Análisis de la expresión de moléculas de adhesión en cultivos celulares primarios derivados de pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas

[ES] El cáncer de pulmón no microcítico (CPNM) representa el 85% de los casos de cáncer de pulmón, enfermedad que supone la segunda causa de muerte a nivel nacional. Esta elevada mortalidad está relacionada entre otros factores con la aparición de resistencias a los tratamientos, a su vez asociada con la existencia de una subpoblación de células llamadas células madre tumorales. De ahí, el interés por establecer marcadores específicos que permitan la caracterización de estas células y de esta forma poder diseñar estrategias terapéuticas dirigidas específicamente contra ellas. Para ello, se han desarrollado métodos de cultivo de estas células madre tumorales basándose en su capacidad para formar esferas en condiciones no adherentes y medio libre de suero. Sin embargo, se ha observado que el fenotipo que las tumoresferas adquieren en los cultivos 3D es variable y se piensa que puede estar correlacionado con la expresión de genes implicados en la adhesión celular. Este trabajo se realizó en 7 muestras tumorales de pacientes resecados con CPNM y en 12 líneas celulares crecidas en monocapa y en placas de baja adherencia con medio sin suero (tumoresferas). La expresión de genes relacionados con la adhesión celular (CLDN1, CLDN3, CLDN4, CLDN6, CLDN7, CLDN8, CLDN14, Vcam1, OCLN, JAM1, GJA1, GJB6, EPCAM, CDH1, VIM, ITGA2, ITGA6, ITGB1 y CTNNB1) se analizó mediante PCR cuantitativa a tiempo real (qPCR), normalizándose frente a la expresión de tres genes controles seleccionados: ACTB, CDKN1B y GUSB, utilizados para el cálculo de la expresión relativa y un ADNc de referencia comercial. Las tumoresferas de pulmón presentaron una expresión incrementada de CLDN4, CDH1 y ITGA6 (p= 0,05, p= 0,049 y p= 0,002, respectivamente) comparadas con sus correspondientes células crecidas en adherencia. Asimismo, el estudio de las posibles correlaciones entre los genes mostró un patrón de coexpresión entre la mayoría de ellos ya que están implicados en el mismo proceso de adhesión celular, siendo estas correlaciones estadísticamente significativas entre CLDN3-CLDN4 (p=0,001), CDH1-CTNNB1 (p=0,008) o VIM-EPCAM (p=0,012). Por otra parte, el análisis de la expresión génica relativa demostró también que la sobreexpresión de E-cadherina y Conexina 43 se relaciona con la formación de tumoresferas compactas, mientras que la expresión aumentada de la integrina b6 se asocia con la obtención de agregados laxos de CSCs. Con todo ello, se propone la modulación de la expresión de los genes involucrados en la adhesión celular que condicionan la morfología de los esferoides de CSCs como una opción terapéutica para tratar a los pacientes con CPNM.[EN] Non-Small Cell Lung Cancer (NSCLC) represents approximately 85% of lung cancer cases, a disease which accounts for the second cause of death in Spain. This high mortality is related with the existence of resistances to treatments, which is associated with the presence of a subpopulation of cells called Cancer Stem Cells (CSC). For this reason, interest is set in establishing specific markers which allow the characterization of these cells in order to design therapeutic strategies targeted specifically to these cells. As a result, different culture methods have been proposed based on the ability of CSCs to form spheres in non-adherent conditions and in serum-free medium. However, the phenotype of the tumorspheres in 3D cell cultures is variable and it is believed that it is linked to the expression of genes implicated in cell adhesion. This study was carried with 7 samples from resectable NSCLC patients and 12 cell lines grown both in monolayer and as spheroids. The expression of genes related with cell adhesion (CLDN1, CLDN3, CLDN4, CLDN6, CLDN7, CLDN8, CLDN14, Vcam1, OCLN, JAM1, GJA1, GJB6, EPCAM, CDH1, VIM, ITGA2, ITGA6, ITGB1 y CTNNB1) was analysed by quantitative real-time PCR. Housekeeping genes ACTB, CDKN1B and GUSB were used as endogenous controls for relative expression calculation. Lung tumorspheres had increased expression of CLDN4, CDH1 y ITGA6 (p= 0,05, p= 0,049 y p= 0,002, respectively) when compared to their paired-adherent cells. Moreover, when studying possible correlations between genes, a coexpression pattern was observed between most of them since they are involved in the same process of cell adhesion, being significant the correlations between CLDN3-CLDN4 (p=0.001), CDH1-CTNNB1 (p=0.008) or VIM-EPCAM (p=0.012). What’s more, the relative gene expression analysis revealed that the overexpression of E-cadherin and Connexin 43 was related with the formation of tight tumorspheres while the increased expression of integrin b6 was associated with the presence of loose aggregates of CSCs. Altogether, the modulation of the expression of these genes involved in cell adhesion, which determine the spheroids morphology, is proposed as a therapeutic option to treat NSCLC patients.Piqueras Nebot, M. (2018). Análisis de la expresión de moléculas de adhesión en cultivos celulares primarios derivados de pacientes con cáncer de pulmón de células no pequeñas. http://hdl.handle.net/10251/105976TFG

