Avaliação do efeito do meio condicionado proveniente de fibroblastos orais senescentes sobre a viabilidade e o crescimento de células de carcinoma

TCC (graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Odontologia.O carcinoma epidermoide de boca (CEB) permanece entre as lesões malignas com maior prevalência no Brasil e no mundo, representando mais de 90% das malignidades que acometem a cavidade oral. O desenvolvimento e progressão do CEB não se derivam somente de alterações genéticas nas células do parênquima, mas também em modificações fenotípicas e metabólicas das células presentes no estroma, em especial, os fibroblastos. Estas células, quando associadas à lesão tumoral, podem apresentar características biológicas que têm sido relacionadas a uma maior taxa de progressão e metástase da lesão. Além disso, fibroblastos também podem adquirir um fenótipo secretor associado à senescência, cujas características e perfil secretório de diversos fatores, tanto intra como extracelulares, têm sido apontados como mecanismos de promoção e disseminação de diversos tipos de cânceres. Sendo assim, o objetivo deste trabalho foi analisar os efeitos do meio condicionado proveniente de fibroblastos orais senescentes na viabilidade, proliferação e migração de células de CEB in vitro. Primeiramente foi feita a indução da senescência em fibroblastos provenientes de cultura primária, por meio de incubação com peróxido de hidrogênio a 30%. Foram consideradas senescentes as culturas que apresentaram pelo menos 50% de marcação positiva para a enzima β-galactosidase. Após esse processo, foi feita a cultura dos fibroblastos jovens e senescentes para a coleta do meio condicionado. Quando as culturas atingiram de 80 a 90% de confluência foi feita a incubação com meio DMEM sem soro por 48h para coleta dos meios condicionados. Células de CEB (linhagem CAL27) foram cultivadas em placas de 96 e 48 cavidades e os meios condicionados experimentais de fibroblastos senescentes (MCFS), fibroblastos jovens (MCFJ) e meio DMEM sem soro (DSS) foram adicionados para compor os grupos de intervenção, onde o controle foi realizado com meio convencional suplementado com 10% de soro fetal bovino (DCS). Para avaliação da viabilidade celular foi utilizado o método da coloração com Sulforrodamina B; para análise da migração celular o método do “Scratch” ou ranhura; e para confirmação da proliferação celular, utilizou-se a coloração fluorescente com CyQuant. Foi observado que os grupos MCFJ e MCFS apresentaram uma média de viabilidade celular superior no tempo de 24h quando comparado ao tempo de 48h (p<0,000). A migração celular no grupo DSS apresentou diferença estatística apenas entre os tempos 0h e 48h (p=0,002), assim como o grupo MCFJ (p=0,04), já o grupo com MCFS foi significativo nos tempos 24h (p=0,042) e 48h (p=0,018) quando comparados ao tempo 0h. Em relação à proliferação celular, houve diferença estatística entre o grupo controle quando comparado ao grupo DSS (p=0,027) e MCFS (p=0,034). Dessa forma, apesar das limitações que protocolos in vitro apresentam, podemos observar que houve influência positiva dos meios condicionados especialmente sobre a migração de células de carcinoma epidermoide de boca.Oral squamous cell carcinoma (OSCC) remains one of the most prevalent malignant lesions in Brazil and worldwide, representing over 90% of malignancies affecting the oral cavity. The development and progression of OSCC are not only derived from genetic alterations in parenchymal cells but also from phenotypic and metabolic changes in stromal cells, particularly fibroblasts. These cells, when associated with the tumor lesion, can exhibit biological characteristics that have been linked to a higher rate of lesion progression and metastasis. Additionally, fibroblasts can acquire a secretory phenotype associated with senescence, whose characteristics and secretory profile of various factors, both intra- and extracellular, have been implicated as mechanisms, promoting the spread of various types of cancers. Therefore, the aim of this study was to analyze the effects of conditioned medium from senescent oral fibroblasts on the viability, proliferation, and migration of OSCC cells in vitro. Initially, senescence was induced in fibroblasts from primary culture by incubating them with 30% hydrogen peroxide. Cultures were considered senescent if they showed at least 50% positive staining for βgalactosidase enzyme. After this process, young and senescent fibroblasts were cultured to collect conditioned medium. When cultures reached 80-90% confluence, they were incubated with serum-free DMEM medium for 48 hours to collect conditioned media. OSCC cells (CAL27 cell line) were cultured in 96-well and 48-well plates, and experimental conditioned media from senescent fibroblasts (CMSF), young fibroblasts (CMYF), and serum-free DMEM (SFD) were added to form intervention groups. The control group was cultured in conventional medium supplemented with 10% fetal bovine serum (CMS). Cell viability was assessed using the Sulforhodamine B staining method; cell migration was analyzed using the scratch assay; and cell proliferation was confirmed using CyQuant fluorescent staining. It was observed that the CMYF and CMSF groups showed higher average cell viability at 24 hours compared to 48 hours (p<0.000). Cell migration in the SFD group showed statistical difference only between 0 hours and 48 hours (p=0.002), as did the CMYF group (p=0.04), whereas the CMSF group was significant at 24 hours (p=0.042) and 48 hours (p=0.018) compared to 0 hours. Regarding cell proliferation, there was statistical difference between the control group compared to the SFD (p=0.027) and CMSF (p=0.034) groups. Thus, despite the limitations inherent in in vitro protocols, it can be observed that there was a positive influence of conditioned media, especially on the migration of oral squamous cell carcinoma

