Determination of cannabinoids in urine samples by sorbent packed microextraction and gas chromatography-mass spectrometry

Cannabis is the most consumed illicit drug worldwide, and its legal status is a source of concern. This study proposes a rapid procedure for the simultaneous quantification of ?9- tetrahydrocannabinol (THC), 11-hydroxy-?9-tetrahydrocannabinol (11-OH-THC), 11-nor9-carboxy-?9-tetrahydrocannabinol (THC-COOH), cannabidiol (CBD) and cannabinol (CBN) in urine samples. Microextraction by packed sorbent (MEPS) was used to preconcentrate the analytes, which were detected by gas chromatography-mass spectrometry. The procedure was previously optimized, and the final conditions were: conditioning with 50 µL methanol and 50 µL of water, sample load with two draw-eject cycles, washing with 310 µL of 0.1% formic acid in water with 5% isopropanol; the elution was made with 35 µL of 0.1% ammonium hydroxide in methanol. This fast extraction procedure allowed quantification in the ranges of 1-400 ng/mL for THC and CBD, 5-400 ng/mL for CBN and 11-OH-THC, and 10-400 ng/mL for THC-COOH with coefficients of determination higher than 0.99. The limits of quantification and detection were between 1-10 ng/mL using 0.25 mL of sample. The extraction efficiencies varied between 26 and 85%. This analytical method is the first allowing the determination of cannabinoids in urine sample using MEPS, being a fast, simple and low-cost alternative to conventional techniques.A canábis é a droga mais antiga e mais frequentemente consumida mundialmente, tornando-se na substância ilícita mais populares do século XXI. Portanto, o seu estatuto legal e a sua discriminização em vários países, atualmente é uma fonte de preocupação global. A canábis legalizada continua a causar preocupação por várias razões, nomeadamente: (1) as provas existentes de que a canábis tem um efeito prejudicial sobre as ligações neuronais do cérebro em desenvolvimento; (2) o facto de haver um crescimento nos pedidos de tratamento para a dependência da canábis a ocorrer mundialmente; (3) e os perigos do aumento da intoxicação pela canábis, especialmente na condução. Devido a estas razões, o contributo do desenvolvimento de investigações e métodos cada vez mais eficazes são extremamente importantes na área toxicológica. A urina é uma das amostras mais utilizadas para a deteção e quantificação de canabinóides, especialmente em laboratórios de despistagem de análise de drogas. Nesta matriz biológica é possível detetar metabolitos do ?9-tretahidrocanabinol (THC), principal composto psicoativo presente na cannabis, o ácido 11-nor-9-carboxi-?9- tretahidrocanabinol (THC-COOH) e ainda o 11-hidroxi-?9-tetrahydrocannabiol (11-OHTCH) que são utilizados como marcadores de consumo desta droga de abuso. São diversas às técnicas de extração ou de preparação da amostra utilizadas para isolar estes compostos da amostra biológica, entre elas a mais utilizada é extração de fase sólida (SPE). Versões miniaturizadas desta técnica, como por exemplo a microextração em seringa empacotada (MEPS), estão ainda pouco usadas. Esta técnica tem várias vantagens como a sua rapidez, sensibilidade, eficiência, e a redução de utilização de volumes de amostras e de solventes orgânicos utilizados, considerando-a amiga para o ambiente e para o utilizador. Com base nesta premissa, o presente estudo descreve o desenvolvimento, otimização e validação de um método analítico para a determinação de três canabinóides (cannabidiol (CBD), canabinol (CBN) e THC e dois metabolitos (11-OH-THC e THC-COOH) em urina com recurso à MEPS e à cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (GCMS). A otimização do processo de extração foi realizada tendo em conta os principais parâmetros que afetam ao processo de microextração: número de aspirações de amostra (2), o número de lavagens do sorbente e o número de eluições (1). Para esta etapa recorreu-se à utilização da ferramenta estatística do desenho experimental (DOE). As condições finais foram: condicionamento com 50 µL de metanol e 50 µL de água, passagem da amostra com dois ciclos de aspiração e ejeção, lavagem com 310 µL de 0,1% de fórmico em água com 5% de isopropanol e a eluição foi feita com 35 µL de 0,1% de hidróxido de amónia em metanol. Após otimização, a metodologia foi validada seguindo normas internacionais de validação para bioanálise. Foram considerados parâmetros como seletividade, modelo de calibração e linearidade, limites de quantificação e deteção, precisão e exatidão de intra-dia, inter-dia e intermediada, eficiência do processo de extração, estabilidade e carryover. Foi obtida uma linearidade de 1-400 ng/mL para o THC e CBD, de 5-400 ng/mL para CBN e 11-OH-THC e de 10-400 ng/mL para THC-COOH, com um coeficiente de correlação em todos os casos superior a 0.99. As precisões e exatidão inter-dia, intra-dia e intermedia obtidas tiveram coeficientes de variação (CV) abaixo dos 15% e uma exatidão inferior ou igual a 15% para todos os compostos em estudo. As recuperações obtidas variaram entre 26% a 85%. Os resultados obtidos permitem afirmar que a técnica proposta apresenta uma excelente sensibilidade (1-10 ng/mL). O método desenvolvido foi ainda aplicado a amostras de indivíduos com suspeita de consumo de canábis. É necessário destacar que o procedimento descrito nesta dissertação é o primeiro trabalho que recorre à MEPS combinada com a GC-MS para identificação e quantificação de canabinóides em amostras de urina. Dada a rápida extração, os volumes de amostra e de solventes utilizados, além da possibilidade de reutilização do sorbente de extração, é possível considerar a metodologia proposta acessível para a maioria dos laboratórios de toxicologia

