Molecular organization of the human serotonin transporter at the air/water interface

AbstractThe serotonin transporter (SERT) is the target of several important antidepressant and psychostimulant drugs. It has been shown that under defined conditions, the transporter spread at the air/water interface was able to bind its specific ligands. In this paper, the interfacial organization of the protein has been assessed from dynamic surface pressure and ellipsometric measurements. For areas comprising between 10 400 and 7100 Å2/molecule, ellipsometric measurements reveal an important change in the thickness of the SERT film. This change was attributed to the reorientation of the transporter molecules from a horizontal to their natural predictive transmembrane orientation. The thickness of the SERT film at 7100 Å2/molecule was found to be approximately equal to 84 Å and coincided well with the theoretical value estimated from the calculations based on the dimensions of α-helices containing membrane proteins. These data suggest that the three-dimensional arrangement of the SERT may be represented as a box with lengths dz=83–85 Å and dy or dx=41–47 Å

The bacterial cell envelope as delimiter of anti-infective bioavailability - An in vitro permeation model of the Gram-negative bacterial inner membrane.

Gram-negative bacteria possess a unique and complex cell envelope, composed of an inner and outer membrane separated by an intermediate cell wall-containing periplasm. This tripartite structure acts intrinsically as a significant biological barrier, often limiting the permeation of anti-infectives, and so preventing such drugs from reaching their target. Furthermore, identification of the specific permeation-limiting envelope component proves difficult in the case of many anti-infectives, due to the challenges associated with isolation of individual cell envelope structures in bacterial culture. The development of an in vitro permeation model of the Gram-negative inner membrane, prepared by repeated coating of physiologically-relevant phospholipids on Transwell(®) filter inserts, is therefore reported, as a first step in the development of an overall cell envelope model. Characterization and permeability investigations of model compounds as well as anti-infectives confirmed the suitability of the model for quantitative and kinetically-resolved permeability assessment, and additionally confirmed the importance of employing bacteria-specific base materials for more accurate mimicking of the inner membrane lipid composition - both advantages compared to the majority of existing in vitro approaches. Additional incorporation of further elements of the Gram-negative bacterial cell envelope could ultimately facilitate model application as a screening tool in anti-infective drug discovery or formulation development

INTERACTIONS SPECIFIQUES A L'INTERFACE AIR/EAU, ENTRE DES PROTEINES ET LEURS LIGANDS (DOCTORAT (PHARMACOTECHNIE ET BIOPHARMACIE))

CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Evolution de la stratégie de conception de photosensibilisateurs utilisés en photothérapie dynamique des cancers

CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Analysis of intramembranal penetration mechanisms of glycoconjugated porphyrins used in photodynamic therapy of cancers (Modelization of specific and non specific interactions)

La complexité des membranes biologiques est à l origine du développement des modèles membranaires artificiels comme outils indispensables à la compréhension des mécanismes d interaction entre médicaments et membrane cellulaire. Cette thèse porte sur l'étude des interactions non spécifiques et spécifiques entre de nouvelles porphyrines glycoconjuguées utilisables en thérapie photodynamique (PDT) et des modèles membranaires biomimétiques (monocouches, bicouches planes supportées et liposomes) du rétinoblastome portant à leur surface une lectine spécifique du mannose. Les principales techniques utilisées pour cette étude sont la tensiométrie de surface, la spectrométrie de fluorescence, la microbalance à cristal de quartz avec mesure de dissipation (QCM-D) et diffusion quasi-élastique de lumière (DLS). Les porphyrines glycoconjuguées se sont avérées comme des molécules prometteuses, capables à interagir d une manière non spécifique (pénétration passive) et spécifique (ciblage des récepteurs de type lectinique) avec les modèles membranaires du rétinoblastome.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Etude des mécanismes d'interaction entre des porphyrines dendrimériques et des membranes de cellules tumorales (validation d'un modèle artificiel par une approche cellulaire)

