRE in der Lage ist, regionsspezifische Veränderungen in der Gewebemikrostruktur zu erkennen, wobei eine verringerte kortikale Steifigkeit während der EAE festgestellt wurde. Diese Veränderungen gingen mit einer Überexpression von Laminin 4 und 5 sowie von Kollagen Typ VI und einer Herabregulierung von Fibronektin einher. Weiterhin deuten Alterationen in der GAG Zusammensetzung und im Stoffwechsel darauf hin, dass auf eine veränderte Genexpression Änderungen in den GAG-Fraktionen Chondroitinsulfat (CS) und Hyaluronsäure (HA) folgen. Die Hochregulierung von GAG-verwandten Genen hielt während der Entzündungsphasen an, nahm jedoch während der Remissionsphase ab. Die Quantifizierung von CS- und HA-Disacchariden mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie ergab eine Verringerung von CS-4S und eine Zunahme von HA zum Höhepunkt der EAE. Insgesamt deuten die Ergebnisse darauf hin, dass die In-vivo-Bewertung der Gewebemikrostruktur mittels MRE die Überwachung der Krankheitsentwicklung und zugrundeliegender pathologischer Prozesse unterstützt. Darüber hinaus sind GAGs, die in der ECM umgebaut werden, interessante Ziele für die Entwicklung von Bildgebungssonden oder für interventionelle Therapien zur Verhinderung der Progression von Krankheiten

El concepto de “transferencia educacional” en la historia de la educación comparada: continuidades y rupturas

Este artículo analiza nociones de “transferencia ” en laliteratura de la educación comparada, buscando continuidadesy discontinuidades en la forma como el proceso de transferenciaeducacional ha sido interpretado. El análisis muestra que eltema de transferencia ha sido fundamental, en la educacióncomparada, desde inicios del siglo XIX hasta hoy en día. Apesar de que algunas de las cuestiones abordadas en sus orígenestodavía sean cruciales hoy en día, se sugiere, al final del estudio,que dichos problemas deberían volver a ser tratados, en unmundo cuyo espacio educacional se ha vuelto más complejo,en la medida en que actores supranacionales y subnacionalesse hacen más importantes a la hora de producir y reproducir elconocimiento especializado sobre educación.Este artigo analisa noções de “transferência” na literatura da educação comparada, buscando continuidades e descontinuidades na forma como o processo de transferência educacional tem sido interpretado. A análise mostra que o tema da transferência tem sido fundamental, na educação comparada, desde o começo do século XIX até a atualidade. Apesar de algumas das questões abordadas no campo desde suas origens ainda serem cruciais hoje, sugere-se, na parte final do estudo, que esses problemas deveriam agora ser tratados em um mundo cujo espaço educacional tem se tornado mais complexo, à medida que atores supranacionais e subnacionais se fazem crescentemente importantes na produção e na reprodução de conhecimento especializado sobre educação.This article analyses notions of ‘transfer’ in the literatureof comparative education, searching for continuities anddiscontinuities in the way that the process of educationaltransfer has been construed. The analysis shows that the themeof transfer has been fundamental in comparative education fromthe early nineteenth century until the present day. Althoughsome of the questions addressed in the field since its origins arestill crucial today, it is suggested in the final part of the study thatthese problems should now be addressed in a world in whicheducational space has become more complex, as supra-nationaland sub-national actors become increasingly important in theproduction and reproduction of specialized knowledge abouteducation.Tradução: Rafaela Silva RabeloFil: Beech, Jason. Universidad de San Andrés. Escuela de Educación; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rabelo, Rafaela Silva. Universidade de Sao Paulo; Brasi

Analysis of the use of dosimetrically equivalent linear accelerators for intensity modulated radiotherapy treatments

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica , apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015O uso de radiações para terapia iniciou-se pouco tempo após a descoberta dos raios-X por Wilhelm Röntgen em 1895, tendo ocorrido uma grande evolução ao nível da tecnologia geradora de raios-X até ao presente. Essa evolução tornou possível que sejam produzidos feixes de fotões e electrões de altas energias. Os aceleradores lineares são actualmente os principais produtores de raios X de alta energia utilizados em Radioterapia. Devido à evolução tecnológica das últimas décadas e ao elevado nível de reprodutibilidade e precisão dos feixes produzidos por estes equipamentos, tem-se verificado um esforço progressivo, por parte dos fabricantes, para uniformizar o desenho e a tecnologia dos aceleradores lineares. Esta uniformização permite que aceleradores lineares idênticos possam ser instalados com ajuste dosimétrico (beam-matching) e considerados dosimetricamente equivalentes. A instalação com beam-matching permite um aumento da flexibilidade e eficiência dos aceleradores