Acidic pH and acidic enzymes in atherosclerosis

Atherosclerosis is an inflammatory disease characterized by accumulation of lipids and fibrous connective tissue in the arterial wall. Recently, it has been suggested that decrease in the pH of extracellular fluid of the arterial intima may enhance LDL accumulation by increasing binding of the LDL to matrix proteoglycans and also by making the plaque more favorable for acidic enzymes to be active. Many lysosomal acidic enzymes have been found in atherosclerotic plaques. In this thesis, we were able to induce secretion of lysosomal acidic cathepsin F from human monocyte-derived macrophages by stimulation with angiotensin II. We also showed that LDL pre-proteolyzed with cathepsin S was more prone to subsequent hydrolytic modifications by lipases. Especially acidic secretory sphingomyelinase was able to hydrolyze pre-proteolyzed LDL even at neutral pH. We also showed that the proteolyzed and lipolyzed LDL particles were able to bind more efficiently to human aortic proteoglycans. In addition, the role of extracellular acidic pH on the ability of macrophages to internalize LDL was studied. At acidic pH, the production of cell surface proteoglycans in macrophages was increased as well as the binding of native and modified LDL to cell surface proteoglycans. Furthermore, macrophages cultured at acidic pH showed increased internalization of modified and native LDL leading to foam cell formation. This thesis revealed various mechanisms by which acidic pH can increase LDL retention and accumulation in the arterial intima and has the potential to increase the progression of atherosclerosis.Ateroskleroosi on valtimon seinämän tulehdussairaus. Sen merkittävimmät ilmenemismuodot ovat sydäninfarkti ja aivoinfarkti. Ateroskleroosissa veren kolesterolia kuljettavat LDL-hiukkaset tunkeutuvat valtimoiden seinämään, jonka seurauksena kehittyy ateroskleroottinen plakki. Plakin kasvaminen ahtauttaa valtimon onteloa ja heikentää veren virtausta. Plakki voi myös revetä, jolloin muodostuu paikallinen verihyytymä, joka voi tukkia valtimon ja aiheuttaa hapen puutteessa olevaan kudokseen infarktin eli kuolion. Viimeaikaisissa tutkimuksissa paksuntuneesta valtimon seinämästä on löydetty alueita, joissa solunulkoisen tilan pH on voimakkaasti laskenut, paikallisesti jopa alle pH kuuden. Happamassa LDL-hiukkasten on todettu sitoutuvan voimakkaammin seinämän proteoglykaaneihin, mikä edesauttaa LDL-hiukkasten kertymistä seinämään, sekä altistaa LDL-hiukkaset seinämässä sijaitsevien entsyymien aiheuttamalle muuntumiselle. Tässä väitöskirjassa on tutkittu happamuuden vaikutusta LDL-hiukkasten kertymiseen ateroskleroottisessa plakissa esiintyviin makrofageihin. Lisäksi väitöskirjassa tutkittiin happamien entsyymien eritystä makrofageista sekä niiden vaikutusta solunulkoisessa tilassa. Tutkimuksemme osoittivat verisuonen seinämästä löytyvän angiotensiiini II:n pystyvän aiheuttamaan happaman katepsiini F-entsyymin erittymisen solunulkoiseen tilaan. Lisäksi katepsiini S:n todettiin muuntavan LDL-hiukkaset alttiimmaksi solunukoisten lipaasien vaikutukselle, minkä seurauksena muun muassa LDL-hiukkasten sitoutuminen soluväliaineen proteoglykaaneihin vahvistui. Happamassa makrofagit tuottivat enemmän solun pinnan proteoglykaaneita ja LDL-hiukkasten sitoutumisen näihin todettiin lisääntyvän. Tämän seurauksena muuntuneiden ja jopa muuntumattomien LDL-hiukkasten sisäänotto makrofageihin lisääntyi happamassa pH:ssa. Hapan pH lisää LDL-hiukkasten tarttumista valtimon seinämästä eristettyihin rakenteisiin ja kiihdyttää ateroskleroosille tyypillisten kolesterolitäytteisten makrofagien muodostumista. Niinpä nämä valtimon seinämän happamat alueet voivat toimia ateroskleroosin kehittymistä voimakkaasti edistävinä keskuksina