Marketing infantil: despertando a bela biblioteca escolar adormecida

Emphasize that the school library serves as a center of educational resources , integrated with the teaching-learning process and aims to develop reading and information. Examines the issue of Marketing and Endomarketing applied to private institutions of school libraries in the municipality of João Pessoa. The methodology consisted of exploratory articulated character with field research , with five (05 ) managers of these school libraries in elementary school in João Pessoa- PB . The data collection instrument was a questionnaire containing open and closed questions .Points out , as a marketing tool that creates and adds value to the procedures adopted in the institution . We conclude that there is not a full planning and actions supported in marketing practices that promote and advertise their products and services . We recommend that guidelines for the implementation of the marketing information units studied , in order to facilitate access of the target audience and enhance the performance space of the librarian and the dissemination of information space which is widespread knowledge and professional are outlined own librarian.NenhumaEnfatizar que a biblioteca escolar funciona como um centro de recursos educativos, integrado ao processo de ensino- aprendizagem e tem como objetivo desenvolver a leitura e informação. Analisa a questão do Marketing e Endomarketing aplicado a bibliotecas escolares de Instituições privadas do Município de João Pessoa. A metodologia foi constituída de caráter exploratória, articulada com pesquisa de campo, sendo 05 (cinco) gestores destas bibliotecas escolares de ensino fundamental em João Pessoa-PB. O instrumento de coleta de dados foi o questionário, contendo questões abertas e fechadas. Ressalta, o marketing como uma ferramenta que cria e agrega valor aos procedimentos adotados na instituição. Conclui-se que não há um planejamento pleno e ações apoiadas no marketing, práticas que promovem e divulgam seus produtos e serviços. Recomendamos que sejam delineadas diretrizes para a implantação do marketing nas unidades de informação estudadas, com o intuito de facilitar o acesso do público alvo e valorizar o espaço de atuação do bibliotecário e da disseminação da informação o espaço que é disseminado o conhecimento e o próprio profissional bibliotecário

Opioid Monitoring in Clinical Settings: Strategies and Implications of Tailored Approaches for Therapy

This review emphasises the importance of opioid monitoring in clinical practice and advocates for a personalised approach based on pharmacogenetics. Beyond effectively managing pain, meticulous oversight is required to address concerns about side effects, specially due to opioidcrisis- related abuse and dependence. Various monitoring techniques, along with pharmacogenetic considerations, are critical for personalising treatment and optimising pain relief while reducing misuse and addiction risks. Future perspectives reveal both opportunities and challenges, with advances in analytical technologies holding promise for increasing monitoring efficiency. The integration of pharmacogenetics has the potential to transform pain management by allowing for a precise prediction of drug responses. Nevertheless, challenges such as prominent pharmacogenetic testing and guideline standardisation persist. Collaborative efforts are critical for transforming scientific advances into tangible improvements in patient care. Standardised protocols and interdisciplinary collaboration are required to ensure consistent and evidence-based opioid monitoring. Future research should look into the long-term effects of opioid therapy, as well as the impact of genetic factors on individual responses, to help guide personalised treatment plans and reduce adverse events. Lastly, embracing innovation and collaboration can improve the standard of care in chronic pain management by striking a balance between pain relief and patient safet

Opioid Monitoring in Clinical Settings: Strategies and Implications of Tailored Approaches for Therapy