Functional range of motion of the hand joints in activities of the International Classification of Functioning, Disability and Health

Study Design Cross-sectional research design. Introduction Active range of motion (AROM) is used as indicator of hand function. However, functional range of motion (FROM) data are limited, and fail to represent activities of daily living (ADL). Purpose of the Study To estimate dominant hand FROM in flexion, abduction and palmar arching in people under 50 years of age performing ADL. Methods AROMs and hand postures in 24 representative ADL of the International Classification of Functioning, Disability and Health (ICF) were recorded in 12 men and 12 women. FROM data were reported by activity and ICF area, and compared with AROMs. The relationship between ROM measures to gender and hand size was analyzed by correlation. Results FROM was 5° to 28° less than available AROM depending on the joint and movement performed. Discussion Joints do not necessarily move through full AROM while performing ADL which has benefits in retaining function despite loss of motion. This may also suggest that ADL alone are insufficient to retain or restore full AROM. Conclusions Therapists should consider FROM requirements and normal AROM when defining hand therapy goals, interventions and evaluating the success of treatment. Level of Evidence N/A.This research was funded by the Universitat Jaume I through projects P1·1B2013-33 and P1 1B2014-10 and by the Spanish Ministry of Research and Innovation and the European Union (European Regional Development Funds) through project DPI2014-52095-P

DEBATMITAL 2.0: 2ª Edición de los debates sobre mitos en alimentación

[ES] En la segunda edición del DEBATMITAL, se ha vuelto a utilizar el debate como herramienta docente para abordar el tema de los Mitos en la Alimentación, en la asignatura optativa del Grado en Medicina de la Universitat de Valencia, “Alimentación y Dietética”. Como novedad respecto a la edición pasada, este curso se ha debatido sobre temas de actualidad acerca de la alimentación, sobre los que existe controversia real en la comunidad científica. Los alumnos han valorado la actividad aún más positivamente este curso: la vuelven a preferir respecto a la lección magistal y además creen que les ayuda a adquirir varias competencias propias de su grado. En base a esta experiencia, se consolida el uso del debate como herramienta docente en la asignatura.[EN] In the second edition of DEBATMITAL, the debate has been used again as a teaching tool to address the topic of Food Myths, in the optional subject of the Degree in Medicine of the Universitat de Valéncia, "Food and Dietetics". As a novelty compared to the last edition, this year current issues among food, on which there is real controversy in the scientific community, have been debated. The students have valued the activity even more positively this course: they prefer it again with respect to the magistal lesson and also believe that it helps them acquire various skills of their grade. Based on this experience, the use of debate as a teaching tool in the subject is consolidated.Olaso González, G.; Romá Mateo, C.; Piqueras, M. (2021). DEBATMITAL 2.0: 2ª Edición de los debates sobre mitos en alimentación. En IN-RED 2020: VI Congreso de Innovación Educativa y Docencia en Red. Editorial Universitat Politècnica de València. 412-420. https://doi.org/10.4995/INRED2020.2020.12001OCS41242

Proteína antagonista del receptor de la interleuquina-1 (IRAP) para el tratamiento de enfermedades articulares en los caballos de carreras

