Morfogenese in vitro e micropropagação de Aspidosperma polyneuron Mull. Arg. (Peroba-rosa)

Orientador: Flavio ZanetteTese (doutorado) - Universidade Federal do Parana, Setor de Ciencias AgrariasÁrea de concentração: SilviculturaRESUMO No presente trabalho estudou-se a morfogênese in vitro e os fatores que controlam a organogênese e embriogênese somática para estabelecer um protocolo de micropropagação de Aspidosperma polyneuron. Foram realizados experimentos com hipoclorito de sódio e bicloreto de mercúrio para desinfestação de brotações apicais e sementes visando o estabelecimento de culturas assépticas. No estudo da organogênese, brotações apicais de mudas de dois anos de idade, mantidas em casa de vegetação, foram avaliadas na indução de brotações múltiplas em meio de cultura WPM, suplementado com BAP, ZEA ou Cin (2,2-8,8 uM), no cultivo inicial e em dois subcultivos. Explantes do epicótilo e hipocótilo de sementes germinadas in vitro também foram testados em meio de cultura WPM, acrescido de BAP (2,5-10,0 uM), combinado ou não com AIB ou ANA (0,5 uM), durante três subcultivos. Para indução de brotações alongadas foram testadas combinações de fitorreguladores 2,25 uM de BAP, ZEA ou Cin, com 1,25 uM de AIB. A indução de raízes foi avaliada com tratamentos pulsos de soluções de AIB (2,5-10 mM), durante 5 ou 15 minutos. As mudas enraizadas foram plantadas em casa-de-vegetação climatizada. O estudo da embriogênese somática foi realizado visando determinar a melhor fonte de explantes, o estado fisiológico, a influência das formulações salinas, dos fitorreguladores, da consistência dos meios de cultura e o tempo necessário para expressão das respostas morfogenéticas. Avaliações histológicas e citoquímicas foram realizadas para caracterizar __ células embriogenéticas e embriões somáticos em vários estádios de desenvolvimento.! A desinfestação de brotações apicais foi eficiente com 0,25% de NaOCl ou 0,05% de HgCh. durante 10 minutos e das sementes com 1 % de NaOCl, durante 20 minutos, sendo obtida 72,89%, 70-90% e 90% de sobrevivência, respectivamente. Em todas as estações do ano foram estabelecidas culturas assépticas, apesar de que na primavera e verão foram obtidos os melhores resultados. Brotações apicais induziram as maiores taxas médias de regeneração de brotações axilares (4 a 5) em meio de cultura WPM, suplementado com ZEA ou BAP (4,4-8,8 uM), após o segundo subcultivo. Concentrações mais reduzidas de BAP ou ZEA (2,25 uM) e 1,25 uM de AIB proporcionaram em média, três brotações mais alongadas. Os explantes provenientes da região do hipocótilo apresentaram taxas médias de regeneração de brotações e percentagens de enraizamento mais elevadas do que os do epicótilo. Os maiores números médios de brotações (7 a 8) ocorreram em meio de cultura, acrescido de 10 uM de BAP no terceiro subcultivo. A presença de 0,5 uM de AIB ou ANA, combinadas com BAP (2,5; 5 e 10 uM) não afetaram as taxas médias de regeneração de brotações. Tratamentos pulsos com soluções de 10 mM de AIB, durante 15 minutos foram eficientes na indução de raízes (80%) e as mudas transplantadas apresentaram taxas de sobrevivência superiores a 900/0, em casa de vegetação climatizada. A indução e desenvolvimento de embriões somáticos ocorreu a partir de embriões maduros e imaturos inoculados em meios de cultura semi-sólidos (LPm, WPM e MS), suplementados com 2,4-D (5 ou 10 uM) e 0,5 uM de Cin, BAP ou TDZ, na ausência de luz. A indução e expressão da rota de embriogênese somática de culturas primárias foi de baixa freqüência e de forma assincrônica. Foram observados os padrões diretos e indiretos de expressão da embriogênese somática dependendo do estado fisiológico dos embriões inoculados. O período médio, que iniciaram os eventos da embriogênese somática, for de 12 a 16 semanas após a inoculação. O estabelecimento e manutenção de linhagens celulares embriogenéticas ocorreu em meio de cultura LPm, suplementado com 0,5 uM de 2,4-0 ou ANA e 0,5 uM de Cin, sendo estabelecidos ciclos repetitivos de divisão celular por mais de três anos, permitindo o "scale-up" de culturas embriogenéticas. A maturação dos embriões somáticos ocorreu em meio de cultura LPm, suplementado com 12,30 uM ou 24,60 uM de 2-iP e 0,5 uM de ANA e das linhagens celulares embriogenéticas com 30 uM de ABA. Avaliações citoquímicas