Prescription des inhibiteurs de la pompe à protons (étude et intervention à titre exploratoire sur un échantillon de médecins militaires)

Introduction : La forte consommation d inhibiteurs de la pompe à protons (IPP) a un impact majeur sur les dépenses de l Assurance-Maladie. Bien tolérés, ils sont souvent prescrits en dehors des indications de l autorisation de mise sur le marché (AMM). Nous avons réalisé un audit à partir d une étude connaissances attitudes et pratiques, associée à une action de formation, sur la prescription des IPP d un échantillon de médecins généralistes militaires. Nous avons, au préalable, étudié le volume de prescriptions des IPP dans les Armées.Méthode : Nous avons déterminé le nombre de prescription d IPP et leur rang dans l ensemble des médicaments prescrits par les médecins militaires durant la période 2009-2010 d après les données de la Caisse Nationale Militaire de Sécurité Sociale (CNMSS). Notre audit a évalué les pratiques de 20 médecins d unités d Ile-de-France à l aide de deux questionnaires hétéro-administrés encadrant une action de formation.Résultats : Les IPP arrivaient au 6ème rang des médicaments les plus prescrits par les médecins militaires selon les données de la CNMSS. On notait un manque de connaissance global des recommandations, ainsi, plus de la moitié des prescriptions d IPP concernant la prévention des lésions gastro-intestinales induites par des AINS n étaient pas conforme à l AMM. Seuls 25 % des médecins prescrivaient correctement l IPP en cas de RGO. Les des praticiens prescrivaient un IPP pour des manifestations extra-digestives isolées du RGO. L action de formation a permis une amélioration notable des résultats.Discussion : L enquête réalisée auprès de la CNMSS et le manque de connaissance des recommandations suggèrent l importance des actions de formationsPARIS12-CRETEIL BU Médecine (940282101) / SudocPARIS-Bib. Serv.Santé Armées (751055204) / SudocSudocFranceF

Importance de la classification moléculaire dans la prise en charge de patients atteints de mélanome métastatique

Le mélanome est la forme la plus agressive de cancer de la peau et son incidence à travers le monde ne cesse de s'accroître. Si les formes précoces de mélanome peuvent être traitées avec succès par chirurgie, il existe peu de traitements efficaces pour les formes avancées. Le mélanome métastatique présente de nombreuses anomalies moléculaires qui peuvent être utilisées comme cible thérapeutique. Aujourd'hui, il semble plus intéressant de déterminer des sous-groupes de patients présentant telle(s) ou telle(s) anomalie(s) plutôt que de considérer le mélanome comme une maladie identique d'un patient à un autre. Actuellement, l'objectif est de développer des traitements personnalisés pour un sous-groupe de patients donné de manière à optimiser la prise en charge. Les altérations génétiques et moléculaires mises en évidence à ce jour concernent notamment la voie des MAPK et des PI3K/AKT/mTOR impliquées dans la survie, l'invasion et la prolifération cellulaire. Les résultats cliniques obtenus l'an passé avec les inhibiteurs spécifiques de BRAFV600E ont suscité un vif enthousiasme mais le développement rapide de résistance conduit à développer des traitements dirigés contre d'autres cibles ou à contre les mécanismes de résistance mis en jeu.NANTES-BU Médecine pharmacie (441092101) / SudocSudocFranceF

The melanoma antigens MELOE-1 and MELOE-2 are translated from a bona fide polycistronic mRNA containing functional IRES sequences.