Asiakkaan valinnanvapauden toteutuminen palvelusetelijärjestelmissä : Tutkimus valinnanvapauden mahdollisuuksista ja rajoitteista sekä valintojen tukemisen keinoista perusterveydenhuollon palveluissa

Palveluseteli on yksi vaihtoehto kunnan järjestää lakisääteiset terveydenhuollon palvelut. Se on myös yksi keino lisätä asiakkaan valinnanvapautta. Tutkimuksen tavoitteena olikin selvittää, miten kaupungit mahdollistavat ja rajoittavat asiakkaan valinnanvapautta sekä keinoja, joilla kaupungit voivat tukea asiakkaan valintaa perusterveydenhuollon palvelusetelijärjestelmissä. Perusterveydenhuollon palveluista valittiin yleislääkäripalvelut ja suun terveydenhuollon palvelut. Tutkimuksessa tarkasteltiin myös palveluseteliasiakkaan vaikutusmahdollisuuksia palvelusetelijärjestelmissä soveltaen Hirschmanin exit, voice and loyalty teoriaa. Tämän lisäksi tutkimuksessa tuotettiin empiiristä tietoa siitä, miten kaupungit ja kuntayhtymä toteuttavat palvelusetelipolitiikassa näennäismarkkinateoriaa ja miten näennäismarkkinateorian esittämiä tehokkuusvaatimuksia on otettu huomioon. Tutkimukseen valittiin kaupungit sähköisistä palvelusetelijärjestelmistä. Helsingissä, Espoossa, Turussa, Kuopiossa, Porissa ja Jyväskylässä on käytössä suun terveydenhuollossa palveluseteli. Yleislääkäripalveluissa palveluseteli on käytössä Helsingissä, Espoossa, Porissa, Raumalla, Seinäjoella ja Keski-Suomen seututerveyskeskuksen kuntayhtymässä. Tutkimus on tutkimusotteeltaan dokumenttianalyysi. Tutkimusaineistona käytettiin kaupunkien palvelusetelisääntökirjoja, kaupunkien nettisivuja, kaupunkien sosiaali- ja terveydenhuollon lautakuntien pöytäkirjoja sekä kaupunkien käyttämiä sähköisiä palvelusetelijärjestelmiä. Tutkimuksesta selvisi, että harvalla kaupungilla on vielä palveluseteleitä käytössä suun terveydenhuollon palveluissa ja yleislääkärin vastaanotoissa, ainakaan sähköisissä järjestelmissä. Tulosten mukaan asiakkaalla on todellinen valinnanvapaus palvelutuottajien valinnassa Helsingin, Espoon ja Porin suun terveydenhuollon palveluissa. Näissä kaupungeissa asiakas saa valita palvelusetelin ja yksityisen palveluntuottajan, vaikka omissa hammashoitoloissa olisikin tilaa. Turussa, Kuopiossa ja Jyväskylässä palveluseteli on vaihtoehtona, jos omista hoitoloista ei löydy aikaa hoitotakuun määräajoissa. Kaikissa tutkimuksessa mukana olleissa kaupungeissa asiakkaat voivat saada palvelusetelin yleislääkärin vastaanotolle vain, jos lääkärin vastaanottoaikoja ei ole antaa riittävän nopeasti. Kaupunkien ensisijainen tavoite on lisätä palveluiden saatavuutta suun terveydenhuollon ja yleislääkärivastaanottojen palveluissa.A service voucher is one option for the municipality to organize statutory health care services. It is also one way to increase customers freedom of choice. The aim of the study was to find out how municipalities enable and restrict the customer’s freedom of choice and the ways to support choices in service voucher systems. Oral health care and general practitioner services were selected for the study. The study also examined the service voucher customer’s possibilities to influence the service voucher system applying Hirschman’s exit, voice and loyalty theory. In addition, the study provided empirical information on how the city implements of quasi-market theory in service voucher policy and how the efficiency requirements of quasi-market theory have been considered. The cities were selected for the study from electronic service voucher systems. In Helsinki, Espoo, Turku, Kuopio, Pori and Jyväskylä, a service voucher is used in oral health care. In general practitioner services, the service voucher is used in Helsinki, Espoo, Pori, Rauma, Seinäjoki and Keski-Suomen seututerveyskeskus. The approach to this research is a documentary analysis. The research material consists of municipalities service voucher rulebooks, websites, the decisions of municipal social- and healthcare boards, and electronic service vouchers systems used by municipalities. The results of the study showed that few cities have the service voucher in use for oral health care services and general practitioner services. According to the results, the customer has real freedom of choice in the choice of service providers in Helsinki, Espoo and Pori oral health services. In these cities the customer has the right to choose a service voucher and private service provider even if there is space in their own dental clinic. In Turku, Kuopio and Jyväskylä a service voucher is an option if you cannot find time in your own dental clinics within a reasonable time. The customer can choose the service voucher for general practitioner reception only if there is no available time for the city’s own doctors in short order. The primary objective of the service voucher is to increase the service availability in these cities