permitiram a caracterização de células embriogenéticas e indicaram a presença de corpúsculos lipídicos e grãos de amido. Avaliações histológicas permitiram caracterizar células embriogenéticas e embriões somáticos em vários estádios ontogenéticos.ABSTRACT This work studied morphogenesis in vitro, organogenesis and somatic embryogenesis regulation to establish a micropropagation protocol of Aspidosperma polyneuron. Apical shoots and seeds were desinfested with NaOCl and HgC^ to establish aseptic cultures. Apical shoots were used to evaluate induction of multiple shoots in WPM medium, supplemented with ZEA, BAP and Kin (2.2-8.8fiM). Epicotyl and hipocotyl expiants were tested in WPM medium with BAP (2.5, 5.0, 10.0 |xM), with and without IBA or NAA (0.5 \M). IBA pulse treatments (2.5, 5.0, 10.0 mM) were tested at 5 and 15 minutes to induce roots. Plantlets were planted in a climatized greenhouse. Somatic embryogenesis studies were established to determine the expiants, the physiological state of the expiants, the influence of the culture medium consistency, salts formulations, phytoregulators and the necessary time to induction and expression of the morphogenetic responses. Cytochemical and histologycal evaluations were performed to characterize embryogenic cells and the stages of somatic embryos development. Efficient apical shoots disinfestation were achieved with NaOCl (0.25%-10 minutes) or HgCb (0,05%-10 minutes) and seed disinfestation with NaOCl (l%-20 minutes); survival rates were 72.89%, 70-90% and 90%, respectively. Spring and summer had the highest survival rates. Apical shoots induced 4-5 axillary buds in WPM culture medium, containing ZEA or BAP (4.4-8.8 |iM) following two subcultures. Reduced concentrations of ZEA or BAP (2.25 |xM), combined with IBA (1.25 jiM) produced long shoots. Hipocotyl expiants showed an increase of the shoot regeneration and the rooting percentages, as compared to epicotyls explants. Explants of the epicotyl and hipocotyl induced multiple shoots (7-8) in culture medium supplemented with 10.0 (¿M de BAP on the third subculture. The addition of 0.5 |iM IBA or NAA, combined with BAP concentrations did not influence regenerations rates. IBA pulse treatment (10.0 mM) during 15 minutes induced higher rooting percentages (80%). Plantlets planted in a climatized greenhouse showed higher survival rates (90%). Somatic embryo induction occurred from mature and immature embryos inoculated on semi-solid culture media (LPm, WPM and MS), supplemented with 2,4-D (5.0 or 10.0 |iM) plus Kin, TDZ or BAP (0.5 |iM) at dark conditions. The induction and expression of primary cultures occurred asynchronously and in relatively small proportions of cultures. Direct and indirect patterns of somatic embryogenesis were observed depending of the physiological stage of the expiants. The establishment and scale-up of embryogenic cell lines occurred in LPm culture medium, supplemmented with 2,4-D or NAA (0.5 |iM) plus Kin (0.5 |iM) for periods longer than three years. Somatic embryos maturation occurred in LPm culture medium supplemented with 2-iP (12.30-24.60 |iM) plus ANA (0.5 |oM) or ABA (30 |iM) to maturation of embryogenic cell lines. Cytochemical studies showed the accumulation of lipid and starch bodies in the embryogenic cells. Histological studies allowed characterization of embryogenic cells and of the stages of somatic embryos. semi-solid culture media (LPm, WPM and MS), supplemented with 2,4-D (5.0 or 10.0 uM) plus Kin, TDZ or BAP (0.5 uM) at dark conditions. The induction and expression of primary cultures occurred asynchronously and in relatively small proportions of cultures. Direct and indirect patterns of somatic embryogenesis were observed depending of the physiological stage of the explants. The establishment and scale-up of embryogenic cell lines occurred in LPm culture medium, supplemmented with 2,4-D or NAA (0.5 uM) plus Kin (0.5 uM) for periods longer than three years. Somatic embryos maturation occurred in LPm culture medium supplemented with 2-iP (12.30-24.60 uM) plus ANA (0.5 uM) or ABA (30 uM) to maturation of embryogenic cell lines. Cytochemical studies showed the accumulation of lipid and starch bodies in the embryogenic cells. Histological studies allowed characterization of embryogenic cells and of the stages of somatic embryos