Our previous studies on melanoma antigens identified two new polypeptides, named MELOE-1 and MELOE-2, that are involved in immunosurveillance. Intriguingly, these antigens are coded by distinct open reading frames (ORF) of the meloe mRNA which is significantly expressed only in the melanocytic lineage. In addition, MELOE-1 and -2 specific T cell clones recognized melanoma cells but very poorly normal melanocytes suggesting differential translation of meloe in normal vs tumor cells. This prompted us to elucidate the mechanisms of translation of these antigens in melanoma cells. We first demonstrated that no splicing event or cryptic promoter could generate shorter meloe transcripts containing only one of the two ORFs. Triggering meloe RNA degradation with a siRNA close to the ORF coding for MELOE-2 abrogated expression of both MELOE-1 and MELOE-2, thus confirming that the two ORFs are always associated. Next we showed, in a bicistronic reporter system, that IRES activities could be detected upstream of MELOE-1 and MELOE-2 and finally confirmed their translation from full length meloe cDNA in melanoma cells with eGFP constructs. In conclusion, meloe is a polycistronic mRNA that generates both MELOE-1 and MELOE-2 antigens through IRES-dependent translation in melanoma cells and that may explain their tumor specificity

Expression of <i>meloe</i> mRNA and MELOE antigens in SW480 line transfected with full-length <i>meloe</i> cDNA.

<p>A. <i>Meloe</i> relative expression measured by RT-qPCR using 3′DR primers on SW480 cells wild type (wt-SW480) or transfected (T-SW480) with full-length <i>meloe</i> cDNA. M113 cells were used as positive control. B. RT-PCR products amplified from RNA of SW480 cells transfected or not with full-length <i>meloe</i> cDNA. Reverse transcriptions were performed on total RNA samples followed by PCR using 5′end and 3′end primers described on <a href="http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0075233#pone-0075233-g001" target="_blank">Figure 1C</a>. C. TNF secretion by MELOE-1 (M170.48) and MELOE-2 (M170.51) T cell clones in response to SW480 cell line. Co-cultures were performed at 1∶2 clone:SW480 cells ratio and responses were assessed by TNF-α intracellular staining.</p

<i>Meloe</i> silencing in melanoma cells with a short interfering RNA (siRNA) localized upstream of MELOE-2 ORF.

<p>A. M88 melanoma cells were transfected with 50(control si) or siRNA hybridizing 55 bp upstream of MELOE-2 ORF (<i>meloe</i> si) along with a GFP reporter plasmid. Relative expression levels of <i>meloe</i> mRNA were evaluated on GFP+ sorted cells by qPCR with MELOE-1 primers. B. TNF secretion by MELOE-1 (M170.48) and MELOE-2 (M170.51) T cell clones in response to GFP+ sorted M88 cells transfected with the different siRNAs. Co-cultures with specific clones were performed at 1∶2 clone to melanoma cell ratio and response of each clone was assessed by TNF-α intracellular staining.</p

Analysis of IRES activity in upstream region and within the intercistronic region of <i>meloe</i> mRNA.

<p>M113 melanoma cells were transfected with the pRF bicistronic vector either empty (control vector) or containing the viral EMCV IRES (positive control) or various fragments of <i>meloe</i> mRNA: UR_1–545, UR_262–545 IR_666–1215, IR_1268–1490, IR_1391–1490. Renilla luciferase (black bars) and Firefly luciferase (white bars) activities were determined 48 h after transfection and expressed as arbitrary units. Data are expressed as mean +/− SEM from four distinct experiments. ***p<0.001, *p<0,05, ns (non significant) by ANOVA and Dunnett post-test.</p

Detection of putative cryptic promoter activity in intercistronic region (IR) and upstream region (UR) of <i>meloe</i>.

<p>The SV40 promoter region of PGL4-13 vector was replaced by fragments of interest, i.e intercistronic region (IR_666–1490) between MELOE-1 and MELOE-2, MELOE-2 Upstream Region (UR_1–545), or the 600 bp melanA promoter as positive control. PGL4-13 without the SV40 promoter was used as negative control. A Renilla luciferase expression plasmid was co-transfected as a positive control of transfection. Renilla luciferase (black bars) and Firefly luciferase (white bars) activities were measured after 48 h and expressed as arbitrary units. Data are expressed as mean +/− SEM from four distinct experiments.</p