En la actualidad existen numerosas técnicas para el tratamiento de las enfermedades articulares en los caballos de carreras. Sin embargo todas ellas presentan ciertas limitaciones. La interleuquina-1 es una citoquina que juega un papel importante en la degeneración de las estructuras músculo-esqueléticas debido a su potente acción inflamatoria. Por ello, el uso de la proteína antagonista del receptor de la interleuquina-1 (IRAP) consigue disminuir drásticamente el dolor y la inflamación de la articulación afectada. El objetivo de este trabajo es describir y dar a conocer esta técnica que creemos que es de gran utilidad. Además tratamos de mostrar su eficacia en un caso clínico. Esta técnica se aplicó en un Pura Sangre Inglés de cinco años que presentaba signos radiológicos compatibles con osteoartritis. Se le aplicaron cuatro inyecciones intraarticulares separadas por un intervalo de 8-10 días. Actualmente, el caballo ya presenta una notable mejoría y ha regresado al entrenamiento. El tratamiento con IRAP ha demostrado gran eficacia frente a diversas enfermedades articulares y supone una buena alternativa frente al controvertido uso de los corticoesteroides intraarticulares.Currently, there are numerous techniques described for the treatment of joint diseases in racehorses. Nevertheless, all of these show certain limitations. Interleukin-1 is a citoquin that plays an important role in the deterioration of the skeletal muscle structures due to its powerful inflammatory action. Due to this, the use of the protein antagonist of the interleukin-1 receptor (IRAP) manages to drastically decrease the pain and the inflammation of the affected joint. The objective of this issue is to describe and to inform of this technique that we believe is of great use. In addition to this, we have tried to show its efficiency in a clinical case. This technique was applied on a five-year-old thoroughbred that had radiological compatible signs with osteoarthritis. Four intra-articular injections were applied with an 8 to 10 day interval. At present, the horse shows a great improvement and has returned to its training. The treatment with IRAP has demonstrated great efficiency towards diverse joint diseases and is a good alternative to the use of the controversial treatment of intra-articular corticosteroids

Immigrant IBD Patients in Spain Are Younger, Have More Extraintestinal Manifestations and Use More Biologics Than Native Patients

Crohn's disease; Immigrant; Inflammatory bowel diseaseEnfermedad de Crohn; Inmigrante; Enfermedad inflamatoria del intestinoMalaltia de Crohn; Immigrant; Malaltia inflamatòria intestinalBackground: Previous studies comparing immigrant ethnic groups and native patients with IBD have yielded clinical and phenotypic differences. To date, no study has focused on the immigrant IBD population in Spain. Methods: Prospective, observational, multicenter study comparing cohorts of IBD patients from ENEIDA-registry who were born outside Spain with a cohort of native patients. Results: We included 13,524 patients (1,864 immigrant and 11,660 native). The immigrants were younger (45 ± 12 vs. 54 ± 16 years, p < 0.001), had been diagnosed younger (31 ± 12 vs. 36 ± 15 years, p < 0.001), and had a shorter disease duration (14 ± 7 vs. 18 ± 8 years, p < 0.001) than native patients. Family history of IBD (9 vs. 14%, p < 0.001) and smoking (30 vs. 40%, p < 0.001) were more frequent among native patients. The most prevalent ethnic groups among immigrants were Caucasian (41.5%), followed by Latin American (30.8%), Arab (18.3%), and Asian (6.7%). Extraintestinal manifestations, mainly musculoskeletal affections, were more frequent in immigrants (19 vs. 11%, p < 0.001). Use of biologics, mainly anti-TNF, was greater in immigrants (36 vs. 29%, p < 0.001). The risk of having extraintestinal manifestations [OR: 2.23 (1.92-2.58, p < 0.001)] and using biologics [OR: 1.13 (1.0-1.26, p = 0.042)] was independently associated with immigrant status in the multivariate analyses. Conclusions: Compared with native-born patients, first-generation-immigrant IBD patients in Spain were younger at disease onset and showed an increased risk of having extraintestinal manifestations and using biologics. Our study suggests a featured phenotype of immigrant IBD patients in Spain, and constitutes a new landmark in the epidemiological characterization of immigrant IBD populations in Southern Europe

Recommendations of the Spanish Group on Crohn's Disease and Ulcerative Colitis on the importance, screening and vaccination in inflammatory bowel disease patients