Riista-aitojen toteuttaminen valtatielle 1 välille Veikkola-Myllykylä :Toimenpideselvitys

Tämän selvityksen perusteella valtatiellä 1 on suuri tarve riista-aidoille osuudelle, jolta ne puuttuvat. Selvityksen perusteella riista-aidat on toteutettavissa osin puuttuvalle välille ELY-keskukselle myönnetyllä 350 000 euron rahoituksella (vihersillat toteutetaan erillisestä budjetista). Edellä esitetyn mukaisesti riista-aitojen toteutuksessa kannattaa edetä vaiheittain seuraavasti: Riista-aidat mahtuvat lievin ohjepoikkeamin nykyiselle tiealueelle kahta kohtaa lukuun ottamatta. Näiden osalta selvityksen aikana käynnistettiin maanomistajaneuvottelut, joiden pohjalta pyritään saamaan maanomistajien suostumukset riista-aitojen toteuttamiseksi tiealueen ulkopuolelle. Koska suurempia tiealueen laajentamiseen liittyviä toimenpidetarpeita ei esiintynyt, seuraavassa vaiheessa voidaan edetä suoraan riista-aitojen toteuttamiseen. Riista-aitojen toteuttaminen pyritään ajoittamaan vielä vuoden 2019 puolelle

Human mast cell neutral proteases generate modified LDL particles with increased proteoglycan binding

Background and aims: Subendothelial interaction of LDL with extracellular matrix drives atherogenesis. This interaction can be strengthened by proteolytic modification of LDL. Mast cells (MCs) are present in atherosclerotic lesions, and upon activation, they degranulate and release a variety of neutral proteases. Here we studied the ability of MC proteases to cleave apoB-100 of LDL and affect the binding of LDL to proteoglycans. Methods: Mature human MCs were differentiated from human peripheral blood-derived CD34(+) progenitors in vitro and activated with calcium ionophore to generate MC-conditioned medium. LDL was incubated in the MC-conditioned medium or with individual MC proteases, and the binding of native and modified LDL to isolated human aortic proteoglycans or to human atherosclerotic plaques ex vivo was determined. MC proteases in atherosclerotic human coronary artery lesions were detected by immunofluorescence and qPCR. Results: Activated human MCs released the neutral proteases tryptase, chymase, carboxypeptidase A3, cathepsin G, and granzyme B. Of these, cathepsin G degraded most efficiently apoB-100, induced LDL fusion, and enhanced binding of LDL to isolated human aortic proteoglycans and human atherosclerotic lesions ex vivo. Double immunofluoresence staining of human atherosclerotic coronary arteries for tryptase and cathepsin G indicated that lesional MCs contain cathepsin G. In the lesions, expression of cathepsin G correlated with the expression of tryptase and chymase, but not with that of neutrophil proteinase 3. Conclusions: The present study suggests that cathepsin G in human atherosclerotic lesions is largely derived from MCs and that activated MCs may contribute to atherogenesis by enhancing LDL retention. (C) 2018 Elsevier B.V. All rights reserved.Peer reviewe