Embriogênese somática de peroba-rosa (Aspidosperma polyneuron MULL.ARG.)

Orientadora: Luciana Lopes Fortes RibasAproveitado CD do autorMonografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias Biológicas. Curso de Graduaçao em Ciencias BiológicasResumo : A peroba-rosa (Aspidosperma polyneuron) é uma espécie florestal a qual, devido à qualidade de sua madeira, foi amplamente utilizada na construção civil e na indústria de móveis. Atualmente, a espécie se encontra ameaçada de extinção e necessitando com urgência de programas de conservação. Sua propagação por métodos convencionais é difícil devido a sua produção irregular de frutos (a cada 2-4 anos) e difícil enraizamento em estacas. A embriogênese somática é uma técnica de cultivo in vitro que permite a propagação massal de plantas. O objetivo deste trabalho foi contribuir para a otimização dos protocolos de embriogênese somática de peroba-rosa a partir de embriões zigóticos imaturos, testando-se diferentes concentrações de reguladores vegetais e diferentes agentes geleificantes. Para a indução da embriogênese somática, foram testadas as combinações de 5,0 µM ou 10,0 µM de 2,4-D com 0,5 µM ou 2,5 µM de CIN ou de BAP, em meio de cultura WPM semi-sólido (4 gL-1 de ágar Micromed® ou 2 gL-1 de gelrite), acrescido ou não de caseína hidrolisada e L-glutamina (0,5 gL-1 cada). Após 10 a 12 semanas, as culturas foram subcultivadas para meios com 1/4 ou 1/10 da concentração de 2,4-D. A formação de massas embriogênicas foi observada nos embriões mais imaturos, após o subcultivo para meio de cultura com redução da concentração de 2,4-D. A embriogênese somática direta e indireta (com maior freqüência) foi obtida a partir de embriões bem imaturos após 12 semanas de indução em meio WPM, acrescido de gelrite (2 gL-1), caseína hidrolisada e L-glutamina, com 5,0 µM de 2,4-D e 2,5 µM de CIN, seguido de transferência para meio com 1,25 µM de 2,4-D e 2,5 µM de CIN. O meio de maturação com 10,0 µM de 2-iP e 0,5 µM de ANA têm permitido a formação de novos embriões somáticos e o desenvolvimento dos embriões para os estádios cordiforme e torpedo. Para o estabelecimento de um protocolo de embriogênese somática há necessidade de mais estudos para as etapas de maturação e conversão de embriões somáticos em plantas