Malaltia de Crohn; Colitis ulcerosa; VacunacióEnfermedad de Crohn; Colitis ulcerosa; VacunaciónCrohn's disease; Ulcerative colitis; VaccinationPatients with inflammatory bowel disease (IBD) may require different immunosuppressive treatments throughout their illness. It is essential to assess the immunization status of patients at diagnosis or, if this is not possible, at least before the beginning of immunosuppressive therapy and, subsequently, administering the appropriate vaccines. Therefore, the aim of this work is to establish clear and concise recommendations on vaccination in patients with IBD in the different settings of our clinical practice including vaccination in children, during pregnancy, breastfeeding or on trips. This consensus document emphasises the differences between inactivated and attenuated vaccines and the different degrees of immunosuppression and correlates them with the administration of both mandatory and optional vaccines recommended to our patients with IBD. Finally, as a summary, 17 recommendations are established based on the available scientific evidence and expert opinion. A multidisciplinary team with extensive experience in IBD and vaccination, made up of specialists in gastroenterology, paediatrics, nursing and pharmacy, has participated in the preparation of these recommendations of the Spanish Working Group on Crohn's Disease and Ulcerative Colitis.Los pacientes con enfermedad inflamatoria intestinal (EII) pueden requerir diferentes tratamientos inmunosupresores a lo largo del curso de su enfermedad. Por ello, es fundamental evaluar el estado de inmunización en el momento del diagnóstico o, si no es posible, siempre antes de iniciar un tratamiento inmunosupresor, y administrar las vacunas apropiadas. El objetivo del presente documento es establecer unas recomendaciones claras y concisas sobre la vacunación en pacientes con EII en diferentes escenarios de práctica clínica, incluyendo situaciones especiales como la vacunación en la edad pediátrica, el embarazo, la lactancia o en viajes al extranjero. Se presentan las diferencias entre vacunas inactivadas y atenuadas, los diferentes grados de inmunosupresión y su relación con las pautas de administración de las diferentes vacunas (tanto obligatorias como opcionales) recomendadas a los pacientes con EII. En el documento, se establecen 17 recomendaciones basadas en la evidencia científica disponible y opinión de expertos. En la elaboración de estas recomendaciones del Grupo Español de Trabajo en Enfermedad de Crohn y Colitis Ulcerosa ha participado un equipo multidisciplinar con amplia experiencia en EII y vacunación formado por especialistas de gastroenterología, pediatría, enfermería y farmacia

Performance of Screening Strategies for Latent Tuberculosis Infection in Patients with Inflammatory Bowel Disease: Results from the ENEIDA Registry of GETECCU

Inflammatory bowel disease; Interferon gamma release assays; Latent tuberculosis infectionEnfermedad inflamatoria intestinal; Ensayos de liberación de interferón gamma; Infección tuberculosa latenteMalaltia inflamatòria intestinal; Assajos d'alliberament gamma d'interferó; Infecció tuberculosa latentAims: Patients receiving antitumor necrosis factor (anti-TNF) therapy are at risk of developing tuberculosis (TB), usually due to the reactivation of a latent TB infection (LTBI). LTBI screening and treatment decreases the risk of TB. This study evaluated the diagnostic performance of different LTBI screening strategies in patients with inflammatory bowel disease (IBD). Methods: Patients in the Spanish ENEIDA registry with IBD screened for LTBI between January 2003 and January 2018 were included. The diagnostic yield of different strategies (dual screening with tuberculin skin test [TST] and interferon-ץ-release assay [IGRA], two-step TST, and early screening performed at least 12 months before starting biological treatment) was analyzed. Results: Out of 7594 screened patients, 1445 (19%; 95% CI 18−20%) had LTBI. Immunomodulator (IMM) treatment at screening decreased the probability of detecting LTBI (20% vs. 17%, p = 0.001). Regarding screening strategies, LTBI was more frequently diagnosed by dual screening than by a single screening strategy (IGRA, OR 0.60; 95% CI 0.50−0.73, p < 0.001; TST, OR 0.76; 95% CI 0.66−0.88, p < 0.001). Two-step TST increased the diagnostic yield of a single TST by 24%. More cases of LTBI were diagnosed by early screening than by routine screening before starting anti-TNF agents (21% [95% CI 20−22%] vs. 14% [95% CI 13−16%], p < 0.001). The highest diagnostic performance for LTBI (29%) was obtained by combining early and TST/IGRA dual screening strategies in patients without IMM. Conclusions: Both early screening and TST/IGRA dual screening strategies significantly increased diagnostic performance for LTBI in patients with IBD, with optimal performance achieved when they are used together in the absence of IMM