Asiakasyhteistyökysely sosiaalityöntekijälle

Tämän opinnäytetyön tavoitteena oli saada aikaan arviointilomake, jolla sosiaalityön-tekijöiltä saadaan palautetta Setlementtiyhdistys Naapuri ry:n nuorten tuetun asumi-sen toiminnasta. Opinnäytetyönä toteutetun arviointilomakkeen avulla on tarkoitus tuoda näkyväksi Setlementtiyhdistys Naapurin nuorten tuetun asumisen (TUAS) pal-velun laatua, toimivuutta ja vaikuttavuutta sosiaalityöntekijöiden näkökulmasta. Lo-make suunniteltiin TUAS- toiminnan kehittämisen tarpeesta ja toteutettiin yhteis-työssä TUAS-tiimin kanssa. Asiakaspalautteen hankkiminen tuetun asumisen toiminnasta kirjallisesti varsinkin tilaaja-asiakkaalta on ollut hyvin vähäistä. Aiemmin palaute on ollut suullista ja to-teutunut asiakaskäyntien yhteydessä tilaaja-asiakkaan eli sosiaalityöntekijän luona. Opinnäytetyössäni esittelin Setlementtiyhdistys Naapuri ry:n arvoja, tavoitteita ja sen Nuorten tuetun asumisen toimintaa. Työssäni selvitin laadun vaatimuksia, lomakkeen laatimisen haasteita ja perusteita sekä lomakkeella kerättävän tiedon tavoitteita. Kä-sittelin myös palvelutoiminnan laatua, vaikuttavuutta ja sen arviointia. Palautteen hankkimisen menetelmäksi valittiin asiakasyhteistyökysely sosiaalityöntekijöille. Heidän antamansa palaute on tärkeää, kun palvelua kehitetään entistä laadukkaam-maksi. Neljä sosiaalityöntekijää testasi lomakkeen. Sosiaalityöntekijät olivat lapsiperheiden- ja aikuissosiaalityönasemien työntekijöitä sekä maahanmuuttaja nuorien sosiaali-työntekijä. Lomaketta kommentoi myös neljä muuta sosiaalialan työntekijää. Lomake muotoutui lopulliseen muotonsa testauksen ja kommenttien tuloksena. Opinnäyte-työtä on tarkoitus hyödyntää TUAS:n toiminnan kehittämiseen sekä palvelun laadun ja toimivuuden arvioimiseen.The aim of this thesis was to develop an evaluation form with which social workers could give feedback on the activities of supported living for youth by the Settlement Association Naapuri (Finnish abbreviation TUAS). The purpose of this evaluation form is to judge the quality, functionality and effectiveness of the services of sup-ported living for youth by the Settlement Association Naapuri, from the perspective of social workers. The form was designed in order to develop the activities of TUAS in cooperation with the TUAS team. Very little written client feedback about the activities of supported living has been received, especially from ordering clients. Earlier feedback has mainly been verbal and has taken place in conjunction with client visits to the ordering client, that is, the social worker. In this thesis, I presented the values and goals of the Settlement Association Naapuri, as well as the activities of its services for supported living for youth. I explored the criteria for quality, the challenges and basis for creating an evaluation form, as well as the goals of the information to be collected. I also dealt with the quality, effective-ness and evaluation of the services. The method for evaluation was a questionnaire about client cooperation given to the social workers. Their feedback is vital in further developing the quality of services. Four social workers tested the evaluation form. They were social workers for families with children and adults, as well as social workers for immigrant youth. In addition, four other social workers also commented on the form. The form developed into its final version as a result of the testing and comments. The aim is to use this thesis to develop the work of TUAS and the evaluation of quality and functionality in ser-vices