Embriogênese somática e morfoanatomia de embriões somáticos de Ocotea porosa

http://dx.doi.org/10.5902/1980509812343Ocotea porosa seeds have strong tegument dormancy, recalcitrant behavior, low and irregular germinationand that makes its natural propagation difficult. The aim of this study was to establish a protocol ofregeneration of Ocotea porosa from somatic embryogenesis. Immature embryonic axes were inoculatedon WPM culture medium supplemented with 2.4-D (200 μM) combined or not with hydrolyzed casein orglutamine (0.5 or 1 g l-1), during 90 days. The repetitive embryogenesis was induced on medium with 2.4-D(22.62 μM) combined with 2-iP (2.46 μM) followed by transfer to culture medium with hydrolyzed caseinor glutamine (1 g l-1) during 90 days. The maturation of somatic embryos was tested in culture mediumcontaining NAA (0.5 μM) and 2-iP (5; 10 and 20 μM). The highest percentage of somatic embryos induction(8.3%) was observed in WPM culture medium containing 200 μM 2.4-D and 1 g L-1 hydrolyzed casein andthe development of somatic embryos occurred indirectly. Repetitive somatic embryogenesis was promotedin WPM medium containing hydrolyzed casein or glutamine. However, the culture medium containinghydrolyzed casein promoted the maintenance of embryogenic capacity for more than two years. Duringthe maturity phase, there was a low progression of globular embryos to cordiform and torpedo stages.The different ontogenetic stages of somatic embryos of Ocotea porosa were characterized by histologicalstudies.http://dx.doi.org/10.5902/1980509812343Ocotea porosa apresenta sementes com forte dormência tegumentar, comportamento recalcitrante, baixa germinação e irregularidade, o que dificulta a propagação natural. O objetivo deste trabalho foi estabelecer um protocolo de embriogênese somática para Ocotea porosa. Eixos embrionários zigóticos imaturos foram inoculados em meio de cultura WPM suplementado com 2,4-D (200 μM) combinado ou não com caseína hidrolisada ou glutamina (0,5 ou 1 g l-1) durante 90 dias. A embriogênese repetitiva foi induzida em meio contendo 2,4-D (22,62 μM) combinado com 2-iP (2,46 μM) seguido de transferência para meio de cultura com caseína hidrolisada ou glutamina (1 g l-1), durante 90 dias cada. A maturação dos embriões somáticos foi testada em meio de cultura contendo ANA (0,5 μM) e 2-iP (5, 10 ou 20 μM). A maior porcentagem de embriões somáticos induzidos (8,3%) foi observada em meio de cultura WPM contendo 200 μM de 2,4-D e 1 g l-1 de caseína hidrolisada e o desenvolvimento de embriões somáticos ocorreram de forma indireta. A embriogênese somática repetitiva foi promovida em meio de cultura WPM contendo caseína hidrolisada ou glutamina, no entanto, a caseína hidrolisada promoveu a manutenção da competência embriogênica por mais de dois anos. Na fase de maturação, houve baixa progressão dos embriões globulares para os estádios cordiforme e torpedo. Os diferentes estádios ontogenéticos de embriões somáticos de Ocotea porosa foram caracterizados pelo estudo histológico

Acclimatization of 'VR043-43' (Vitis vinifera x Vitis rotundifolia) grapevine rootstock