Capacidad predictiva de la Batería ENFEN en el diagnóstico del Trastorno por Déficit de Atención e Hiperactividad

Attention deficit hyperactivity disorder (ADHD) is considered to be one of the most common disorders during children and adolescents’ neurodevelopment. Given how much the individuals’ executive functions are affected, the objective of the present study was to verify the validity of the Neuropsychological Assessment of Executive Functions battery for Children (ENFEN for its acronym in Spanish) as a predictor in the diagnosis of ADHD. The sample consisted of 175 participants from southeast Spain of both sexes aged between 6 and 12 (clinical M=8.39, SD=1.87, and control M=8.78, SD=1.91). The clinical group was composed of 89 (79.50%) males and 23 (20.50%) females, and the control group consisted of 37 (58.70%) males and 26 (41.30%) females. ENFEN is an individual applications battery that allows the executive functions to be globally evaluated using a wide range of elements. We followed a non-experimental research design for this comparative descriptive study. The results indicate that the phonological fluency, colour naming path, and interference scales are closely associated with the diagnosis of ADHD as they provide data on elements including inhibition, mental flexibility, sustained and selective attention, verbal fluency, and working memory. In general, this study supports the usefulness and validity of the ENFEN battery as a tool to clinically diagnose ADHD.El trastorno por déficit de atención en hiperactividad (TDAH) es uno de los trastornos más frecuentes en el neurodesarrollo de niños y adolescentes. Las personas que lo padecen se caracterizan por presentar dificultades en los procesos de atención sostenida, ser muy activos y tener un deficiente control de sus impulsos. Pese a su elevada prevalencia y la existencia de diversas pruebas utilizadas para su diagnóstico, se conocen pocos datos sobre la utilidad y validez diagnóstica de estas herramientas. Dada la gran afectación que estos sujetos presentan en las funciones ejecutivas, el objetivo de este estudio es comprobar la utilidad y validez de la batería de Evaluación Neuropsicológica de las Funciones Ejecutivas en Niños (ENFEN), como predictora herramienta de apoyo al diagnóstico de TDAH. La muestra de estudio estuvo compuesta por 175 participantes de ambos sexos, con edades comprendidas entre los 6 y 12 años (grupo clínico M=8.39, SD=1.87 y grupo control M=8.78, SD=1.91). El grupo clínico estaba compuesto por 89 (79.50%) hombres y 23 (20,50%) mujeres, y el grupo de control por 37 (58,70%) hombres y 26 (41,30%) mujeres. ENFEN es una batería de aplicación individual, compuesta por varias subpruebas que requieren el empleo de funciones ejecutivas para resolver los elementos que las componen. Se siguió un diseño no-experimental para llevar a cabo un estudio descriptivo comparativo. Los resultados señalaron que las escalas Fluidez Fonológica, Sendero Color e Interferencia que requieren en mayor medida inhibición, flexibilidad mental, atención sostenida y selectiva, fluidez verbal y memoria de trabajo, entre otras aptitudes cognitivas, son las que mejor se asocian al diagnóstico de TDAH. En general, este estudio apoya la utilidad y validez de la prueba ENFEN como herramienta para el diagnóstico clínico del TDAH

Implementation of audiovisual narrative resources in a digital educational escape room. “Alimental, querida Watson: The strange case of the mysterious green lights of the Tower of London”