Eron jälkeinen vanhemmuus etä-isän näkökulmasta

Nykyään isyys on muutostilassa ja on monenlaisia isiä, kuten etä-isiä, yksinhuoltajaisiä ja ydinperheenisiä. Vanhempien erot ovat lisääntyneet ja isät elävät usein erossa lapsistaan, mutta silti etä-isyyttä on Suomessa tutkittu suhteellisen vähän. Tämän pro gradu- työn tarkoituksena oli selvittää isien kokemuksia etä-isyydestä ja miten suhteet lapsiin muuttuivat eron jälkeen sekä etä-isyyteen liittyviä tunteita. Tutkimuskysymyksenä oli siis ensinnäkin selvittää millaista isyys oli eron jälkeen ja miten se on muuttunut. Toisena tutkimuskysymyksenä oli se, kokivatko isät suhteen lapsiinsa muuttuneen eron jälkeen ja jos kokivat, niin miten. Kolmantena tutkimuskysymyksenä oli selvittää millaisia tunteita isillä oli etä-isyyteen liittyen. Tutkimusaineisto kerättiin haastattelemalla kahdeksaa etä-isää. Haastattelut toteutettiin yksilöhaastatteluina teemahaastattelun avulla helmi-huhtikuussa 2009. Tutkimuksen analysointi tehtiin laadullisesti teemoittelun, tyypittelyn ja osittain diskurssianalyysin avulla. Isät kokivat isyyden jatkuvan eron jälkeenkin. Vaikeinta erossa oli lasten menettäminen. Isyyden koettiin muuttuvan eron jälkeen positiiviseen suuntaan, koska vaikea perhetilanne päättyi ja eron jälkeen isyydestä tuli tietoisempaa ja isyyttä alettiin arvostaa enemmän. Etä-isyyden haasteina koettiin muun muassa arjen ja ajan puute lasten kanssa, välimatka, tiedon puute lasten asioista, katkenneet sukulaissuhteet sekä yksinäisyys. Positiivisena asiana koettiin vapaus arjen rasitteista, oma aika sekä lähentyminen lasten kanssa. Isät tekivät lastensa kanssa samoja asioita kuin ennen eroakin. Tekeminen liittyi arkisiin asioihin ja harrastuksiin. Isät halusivat, että yhteinen lyhyt aika on mukavaa yhdessäoloa, eivätkä he halunneet tapaamisiin kireää tunnelmaa. Suhde lapsiin oli kaikilla isillä pysynyt läheisenä. Puolet isistä koki, että suhde on muuttunut läheisemmäksi, koska perhetilanne on rauhoittunut ja nyt isillä on enemmän läsnäoloa lasten kanssa kuin aiemmin. Suurin osa isistä oli puhunut erosta lastensa kanssa. Isien mukaan ero oli lapsille hyvin rankka kokemus. Ennen eroa isyyteen ei liittynyt niin voimakkaita tunteita kuin eron jälkeen. Eron jälkeen tunteet lasta kohtaan ovat voimistuneet ja negatiiviset tunteet ovat rauhoittuneet. Isien tunnepuheesta muodostui kolmenlaisia diskursseja: negatiivisten ja ristiriitaisten tunteiden diskurssi sekä tunteista puhumattomuuden diskurssi. Negatiivisten tunteiden diskurssiin liittyi muun muassa surua, katkeruutta, kateutta ja pelkoa, koska lapset asuvat äidin luona. Syyllisyyttä isät tunsivat siitä, mitä ero aiheuttaa lapsille. Ristiriitaisten tunteiden diskurssi pohjautui siihen, että isät kokivat eron oikeaksi ratkaisuksi, mutta toisaalta yksinäisyys ja arjen puute lasten kanssa tuntui ikävältä. Tunteista puhumattomuuden diskurssi viittasi siihen, että muutama isä ei juuri osannut pukea tunteitaan sanoiksi ja tunteiden sijaan he puhuivat jostakin muusta

Tietomallintamalla laaditun tie- ja rakennussuunnitelman hyödyt ja haasteet tilaajien sekä urakoitsijoiden näkökulmasta