The pre-acclimatization stage can be used to improve micropropagation protocols and increase the yield of produced plants. The influence of sucrose and photon flux density (PFD) levels on the acclimatization of in vitro-grown 'VR043-43' (Vitis vinifera x Vitis rotundifolia) grapevine rootstocks was evaluated. Rooted shoots were obtained from 4-week-old in vitro shoots cultivated in QL (Quoirin and Lepoivre, 1977) culture medium supplemented with 15, 30 and 45 g L-1 of sucrose. The experiment was kept in a 25 ± 2ºC growth room, under 16-h photoperiod and PFD of 18 µmol m-2 s-1 or 43 µmol m-2 s-1. Plants were transferred to an intermittent misting system greenhouse for 10 d followed by 20 d of once-a-day watering routine using a handheld hose. Plant height was influenced by sucrose concentration, and shoots produced on media supplemented with 30 g L-1 sucrose were the tallest (5.0 cm). The largest leaf area was obtained with 31.3 g L-1 of sucrose, under the PFD of 43 µmol m-2 s-1 (13.3 cm²). Absence of sucrose in the culture medium led to a significant reduction in leaf area at both PFDs. Shoot (aerial part) dry matter was largest when 30 or 45 g L-1 of sucrose (17.5 and 16.7 mg per plant, respectively) were used. Microcuttings rooted in all sucrose concentrations tested. The highest survival percentage (100%) during ex vitro acclimatization was obtained for shoots cultured in media supplemented with 45 g L-1 of sucrose under both PFDs tested.A fase de pré-aclimatização pode ser utilizada para aperfeiçoar os protocolos de micropropagação e aumentar o rendimento na produção de mudas. Avaliou-se a influência da sacarose e níveis de densidade de fluxo de fóton (DFF) in vitro, na sobrevivência das mudas do porta-enxerto de videira 'VR043-43'(Vitis vinifera x Vitis rotundifolia), na fase de aclimatização. Microestacas obtidas de brotações in vitro foram cultivadas em meio de cultura QL suplementado 15, 30 e 45 g L-1 de sacarose. O experimento foi mantido em sala climatizada com temperatura de 25 ± 2ºC, fotoperíodo de 16 horas e DFF de 18 µmol m-2 s-1 ou 43 µmol m-2 s-1. As plantas foram transferidas para uma câmara de nebulização intermitente por 10 d e mantidas durante 20 d em casa de vegetação com irrigação manual. A altura das plantas foi influenciada pelas concentrações de sacarose, sendo a maior altura (5,0 cm) obtida com a concentração de 30 g L-1 de sacarose. A maior área foliar foi obtida com 31,3 g L-1 de sacarose na DFF de µmol m-2 s-1 (13,3 cm²). A ausência de sacarose no meio de cultura promoveu redução significativa na área foliar nas duas DFFs testadas. A matéria seca da parte aérea foi maior quando o meio de cultura foi suplementado com 30 ou 45 g L-1 de sacarose (17,5 e 16,7 mg por planta, respectivamente). Houve enraizamento das microestacas em todas as concentrações de sacarose testadas. Alta porcentagem de sobrevivência (100%) durante a aclimatização ex vitro foi obtida quando as brotações foram cultivadas no meio de cultura suplementado com 45 g L-1 de sacarose em ambas DFFs testadas

Asymbiotic seed germination and in vitro propagation of Brasiliorchis picta

Seed storage method for in vitro germination and propagation from leaves of Brasiliorchis picta was developed. Seeds were harvested and stored at -20 and -80°C for 1, 3, 6, and 12 months and were germinated on Knudson C (KC), Murashige and Skoog (MS), half-strength MS (½ MS macro- and micro-nutrients), and woody plant medium (WPM). Seeds stored at -20°C, the recommended temperature for seed banks, had a high germination rate (76.0%) when cultivated in WPM after 12 months of storage. WPM is the best medium for seed germination and seedling development for both harvested and stored seeds, regardless of storage time and storage temperature. Whole leaf and leaf transversal thin cell layers (tTCL) from 3-month-old in vitro grown protocorms were cultured in ½ MS supplemented with 6-benzyladenine (BA; 2.5, 5.0 and 10.0 μM) and thidiazuron (TDZ; 3.0, 6.0 and 9.0 μM) for 12 weeks. The highest frequency of regenerated protocorm-like bodies (PLBs) from explants (70.0%) occurred when whole leaves were cultured in medium containing 5.0 μM BA, whereas the best response for leaf TCL was with the basal section in medium containing 9 μM TDZ, in which PLBs developed in all regions of leaves. Plantlets were successfully acclimatized (with a survival rate of 97%) when vermiculite was used as a substrate.Key words: Endangered species, conservation, germination rate, leaf explant, culture medium, micropropagation, Orchidaceae, thin cell layer

