Distribuição dos moluscos terrestres da ilha do Pico (Açores) e variabilidade de Oxychilus (Droutia) minor (Morelet, 1860)

XII Expedição Científica do Departamento de Biologia - Pico 2005.Os moluscos terrestres da ilha do Pico têm sido objecto de estudos vários, mas sobre eles de facto pouco se tem publicado. Arthur Morelet, na sua expedição aos Açores em companhia de Henri Drouët, visitou a ilha em 1857 e, em 1860, naquela que foi a primeira grande obra sobre a malacologia açoriana, elencou as espécies encontradas naquela visita. Ali Morelet (1860) descreveu Pupa [= Leiostyla] rugulosa com base num único indivíduo encontrado no Pico, tornando-se esta a primeira espécie endémica de moluscos terrestres adstrita àquela ilha. Se bem que trabalhos posteriores hajam registado esta espécie em outras ilhas (veja Cunha et al., 2005), impõe-se uma revisão deste grupo com base não apenas em caracteres conquiológicos mas sobretudo anatómicos e moleculares no intuito de serem compreendidas as posições taxonómicas e relações filogenéticas destes taxa nas várias ilhas. Para além desta espécie, aquele naturalista francês menciona para o Pico uma variedade â de Limax rufus [Arion lusitanicus], espécie espalhada por outras ilhas açorianas. Morelet (1860) serviu-se ainda das suas observações no Pico para a descrição de outras espécies que reconheceu estarem distribuídas pelas restantes ilhas; tal foi o caso dos ellobiídeos halofílicos Auricula [=Ovatella] vulcani, endemismo açórico, e Auricula bicolor e Auricula vespertina que são consideradas sinónimos de Myosotella myosotis. Para além do que acima foi indicado, apenas mais quatro espécies terrestres mereceram para Morelet menção expressa da ilha do Pico: Helix [= Caracollina] lenticula, uma introdução da Europa então ainda raramente observada nos Açores, Helix [= Heterostoma] paupercula, uma introdução da Madeira igualmente rara, e Bulimus [= Macaronapaeus] forbesianus, um endemismo circunscrito ao Grupo Central. No início do século XX, o barão W. Rothschild realizou uma expedição aos Açores cujas recolhas depositou no Natural History Museum, Londres; entre o material recolhido, mas nunca trabalhado, figuram sete exemplares de Macaronapaeus imaculadamente brancos (BMNH 1903-10-8.175-181), que se crê relacionados com o endemismo terceirense Macaronapaeus alabastrinus, mas cuja decisão aguarda revisão taxonómica apropriada. Nobre (1924) recolheu esta espécie nos arredores do Cais do Pico e menciona-a como Bulimus pruninus mas Backhuys (1975), ciente embora da lista de Nobre, nem se lhe refere; estes autores, porém, se bem que hajam contribuído imensamente para o conhecimento da malacofauna açórica, pouco acrescentaram à lista de Morelet em matéria de novidade endémica para a ilha do Pico

In situ crosslinked electrospun gelatin nanofibers for skin regeneration

Due to its intrinsic similarity to the extracellular matrix, gelatin electrospun nanofibrous meshes are promising scaffold structures for wound dressings and tissue engineering applications. However, gelatin is water soluble and presents poor mechanical properties, which generally constitute relevant limitations to its applicability. In this work, gelatin was in situ crosslinked with 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDGE) at different concentrations (2, 4 and 6 wt%) and incubation time-points (24, 48 and 72 h) at 37 °C. The physico-chemical and biological properties of BDDGE-crosslinked electrospun gelatin meshes were investigated. Results show that by changing the BDDGE concentration it is possible to produce nanofibers crosslinked in situ with well-defined morphology and modulate fiber size and mechanical properties. Crosslinked gelatin meshes show no toxicity towards fibroblasts, stimulating their adhesion, proliferation and synthesis of new extracellular matrix, thereby indicating the potential of this strategy for skin tissue engineering.info:eu-repo/semantics/acceptedVersio

Estudio de foraminífiros bentónicos en escala mensual en una bahía subtropical moderadamente afectada por efluentes urbanos