Suuret julkiset tilaajat (Liikennevirasto, ELY-keskukset ja suuret kaupungit) ovat tilanneet tietomallipohjaista suunnittelua vuodesta 2014 lähtien ja edellyttäneet Inframodel3-standardin käyttöä suunnitelmissa. Tämän tutkimuksen tavoite oli selvittää tietomallintamalla laaditun tie- ja rakennussuunnitelman hyödyt ja haasteet sekä tilaajien että urakoitsijoiden näkökulmasta. Tutkimus aloitettiin tutustumalla teoriaan: InfraBim Finlandin internet-sivujen aineistoon sekä Liikenneviraston tietomallinnusohjeistukseen. Lisäksi käytiin läpi tie- ja rakennussuunnitelmien tarjouspyyntöjä tietomallinnuksen vaatimusten osalta. Päätutkimusmenetelmä oli sähköpostitse lähetetty kysymyspatteristo, tilaajille ja urakoitsijoille omansa. Molemmissa kysymyspatteristoissa oli sekä avoimia kysymyksiä että monivalintakysymyksiä. Saatujen sähköpostivastausten jälkeen muutamille tilaajille ja urakoitsijoille pidettiin puhelinhaastattelut. Haastatteluiden pohjalta saatiin lisätietoa ja perusteluja saatuihin monivalintakysymysten vastauksiin. Haastattelut antoivat myös lisätietoa asioista, joita sähköpostikyselyssä ei oltu kysytty. Tutkimustyön perusteella voitiin todeta, että tietomallintamisen osaamistasossa on suuria eroja eri tahojen välillä. Tilaajapuolen haasteena on se, että heillä ei ole käytettävissä tarvittavia katseluohjelmia, eivätkä he ole saaneet koulutusta yhdistelmämallien katseluun. Urakoitsijoiden osaaminen tutkimuksen perusteella on pääasiassa hyvällä tasolla. Vain pienillä urakoitsijoilla koneohjausmallin avulla tehdyistä urakoista ei ole vielä kokemusta. Tämän tutkimuksen tuloksia voidaan hyödyntää tietomallintamisen tietotaidon laajentamisessa ja eteenpäin viemisessä.Large public clients (The Finnish Transport Agency (FTA), The Centers for Economic Development, Transport and the Environment (the ELY Centres) and big cities) have ordered information model based designs from 2014 and required the use of Inframodel3 -standard in the design. The purpose of this study was to find out the benefits and challenges of designing road plans and road construction plans with information model from the viewpoint of a customer and a contractor. The study started by getting to know the theory of information models by reading webpages of InfraBim Finland and the instructions of information models by the FTA. The study also examined the invitations of tenders of road plans and road construction plans from the viewpoint of information models’ requirements. The main research method was individual questionnaires sent to customers and contractors by e-mail. Both questionnaires had open questions and multiple-choice questions. After getting the answers from both questionnaires, telephone interviews were conducted to a few customers and contractors. Based on the interviews there was more information and explanations to the answers of multiple-choice questions. The interviews also provided additional information on the issues that were not asked in the e-mail questionnaire. Based on the study one could state that there are a lot of differences in information modelling skills between different parties. The challenge for customers is that they don’t have the required viewing programs and they haven’t had the training in inspecting combination models. Based on the study, skills of contractors are on a good level. Only small contractors don’t have the building experience with information models. The results of this study can be used on improving the know-how of information modelling and developing it further

Proteolysis sensitizes LDL particles to phospholipolysis by secretory phospholipase A2 group V and secretory sphingomyelinase

LDL particles that enter the arterial intima become exposed to proteolytic and lipolytic modifications. The extracellular hydrolases potentially involved in LDL modification include proteolytic enzymes, such as chymase, cathepsin S, and plasmin, and phospholipolytic enzymes, such as secretory phospholipases A2 (sPLA2-IIa and sPLA2-V) and secretory acid sphingomyelinase (sSMase). Here, LDL was first proteolyzed and then subjected to lipolysis, after which the effects of combined proteolysis and lipolysis on LDL fusion and on binding to human aortic proteoglycans (PG) were studied. Chymase and cathepsin S led to more extensive proteolysis and release of peptide fragments from LDL than did plasmin. sPLA2-IIa was not able to hydrolyze unmodified LDL, and even preproteolysis of LDL particles failed to enhance lipolysis by this enzyme. However, preproteolysis with chymase and cathepsin S accelerated lipolysis by sPLA2-V and sSMase, which resulted in enhanced fusion and proteoglycan binding of the preproteolyzed LDL particles. Taken together, the results revealed that proteolysis sensitizes the LDL particles to hydrolysis by sPLA2-V and sSMase. By promoting fusion and binding of LDL to human aortic proteoglycans, the combination of proteolysis and phospholipolysis of LDL particles potentially enhances extracellular accumulation of LDL-derived lipids during atherogenesis