A representação e a representatividade sindical no contexto da terceirização da atividade-fim

Trabalho de Conclusão de Curso (graduação)—Universidade de Brasília, Faculdade de Direito, 2018.O objetivo do presente trabalho é refletir acerca das consequências da terceirização na atividade-fim da empresa para a atual estrutura sindical brasileira, a partir da diferenciação entre os conceitos de representação e representatividade. A análise das alterações na estrutura de produção que geram a precarização da mão-de-obra trabalhadora também é essencial para a compreensão da crise de representação vivida pelos sindicatos que, organizados a partir da clássica conformação das grandes fábricas do período fordista, encontram dificuldades para fixar uma atuação representativa e democrática em meio a uma base trabalhadora fragmentada pelos diferentes tipos de contrato de trabalho (que têm como consequência diferentes condições de trabalho). Em um contexto de alterações legislativas que legitimam as modificações na estrutura de produção, com vistas ao aumento de lucro, importa-se encontrar saídas benéficas ao trabalhador dentro do próprio texto legislativo, adequando-se a interpretação da legislação ordinária aos preceitos constitucionais de modo que retrocessos sociais como o alargamento da possibilidade de terceirização não inviabilizem o direito do trabalhador a participar e ser representado por um sindicato que converta os interesses da base em agenda de atuação sindical. Nesse sentido, por meio de uma revisão bibliográfica e recolhimento de dados que refletem o atual cenário do mercado de trabalho, é feita uma discussão sobre a atuação sindical no contexto em que a terceirização pode ser estendida à atividade-fim, por meio de um diálogo entre a legislação e a necessidade de uma representação que vá além dos aspectos formais para ser factualmente efetiva. Com isso, defende-se a ampliação do conceito de “categoria profissional” estipulados pelo artigo 511 da CLT de modo que o enquadramento sindical do trabalhador terceirizado se dê à luz de uma intepretação constitucional, uma vez que este exercerá as mesmas atividades do trabalhador diretamente contratado, devendo ser, portanto, representados pela mesma entidade sindical.The objective of this paper is to reflect on the consequences of outsourcing of the end activity of a company to the current Brazilian trade union structure from the differentiation between the concepts of representation and representativeness. The analysis of the changes in the structure of production that generate the precariousness of the labor force is also essential for the understanding of the crisis of representation experienced by the unions, which were organized from the classic conformation of the great factories of the Fordist period and have difficulty establishing a representative and democratic performance in the midst of a fragmented working force given the different types of labor contract (which have as a consequence different working conditions). In a context of legislative changes that legitimize modifications in the production structure, aiming at increasing profits, it is important to find benefits that are beneficial to the worker within the legislative text itself, adapting the interpretation of ordinary legislation to constitutional precepts so that social backslides such as the extension of the possibility of outsourcing do not prevent the right of the worker to participate in and be represented by a union that converts the interests of the base into an agenda for trade union. Through a bibliographical review and data collection that reflect the current labor market scenario, a discussion is made of the trade union activity in the context in which outsourcing can be extended to the end-activity, through a dialogue between the legislation and the need for a representation that goes beyond formal aspects to be factually effective. Thus, it is defended the extension of the concept of "professional category" stipulated by article 511 of the CLT so that the union framework of the outsourced worker is given in the light of a constitutional interpretation, since this will carry out the same activities of the worker directly be represented by the same trade union entity

