An improved system for estradiol-dependent regulation of gene expression in yeast

BACKGROUND: Saccharomyces cerevisiae is widely utilized in basic research as a model eukaryotic organism and in biotechnology as a host for heterologous protein production. Both activities demand the use of highly regulated systems, able to provide accurate control of gene expression in functional analysis, and timely recombinant protein synthesis during fermentative production. The tightly regulated GAL1-10 promoter is commonly used. However, induction of the GAL system requires the presence of the rather expensive inducer galactose and the absence of glucose in the culture media. An alternative to regulate transcription driven by GAL promoters, free of general metabolic changes, is the incorporation of the hybrid Gal4-ER-VP16 protein developed by D. Picard. This chimeric protein provides galactose-independent activation of transcription from GAL promoters in response to β-estradiol, even in the presence of glucose. However, constitutive expression of this transactivator results in relatively high basal activity of the GAL promoters, therefore limiting the gene expression capacity that is required for a number of applications. RESULTS: In order to improve this expression tool, we have introduced additional regulatory elements allowing a simultaneous control of both the abundance and the intrinsic activity of the Gal4-ER-VP16 chimeric transactivator. The most efficient combination was obtained by placing the coding sequence of the hybrid activator under the control of the GAL1 promoter. This configuration results in an amplification feedback loop that is triggered by the hormone, and ultimately leads to the enhanced regulation of recombinant genes when these are also driven by a GAL1 promoter. The basal expression level of this system is as low as that of native GAL-driven genes in glucose-containing media. CONCLUSION: The feedback regulatory loop that we have engineered allows a 250-fold induction of the regulated gene, without increasing the basal activity of the target promoter, and achieving a 12-fold higher regulation efficiency than the previous configuration

Promotion of Direct Electron Transfer to Cytochrome c by Functionalized Thiophene-based Conducting Polymers

Controlling direct electron transfer (DET) to redox proteins is of great interest for fundamental studies on biochemical processes and the development of biotechnological devices, such as biosensors or enzymatic fuel cells. Cytochrome c is a classical model protein for studying DET reactions that plays a key role in the onset of cellular apoptosis and the mitochondrial respiratory chain. In this contribution, we explored DET between cyt c and conducting polymers bearing the chemical structure of thiophene, specifically PEDOT, and its OH-containing derivative, PHMeEDOT. The combination of electrochemistry and in situ FTIR spectroscopy allowed us to gain more insight into the inner mechanism of DET at physiological pH. Hydrophilic interactions favour the correct orientation of the heme crevice of cytochrome c towards the polymer surface. When a positive charge is injected into the conducting polymer, the increasing electrostatic repulsion between protein and surface induces the desorption of lysine residues near the heme group and stimulates protein flipping. This effect was more pronounced at PEDOT- than PHMeEDOT-modified electrodes since the latter shows stronger interactions with lysine residues, partially hindering protein rotation at moderate potential. The potential-induced reorientation process was similar on both polymer surfaces, only at high positive potentials.Financial support by Spanish Ministry of Science (projects TED2021-129894B-I00 and PDC2021-120884-I00), Generalitat Valenciana (projects GVA-THINKINAZUL/2021/015, MFA/2022/058 and CIPROM/2021/62) and European Union (NextGenerationEU PRTR-C17.I1) is gratefully acknowledged. A.G.-Q. acknowledges funding received from his Marie Skłodowska-Curie Postdoctoral Fellowship (Grant Number MSCA-IF-EF-ST 2020/101018277)

Integración de nuevas tecnologías en la educación: tendencias, retos, complejidad y responsabilidad del cambio curricular

La siguiente pretende ser una reflexión en torno a la Integración de las Nuevas Tecnologías de la Información y la Comunicación en la Educación en el contexto de la Sociedad de la Información, y entendida como un ejercicio más que de reto o exigencia mediática, económica y social, de responsabilidad ética y moral ante la educación con todas las consecuencias que tal planteamiento debe acarrear.Eje: Reflexiones educación Siglo XXIRed de Universidades con Carreras en Informática (RedUNCI

