Early detection of the biological and genetic determinants of resistence to artemisinin-based combination therapy in malária parasites

A utilização de Terapia Combinada com Artemisinina (ACT), administração simultânea de derivativos de Artemisinina (ART) com outros antimaláricos quimicamente distintos, representa atualmente o último recurso eficaz contra parasitas de malária humana resistentes a múltiplos fármacos. As vantagens da utilização de ACTs para o tratamento da malária foram debatidas em diversos estudos, baseando-se fundamentalmente na elevada eficácia e rápida ação dos derivados de ART associadas à utilização de fármacos de semi-vida longa, com o objetivo de complementar a curta semi-vida dos derivativos de ART. No entanto, administração destes fármacos em níveis sub-terapêuticos, entre outros factores, contribuiu para o aparecimento de parasitas resistentes a cada componente da terapia combinada. O aparecimento de resistência a um dos componentes da combinação pode contribuir para o aparecimento de resistência aos ACTs em populações parasitárias. Adicionalmente, parasitas resistentes a cada um dos componentes dos ACTs podem sofrer recombinação genética em mosquitos vectores, o que poderia originar novas estirpes resistentes simultaneamente aos dois fármacos da combinação. Com o objectivo de testar estas hipóteses e visando criar um modelo capaz de representar a possível evolução de resistência aos ACT em parasitas de humanos, o parasita de malária murina Plasmodium chabaudi foi utilizado neste estudo. Apesar de poderem não reflectir os mecanismos ocorrentes em Plasmodium falciparum com exatidão, os modelos murinos representam um exelente recurso para obter indícios relativos à biologia do parasita, nomeadamente, aos mecanismos de evasão à acção de fármacos. Além disso, podem ainda fornecer ferramentas necessárias para que a vida útil de um determinado fármaco seja avaliada e contribuir para o desenvolvimento de políticas apropriadas para cada país onde a doença é endemica. No decorrer deste trabalho, a evolução experimental de resistência à versão de ACTs que consiste na combinação de artesunato e mefloquina (ATN + MF) foi obtida através de seleçãopor pressão de fármaco utilizando duas abordagens: i) o clone resistente à MF, AS-15MF, foi submetido a sub-inoculações consecutivas em murganhos tratados com doses crescentes de ATN; e ii) o clone resistente a ATN, AS-ATN, foi submetido a sub-inoculações consecutivas em murganhos tratados com doses crescentes da combinação ATN + MF. Em ambos os casos, os clones obtidos, AS-MFATN-5 e AS-ATNMF-1, apresentaram níveis acrescidos de resistência a ATN + MF quando comparados aos seus progenitores AS-15MF e AS-ATN, respectivamente. A análise genética dos clones AS-MFATN-5 e AS-ATNMF-1 revelou que os mesmos haviam adquirido uma cópia extra do gene mdr1, e que a aquisição desta cópia extra foi acompanhada pelo aumento nos níveis de expressão de RNA e proteína no clone AS-ATNMF-1. Adicionalmente, a re-sequenciação do genoma completo do clone AS-ATNMF-1 através do método Solexa revelou a presença adicional de duas novas mutações não sinónimas nos genes PCAS_132020 e PCAS_143160, ambos de função desconhecida. O clone AS-ATNMF-1 foi ainda comparado ao seu progenitor AS-ATN em ensaios de competição intra-hospedeiro, com o propósito de avaliar um potencial custo biológico da resistência à combinação ATN + MF. Além disso, o parasita AS-ATNMF-1 foi comparado com o clone AS-ATN sub-inoculado vinte e sete vezes em murganhos na ausência de tratamento com fármaco (AS-ATN27P), com o objectivo de verificar se sub-inoculações consecutivas estariam associadas a um aumento no fitness destes parasitas. Nestes ensaios, enquanto o clone AS-ATNMF-1 foi capaz de superar o seu progenitor AS-ATN em termos de multiplicação parasitária, esta mesma tendência não foi observada quando em competição com AS-ATN27P. Colectivamente, os resultados descritos neste trabalho sugerem que a amplificação do gene mdr1 desempenha um papel importante na resistência a ATN + MF gerada neste modelo experimental. No entanto, mutações adicionais podem também ter algum papel nessse fenótipo.Adicionalmente, a presença destas mutações não está associada a uma redução no “fitness” do clone resistente AS-ATNMF-1 quando comparado ao progenitor sensível a ATN + MF. Em conclusão, a eficácia do tratamento baseado em ACTs pode ser comprometida pelo aparecimento de parasitas portadores de um mecanismo genérico