Desempenho ocupacional de pessoas com esquizofrenia em uma tarefa de automanutenção

Orientador: Profª. Drª. Mônica Mello de Macedo IgnácioMonografia (especialização) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Curso de Especialização em Terapia Ocupacional em Saúde MentalInclui referênciasResumo: Introdução: O processo da reforma psiquiátrica no Brasil, com a redução de leitos hospitalares e a criação de serviços de base comunitária para o tratamento dos transtornos mentais pela Lei 10.216 de 06 de Abril de 2001, evidenciou a situação de abandono e marginalização a qual pessoas em sofrimento psíquico estiveram sujeitas durante anos. Isoladas da sociedade, privadas de ocupações e papéis ocupacionais significativos, ao iniciarem suas vidas desinstitucionalizadas tiveram que aprender a exercer a autonomia que antes lhes fora negada. A esquizofrenia é um transtorno mental caracterizado pelo potencial em causar incapacidades pela ocorrência de déficits cognitivos e/ou pelos prejuízos sociais decorrentes de crenças delirantes; assim, como recurso aos cuidados de pessoas com esquizofrenia, tem se visto ampliar a oferta de serviços de casas de apoio. Há nestes espaços potencial de organização para a participação destas pessoas em suas atividades do dia-a-dia, bem como há no cotidiano domiciliar particular daqueles que seguem a convivência com seus familiares diversas formas de promover a independência e autonomia nestas mesmas atividades, tornando as atividades rotineiras em possibilidade de estimulação às habilidades cognitivas. Objetivo: Este trabalho teve por objetivo investigar o desempenho ocupacional de pessoas com esquizofrenia em uma tarefa de automanutenção. Método: Foi realizado um estudo exploratório descritivo, transversal, com três grupos de participantes: pessoas com esquizofrenia residentes em casa de apoio, pessoas com esquizofrenia, pessoas sem esquizofrenia. Foram avaliados os fatores cognitivos primários, nível de independência nas atividades de vida diária e desempenho ocupacional em uma tarefa de automanutenção dos três grupos. A análise de dados foi realizada por meio de estatística descritiva e análise de conteúdo. Resultados: A aplicação da avaliação ILLS-BR/P indicou, através da análise da média de pontuação dos grupos, discrepâncias quanto as habilidades de vida diária entre os grupos nos domínios (1) preparo e armazenamento dos alimentos (2) transporte e (3) emprego. Quanto ao PRPP, no grupo 1 as médias de desempenho por itens dos domínios variaram de 50% a 92%, sendo os menores valores referentes aos domínios planejamento e execução da atividade, enquanto para P5 o resultado foi de 100% em todos os domínios. Para o grupo 3 as pontuações variaram de 86% a 100% unicamente no domínio Execução. Conclusão: Os resultados indicaram que apesar de haver prejuízo no desempenho ocupacional de pessoas com esquizofrenia, provavelmente acentuados por dificuldades relacionadas às habilidades cognitivas, tais dificuldades não tiveram impacto na funcionalidade dos participantes em uma atividade de auto manutenção

