Looking for mechanisms regulating lung growth in CDH: rat and human studies

Tese de Doutoramento em Ciências da SaúdeLung development is a complex process that involves a coordinated orchestration of several signalling pathways and mechanisms in order to growth normally. Pulmonary hypoplasia emerges as a result of foetal abnormal lung development and consequently it leads to high rates of morbidity and mortality. The understanding of normal and abnormal foetal lung growth has became clinical relevant because it can offer new perspectives in the treatment of lung diseases. Regardless the recent advances in the knowledge of lung development, there are still a lot of mechanisms that need to be elucidated and investigated. The main aim of this PhD dissertation was to investigate new physiological regulators of foetal lung growth in order to find a prenatal therapy to revert foetal lung hypoplasia in Congenital Diaphragmatic Hernia (CDH) context. Moreover, two already well-known and studied signalling pathways (retinoic acid and neuroendocrine factors) were further investigated and an important link between them was discovered/established. Using molecular/histological techniques and gain-loss of function studies with nitrofen rat model and human samples we tried to achieve our goals. In this PhD thesis, it was demonstrated that ephrins B1, -B2 and eph B4 receptor were expressed during all foetal lung developmental stages. Moreover ephrin B1 and eph B4 receptor mainly presented mesenchymal expressions whereas ephrin B2 presented an epithelial expression. Ephrin B1 and –B2 administration contributed to increase foetal lung branching, but the observed increase has not significant biological meaning. Another interesting finding was the importance of microRNAs in human CDH. MicroRNA 10a and microRNA 200b are up-regulated in CDH human lungs when compared to normal lungs and they are also changed in the tracheal fluid of CDH babies that respond or did not respond to FETO. In FETO responders, after removing the plug, tracheal fluid presented higher expression of miR-10a and miR-200 family when compared to non-responders. Moreover, in responders the expression of those microRNAs increased significantly after removing the plug when compared to the expression observed at the moment of plug insertion. In line with the second aim mentioned above, we decided to look into two already known and apparently unrelated signalling pathways and discover a link between them because both of them are altered in CDH (retinoic acid was down-regulated and neuroendocrine factors were up-regulated). We found that neuroendocrine factors act as regulators of lung growth, sensitizing the lungs to the action of retinoic acid through RAR α and RAR γ up-regulation. To conclude, in this thesis, we showed that ephrins seem to be strong candidates to act as morphogens or being involved in vascular regulation instead of being a promisor mechanism to regulate lung growth. Additionally, we discovered that microRNAs are an important tool as a prognostic biomarker for CDH new-borns outcome. Moreover, we established a novel physiological link showing that neuroendocrine factors and retinoic acid signalling pathways interact with each other during foetal lung growth regulation. With this work, new insights into normal and abnormal foetal lung development were brought, discovering novel mechanisms to further explore as potential therapeutic targets into CDH field.O desenvolvimento pulmonar é um processo complexo que envolve a combinação e funcionamento coordenados de várias vias e mecanismos de sinalização, a fim do crescimento pulmonar normal. A hipoplasia pulmonar surge como resultado do desenvolvimento anormal do pulmão fetal estando associada a elevadas taxas de morbilidade e mortalidade. A compreensão do crescimento do pulmão fetal normal e anormal, tornou-se clinicamente relevante pelo facto de poder oferecer novas perspetivas no tratamento de doenças pulmonares. Independentemente dos recentes avanços no conhecimento do desenvolvimento pulmonar, ainda há muito que é preciso fazer, ser elucidado e investigado. O objetivo principal desta dissertação de doutoramento foi investigar novos reguladores fisiológicos de crescimento do pulmão fetal, a fim de encontrar uma terapia pré-natal para reverter a hipoplasia pulmonar fetal no contexto da Hérnia Diafragmática Congénita (HDC). Por outro lado, foi descoberto e estabelecido um elo de ligação entre duas vias de sinalização (via do ácido retinóico e fatores neuroendócrinos) já bem conhecidas e estudadas como sendo importantes ao longo do desenvolvimento pulmonar fetal. Foram utilizadas técnicas moleculares/histológicas e estudos de ganho-perda de função com o modelo do nitrofeno em rato e com amostras humanas. Nesta tese de doutoramento, foi demonstrado que as efrinas B1,-B2 e o recetor eph B4 são expressos durante todas as fases de desenvolvimento pulmonar fetal. Além disso, a efrina B1 e o recetor eph B4 expressaram-se essencialmente no mesenquima enquanto que a efrina B2 apresentou ter uma expressão epitelial. A administração de efrina B1 e –B2 em culturas de explantes pulmonares, contribuiu para aumentar a ramificação pulmonar fetal, embora o aumento observado não tenha significado biológico relevante. Outro achado interessante ao longo deste trabalho de Doutoramento, foi a importância dos microRNAs na fisiopatologia da HDC em humanos. O microRNA 10a e o microRNA 200b estão aumentados em pulmões humanos com HDC quando comparados com pulmões normais e a sua expressão está também alterada no fluido traqueal em crianças que sobrevivem ou morrem à oclusão fetal da traqueia (FETO). Nos pacientes que sobrevivem depois do FETO, após se remover o balão da traqueia, o fluido traqueal apresentou uma maior expressão de miR-10a e da família do miR-200 quando comparados com os não sobreviventes. Por outro lado, nos sobreviventes, a expressão desses microRNAs aumentou significativamente após a remoção do balão quando comparada com a expressão observada no momento da inserção do balão na traqueia. Em linha com o segundo objetivo acima mencionado, decidimos revesitar duas vias de sinalização já conhecidas e aparentemente não relacionadas, e descobrir uma ligação entre elas, pelo facto de ambas estarem alteradas na HDC (défice de ácido retinóico e aumento dos fatores neuroendócrinos nomeadamente da bombesina e da grelina). Descobrimos que os fatores neuroendócrinos atuam como reguladores do crescimento pulmonar, sensibilizando os pulmões para a ação do ácido retinóico através do aumento da expressão dos seus recetores (RAR α e RAR γ). Para concluir, nesta tese, mostramos que as efrinas parecem ser fortes candidatos para atuar como morfogéneos ou como fatores importantes na regulação vascular ao invés de serem um mecanismo importante de regulação do crescimento pulmonar. Por outro lado, descobrimos que os microRNAs são uma ferramenta importante que poderá vir a ser utilizada como um biomarcador de prognóstico em crianças com HDC. Adicionalmente, estabelecemos uma nova ligação fisiológica mostrando que os fatores neuroendócrinos e a via de sinalização do ácido retinóico interagem entre elas durante a regulação do crescimento fetal pulmonar. Com este trabalho, hipotetizámos novas abordagens sobre o desenvolvimento/regulação do pulmão fetal normal e anormal, descobrindo-se novos mecanismos para continuar a explorar como potenciais alvos terapêuticos para o tratamento da HDC