This review emphasises the importance of opioid monitoring in clinical practice and advocates for a personalised approach based on pharmacogenetics. Beyond effectively managing pain, meticulous oversight is required to address concerns about side effects, specially due to opioid-crisis-related abuse and dependence. Various monitoring techniques, along with pharmacogenetic considerations, are critical for personalising treatment and optimising pain relief while reducing misuse and addiction risks. Future perspectives reveal both opportunities and challenges, with advances in analytical technologies holding promise for increasing monitoring efficiency. The integration of pharmacogenetics has the potential to transform pain management by allowing for a precise prediction of drug responses. Nevertheless, challenges such as prominent pharmacogenetic testing and guideline standardisation persist. Collaborative efforts are critical for transforming scientific advances into tangible improvements in patient care. Standardised protocols and interdisciplinary collaboration are required to ensure consistent and evidence-based opioid monitoring. Future research should look into the long-term effects of opioid therapy, as well as the impact of genetic factors on individual responses, to help guide personalised treatment plans and reduce adverse events. Lastly, embracing innovation and collaboration can improve the standard of care in chronic pain management by striking a balance between pain relief and patient safety.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Determination of Ketamine and Norketamine in hair samples using MEPS as sample clean-up

Palestra realizada no encontro SoHT-GTFI Joint Meeting, Verona, Junho 2022Introduction and Aim: The use of hair samples to determine ketamine (K) and its metabolite, norketamine (NK), has been studied by several authors, using different clean-up approaches. However, microextraction by packed sorbent (MEPS), a miniaturized form of the classic solid-phase extraction has not been applied to date for the purpose. Therefore, a method to determine K and NK in hair samples was developed, optimized, and validated using MEPS as sample clean-up. Materials & Methods: Hair samples were scissor-cut into small fragments, and rinsed with methanol to remove dirt and externally deposited material. Following an overnight incubation with methanol at 65 ºC (no stirring), the compounds were analysed by GC-MS/MS without the need of derivatization procedures; MEPS conditions were: conditioning (5 x 250 µL of methanol and 4 x 250 µL of deionized water); load (10 x 150 µL of hair extract); washing (50 µL of 0.1% acetic acid and 50 µL of 10% methanol); and elution (100 µL of 3% ammonium hydroxide in methanol). Results & Discussion: The procedure resulted in acceptable recoveries, 39-61% for K and 32-43% for NK, and allowed reaching limits of quantification (LOQs) of 50 pg/mg for both analytes. The analytical method presented acceptable accuracy and precision with coefficients of variation typically lower than 15% and BIAS within ± 15%, except at the LOQ (20%). The method was successfully applied to 2 authentic samples, and ketamine concentrations were below 0.05 and 0.18 ng/mg. Norketamine was not detected. Conclusions: This work is the first analytical method using MEPS coupled to GC-MS/MS for the determination of K and NK in hair samples. Following a comparison with a SPE-based method using authentic samples, it was considered rapid and suitable for routine analysis. Acknowledgments: FCT (UIDB /00709/2020 and UIDP/00709/2020). A.Y. Simão acknowledges the PhD fellowship from FCT (2020.09070.BD).N/

The Determination of Cannabinoids in Urine Samples Using Microextraction by Packed Sorbent and Gas Chromatography-Mass Spectrometry

Cannabis is the most consumed illicit drug worldwide, and its legal status is a source of concern. This study proposes a rapid procedure for the simultaneous quantification of Δ9-tetrahydrocannabinol (THC), 11-hydroxy-Δ9-tetrahydrocannabinol (11-OH-THC), 11-nor-9-carboxy-Δ9-tetrahydrocannabinol (THC-COOH), cannabidiol (CBD), and cannabinol (CBN) in urine samples. Microextraction by packed sorbent (MEPS) was used to pre-concentrate the analytes, which were detected by gas chromatography–mass spectrometry. The procedure was previously optimized, and the final conditions were: conditioning with 50 µL methanol and 50 µL of water, sample load with two draw–eject cycles, and washing with 310 µL of 0.1% formic acid in water with 5% isopropanol; the elution was made with 35 µL of 0.1% ammonium hydroxide in methanol. This fast extraction procedure allowed quantification in the ranges of 1–400 ng/mL for THC and CBD, 5–400 ng/mL for CBN and 11-OH-THC, and 10–400 ng/mL for THC-COOH with coefficients of determination higher than 0.99. The limits of quantification and detection were between 1 and 10 ng/mL using 0.25 mL of sample. The extraction efficiencies varied between 26 and 85%. This analytical method is the first allowing the for determination of cannabinoids in urine samples using MEPS, a fast, simple, and low-cost alternative to conventional techniquesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