de evasão à acção farmacológica, que previna a actuação dos dois componentes da combinação em simultâneo. Além disso, parasitas resistentes podem não apresentar redução no “fitness”, o que poderia contribuir para o seu rápido alastramento. Os resultados apresentados neste trabalho e a suas implicações inerentes poderão servir de base para o aperfeiçoamento das terapias utilizando combinações de fármacos e das ferramentas moleculares para a monitorização da eficácia dos ACTs em populações parasitárias selvagens.Artemisinin Combination Therapy (ACT) is the last standing force against multi-drug resistant malaria parasites. ACTs consist of the simultaneous administration of an artemisinin (ART) derivative and a chemically non-related antimalarial drug. Many studies have debated the use of ACTs as having many advantages, relying on the high efficacy and fast action of ART derivatives and on long-half life drugs used as partners in order to circumvent ART derivatives’ short half life. However, sub-standard drug administration, amongst other factors, has contributed to the appearance of resistance to each component of combination therapy. Preexisting resistance to one partner drug of the combination may be an important factor contributing to the appearance of resistance to ACTs in the field. In addition, parasites which are resistant to each component may undergo genetic recombination in the mosquito and originate new strains showing resistance to both partner drugs simultaneously. In order to test these hypotheses and in an attempt to model ACT resistance as it might occur in the field, the rodent model Plasmodium chabaudi was used in this study. Although rodent laboratory models may not mimic Plasmodium falciparum natural parasite populations in their every characteristic, they provide important insights on the parasite’s biology, such as mechanisms used to escape drug action, and may provide tools for estimation of drug’s useful life and the help in the design of drug policies for endemic countries. Experimental evolution of the artesunate + mefloquine (ATN + MF) version of ACT was accomplished by selection through drug pressure using two different approaches: i) a MFresistant clone, AS-15MF, was subjected to consecutive sub-inoculations in mice treated with stepwise increasing doses of ATN alone; and ii) an ATN-resistant clone, AS-ATN, was subjected to consecutive sub-inoculations in mice treated with stepwise increasing doses of the ATN + MF combination. In both cases, the AS-MFATN-5 and AS-ATNMF-1 clones generatedhere showed higher levels of resistance to ATN + MF than their respective progenitors AS- 15MF and AS-ATN. Genetic analyses revealed that both AS-MFATN-5 and AS-ATNMF-1 gained an extra copy of the mdr1 gene during the evolution of resistance, and this extra copy was met with an increase in RNA and protein expression in AS-ATNMF-1. In addition, Solexa whole genome resequencing showed that AS-ATNMF-1 carried other two further novel non-synonymous mutations in the PCAS_132020 and PCAS_143160 genes, the function of which are unknown. AS-ATNMF-1 was also compared with its progenitor AS-ATN in within-host competition assays is order to estimate if ATN + MF resistance would impose a biological cost to these parasites. In addition, AS-ATNMF-1 was compared with AS-ATN passaged through mice twenty seven times (AS-ATN27P) with the purpose of checking if consecutive sub-inoculations in mice would be associated with increased parasite fitness. Whilst AS-ATNMF-1 outgrew its progenitor AS-ATN, the same trend was not observed when in competition with AS-ATN27P. These results suggest that mdr1 amplification and overexpression may play a central role in ATN + MF resistance in our model. However, the newly acquired mutations may also influence parasite’s phenotype. In addition, acquisition of these mutations is not associated with increased fitness cost to the resistant clone when compared to its ATN + MF-sensitive progenitor. In conclusion, the efficacy of ACTs may be hampered by the development of a generic mechanism of drug-evasion that allows parasites to prevent the action of both drugs of the combination simultaneously. In addition, resistant parasites may show little or no reduction in fitness which could contribute to their rapid spread. The results of this work may provide valuable insights for improved deployment of drug combinations and for molecular surveillance of ACT efficacy in the field