Bagunça na escola: estratégias para serem aplicadas entre escola e grupos

Partindo de uma perspectiva intercultural, este artigo pretende cartografar algumas práticas de alunos e grupos de alunos em sala de aula, a conhecida bagunça, comumente tratadas como prejudiciais ao ensino e organização escolares. Baseando-se na reconstrução documentária de grupos de discussão e entrevistas com alunos do quinto ano de diferentes sistemas escolares (público e privado no Brasil e escolas de baixa e alta qualificação educacionais na Alemanha), discutiremos o conceito de bagunça considerando a sua função social em relação à constituição de grupos de amigos, à carreira escolar e a um descontentamento ou crítica do aluno sobre qualidade de ensino. Função esta que se diferencia e configura de acordo com o contexto social, econômico e cultural do aluno revelando-se, muitas vezes, como sua voz face à obsolescência e ao fracasso da instituição escolar. Do ponto de vista metodológico, empregamos o método de pesquisa qualitativa relacionada a investigações interculturais assim como o método de triangulação sobre o material cultural relacionado.Based on a cross-cultural study in this paper we outline practices of groups of students in the class room, known as #disruptive behaviour', which are seen as disruptions to classroom and school's order. Using documentary reconstructions of data from interview and group discussions with 5th graders from different schools and school systems (public and private schools in Brazil, lower and higher qualifying schools in Germany), we discuss the concept of 'bagunça' in relation to its social functions concerning the construction of peer-groups, school careers and school-related attitudes. A fundamental difference between pupil on different educational and social contexts can be seen concerning the function of school critique, which is only applied in schools of lower educational or social status. From a methodological point of view we address questions of class-related qualitative research in cross-cultural investigations and, more concrete, the triangulation of culture-related material

Evolution of Axis Specification Mechanisms in Jawed Vertebrates: Insights from a Chondrichthyan

The genetic mechanisms that control the establishment of early polarities and their link with embryonic axis specification and patterning seem to substantially diverge across vertebrates. In amphibians and teleosts, the establishment of an early dorso-ventral polarity determines both the site of axis formation and its rostro-caudal orientation. In contrast, amniotes retain a considerable plasticity for their site of axis formation until blastula stages and rely on signals secreted by extraembryonic tissues, which have no clear equivalents in the former, for the establishment of their rostro-caudal pattern. The rationale for these differences remains unknown. Through detailed expression analyses of key development genes in a chondrichthyan, the dogfish Scyliorhinus canicula, we have reconstructed the ancestral pattern of axis specification in jawed vertebrates. We show that the dogfish displays compelling similarities with amniotes at blastula and early gastrula stages, including the presence of clear homologs of the hypoblast and extraembryonic ectoderm. In the ancestral state, these territories are specified at opposite poles of an early axis of bilateral symmetry, homologous to the dorso-ventral axis of amphibians or teleosts, and aligned with the later forming embryonic axis, from head to tail. Comparisons with amniotes suggest that a dorsal expansion of extraembryonic ectoderm, resulting in an apparently radial symmetry at late blastula stages, has taken place in their lineage. The synthesis of these results with those of functional analyses in model organisms supports an evolutionary link between the dorso-ventral polarity of amphibians and teleosts and the embryonic-extraembryonic organisation of amniotes. It leads to a general model of axis specification in gnathostomes, which provides a comparative framework for a reassessment of conservations both among vertebrates and with more distant metazoans

Autoavaliação de estudantes universitários sobre seu desempenho acadêmico durante a pandemia da COVID-19