Applying PLCS to EDMS/MTF at the European Organization for Nuclear Research

Estágio realizado no CERN e orientado Eva Sanchez-Corral MenaTese de mestrado integrado. Engenharia Informática e Computação. Faculdade de Engenharia. Universidade do Porto. 200

Clima relacional em famílias adotivas : a influência do padrão de vinculação dos pais e do stress parental

Tese de mestrado, Psicologia (Secção de Psicologia Clínica e da Saúde, Núcleo de Psicologia Clínica Sistémica), Universidade de Lisboa, Faculdade de Psicologia, 2017Apesar das inúmeras semelhanças entre parentalidade adotiva e biológica, os pais adotivos enfrentam processos e especificidades familiares únicos que advêm, em grande parte, do facto de os filhos virem de “fora” do sistema familiar, trazendo histórias e experiências (adversas) prévias. No presente estudo pretendeu-se: 1) comparar pais adotivos e biológicos relativamente a padrões de vinculação dos pais, stress parental e clima relacional familiar; 2) analisar a relação entre padrões de vinculação dos pais, stress parental e clima relacional familiar, considerando pais adotivos e pais biológicos; 3) analisar o contributo do stress parental (distress parental; interação disfuncional; criança difícil) e de padrões de vinculação dos pais (seguros vs. inseguros) para o clima relacionar familiar (coesão e conflito) em pais biológicos e pais adotivos. A amostra incluiu 135 pais adotivos e 187 pais biológicos. Os participantes responderam aos seguintes instrumentos: Índice de Stress Parental (versão reduzida), a versão portuguesa do Questionário de Estilos Relacionais, e a Family Environment Scale. Verificou-se que os pais adotivos apresentaram níveis menos elevados de conflito familiar, e que o stress parental contribui para o clima relacional familiar.Despite the various resemblances between adoptive and biologic parenthood, adoptive parents face unique family processes and specificities that come, largely, from the fact that their kids come from “outside” their family system. The present study aimed to: 1) compare biological and adoptive parents in their attachment styles, parental stress and family environment; 2) analyze the relation between parents’ attachment styles, parental stress and family environment, considering biological and adoptive parents; 3) analyze the contribute of parental stress (parental distress, dysfunctional interaction, difficult child), and of parents’ attachment styles (secure vs. insecure) in the family environment (cohesion and conflict) in biological and adoptive parents. Our sample consisted of 135 adoptive parents and 187 biological parents. Participants responded to the following instruments: Parental Stress Index in its short-form, the Relationship Questionnaire in its Portuguese version and the Family Environment Scale. We verified that adoptive parents showed less levels of family conflict and that parental stress contributes to family environment