MICROPROPAGAÇÃO DE Aspidosperma polyneuron. Müll. Arg. A PARTIR DE PLÂNTULAS GERMINADAS IN VITRO

In this study, an efficient method for regenerating plants from nodal cultures of seedlings was developed for Aspidosperma polyneuron. Mature seeds were surface-sterilized and embryos were germinated in Woody Plant Medium (WPM). Epicotyl and hypocotyl nodal segments, excised from 3-week-old in vitro-grown seedlings, were cultured in WPM medium supplemented with 6-benzyladenine (BA) (2.5, 5.0, and 10 mM), alone or combined with indole-3-butyric acid (IBA) or a-naphthaleneacetic acid (NAA) (0.5 mM) for culture initiation and three subcultures. For root induction, IBA (2.5, 5.0, and 10 mM) pulse treatments (15 minutes) were initially applied, followed by transfer to growth regulator-free WPM for five weeks. Regenerated plants were first transplanted to trays containing soil and Plantmax® substrate (3:1) and later to polyethylene bags for acclimatization in a greenhouse. Hypocotyl explants exhibited superior shoot regeneration rate and rooting percentages compared with those of epicotyl explants. The highest numbers of shoots per explant (7-8) were obtained at the third subculture when using the culture medium supplemented with 10 mM BA. When combined with BA, the addition of 0.5 mM IBA or NAA did not affect the regeneration of shoots. An IBA pulse treatment of 5-10 mM for 15 minutes induced 60% of rooting. The regenerated plants were acclimatized and successfully established in a greenhouse, with a 90% survival rate observed after three months. Based on the results of this study, the micropropagation of Aspidosperma polyneuron from in vitro seedlings is feasible and could be a useful tool for the conservation and propagation of this important endangered species.Foi desenvolvido um método eficiente de regeneração de plantas para Aspidosperma polyneuron a partir de culturas nodais de plântulas. Sementes maduras foram desinfestadas e os embriões germinaram em meio de cultura Woody Plant Medium (WPM).  Segmentos nodais do epicótilo e hipocótilo retirados de plântulas de três semanas crescendo in vitro foram cultivados em meio WPM, suplementado com 6-benziladenina (BA) (2,5; 5,0 e 10 mM), isolado ou combinado com ácido indol-3-butírico (AIB) ou ácido a-naftalenoacético (ANA) (0,5 mM) durante o cultivo inicial e três subcultivos. Para indução de raízes, inicialmente, foram testados tratamentos-pulso de AIB (2,5; 5,0 ou 10 mM) por 15 minutos, seguidos de transferência para meio WPM, sem regulador de crescimento por cinco semanas. Plantas regeneradas foram transplantadas para bandejas contendo solo e substrato Plantmax® (3:1) e depois transferidas para sacos plásticos para aclimatização em casa de vegetação. Os explantes do hipocótilo apresentaram resultados superiores de regeneração de brotações e enraizamento, quando comparados com os do epicótilo. Os maiores números de brotações por explante (7-8) foram obtidos em meios de cultura, suplementados com 10 mM de BA, no terceiro subcultivo. A adição de 0,5 mM de AIB ou ANA combinada com BA não influenciou a regeneração de brotações. O tratamento-pulso de AIB (5-10 mM) por 15 minutos induziu 60% de enraizamento. As plantas regeneradas foram aclimatizadas e bem estabelecidas em casa de vegetação com 90% de sobrevivência, após três meses. Baseado nos resultados desse estudo, a micropropagação de Aspidosperma  polyneuron a partir de plântulas cultivadas in vitro é viável e pode ser uma boa opção para conservação e propagação dessa espécie importante que está em extinção

Estabelecimento de culturas assépticas de Aspidosperma polyneuron.