Objetivo: Analisar como os estudantes universitários autoavaliam o seu desempenho acadêmico durante a pandemia da COVID-19 em uma universidade pública do sul do Brasil. Método: estudo transversal realizado por meio de um questionário online respondido por 527 estudantes em julho e agosto de 2020. Realizou-se análise estatística descritiva e o teste qui-quadrado para avaliar associações. Resultados: Entre os participantes,49,5% referiram um desempenho acadêmico insuficiente,24,1% suficiente,19,40% bom,5,90% muito bom e 1,10% excelente. Verificou-se que houve associação entre as variáveis curso (p=0,034), forma de ingresso na instituição (p=0,016) e atividade de trabalho (p=0,010) e o desempenho acadêmico durante a pandemia de COVID-19. Conclusão: O desempenho acadêmico durante a suspensão das aulas presenciais está sendo insuficiente para muitos estudantes. The occupational therapy students who entered in the university through the system of quotas and work in addition to studying had a worse academic performance during the COVID-19 pandemic. Palavras-chave: Infecções por coronavírus. Pandemias. Desempenho acadêmico. Capacitação de recursos humanos em saúde

Influence of aerobic fitness on the correspondence between heart rate variability and ventilatory threshold

The aims of this study were to verify the correspondence between heart rate variability (HRV) and ventilatory thresholds during a progressive exercise test and the relationship with low and high aerobic fitness levels. Twenty male volunteers (29.5±6.2 years; 75.9±13.0 kg; 175.0±7.4 cm) were recruited. The subjects were allocated to two groups according to their VO2max &lt;48.8 ml•kg−1•min−1 (low cardiorespiratory fitness group) (n=10) and &gt;48.81 ml•kg−1•min−1 (high cardiorespiratory fitness group) (n=10). A progressive test was performed, consisting of 3-min stages beginning at 25 watts and increasing by 25 watts every 3-min. The HRV threshold (HRVT) and ventilatory threshold (VT) analyses were performed through visual inspection. The comparisons with RMSSD values in percentage of maximum workload resulted in a higher effect size (ES) than the SDNN values. The VO2 in the high cardiorespiratory fitness group at VT (+32%), HRVTRMSSD (+27%), and HRVTSDNN (+31%) was signifi cantly higher compared to the group with low cardiorespiratory fitness. Higher values were observed for relative load (W•kg-1) at VT and HRVTSDNN in the high cardiorespiratory fitness group in comparison with the low cardiorespiratory fitness group (P&lt;0.05), but no difference for VT and HRVTRMSSD. Signifi cant correlations between at VT and HRVTSDNN (r=0.77) were found only in the low cardiorespiratory fitness group. Cardiorespiratory fitness should be regarded as a factor for HRVT evaluation. The HRVTSDNN was closer to the VT in the low cardiorespiratory fitness group than the HRVTRMSSD, however, the use of vagal modulation assessed using the HRV parameter was more sensitive to observe possible differences regarding cardiorespiratory fitness.The aims of this study were to verify the correspondence between heart rate variability (HRV) and ventilatory thresholds during a progressive exercise test and the relationship with low and high aerobic fitness levels. Twenty male volunteers (29.5±6.2 years; 75.9±13.0 kg; 175.0±7.4 cm) were recruited. The subjects were allocated to two groups according to their VO2max &lt;48.8 ml•kg−1•min−1 (low cardiorespiratory fitness group) (n=10) and &gt;48.81 ml•kg−1•min−1 (high cardiorespiratory fitness group) (n=10). A progressive test was performed, consisting of 3-min stages beginning at 25 watts and increasing by 25 watts every 3-min. The HRV threshold (HRVT) and ventilatory threshold (VT) analyses were performed through visual inspection. The comparisons with RMSSD values in percentage of maximum workload resulted in a higher effect size (ES) than the SDNN values. The VO2 in the high cardiorespiratory fitness group at VT (+32%), HRVTRMSSD (+27%), and HRVTSDNN (+31%) was signifi cantly higher compared to the group with low cardiorespiratory fitness. Higher values were observed for relative load (W•kg-1) at VT and HRVTSDNN in the high cardiorespiratory fitness group in comparison with the low cardiorespiratory fitness group (P&lt;0.05), but no difference for VT and HRVTRMSSD. Signifi cant correlations between at VT and HRVTSDNN (r=0.77) were found only in the low cardiorespiratory fitness group. Cardiorespiratory fitness should be regarded as a factor for HRVT evaluation. The HRVTSDNN was closer to the VT in the low cardiorespiratory fitness group than the HRVTRMSSD, however, the use of vagal modulation assessed using the HRV parameter was more sensitive to observe possible differences regarding cardiorespiratory fitness