Mídia e política e pacificação: uma análise da cobertura do assassinato de Douglas Rafael Silva

Avalia o programa de Unidades de Polícia Pacificadora no estado do Rio de Janeiro, tomando como objeto de estudo a análise de reportagens publicadas em dois veículos online – O Globo e Favela 247. Para este estudo, foi escolhido o caso do assassinato do jovem Douglas Rafael Silva, no Complexo do Pavão-Pavãozinho. Busca-se o entendimento das diferenças comparativas entre as análises editoriais de cada portal, tendo em vista os frequentes episódios de violência nas favelas do Rio de Janeiro

Interkommunalt samarbeid i barnevernstjenesten: En kvantitativ studie som undersøker om interkommunalt samarbeid påvirker inputkvalitet i barneverntjenesten

Siktemålet med denne studien er å bidra til en større forståelse av hvordan samarbeid mellom kommuner påvirker tjenestekvalitet, noe som har fått mindre oppmerksomhet i forskning på samarbeid. Interkommunale samarbeid er et middel for å høste stordriftsfordeler og løse problemer med småskala produksjon. I denne studien fokuseres det på inputkvalitet i en tjeneste som er preget av behov for høy faglig kompetanse og stor grad av redundans, den kommunale barneverntjenesten. Dette er også en tjeneste der interkommunalt samarbeid er svært utbredt, hvor det før kommunereformen var over 200 norske kommuner som hadde barneverntjenesten organisert gjennom et interkommunalt samarbeid. Gjennom en kvantitativ tilnærming brukes paneldata om 366 kommuner over 17 år for å studere effekten av interkommunalt samarbeid på ulike kvalitetsindikatorer som måler arbeidsstyrken i tjenesten. Det analyseres (1) om interkommunalt tjenesteproduksjon mot kommunal tjenesteproduksjon påvirker inputkvalitet; (2) hvordan antall deltakere i det interkommunale samarbeidet påvirker interaksjonen mellom samarbeid og inputkvalitet; og (3) hvilken effekt det har å være vertskommunen mot det å være deltakerkommune på inputkvaliteten. Funnene i denne studien tyder på at samarbeid øker innsatskvaliteten hos arbeidsstyrken, men at den positive effekten blir begrenset ved hver ekstra deltaker som legges til i samarbeidet. Når det gjelder å være vertskommune eller deltakerkommune indikerer denne studien at å være vertskommune, reduserer inputkvaliteten sammenlignet med både deltakerkommune og kommunal tjenesteproduksjon

Aplicação de ácido hialurónico como coadjuvante ao tratamento periodontal mecânico