The objective of the present work was to obtain aseptic cultures in order to establish a micropropagation protocol of Aspidosperma polyneuron from juvenile explants. Apical shoots from two-year--old seedlings were collected in a greenhouse and disinfected with sodium hypochlorite (0.125 or 0.25%) or mercuric chloride (0.025, 0.05 or 0.1%), during 5 or 10 minutes and at different seasons of the year. Necrosis, bacterial and fungal contamination percentages and survival rates were evaluated after three weeks. It was showed that NaOCl 0.25% solution, during 10 minutes resulted in 70% of survival and disinfection of apical shoots, independent of the season of the year (summer or autumn). HgCl2 was more efficient than NaOCl in the disinfection of apical shoots, therefore 0.05% HgCl2, during 10 minutes was recommended (84.10% of survival). Aseptic cultures were established in all seasons of the year, but better results were obtained in spring and summer.O presente trabalho objetivou estabelecer um protocolo para obtenção de culturas assépticas de Aspidosperma polyneuron visando à regeneração in vitro de mudas dessa espécie. Brotações apicais de mudas de dois anos de idade foram coletadas em casa de vegetação e desinfestadas com hipoclorito de sódio (NaOCl) ou cloreto de mercúrio (HgCl2) visando ao estabelecimento de culturas assépticas. Os tratamentos testados com NaOCl foram: solução 0,125 ou 0,25%, durante cinco ou dez minutos e com HgCl2: 0,025; 0,05 ou 0,1%, durante cinco ou dez minutos e em todas as estações do ano. As avaliações das percentagens de necrose, contaminação fúngica, contaminação bacteriana e de sobrevivência foram feitas após três semanas. Os resultados revelaram que o tratamento com solução de NaOCl a 0,25%, durante 10 minutos, resultou em 70% de sobrevivência para brotações apicais, independente da época do ano (verão e outono). O HgCl2 foi mais eficiente que o NaOCl na desinfestação de brotações apicais de peroba-rosa, sendo recomendado o tratamento de 0,05% de HgCl2, durante 10 minutos (84,10% de sobrevivência). Em todas as estações do ano, foram estabelecidas culturas assépticas, contudo, os melhores resultados foram obtidos na primavera e verão

PROPAGAÇÃO VEGETATIVA DE GUACO COM ADIÇÃO DE ÁCIDO NAFTALENOACÉTICO

The medicinal species Mikania glomerata Spr. (guaco) is native of Atlantic Forest and undergoes non-regulated extraction. Guaco’s seeds are rare, so its vegetative propagation occurs by cutting. The aim of this work was to estimate the role of naphtalene acetic acid (NAA) in root induction of M. glomerata cuttings. The experiment was installed by entire random with six treatments and four replications (10 cuttings per treatment). The treatments consisted of different NAA concentrations in powder and watersolution (0; 2500; 5000 mg kg-1 and 0; 2500; 5000 mg L-1, respectively). During August and October, 2006, cuttings were kept in a greenhouse (25 ºC ± 2 ºC, 95% RH) in Curitiba-PR. The parameters evaluated after 47 days were: cuttings survival with callus (EC); cuttings survival without callus (EV); cuttings dead (EM); cuttings rooted (EE); number of roots per cuttings (NRE); average length of the three longest roots (CRE); cuttings sprouted (BR). Death rate was low (~3%) and 20% of cuttings sprouted. All treatments presented high roots rate (~90%), but the powder treatment with 2500 mg kg-1 NAA showed better results for number of roots per cuttings.O guaco (Mikania glomerata Spr.) é uma planta herbácea nativa da Floresta Atlântica, de grande interesse medicinal e que sofre ações extrativistas. A propagação da espécie é feita por estacas, posta a dificuldade de coleta de sementes. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito do regulador vegetal ácido naftalenoacético (ANA) no enraizamento de M. glomerata em estaquia semilenhosa. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com seis tratamentos e quatro repetições (10 estacas por tratamento). Foram utilizadas diferentes concentrações de ANA em talco e em solução (0; 2500; 5000 mg kg-1 e 0; 2500; 5000 mg L-1, respectivamente). O experimento foi conduzido entre os meses de agosto e outubro de 2006, em Curitiba-PR. Após 47 dias em casa-de-vegetação, as estacas foram avaliadas com relação ao número de estacas vivas com calos (EC); estacas vivas sem calos (EV); estacas mortas (EM); estacas enraizadas (EE); número de raízes por estaca (NRE) e comprimento das três maiores raízes por estaca (CRE), além do número de estacas com brotações (BR). A mortalidade das estacas foi pequena (~3%) e 20% das estacas brotaram. A taxa de enraizamento foi alta (~90%) em todos os tratamentos, destacando-se o tratamento na concentração de 2500 mg kg-1 de ANA em forma de talco para indução de maior número de raízes por estaca