Integración de nuevas tecnologías en la educación: tendencias, retos, complejidad y responsabilidad del cambio curricular

La siguiente pretende ser una reflexión en torno a la Integración de las Nuevas Tecnologías de la Información y la Comunicación en la Educación en el contexto de la Sociedad de la Información, y entendida como un ejercicio más que de reto o exigencia mediática, económica y social, de responsabilidad ética y moral ante la educación con todas las consecuencias que tal planteamiento debe acarrear.Eje: Reflexiones educación Siglo XXIRed de Universidades con Carreras en Informática (RedUNCI

Una experiencia práctica reutilizando aspectos

Este art´ıculo cuenta nuestra experiencia obtenida tras haber realizado un proyecto utilizando la tecnolog´ıa de aspectos AspectJ, y plantearsenos el hecho de reutilizar los aspectos definidos en el mismo con un nuevo proyecto a desarrollar. En definitiva, comprobar de forma pr´actica el grado de reutilizaci´on que tienen los aspectos en distintas aplicaciones

Identification of new sources of resistance to RHBV- rice hoja blanca virus

With the aim to find new sources of resistance to rice hoja blanca (white leaf) disease, transmitted by the insect Tagosodes orizicolus, 660 genotypes were evaluated under greenhouse and field conditions. Seven resistant genotypes were identified, and genomic studies were performed to demonstrate that the resistance in these sources is genetically different from that of Fedearroz 2000, which is currently the variety with the most resistance to hoja blanca. These new resistance sources constitute a resource that can be used to sustainably extend hoja blanca disease management throughout all of the rice-growing regions of tropical America. This is the first report of hoja blanca resistance in indica rice and different from that of Fedearroz 2000

Demersal Resources

En prens

An approach to the spatial distribution of fishing effort in the Gulf of Cadiz.

The spatial distribution of the fishing effort exerted by the trawl fleet of Isla Cristina port (Huelva, Spain) is simulated by means of an application (FAST) for Geographic Information Systems (ArcView), which can offer results just with limited input data. The simulation were carried out with three input variables: depth, distance from fishing grounds to port and the fishing laws in force in the area. The results obtained from two simulations tested match up the effort distribution detected in the area for both the fleet as a whole and a given segment of the same.Postprin

Nutritional valuation of schoolchildren from three Ibero-American countries: A comparative analysis of the references proposed by International Obesity Task Force (IOTF) and World Health Organization (WHO)