Tese de mestrado, Medicina Dentária, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina Dentária, 2018Objetivo: Avaliar se a aplicação de ácido hialurónico em gel como coadjuvante ao tratamento periodontal mecânico apresenta vantagens relativamente a um placebo. Materiais e métodos: Foi realizado um estudo boca dividida em 10 pacientes com periodontite crónica. Foram feitas duas consultas de tratamento periodontal mecânico. Numa, foi aplicado de forma intra-sulcular, o Gengigel® Seringas Pré-cheias 0,8%, com posterior aplicação de Gengigel® Gel 0,2% pelo paciente durante 2 semanas. Noutra, foram feitos os mesmos procedimentos, mas com geles placebo. A escolha do gel a aplicar foi aleatória. Os parâmetros analisados foram índice percentual de placa bacteriana, índice gengival, profundidade de sondagem, índice percentual de hemorragia e nível de inserção clínico. A análise estatística foi realizada através do teste paramétrico T-Student e do teste não-paramétrico de Wilcoxon recorrendo à base de dados SPSS (IBM Statistics v.23, SPSS Inc, Chicago, IL). Resultados: O índice percentual de placa aumentou, em média, 0,18% (p=0,047) nas localizações teste e 0,19% (p=0,002) nas localizações placebo. A diferença entre ambos os grupos é 0,01% (p=0,875). O índice gengival diminuiu, em média, 0,11% (p=0,007) no quadrante teste e 0,01% (p=0,888) no placebo, sendo a diferença média entre geles de 0,10% (p=0,553). A profundidade de sondagem diminuiu, em média, 0,25mm (p=0,241) para o quadrante teste e 0,15mm (p=0,473) para o placebo, sendo a diferença média entre geles de 0,10mm (p=0,214). O índice percentual de hemorragia diminuiu, em média, 0,09% (p=0,241) para as localizações teste e 0,04% (p=0,721) no placebo. A diferença média entre geles foi de 0,06% (p=0,585). No nível de inserção clínico houve um aumento médio do NIC em 0,12mm (p=0,531) no quadrante placebo e uma variação de 0,00mm (p=0,989) no quadrante teste. A diferença entre grupos é 0,12mm (p=0,624). Conclusão: Não existem diferenças clínicas na aplicação de gel de ácido hialurónico como coadjuvante ao tratamento periodontal mecânico.Aim: To determine the adjunctive effect of the application of a hyaluronan gel to the mechanical treatment of chronic periodontitis. Materials and methods: 10 patients with chronic periodontitis were subjected to scaling and root planning in two different appointments. In one of them the hyaluronan gel Gengigel® Seringas pré- cheias 0.8% was applied subgingivally and the patient was asked to apply a hyaluronan gel Gengigel® Gel 0.2% topically for 2 weeks. The same was repeated at the second appointment but using the placebo gels. The order of the gel applications was chosen randomly. The analised parameters were plaque índex, gingival índex, probing depth, bleeding on probing and clinical attchment level. The statistical analysis was performed by using the parametric T-student test and the non-parametric Wilcoxon test, as well as the SPSS database (IBM Statistics v.23, SPSS Inc, Chicago, IL). Results: The mean increase of plaque index was 0,18% (p=0,047) on the test quadrant and 0,19% (p=0,002) for the placebo. The mean difference between placebo and test sites was 0,01% (p=0,875). The gingival index decreased on average 0,11% (p=0,007) on test sites and 0,01% (p=0,888) on control. The mean difference between test and control sites was 0,10% (p=0,0553). The mean probing depth reduction was 0,25mm (p=0,241) for test sites and 0,15mm (p=0,473) for control sites. The mean difference between sites was 0,10mm (p=0,214). The mean reduction for bleeding on probing was 0,09% (p=0,241) for test sites and 0,04% (p=0,721) for control. The mean difference between both was 0,06% (p=0,585). The mean variation in the clinical attachment level for the test sites was 0,00m (p=0,989) and an increase of 0,12mm (p=0,531) for placebo. The mean difference between both was 0,12mm (p=0,624). Conclusion: There are no clinical differences between the use of hyaluronan or placebo gel in the treatment of chronic periodontitis

Impacts of the Fomento Program on Family Farmers in the Brazilian Semi-Arid and its relevance to climate change: a case study in the region of Sub medio São Francisco

For some years, Brazil established itself as a leader in strategies of strategies and programs aimed at reducing the social vulnerability of the most vulnerable populations. In this context, the Program for the Promotion of Rural Productive Activities (Fomento Program), created in 2011, had as one of the main objectives to stimulate the generation of work and income, and promote food and nutritional security for rural, indigenous, traditional and settled populations of agrarian reform. In the Northeast, and more specifically in the Semi-arid region, the relevance of this Program stands out even more concerning climate projections, which indicates that such areas will suffer from more extreme drought in the face of climate change, affecting populations dependent on climate-sensitive activities. Therefore, given the diversity of impacts of the Fomento Program reported in the literature, this article sought to present results on the perception of the Program's impacts from 24 family farmers, interviewed through qualitative research in four municipalities in the state of Bahia in 2017. In addition to the socio-productive aspects, the research sought to understand the Program's impacts in the context of climate change. The results point to a positive perception mainly related to changes in production and technical assistance based on the Paradigm of Co-existence with the Semi-arid Region

Intensidade da dor em idosos institucionalizados: comparação entre as escalas numérica e de descritores verbais