ESTAQUIA E ALPORQUIA DE Tibouchina fothergillae (D.C.) Cogn. (MELASTOMATACEAE) COM A APLICAÇÃO DE ÁCIDO NAFTALENO ACÉTICO

Tibouchina fothergillae is a Brazilian native species with ornamental potential and adequate for ecosystems rehabilitation. However, the species has very small seeds, hard to collect by conventional methods, making large scale seed propagation not commercially feasible. The aim of this work was to propagate T. fothergillae by stem cuttings and air layering, with application of naphthalene acetic acid. Samples were obtained from plants located at the Campus III of the Federal University of Parana (UFPR), in Curitiba-PR-Brazil. Both experiments were installed in August, 2006 and evaluated after 20 days (stem cutting) or 76 days (air layering). The concentrations of 0, 500, and 1000 mg kg-1 of naphthalene acetic acid (NAA) were applied in powder in the cuttings and in vaseline paste in the layerings. It was observed 100% of rooting on stem cuttings. The averages of roots per cutting treated with NAA (20.88 and 21.88) were higher than the control’s average (10.58). However, there weren’t differences of the root length among treatments (grand mean= 3.35 cm). On the air layering experiment, rooting varied from 50 to 100%. The 1000 mg kg-1 NAA treatment promoted the largest number of roots per layering (17.00) and higher root length mean (11.73 cm). Through these results, both techniques can be considered suitable for T. fothergillae’s propagation. It’s recommended to use NAA (1000 mg kg-1) to increase the number of roots on air layerings. NAA application isn’t necessary for stem cuttings.Tibouchina fothergillae é uma espécie nativa brasileira, com potencial ornamental e para recuperação de áreas degradadas. Entretanto, o tamanho reduzido de suas sementes e a dificuldade de coleta das mesmas requer metodologias específicas, fazendo com que a propagação sexuada da espécie não seja viável comercialmente. Objetivou-se neste trabalho estudar a propagação vegetativa de T. fothergillae, por estaquia e alporquia, com a aplicação de ácido naftaleno acético. O material vegetal foi obtido de plantas matrizes localizadas no Campus III da UFPR, Curitiba-PR. Ambos experimentos foram instalados em agosto/2006, e avaliados aos 20 dias (estaquia) e 76 dias (alporquia). A aplicação de três diferentes concentrações (0, 500 e 1000 mg kg-1) de ácido naftaleno acético (ANA) foi feita em talco na base das estacas e em pasta de vaselina nos alporques. Houve 100% de enraizamento nas estacas. O número médio de raízes por estaca foi maior nos tratamentos com ANA (entre 20,88 e 21,88) que na testemunha (10,58). Todavia, não houve diferença no comprimento médio das raízes por estaca, com média geral de 3,35 cm. Na alporquia, o enraizamento variou entre 50 e 100%. O tratamento com 1000 mg kg-1 de ANA promoveu maior número de raízes por alporque (17,00) e maior comprimento médio das raízes por alporque (11,73 cm). Por estes resultados, considerou-se viável a propagação de T. fothergillae por estaquia ou alporquia. Recomenda-se o uso de ANA na concentração de 1000 mg kg-1 para aumentar o número de raízes em alporques, não sendo necessário na estaquia