Benthic foraminifera were sampled monthly during a one-year period in order to examine their biological response to the environmental factors in the Ubatuba Bay (northern coast of São Paulo State, Brazil). The area is a popular tourist destination with a population that varies during the year, as does the untreated sewage carried into the bay by the rivers. Four sites were analysed. Each station is near one of the rivers that discharge into the bay. Biological data were analysed with multivariate and univariate techniques. The influence of the abiotic parameters on the foraminiferal fauna was inferred through statistical methods and time correlation functions. Geochemical and populational parameter differences allowed the sites to be separated into two groups according to their stress conditions. One group was dominated by Ammonia tepida—a herbivore species—and showed higher densities indicating a more productive and less contaminated location. The other one was dominated by Buliminella elegantissima—a detritivore species. Species diversity did not seem to be a good indicator of environmental health in this area due to the low densities and the high dominance of few species. Nevertheless, density and richness were used as evidence of local productivity and environmental conditions. Quasi-azoic moments related to the high degree of contamination were observed. Anthropogenic effects were stronger in the austral summer period, when sewage input through the rivers increases due to mass tourism.Fueron analizados foraminíferos bentónicos en cuatro estaciones muestreadas mensualmente con la intención de investigar la respuesta biológica a los factores ambientales en la Ensenada de Ubatuba (costa noreste de São Paulo, Brasil). El área es un importante local turístico cuya población fluctúa a través del año y recibe efluentes no tratados a través de los ríos que en ella desembocan. Fueron analizados cuatro locales. Cada estación se encuentra localizada próxima a uno de los cuatro ríos que desembocan en la bahía. Los datos biológicos fueron analizados con técnicas uni y multivariadas. La influencia de los parámetros abióticos sobre la fauna de foraminíferos fue inferida a través de métodos estadísticos y de funciones de correlación temporal. Parámetros geoquímicas y poblacionales permitieron distinguir dos grupos de estaciones que reflejan las condiciones de estrés local. Uno de los grupos estuvo dominado por Ammonia tepida –especie herbívora– y se mostró más productivo y menos contaminado. El otro local estuvo dominado por Buliminella elegantísima –especie detritívora. La diversidad especifica no se mostró un buen indicador de la salud ambiental en esta región debido a las bajas densidades y a la alta dominancia de unas pocas especies. Sin embargo, la densidad y riqueza pudieron ser utilizadas como evidencias de la productividad local y condiciones ambientales. Fueron observados momentos casi azoicos relacionados con el alto grado de contaminación. Los efectos antropogénicos fueron mayores durante el período de verano austral, cuando la entrada de deshechos domésticos a través de los ríos aumenta como consecuencia del incremento del turismo

The heme-based oxygen sensor Rhizobium etli FixL: influence of auxiliary ligands on heme redox potential and implications on the enzyme activity

Conformational changes associated to sensing mechanisms of heme-based protein sensors are a key molecular event that seems to modulate not only the protein activity but also the potential of the Fe redox couple of the heme domain. In this work, midpoint potentials (E) assigned to the Fe redox couple of the heme domain of FixL from Rhizobium etli (ReFixL) in the unliganded and liganded states were determined by spectroelectrochemistry in the presence of inorganic mediators. In comparison to the unliganded ReFixL protein (+ 19 mV), the binding to ligands that switch off the kinase activity induces a negative shift, i. e. E = − 51, − 57 and − 156 mV for O, imidazole and CN, respectively. Upon binding to CO, which does not affect the kinase active, E was observed at + 21 mV. The potential values observed for Fe of the heme domain of ReFixL upon binding to CO and O do not follow the expected trend based on thermodynamics, assuming that positive potential shift would be expected for ligands that bind to and therefore stabilize the Fe state. Our results suggest that the conformational changes that switch off kinase activity upon O binding have knock-on effects to the local environment of the heme, such as solvent rearrangement, destabilize the Fe state and counterbalances the Fe-stabilizing influence of the O ligand

2,4,5-Triaminopyrimidines as blue fluorescent probes for cell viability monitoring: synthesis, photophysical properties, and microscopy applications

Monitoring cell viability is critical in cell biology, pathology, and drug discovery. Most cell viability assays are cell-destructive, time-consuming, expensive, and/or hazardous. Herein, we present a series of newly synthesized 2,4,5-triaminopyrimidine derivatives able to discriminate between live and dead cells. To our knowledge, these compounds are the first fluorescent nucleobase analogues (FNAs) with cell viability monitoring potential. These new fluorescent molecules are synthesized using highly efficient and cost- effective methods and feature unprecedented photophysical properties (longer absorption and emission wavelengths, environment-sensitive emission, and unprecedented brightness within FNAs). Using a live– dead Saccharomyces cerevisiae cell and theoretical assays, the fluorescent 2,4,5-triaminopyrimidine derivatives were found to specifically accumulate inside dead cells by interacting with dsDNA grooves, thus paving the way for the emergence of novel and safe fluorescent cell viability markers emitting in the blue region. As the majority of commercially available viability dyes emit in the green to red region of the visible spectrum, these novel markers might be useful to meet the needs of blue markers for co-staining combinations