OBJETIVOCorrelacionar duas escalas unidimensionais de mensuração da intensidade da dor autorreferida por idosos e identificar a preferência por uma das escalas.MÉTODOEstudo conduzido com 101 idosos residentes em Instituições de Longa Permanência para Idosos que referiram algum tipo de dor e alcançaram escores ( 13 no Miniexame do Estado Mental. A Escala Numérica (EN) de 11 pontos e a Escala de Descritores Verbais (EDV), de cinco pontos foram comparadas em três avaliações: global, ao repouso e ao movimento.RESULTADOSAs mulheres foram as mais representadas (61,4%) e a média de idade igual a 77,0±9,1 anos. A EN foi preenchida por 94,8% dos idosos e a EDV por 100%. A associação entre os escores médios da EN com as categorias da EDV foi significativa, apontando validade convergente e métrica semelhante entre as escalas.CONCLUSÃOA mensuração da dor em idosos institucionalizados pode ser feita por meio da EN e da EDV, no entanto, a escala preferida pelos idosos foi a EDV, independentemente do sexo.OBJECTIVECorrelating two unidimensional scales for measurement of self-reported pain intensity for elderly and identifying a preference for one of the scales.METHODA study conducted with 101 elderly people living in Nursing Home who reported any pain and reached ( 13 the scores on the Mini-Mental State Examination. A Numeric Rating Scale - (NRS) of 11 points and a Verbal Descriptor Scale (VDS) of five points were compared in three evaluations: overall, at rest and during movement.RESULTSWomen were more representative (61.4%) and the average age was 77.0±9.1 years. NRS was completed by 94.8% of the elderly while VDS by 100%. The association between the mean scores of NRS with the categories of VDS was significant, indicating convergent validity and a similar metric between the scales.CONCLUSIONPain measurements among institutionalized elderly can be made by NRS and VDS; however, the preferred scale for the elderly was the VDS, regardless of gender.OBJETIVOCorrelacionar dos escalas unidimensionales de mensuración de la intensidad del dolor autorreferido por ancianos e identificar la preferencia por una de las escalas.MÉTODOEstudio conducido con 101 ancianos residentes en Instituciones de Larga Estancia para Ancianos que relataron algún tipo de dolor y alcanzaron puntajes 13 en la Mini Prueba del Estado Mental. La Escala Numérica (EN) de 11 puntos y la Escala de Descriptores Verbales (EDV), de cinco puntos, fueron comparadas en tres evaluaciones: global, al reposo y al movimiento.RESULTADOSLas mujeres fueron las más representadas (61,4%) y el promedio de edad igual que 77,0±9,1 años. La EN fue rellenada por el 94,8% de las personas mayores y la EDV por el 100%. La asociación entre los puntajes medios de la EN y las categorías de la EDV fue significativa, señalando validez convergente y métrica semejante entre las escalas.CONCLUSIÓNLa medición del dolor en personas mayores institucionalizadas puede hacerse mediante la EN y la EDV. Sin embargo, la escala preferida por los ancianos fue la EDV, independientemente del sexo

The perception of the companion of the humanized care in a pediatric intensive care unit

Objective: To understand the perception of the companion of the hospitalized child about humanized care in the context of pediatric intensive care unit. Methods: A descriptive, exploratory study with a qualitative approach, developed in the pediatric intensive care unit of a pediatric hospital in Salvador to interview the caregivers of hospitalized children. The interviews were analyzed using content analysis technique. Results: Perceptions of family associate the meaning of humanized care to a greater affection and attention; values the guidance provided by the health team and emphasizes the importance of their presence throughout assistance. Concerns about the “lack of care” are from the suffering inherent in the child’s situation. Conclusion: The perception of companions on the concept of humanization involves attention, care, concern and sometimes even an emotional involvement with the patient and to understand their perception means to bei alert to the real needs of the patient

Entre lugares e sujeitos da EJA: Mulheres erveiras e os seus saberes culturais no Ver-o-Peso