lineares, pois reduz a necessidade de interrupção ou replaneamento dos tratamentos em caso de paragem de um dos equipamentos, devido à possibilidade da utilização indistinta dos mesmos. A utilização indistinta dos aceleradores lineares assume um papel bastante importante nas unidades de tratamento, pois as interrupções do funcionamento normal dos equipamentos são relativamente frequentes, devido a intervenções de manutenção preventiva periódica, bem como a avarias. Por este motivo, tem-se tornado comum nos serviços de radioterapia a instalação de aceleradores lineares com beam-matching em relação a equipamentos similares instalados previamente, fazendo com que os aceleradores lineares existentes no serviço sejam dosimetricamente equivalentes e permitindo a sua utilização indistinta. Apesar dos ajustes dosimétricos, podem ocorrer pequenas variações nas características dos aceleradores lineares, que podem resultar de diversos factores, como desgaste dos equipamentos ou condições de utilização. Têm sido realizados estudos [1-4] com a finalidade de avaliar a equivalência dosimétrica de aceleradores lineares instalados com beam-matching dentro de uma unidade de tratamento. Os resultados obtidos nestes estudos confirmam a equivalência dosimétrica entre os equipamentos, sugerindo que o processo de beam-matching é suficiente para garantir a utilização indistinta dos aceleradores lineres. No entanto, resultando as possíveis variações nas características dos equipamentos de diversos factores, é necessário avaliar individualmente a equivalência dosimétrica dos aceleradores lineares para diferentes unidades, bem como verificar se esta equivalência é mantida a longo-prazo ou se, por outro lado, surgem diferenças significativas ao nível das características dosimétricas que justifiquem a adaptação do sistema de planeamento aos novos parâmetros. Esta necessidade assume especial relevância para técnicas avançadas, como a Radioterapia de Intensidade Modulada (IMRT), na qual se verificam elevados gradientes de dose e são utilizados colimadores multi-lâminas (MLC), bem como campos de reduzidas dimensões, que podem conduzir a um maior impacto das variações ao nível dos planeamentos dosimétricos. Deste modo, no âmbito do Estágio realizado no Instituto Português de Oncologia de Lisboa Francisco Gentil (IPOLFG), foi realizado um estudo que consistiu, por um lado, na avaliação da estabilidade a longo prazo das características dos feixes de fotões de 6 MV e, por outro, na comparação dosimétrica para a técnica de Radioterapia de Intensidade Modulada (IMRT). Para a realização do presente estudo, foram utilizados três aceleradores lineares do modelo 2100C/D da Varian Medical Systems, Inc., que produzem fotões com energias de 6 MV e com um valor de energia mais elevado, 10 MV ou 15 MV, bem como electrões com diversas energias. Um dos aceleradores lineares, denominado DHX01, foi instalado em Março de 2012, enquanto os dois restantes, DHX02 e DHX03, foram instalados em Novembro e Dezembro de 2012, respectivamente. Os aceleradores lineares DHX02 e DHX03 foram instalados com beam-matching, sendo dosimetricamente equivalentes no sistema de planeamento e usados indistintamente em caso de interrupção do funcionamento de um dos equipamentos. Os três aceleradores lineares são usados para tratamentos de Radioterapia de Intensidade Modulada (IMRT), contendo, para o efeito, um colimador multilâminas (MLC) MilleniumTM MLC com 120 lâminas, divididas por dois bancos com 60 lâminas. Estão também equipados com um dispositivo electrónico de imagem portal (EPID), usado para verificação de planos de IMRT. A avaliação da estabilidade a longo-prazo das características dosimétricas dos aceleradores lineares consistiu na análise de dados adquiridos nas verificações realizadas no âmbito dos controlos de qualidade diário e trimestral durante o ano de 2014 para fotões de 6 MV (energia utilizada para tratamentos de IMRT). Na análise foram também incluídos os resultados de medições realizadas para controlo de qualidade do MLC. Os resultados obtidos com os três aceleradores lineares foram analisados usando o software SPSS Statistics Package, sendo realizada uma comparação entre os três equipamentos para verificar se, de modo geral, os resultados obtidos nos controlos de qualidade compromete a equivalência dosimétrica em estudo. A comparação dosimétrica dos três aceleradores lineares para tratamentos de IMRT foi realizada através de verificação de planos de tratamento para patologia de cabeça e pescoço (H&N) e próstata, criados com o sistema de planeamento EclipseTM da Varian Medical Systems, Inc. Foram selecionadas amostras contendo doentes tratados em cada um dos aceleradores lineares usando a técnica de IMRT, para cada uma das duas patologias, num total de seis amostras. Para além das verificações originais realizadas antes do início dos tratamentos, usando o equipamento em que o doente foi tratado, novas verificações foram realizadas com os restantes dois aceleradores lineares, sem troca de unidade de tratamento