STABILITY OF HEMATOLOGICAL VARIABLES IN Colossoma macropomum BLOOD STORED WITH DIFFERENT ANTICOAGULANTS

Hemograma é uma ferramenta de diagnóstico imprescindível na medicina humana e veterinárias. O recomendável é que as análises hematológicas ocorram pouco tempo após coleta do sangue. No entanto, há situações nas quais as amostras são coletadas em locais distantes dos laboratórios, fazendo-se necessário o armazenamento. Assim, o presente trabalho avaliou a viabilidade das amostras de sangue coletado com ácido etilenodiamino tetra-acético tripotássico – EDTA k3 10% (1.3mg mL-1/EDTAa), EDTA k3 10% (2.0 mg mL-1/EDTAb), heparina de sódio (15 UI/ml) e citrato trissódico (3%) em tambaqui, Colossoma macropomum, comparando os valores do hematócrito e hemoglobina armazenada em temperatura de refrigeração (4ºC). As amostras de sangue foram obtidas através da venopunção caudal e determinado o hematócrito (Ht) e a hemoglobina (Hb), durante 8 dias consecutivos com as análises realizadas em intervalo de 24 horas. Os resultados foram analisados através teste Tukey (5%). Não houve diferença estatística (p>0.05) entre os tempos nos parâmetros hematológicos. Entretanto, observou-se hemólise crescente ao longo do tempo em todas as amostras conservadas com citrato, iniciando horas pós coleta (HPC); no grupo EDTAa verificou-se hemólise em 100% das amostras em 192 HPC. Nas amostras com heparina verificou-se coágulo em 25%, 75%, 87,5% e 100% nos tempos de 2, 3, 4 e 6 dias de armazenagem respectivamente. Conclui-se que o anticoagulante citrato trissódico (3%) e heparina de sódio (15 UI/ml) não são recomendáveis para análises hematológicas em C. macropomum. O EDTA K3 10% na quantidade de 2.0 mg mL-1 foi a melhor opção testada nesse estudo, por apresentar estabilidade das amostras sob refrigeração, evitando hemólise e coagulação.                               PALAVRAS-CHAVE: Hematócrito, Tambaqui, Hemoglobin, Coagulação, Hemólise.El recuento sanguíneo es una herramienta de diagnóstico esencial para la medicina humana y veterinaria. Lo más recomendado es que los análisis hematológicos se realicen poco después de la extracción de sangre. Sin embargo, hay situaciones en las que las muestras se recolectan en lugares alejados de los laboratorios, lo que hace necesario el almacenamiento. Por lo tanto, el presente estudio evaluó la viabilidad de las muestras de sangre recolectadas con ácido tripotásico de etilendiamina tetraacético - EDTA k3 10% (1.3mg mL-1 / EDTAa), EDTA k3 10% (2.0 mg mL-1 / EDTAb), heparina sodio (15 UI / ml) y citrato trisódico (3%) de tambaquis, Colossoma macropomum, comparando los valores de hematocrito y hemoglobina almacenados a temperatura refrigerada (4ºC). Se obtuvieron muestras de sangre mediante venopunción caudal y se determinaron hematocrito (Ht) y hemoglobina (Hb) durante 8 días consecutivos con análisis realizados a intervalos de 24 horas. Los resultados se analizaron utilizando la prueba de Tukey (5%). No hubo diferencia estadística (p> 0.05) entre los tiempos en los parámetros hematológicos. Sin embargo, se observó un aumento de la hemólisis con el tiempo en todas las muestras conservadas con citrato, horas de inicio después de la recolección (HPC); En el grupo EDTAa, se encontró hemólisis en el 100% de las muestras a 192 HPC. En las muestras con heparina hubo un coágulo en 25%, 75%, 87.5% y 100% en los períodos de 2, 3, 4 y 6 días de almacenamiento, respectivamente. Se concluye que el citrato trisódico anticoagulante (3%) y la heparina de sodio (15 UI / ml) no se recomiendan para el análisis hematológico en C. macropomum, ya que EDTA K3 10% en la cantidad de 2.0 mg mL-1, el mejor opción probada en este estudio, por apresentar muestras de estabilidad bajo refrigeración, evitando la hemólisis y la coagulación. PALABRAS CLAVES: Hematocrito, Tambaqui, Hemoglobina, Coagulación, Hemólisis. The blood count is an essential diagnostic tool for human and veterinary medicine. The most recommended is that hematological analyzes should take place shortly after blood collection. However, there are situations in which samples are collected in places far from the laboratories, making storage necessary. Thus, the present work evaluated the viability of blood samples collected with tripotassic ethylenediamine tetraacetic acid - EDTA k3 10% (1.3mg mL-1 / EDTAa), EDTA k3 10% (2.0 mg mL-1 / EDTAb), heparin sodium (15 IU / ml) and trisodium citrate (3%) of tambaquis, Colossoma macropomum, comparing the values of hematocrit and hemoglobin stored at refrigerated temperature (4ºC). Blood samples were obtained through caudal venipuncture and hematocrit (Ht) and hemoglobin (Hb) were determined for 8 consecutive days with analyzes performed at 24-hour intervals. The results were analyzed using the Tukey test (5%). There was no statistical difference (p> 0.05) between times in hematological parameters. However, increasing hemolysis was observed over time in all samples preserved with citrate, starting hours post collection (HPC); in the EDTAa group, hemolysis was found in 100% of the samples at 192 HPC. In the samples with heparin there was a clot in 25%, 75%, 87.5% and 100% in the periods of 2, 3, 4 and 6 days of storage respectively. It is concluded that the anticoagulant trisodium citrate (3%) and sodium heparin (15 IU / ml) are not recommended for hematological analysis in C. macropomum, since EDTA K3 10% in the amount of 2.0 mg mL-1, the best option tested in this study, for presenting samples stability under refrigeration, avoiding hemolysis and coagulation.KEYWORDS: Hematocrit, Tambaqui, Hemoglobin, Coagulation, Hemolysis