Miniaturized solid phase extraction techniques applied to natural products

Natural products are increasingly becoming part of our daily lives through their use in industry, food, as therapeutic agents, etc. To evaluate their possible applications, it is essential to characterize them chemically to explore their potential. Different techniques may be used to characterize natural products, including microextraction techniques. These techniques have been gaining popularity due to the advantages associated with their low use of organic solvents and the small amount of sample used relative to more classical sample preparation techniques. Their application in the extraction of compounds from natural products is still scarce. This manuscript intends to review the most used solid-based miniaturized sample preparation techniques applied to determining compounds in natural products. The main applications of these methodologies will be discussed, with a particular focus on natural product analysis, as well as their advantages and disadvantages over traditionally used sample preparation techniques.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Miniaturized Solid Phase Extraction Techniques Applied to Natural Products

Natural products are increasingly becoming part of our daily lives through their use in industry, food, as therapeutic agents, etc. To evaluate their possible applications, it is essential to characterize them chemically to explore their potential. Different techniques may be used to characterize natural products, including microextraction techniques. These techniques have been gaining popularity due to the advantages associated with their low use of organic solvents and the small amount of sample used relative to more classical sample preparation techniques. Their application in the extraction of compounds from natural products is still scarce. This manuscript intends to review the most used solid-based miniaturized sample preparation techniques applied to determining compounds in natural products. The main applications of these methodologies will be discussed, with a particular focus on natural product analysis, as well as their advantages and disadvantages over traditionally used sample preparation techniques.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Determinação de Ketamina e Norketamina em amostras de cabelo por microextração em seringa empacotada e GC-MS/MS

Poster apresentado no 20º Congresso Nacional de Medicina Legal e Ciências Forenses, 5ª Reunião da rede de Serviços médico-legais e Forenses de Língua Portuguesa, Coimbra, 2022As novas substâncias psicoativas (NSP) continuam a representar um desafio considerável para a saúde pública e um problema para a sociedade. A ketamina (KET) é uma destas substâncias. O cabelo tem vindo a ser utilizado como uma matriz complementar à urina e ao sangue nas análises toxicológicas. A microextração em seringa empacotada (MEPS) tem vindo a ser mais utilizada em análises toxicológicas pelas diversas vantagens que apresenta, nomeadamente a redução do uso de solventes, rapidez e possibilidade de reutilização do adsorvente, sendo por isso economicamente mais apelativa que a clássica extração em fase sólida. Neste trabalho apresenta-se o desenvolvimento de um método de clean-up com recurso à MEPS para a determinação de KET e o seu metabolito norketamina (NK) em amostras de cabelo por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massa em tandem (GCMS/ MS)N/

Determinação da cocaína e metabolitos em águas residuais com recurso à extração em fase sólida e à cromatografia de gases acoplada à espectrometria de massa em tandem

Comunicação apresentada no 13º Encontro Nacional de Cromatografia, Lisboa, 17-19 dezembro, 2023.A cocaína (COC) é a segunda droga mais consumida na Europa, causando graves problemas de saúde pública, tendo contribuído para um aumento de overdoses fatais relacionadas com o consumo de drogas de abuso1. A análise de águas residuais (AR’s) para determinar o consumo de drogas tem-se tornado cada vez mais comum devido ao seu custo reduzido, elevadas precisão e confiabilidade, e por recorrer a uma matriz ambiental, não invasiva, que apresenta baixa probabilidade de adulteração. Neste estudo, foi desenvolvido e validado um método para determinar COC e os metabolitos ecgonina metil éster (EME), benzoilecgonina (BEG), cocaetileno (COET), e norcocaína (NCOC) em AR’s, utilizando extração em fase sólida (SPE) e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em tandem (GC-MS/MS). O método foi otimizado e validado de acordo com as normas internacionais de validação. Foi obtida uma linearidade de 0,00625-5 ng/mL para todos os analitos, tendo sido obtidos coeficientes de determinação superiores 0,9990. O limite inferior de quantificação (LLOQ) para todos os compostos foi de 0,00625 ng/mL. As precisões e exatidão intra-dia, inter-dia e intermédias apresentaram coeficientes de variação abaixo de 15%, e uma exatidão de ±15% para todos os compostos analisados. Além disso, o procedimento permitiu alcançar recuperações entre 72% e 115%. Salienta-se que este procedimento é o primeiro método que utiliza a SPE, com cartuchos Strata TM-X-C, combinada com GC-MS/MS para a determinação de COC e metabolitos em AR’s. Este método torna-se então uma alternativa adequada para a monitorização da COC e dos seus metabolitos em amostras de AR’s, demonstrando elevada importância ambiental e forense.N/