Density of mast cells and intensity of pruritus in psoriasis vulgaris : a cross sectional study

Background: Psoriasis is a chronic and prevalent disease, and the associated pruritus is a common, difficult-tocontrol symptom. The mediators involved in psoriatic pruritus have not been fully established. Objective: To evaluate associations between the number of mast cells in psoriatic lesions and the intensity of pruritus. Methods: 29 patients with plaque psoriasis were recruited. In all participants, Psoriasis Area and Severity Index and Body Surface Area were assessed. A questionnaire was administered to obtain clinical information and the Dermatology Life Quality Index. Pruritus was assessed using a visual analog scale and skin biopsies were performed for staining with Giemsa and Immunohistochemistry with C-Kit. Results: Pruritus was observed in 91.3% of our patients. Median VAS was 6 (p25-75: 2-8). The immunohistochemical method revealed a mean of 11.32 mast cells/field and Giemsa staining revealed a mean of 6.72 mast cells/field. There was no correlation between the intensity of pruritus and mast cell count, neither in Immunohistochemistry (p = 0.15; rho = -0.27) nor in Giemsa (p = 0.16; rho = -0.27). Pruritus did not impact on the Dermatology Life Quality Index (p = 0.51; rho = -0.13). Study limitations: The small sample size may be considered the main limitation of our study. Conclusions: Although mast cells are mediators of pruritus in many cutaneous diseases, our findings support that psoriatic pruritus is a complex disorder with multifactorial, complex pathophysiology, involving pruritogenic mediators others than mast cells

Effect of the essential oil from the latex of the fruit Mangifera indica L. on Tetranychus urticae Koch (Acari, Tetranychidae)

International audienceTetranychus urticae Koch is a cosmopolitan pest that causes damage to crops in protected farming activities in the semiarid region of the state of Pernambuco, Brazil. We investigated the lethal and sublethal effects of the essential oil from the latex of the mango fruit [Mangifera indica, Espada and Rosa (MESPA and MROSA) varieties] and selected monoterpenes on T. urticae. The yield of the MROSA oil was higher (9.22 ± 0.15%). The GC/MS analysis of the oils enabled the identification of 26 constituents. Terpinolene (70.14 ± 0.61%) was the major compound identified in the MESPA oil; β-pinene (38.22 ± 0.80%) was the major constituent of the MROSA oil, followed by terpinolene (29.44 ± 0.29%). The mite was more susceptible to the oils and constituents through fumigation, with no difference between the two varieties. By residual contact, the MROSA oil was 2.7-fold more toxic than the MESPA oil. Terpinolene was the most toxic constituent by fumigation, whereas β-pinene and α-pinene were the most active by residual contact. The selected compounds from M. indica also affected the behavior of the mite, exerting an influence on fecundity, feeding preference and egg-laying preference. The positive control (Azamax®) was more efficient at reducing the fecundity of the mite than the oils, but the MROSA oil was more toxic by fumigation and residual contact. The effects of fumigation and residual contact combined with the change in behavior may be a considerable advantage in the integrated management of T. urticae. For the practical use of these oils as novel acaricides, however, further investigations are needed to evaluate the effects on non-target organisms and the cost-benefit ratio for the formulation of a product to be used on protected crops in the semiarid region of the state of Pernambuco, Brazil