Introducción: El índice de masa corporal (IMC) resulta un indicador útil para valorar la condición nutricional en la infancia y adolescencia. Si bien no existe consenso respecto a los valores o puntos de corte de IMC que deben utilizarse para la diagnosis del sobrepeso, la obesidad o la insuficiencia ponderal, las referencias propuestas por la Organización Mundial de la Salud (OMS) y la International Obesity Task Force (IOTF) son las más aceptadas. No obstante, existen discrepancias importantes en los resultados obtenidos en función de una u otra referencia. Objetivo: Analizar y comparar la condición nutricional de una muestra internacional a partir del IMC, mediante la aplicación simultánea de las referencias recomendadas por la IOTF y la OMS. Métodos: Se calculó el IMC de 1289 escolares de 10 a 13 años de México, Venezuela y España. A cada niño le fue atribuida una categoría nutricional (bajo peso, normopeso, sobrepeso y obesidad) utilizando el criterio de la IOTF (puntos de corte equivalentes a 18,5; 25 y 30 en adultos) y OMS (-1 DE: bajo peso + 1 DE: sobrepeso y +2 DE: obesidad). Las prevalencias de estado nutricional obtenidas por cada criterio fueron comparadas mediante la prueba de Chi-Cuadrado. Resultados: El porcentaje de escolares en cada una de las categorías nutricionales varió significativamente en función de la referencia empleada. La prevalencia de malnutrición por exceso o por defecto fue, en ambos sexos y en los tres países, superior al emplear los parámetros OMS. La referencia OMS evidenció un 10,9% menos de niños normonutridos y un 13,1% más de malnutridos que la IOTF. Discusión: Los resultados de esta investigación permiten inferir que la referencia propuesta por la OMS resulta ser más “preventiva” al momento de identificar individuos malnutridos. Se subraya la importancia de especificar los criterios empleados para la determinación del estado nutricional en los estudios de carácter epidemiológico, así como de contrastar las referencias empleadas para el diagnóstico. Conclusiones: Las referencias OMS para IMC sobrestiman la prevalencia de bajo peso, sobrepeso y obesidad en relación a los puntos de corte propuestos por el IOTF para el diagnóstico de la malnutrición.Introduction: Body Mass Index (BMI) is a useful tool for assessing nutritional status in childhood and adolescence. Although there is no consensus on BMI values or cutoffs to be used for the diagnosis of overweight, obesity and underweight references proposed by World Health Organization (WHO) and International Obesity Task Force (IOTF) are the most accepted. However, there are significant discrepancies in the results obtained in terms of either reference. Objective: To analyze and compare the nutritional status of an international sample from IMC, by simultaneous application of IOTF and WHO recommended references. Methods: 1289 schoolchildren’s BMI between 10 and 13 years of Mexico, Venezuela and Spain was estimated. Each child was assigned a nutritional category (underweight, normal weight, overweight and obese) using the IOTF criteria (points cut equivalent to 18,5, 25 and 30 in adults) and WHO (-1 SD: low weight +1 DE: overweight and +2 SD: obesity). The prevalence of nutritional status of each criterion was compared using the Chi-square test. Results: The percentage of students in each of the nutritional categories mottled significantly depending on the reference used. The prevalence of excess or defect malnutrition, in both sexes and in all three countries, was exceeded using the WHO parameters. WHO reference showed 10,9% less than well-nourished children and 13,1 % more malnourished than the IOTF. Discussion: The results of this research allow inferring that the reference proposed by WHO appears to be more “protecting” when identifying malnourished individuals. The importance of specifying the criteria for determination of nutritional status in epidemiologic studies, as well as to contrast the references used for diagnosis, is emphasized. Conclusions: The WHO BMI references overestimate the prevalence of underweight, overweight and obesity in relation to the cutoff points proposed by the IOTF for diagnosing malnutrition.Fil: Bergel Sanchís, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Cesani Rossi, María Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; ArgentinaFil: Cordero, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucuman. Instituto Superior de Estudios Sociales. Universidad Nacional de Tucuman. Instituto Superior de Estudios Sociales; ArgentinaFil: Navazo, Bárbara. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Cs.naturales y Museo. Departamento Científico de Antropología. Cátedra de Antropología Biológica Iv; ArgentinaFil: Olmedo, S.. Programa de Ecología Reproductiva del Gran Chaco Argentino. Formosa; ArgentinaFil: Quintero, F.. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; Argentina. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Cs.naturales y Museo. Departamento Científico de Antropología. Cátedra de Antropología Biológica Iv; ArgentinaFil: Sardi, Marina Laura. Universidad Nacional de la Plata. Facultad de Cs.naturales y Museo. Departamento de Antropología; ArgentinaFil: Torres, María Fernanda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico CONICET- La Plata. Instituto de Genética Veterinaria "Ing. Fernando Noel Dulout". Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Genética Veterinaria; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Filosofía y Letras; ArgentinaFil: Arechiga, J.. Universidad Nacional Autónoma de México; MéxicoFil: Méndez de Pérez, B. Universidad Nacional de Venezuela; VenezuelaFil: Marrodán, M. D.. Universidad Complutense de Madrid; Españ

Una experiencia de enseñanza en la red en la Universidad de Murcia

En el presente trabajo pretendemos presentar la experiencia de diseñar por primera vez una asignatura para ser seguida enteramente a través de la red en el entorno de la Universidad Presencial.Eje: Educación universitaria: Experiencias uso NTICRed de Universidades con Carreras en Informática (RedUNCI