no sistema de planeamento, i.e., mantendo os parâmetros originais do plano de tratamento, sem recálculo para equipamento diferente. As verificações foram realizadas através de Análise Gamma de imagens portais adquiridas através de EPID. A comparação entre os três equipamentos consistiu na comparação das percentagens de pontos em conformidade com os critérios estabelecidos para a Análise Gamma com critérios 3.0%, 3.0 mm obtidas nas três verificações efectuadas para cada amostra e análise das diferenças obtidas com realização da verificação com um equipamento diferente. Foi ainda realizada uma análise de doses no sistema de planeamento, que consistiu na troca de unidade de tratamento no sistema de planeamento para todos os doentes de cada uma das amostras, com posterior recálculo de dose, e determinação da das diferenças obtidas devido à troca de equipamento ao nível da dose e unidades monitor (UM) calculadas pelo TPS. Esta última análise teve a finalidade de determinar se possíveis desvios obtidos nos resultados da Análise Gamma para as verificações com EPID são resultantes de diferenças nas características dosimétricas dos aceleradores lineares ou se, por outro lado, resultam de diferenças acentuadas entre as unidades de tratamento no sistema de planeamento, comprometendo o ajustamento experimental a um equipamento diferente. Ambas as avaliações foram realizadas com a finalidade de estudar dois aspectos principais. Um deles consistiu na verificação da equivalência dosimétrica a longo-prazo dos aceleradores lineares DHX02 e DHX03, instalados com beam-matching, bem como a verificação desta equivalência no caso de tratamentos de IMRT. O outro aspecto em estudo consistiu na possibilidade de utilizar indistintamente o terceiro acelerador linear, DHX01, instalado sem beam-matching, como dosimetricamente equivalente aos outros dois equipamentos para tratamentos de IMRT. Os resultados obtidos estão de acordo com os valores de tolerância recomendados e confirmam a equivalência dosimétrica entre os aceleradores lineares. No entanto, sugerem precaução na utilização indistinta do equipamento DHX01, pois, embora os resultados estejam dentro dos limites estabelecidos (acordos da Análise Gamma superiores a 90.00%), diferem dos obtidos para os restantes aceleradores lineares, com desvios máximos de 8.00%. Apesar de as diferenças obtidas não serem, em geral, significativas (desvios médios são de aproximadamente 4.00%) não comprometerem totalmente a utilização indistinta do equipamento DHX01, é recomendada a actualização das características dos aceleradores lineares no sistema de planeamento.Linear accelerators are currently the mostly used high energy X-rays generators for Radiotherapy. Due to the evolution occurred in the last decades, as well as to the high reproducibility and precision of the beams generated by these machines, a progressive standardization of their design and technology has occurred. This standardization allows similar linear accelerators to be installed with dosimetric adjustments (beam-matching) and considered dosimetrically equivalent in the treatment planning system, reducing the need of treatment interruption or replanning if a linear accelerator is not functioning. In spite of the dosimetric adjustments, small variation in outputs may occur due to several factors, as equipment wear or use conditions. Several studies [1-4] that supported the dosimetric equivalence between beam-matched linear accelerators have been performed. However, as the possible variations result from diverse factors, it is recommended to evaluate the dosimetric equivalence of linear accelerators individually for each treatment facility, especially for advanced treatment techniques, as Intensity Modulated Radiotherapy (IMRT), in which dose gradients are high and multileaf collimators (MLC) and small fields are used, possibly increasing the impact of the variations for dosimetric plans. For this reason, in the context of the Internship in Instituto Português de Oncologia de Lisboa Francisco Gentil (IPOLFG), a long term stability evaluation has been performed for the characteristics of 6 MV photons from three linear accelerators installed in the Radiotherapy Service (two of them are beam-matched), acquired during daily and trimestral quality assurance procedures. It was also performed a dosimetric comparison between the three machines for Intensity Modulated Radiotherapy (IMRT), using portal imaging and Gamma Analysis, in order to verify the differences resultant from the indistinct use of the linear accelerators. The obtained results supported the dosimetric equivalence of the linear accelerators, but suggesting caution when using indistinctly the linear accelerator installed without beam-matching, especially for Head and Neck treatments, since, although the results are in accordance the recommended tolerance of 90.00% for the agreement of the Gamma Analysis, higher deviations were obtained for this equipment, with approximate average values of 4.00% and maximum value of 8.00%