Mobilização de elementos após aplicação de cinza de biomassa no solo

Mestrado em Engenharia do AmbienteEm Portugal, as indústrias da pasta de papel e de produção de energia produzem grandes quantidades de cinza através da combustão de biomassa florestal, que necessitam de gestão adequada. O uso da cinza de biomassa como fertilizante no solo permitiria a valorização do resíduo, eliminando os custos crescentes associados à sua deposição em aterro. O trabalho realizado e apresentado nesta dissertação teve como objetivo o estudo da mobilização de elementos no solo, após aplicação de cinza de biomassa. A água que percola o solo em resultado da chuva vai mobilizar alguns constituintes da cinza aplicada, dando origem à troca de elementos no solo, podendo causar a exportação de elementos para as massas de água. Para avaliar o efeito de aplicação de cinza no solo foram realizados ensaios no campo e no laboratório, recolhendo amostras de água de percolação e amostras de solo para extração de elementos solúveis, após aplicação de cinza. A partir dos resultados obtidos concluiu-se que a aplicação de cinza fez aumentar o GSB, através do aumento de Ca, K e Mn no complexo de troca do solo e que ocorreu um aumento na concentração dos elementos Ca, Mg, Mn, N e Cl nas águas de percolação recolhidas.In Portugal, the industries from paper pulp and energy production produce large amounts of ash from the combustion of forest biomass, which require proper management. The use of biomass ash as fertilizer in the soil may allow recovery of the residue, eliminating the rising costs associated with landfilling. The work performed and presented in this thesis aimed to study the mobilization of elements in soil after application of biomass ash. The water that percolates the soil as a result of rain will mobilize some constituents of ash applied, giving rise to exchange of elements in the soil, causing the export of elements to the water bodies. To evaluate the effect of application of ash, soil tests were performed in field and laboratory by taking samples of percolating water and soil samples for extraction of solubles, after application of ash. From the results obtained it was concluded that the application of ash increased the GSB through the increase of Ca, K, and Mn in the exchange complex of the soil and that there was an increase of Ca, Mg, Mn, N and Cl elements concentration in the collected percolation water

A influência da inovação em produtos e processos no desempenho de empresas brasileiras

ABSTRACTThe main objective of this research was to evaluate the relationship between performance of product innovations (processes) and growth (profitability) of Brazilian companies from three sectors: manufacturing of machinery and equipment; manufacturing of chemical products and manufacturing of computing equipment, electronic and optical products. We used research data of PINTEC (2003, 2005 and 2008) and PIA (2003-2010) collected at the Brazilian Institute of Geography and Statistics - IBGE. We verified, based on results of multiple regression and statistical analysis, the absence of a positive relationship between the performance of process innovation (product) and profitability (growth). To some extent it was expected that innovations do not provide a high level of explanation for the variance in financial performance of companies considering that there are other factors that help explain this variance (market attractiveness, dominance of input sources, to name just two examples). It was noticed that the literature examined is also inconclusive on the relationship between innovation and financial performance. These contradictory results are mainly due to the diversity of variables used to measure both financial performance and innovation performance. Besides the rejection of the research hypotheses, the study revealed other relevant findings that can support the manager in the decision making process related to the innovation process

Ochratoxigenic aspergillus in wine grapes and ochratoxin a in wines from Northeast Brazil.

Resumo

O MOVIMENTO DOS TRABALHADORES RURAIS SEM TERRA (MST): emancipação dos sujeitos e transformação social

O presente texto trata da construção histórica do Movimento dos Trabalhadores Rurais Sem Terra, sua organização e perspectivas de luta para além da terra, em uma trajetória engajada na emancipação de fração da classe trabalhadora: os camponeses organizados. Aborda traços do projeto do MST para o campo e suas ações de enfrentamento tanto em uma ação internacionalizada, como na tarefa da formação política, sendo várias suas frentes de atuação, como faces de um mesmo projeto combativo e revolucionário. São ações que constituem legado da Revolução Russa, mantendo-se, porém, atuais na construção de ações combativas de transformações sociais e políticas.Palavras-chaves: MST, luta de classe, emancipação

Detection of ochratoxin A in tropical wine and grape juice from Brazil.

Ochratoxin A (OTA) is the main mycotoxin found in grapes, wines and grape juices and is considered one of the most harmful contaminants to human health. In this study, samples of tropical wines and grape juices from different grape varieties grown in Brazil were analysed for their OTA content by high-performance liquid chromatography. The detection and quantification limits for OTA were 0.01 and 0.03 &#956;g L&#8722;1 respectively. OTA was detected in 13 (38.24%) of the samples analysed, with concentrations ranging from <0.03 to 0.62 &#956;g L&#8722;1. OTA was not detected in any of the grape juice samples. Most of the red wine samples proved to be contaminated with OTA (75%), while only one white wine sample was contaminated. However, the OTA levels detected in all samples were well below the maximum tolerable limit (2 &#956;g L&#8722;1) in wine and grape juice established by the European Community and Brazilian legislature. The results of this study indicate a low risk of exposure to OTA by consumption of tropical wines and grape juices from Brazil