Controlo mecânico de infestantes

As infestantes são plantas indesejáveis que crescem juntamente com as plantas cultivadas e que interferem no seu desenvolvimento normal. As infestantes podem ser uma das principais causas da diminuição do rendimento das culturas, porque competem com elas para o espaço, para a água, luz solar, nutrientes e dióxido de carbono, podem segregar substâncias alelopáticas, ser o meio no qual temporariamente se instalam alguns organismos responsáveis por inúmeras pragas e doenças que atacam as culturas dificultando assim o combate às mesmas, dificultam a colheita quer esta seja manual ou mecanizada, podem contaminar o produto final, depreciando-o e, asseguram a reinfestação para as culturas seguintes. O controlo de infestantes ter-se-á iniciado quando o homem deixou a de ser nómada e de assegurar as suas necessidades através da colheita de frutos e da caça e passou após a “domesticação“ das espécies animais e vegetais a fazer agricultura, tornando-se sedentário. Portanto, desde o início da agricultura, que o homem tem feito grandes esforços para controlar as plantas infestantes, primeiro à mão, depois com o uso de alguns artefactos, ferramentas e equipamentos para melhorar a eficiência no seu controlo. Hoje existem equipamentos mecânicos sofisticados tal como, substâncias químicas ou biológicas que permitem o seu controlo prevenindo ou retardando a sua germinação ou crescimento. Interferência das plantas infestantes com a cultura pode gerar perdas significativas, na qualidade e quantidade de alimentos produzidos, desperdiçando enormes quantidades de energia, especialmente não renováveis. Os custos no controlo e os efeitos sobre os rendimentos são muito variáveis, dependendo do agricultor, das espécies de plantas infestantes e da estratégia ou estratégias adoptadas para garantir a eficácia no controlo. Nas últimas cinco décadas têm vindo a fazer-se significativos avanços científicos e tecnológicos na criação de estratégias para o aumento da eficácia no controlo de infestantes seja mecanicamente, seja através da utilização de substâncias químicas ou biológicas menos tóxicas para o homem, menos agressivas ao meio ambiente, com menores custos de produção e ao mesmo tempo, mais selectivas para as culturas onde são aplicadas. A alternativa ao controlo químico de infestantes através da aplicação de herbicidas é o controlo mecânico pela utilização de diversas alfaias agrícolas, tais como a charrua de aivecas, a charrua de discos, o escarificador de braços rígidos, o escarificador de braços flexíveis (vibrocultor) e a fresa. O controlo mecânico de infestantes poderá ser levado a cabo também por máquinas de corte, como por exemplo, as gadanheiras. Cortar as infestantes numa fase de desenvolvimento antes da produção de semente evita a sua propagação. Se o agricultor optar pela sementeira directa como técnica de instalação das culturas, a única alternativa que tem para o controlo de infestantes é a química, mas se optar pelo sistema de mobilização tradicional ou pela mobilização reduzida poderá controlar as infestantes, química e/ou mecanicamente. A eficácia das diferentes alfaias no controlo de infestantes depende da própria alfaia, da época do ano em que se realiza esse controlo, do estado do solo, das espécies de infestantes presentes e seu estádio de desenvolvimento. Iremos no presente trabalho, referir os aspectos mais importantes do controlo mecânico de infestantes