La thérapie photodynamique (PDT) constitue une approche prometteuse pour le traitement de tumeurs cancéreuses accessibles à la lumière, en particulier pour la réduction des effets indésirables comparés à la chimiothérapie classique. Particulièrement intéressante pour le traitement du rétinoblastome, cancer le plus fréquent chez le jeune enfant, elle nécessite le développement de nouveaux photosensibilisateurs dont la structure est mieux adaptée aux spécificités des cellules ciblées. Dans le cadre de cette thèse, nous avons étudié des dérivés porphyriniques à structure dendrimérique pour amplifier leur caractère amphiphile et créer un cluster de sucres. Cette structure pourrait favoriser la reconnaissance de ces molécules par des récepteurs membranaires, interactions déjà mises en évidence grâce à des modèles membranaires artificiels. L'objectif de cette thèse était de déterminer les mécanismes d'interactions spécifiques et non spécifiques de ces molécules avec la membrane plasmique et de valider la pertinence des modèles artificiels. Si la culture cellulaire s'est avérée inadaptée pour cette détermination, une approche innovante utilisant une microbalance à cristal de quartz et des expériences de cytométrie en flux ont confirmé la capacité des porphyrines dendrimériques à interagir avec un ou plusieurs récepteurs spécifiques. Une analyse de la composition lipidique des membranes cellulaires de la lignée Y79 et de deux xénogreffes a été également entreprise afin de mieux caractériser ces membranes et de contribuer à l'élaboration d'un modèle lipidique artificiel davantage biomimétique du rétinoblastome.Photo Dynamic Therapy (PDT) is a promising alternative treatment against solid tumors reachable to light with less side-effects than classical chemotherapies. Its efficacy mainly relies on the physicochemical properties of a photosensitizer (PS), and its penetration into tumour cells. PDT is particularly interisting for the treatment of retinoblastoma, a malignant intraocular tumor affecting young children. Consequently, new photosensitizers need to be created. Since PS uptake may be ease by the over-expression of a mannose receptor at the surface of retinoblastoma cells, amphiphilic dendrimeric porphyrins grafted with mannose groups have been synthetised. Model membranes allow the identification of structural parameters controlling the passive penetration of porphyrins into cells. Specific interactions have been previously shown between these porphyrins and a model membrane grafted with a lectin (Concanavalin A) mimicking the mannose receptor on the retinoblastoma cell membrane. In this work we aimed at i) assessing the relevance of the membrane model with biological studies (cell culture and flow cytometry) and ii) improve the model with a lipidomic analysis of retinoblastoma cells and xenografts. Cell culture revealed to be unsuitable for our studies. To overcome this, we used an innovative approach in which retinoblastoma cells were immobilized onto the sensor of a quartz crystal microbalance (QCM-D). We fully confirmed the results achieved with the artificial membrane model. Since the composition of a membrane plays a crucial role, a lipidomic analysis of Y79 cell and xenografts membranes has been performed. Phospholipids and cholesterol have been identified and quantified with LC-DEDL and GC-MS. The feedback from these experiments not only provided useful information about the differences in lipidic composition of these membranes, but also allowed us to refine the lipidic composition of our models.PARIS11-SCD-Bib. électronique (914719901) / SudocSudocFranceF

La beauté en Asie (caractéristiques cutanées, rituels, besoins et produits cosmétiques spécifiques, une inspiration pour le monde occidental)

La beauté occidentale se révèle être le standard de beauté universel alors que les différentes populations du monde manifestent des attentes et des besoins spécifiques. Notre approche des caractéristiques de la peau asiatique permet de mieux comprendre les exigences cosmétiques de cette population. Mais des facteurs autres que physiologiques, la culture et les critères de beauté asiatiques, influencent également le développement des produits cosmétiques sur le marché asiatique. Notre étude sur les produits blanchissants illustre notamment cet aspect. Les marques occidentales sont ainsi contraintes de s'adapter pour exister sur ce marché de plus en plus important, mais s en inspirent également pour développer et lancer de nouvelles tendances en Occident.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocPARIS-BIUP (751062107) / SudocSudocFranceF

Comportement interfacial et en solution de polysaccharides amphiphiles (application à la solubilisation de principes actifs hydrophobes)

Ce travail décrit le comportement interfacial et en solution de carboxymethylpullulanes modifiés par des chaines alkyl de taille et en proportion variables, ainsi que leur application à la solubilisation de principes actifs insolubles. En solution, les interactions hydrophobes entrainent la formation d'agregats. La polarité du coeur de ces agrégats dépend de la composition des polymères, de leur concentration et des conditions du milieu. L'adsorption à l'interface air-solution est influencée par la longueur des substituants alkyl et le taux de substitution hydrophobe. Les tests de solubilisation sur la benzophenone et le docetaxel (anticancéreux) ont montré que le polymère le plus substitué présente le meilleur pouvoir solubilisant. Les solutions de polymère-docetaxel ont démontre une cytotoxicité vis-à-vis des cellules du cancer du sein similaire à celle de la formulation commerciale et une moindre toxicité du polymère vis-à-vis des macrophages par rapport à l'excipient commercialisé.This manuscript focuses on the comparative study of physico-chemical properties of amphiphilic carboxymethylpullulans differing by the length and the percentage of grafted alkyl chains , and on their application to the solubilisation of hydrophobic drugs. In aqueous solutions, hydrophobic interactions induce the formation aggregates. The polarity of the aggregates core depends on polymers composition and external factors. The surface tension studies evidenced a difference between the interfacial properties of polymers containing more than 10% of octyl chains and those substituted with long alkyl chains. The solubility studies showed that the polymer with the higher percentage of alkyl chains was the most effective in solubilizing benzophenone and docetaxel. In vitro, the polymer-docetaxel formulation was equipotent against cancer cells to the commercial docetaxel one. Furthermore, the polymer appeared less cytotoxic against macrophages than the excipient used in the commercial form.CHATENAY M.-PARIS 11-BU Pharma. (920192101) / SudocSudocFranceF

Specific interaction of lectins with liposomes and monolayers bearing neoglycolipids

The interaction of three lectins (wheat germ, Ulex europaeus I, and Lotus tetragonolobus agglutinins: WGA, UEA-I and LTA) with either N-acetyl--glucosamine or -fucose neoglycolipids incorporated into phospholipid monolayers and liposome bilayers was studied at the air/water interface and in bulk solution.http://www.sciencedirect.com/science/article/B6T2N-497HFTC-1/1/22d2980a499b2c91ce83c2d9a6cfaa8

Bioaccessibility and intestinal cellular uptake could partly explain relative biopotency of D3 vitamers.

Bioaccessibility and intestinal cellular uptake could partly explain relative biopotency of D3 vitamers.. 4. international vitamin conferenc