[EN] With the aim of improving the digital escape room "Alimental, querido Watson" designed during the 2020/2021 academic year for the Dietetics and Nutrition subject (3rd course of the Degree in Medicine), we have generated audiovisual material in which the professors of the subject, characterized as Dr. Watson and Mr. Holmes, introduce the students to the resolution of each puzzle and offer feedback to complete the mission. The results of this new version of the escape room show that the audiovisual narrative materials created: 1) encourage greater student participation in the activity (90%), 2) contribute to improve academic performance, since the participants obtained an average grade in the subject 0.77 points higher than the non-participants, and 3) the students evaluate the audiovisual narrative material very positively, since 82.9% of them consider the videos useful for the activity and 36% think that they are the best of the escape room. In addition, all the students who carried out the previous version of the escape room in the 2020/2021 academic year and have also tested the current version consider that the videos improve the experience.[ES] Con el objetivo de mejorar la escape room digital “Alimental, querido Watson” diseñada durante el curso 2020/2021 para la asignatura Alimentación y Dietética (optativa de tercer curso del grado en Medicina de la UV), se generan una serie de recursos narrativos audiovisuales en los que el profesorado, caracterizado como la Dra. Watson y el Sr. Holmes, introduce a los estudiantes en la resolución de cada prueba y le ofrecen retroalimentación para poder completar la misión.Los resultados de esta nueva versión de la escape room muestran que las nuevas herramientas narrativas audiovisuales creadas: 1) fomentan una mayor participación de los estudiantes en la actividad (90%), 2) contribuyen a mejorar el rendimiento académico, ya que los participantes obtienen una nota media en la asignatura 0.77 puntos superior a los no participantes, y 3) tienen una valoración muy positiva por parte de los estudiantes, puesto que el 82.9% de los estudiantes consideran los videos útiles para la actividad y el 36% opina que son lo mejor de la escape room. Además, todos los estudiantes que realizaron la anterior versión de la escape room en el curso académico 2020/2021 y han participado también en la versión actual consideran que los videos mejoran la experiencia.Olaso-González, G.; Piqueras-Franco, M.; Romá-Mateo, C. (2022). Implementación de recursos narrativos audiovisuales en una escape room educacional digital. “Alimental, querida Watson: El extraño caso de las misteriosas luces verdes de la Torre de Londres”. Editorial Universitat Politècnica de València. 922-935. https://doi.org/10.4995/INRED2022.2022.1585192293

Expresión inmunohistoquímica de la proteína mycN y el estado del gen MYCN en tumores neuroblásticos

Antecedentes: Los tumores neuroblásticos son de los tumores pediátricos más frecuentes. A pesar de su gran variedad genética, clínica e histopatológica, la amplificación del gen MYCN es siempre un indicador de mal pronóstico. Este oncogen codifica una proteína nuclear que se une al ADN y activa la transcripción de sus genes diana. Un aumento en el número de copias del gen no se corresponde siempre con sobreexpresión de su proteína. El valor pronóstico de la detección de la proteína es controvertido. Métodos: Se han analizado 220 muestras de NB. Mediante la técnica de FISH se ha establecido el estado del gen, mientras que la inmunohistoquímica ha permitido el estudio de la expresión de la proteína en secciones de parafina. Resultados: Los 15 casos con ganancia y 140 de los 141 casos sin amplificación del gen MYCN no expresan la proteína. En el grupo de los 55 casos amplificados, el 76,4% han sido positivos y 23,6% negativos. Conclusiones: Los niveles de expresión génica no siempre corresponden con el número de copias del gen, ya que intervienen muchos mecanismos moleculares. La mayoría de los casos positivos para este anticuerpo presentan amplificación, así que el estudio inmunohistoquímico de su expresión podría utilizarse para aproximar el estado del gen MYCN en aquellos laboratorios de diagnóstico donde las técnicas moleculares no estén disponibles.Introduction: Neuroblastic tumors are one of the most frequent pediatric tumor. Despite their genetic, clinic and histopathologic variety, MYCN gene amplification is always considered as an adverse prognosis factor. MYCN gene encodes a nuclear protein which binds DNA and activates target genes transcription. An increase of gene copies number not always involves a protein overexpression. The prognostic value of the determination of mycN protein is controversial. Materials and methods: 220 NB samples were analyzed. We established the gene status by FISH and we studied the protein expression in paraffin sections by immunohistochemistry. Results: 15 gain samples and 140 from 141 non-amplified samples don’t express MYCN protein. From 55 amplified cases, 76.4% were positive and 23.6% were negative. Conclusions: Gene expression levels do not always match with gene copies number due to different molecular mechanisms. Most of positive cases to mycN protein are amplified samples. This antibody could be used to approach gene status in those laboratories without available molecular techniques.Piqueras Franco, Marta, [email protected] ; Noguera Salva, Rosa, [email protected] ; Cruz Mojarrieta, Julia, [email protected] ; Subramaniam, Manish Mani, [email protected] ; Llombart Bosch, Antonio, [email protected]; Navarro Fos, Samuel, [email protected]