Objetiva-se, neste texto, discorrer sobre os ensinos e as aprendizagens vivenciadas por cinco mulheres erveiras que trabalham no Ver-o-Peso. Ao tratar-se de lugares da EJA (Educação de jovens e adultos) pontuam-se os cotidianos familiar e de trabalho em que são vivenciados ensinos e aprendizagens e são compartilhados saberes culturais. Diante disso, pondera-se que este trabalho resultou de uma pesquisa de mestrado no Programa de Pós-graduação em Educação da Universidade do Estado do Pará PPGED - UEPA, realizada no período de 2018 a 2020. Trata-se de uma pesquisa de campo, com abordagem qualitativa (MINAYO, 2009); observação in loco (MINAYO, 1994) e entrevistas semiestruturadas. Na sistematização e na análise dos dados foram construídas categorias analíticas e temáticas (OLIVEIRA; MOTA NETO, 2011). A construção das categorias teve como referência técnicas da análise de conteúdo, (BARDIN, 2011). Diante disso, a pesquisa indicou os seguintes resultados: no processo de manipulação das ervas medicinais destaca-se a conexão entre corpo e mente, nos momentos saber identificar, diferenciar e combinar raízes, cascas e suas propriedades medicinais, pela textura, pela cor, pelo aroma e pelo formato. Os ensinos e aprendizagens vivenciados por elas ocorrem por meio da oralidade, do registro escrito, da observação e da gestualidade. Assim, os ensinos, as aprendizagens e os saberes constituem as autonomias de ser erveira, referente à memória, à herança familiar e ao sustento material, a partir do trabalho no setor das ervas.Palavras-chave: Educação de Jovens e Adultos; Saberes Culturais; Mulheres erveiras.Between places and subjects of EJA: Women herb handlers and their cultural knowledge in Ver-o-PesoABSTRACTThe objective of this text is to discuss the teachings and learning experienced by five women herb handlers, who work at Ver-o-Peso. When dealing with EJA (Youth and Adult Education) places, the family and work routines are highlighted in which teaching and learning are experienced and cultural knowledge is shared. Therefore, it is considered that this work resulted from a master's research in the Postgraduate Program in Education of the State University of Pará PPGED - UEPA, carried out from 2018 to 2020. It is a field research, with a qualitative approach, (MINAYO, 2009); observation in loco (MINAYO, 1994) and semi-structured interviews. In the systematization and analysis of data, analytical and thematic categories were built (OLIVEIRA; MOTA NETO, 2011). The construction of the categories was based on technical content analysis (BARDIN, 2011). Therefore, the research indicated the following results: in the process of handling medicinal herbs, the connection between body and mind stands out, at times knowing how to identify, knowing how to differentiate and combine roots, bark and leaves and their medicinal properties, by texture, by color, by aroma, by shape. The teachings and learning experienced by them occur through orality, written record, observation, and gestures. Thus, teachings, learning and knowledge constitute the autonomy of being women herb handlers, referring to memory, family inheritance, and material support, from work in the herb sector.Keywords: Youth and Adult Education; Cultural Knowledge; Women herb handlers.Entre lugares y temas de EJA: Herbolarias y sus conocimientos culturales en Ver-o-PesoRESUMENEl objetivo de este texto es discutir las enseñanzas y el aprendizaje experimentado por cinco mujeres herbolarias que trabajan en Ver-o-Peso. Cuando se trata de lugares de EJA (Educación de Jóvenes y Adultos), se destacan las rutinas familiares y laborales en las que se vive la enseñanza y el aprendizaje y se comparte el conocimiento cultural. Por lo tanto, se considera que este trabajo es el resultado de una investigación de maestría en el Programa de Posgrado en Educación de la Universidad Estatal de Pará PPGED - UEPA, realizada de 2018 a 2020. Es una investigación de campo, con enfoque cualitativo, (MINAYO, 2009); observación in loco (MINAYO, 1994) y entrevistas semiestructuradas. En la sistematización y análisis de datos se construyeron categorías analíticas y temáticas (OLIVEIRA; MOTA NETO, 2011). La construcción de las categorías se basó en el análisis de contenido técnico (BARDIN, 2011). Por tanto, la investigación arrojó los siguientes resultados: en el proceso de manipulación de las hierbas medicinales se destaca la conexión entre cuerpo y mente, en ocasiones saber identificar, saber diferenciar y combinar raíces, corteza y hojas y sus propiedades medicinales, por textura, color, aroma, forma. Las enseñanzas y el aprendizaje experimentado por ellos ocurren a través de la oralidad, el registro escrito, la observación y los gestos. Así, la enseñanza, el aprendizaje y el conocimiento constituyen la autonomía de ser herbolaria, referida a la memoria, la herencia familiar y el apoyo material, del trabajo en el sector herbáceo.  Palabras clave: Educación de Jóvenes y Adultos; Conocimiento cultural; Herbolarias