Inhibition of cytokinesis by wiskostatin does not rely on N-WASP/Arp2/3 complex pathway

BACKGROUND: Cytokinesis is the final step of cell division taking place at the end of mitosis during which the cytoplasmic content and replicated chromosomes of a cell are equally partitioned between the two daughter cells. This process is achieved by the formation and the ingression of an actomyosin contractile ring under the control of equatorial microtubules. The mechanisms of contractile ring formation are not fully understood but involve recruitment of preexisting actin filaments and de novo actin polymerisation. RESULTS: In this study, we evaluated the role of the actin nucleation factor, Arp2/3 complex, during cytokinesis. We found that the Arp2/3 complex is recruited late to the cleavage furrow suggesting a potential involvement of Arp2/3 complex during this process. Furthermore, wiskostatin a potent inhibitor of N-WASP activity towards the Arp2/3 complex blocked cytokinesis without affecting mitosis. Nonetheless, this inhibition could not be reproduced using alternative approaches targeting the N-WASP/Arp2/3 complex pathway. CONCLUSION: We conclude that the wiskostatin induced defective cytokinesis does not occur through the inhibition of the N-WASP/Arp2/3 pathway. Wiskostatin is likely to either directly target other proteins required for cytokinesis progression or alternately wiskostatin bound to N-WASP could affect the activity of other factors involved in cytokinesis

Synthèse chimique et activité biologique d'une série de dérivés amides en position 7α de la testostérone

En 2012, au Canada, il y a eu 26 500 hommes diagnostiqués avec un cancer de la prostate dont 4000 sont décédés. Il existe plusieurs traitements pour ce cancer, dont la chimiothérapie qui occasionne des effets secondaires importants et désagréables pour le patient. Pour contrer ces effets secondaires, un ciblage thérapeutique vers les cellules cancéreuses permettrait une action antitumorale plus précise et efficace. Le cancer de la prostate est hormono-dépendant dans 80 à 90 % des cas. Le projet consiste à trouver un nouveau moyen d'exploiter la 7α-allyl-testostérone pour fabriquer une série de composés originaux ayant un potentiel cytotoxique et/ou antiandrogénique. Dix nouveaux composés ont été synthétisés par une méthode originale à partir de la 7α-allyl-testostérone. La majorité de ces composés sont des amides obtenus avec des rendements globaux variant entre 4 % et 35 % sans optimisation. Tous les composés synthétisés ont été testés sur des cellules du cancer de la prostate hormono-dépendant (LNCaP) et hormono-indépendant (PC3). Certains composés ont montré une meilleure efficacité que le chlorambucil et l'acétate de cyprotérone. L'acide trans-4-(4-androstèn-17β-acétoxy-3-one-7α-yl)-but-2-ènoïque N-2-pyridyléthylamide (17) est le plus intéressant composé synthétisé avec son IC50 de 23,7 µM pour les cellules LNCaP et de 5,8 µM pour les cellules PC3. Avec cette activité, il possède une activité cytotoxique supérieure au chlorambucil (LNCaP : 52,1 µM et PC3 : 55,7 µM) sur les deux types de lignées cellulaires du cancer de la prostate. Certains de ces composés permettent d'envisager de nouvelles avenues de traitements contre les cancers de la prostate. De plus, la méthode de synthèse ouvre la voie à d'autres composés d'intérêt biologique dans le futur.\ud ______________________________________________________________________________ \ud MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Synthèse, stéroïde, androgène, testostérone, cancer de la prostate, 7α-allyl-testostérone amid

Le rapport à l'eau chez les cégépiens : représentations et agir

De l'avis de nombreux auteurs, et selon les événements qui émergent au fil de l'actualité, l'eau est l'un des grands problèmes environnementaux auxquels est confrontée l'humanité, au même titre que le réchauffement climatique ou l'érosion de la biodiversité. Toutefois, à la différence des autres grandes problématiques environnementales - pourtant étroitement reliées entre elles -, l'eau ne suscite encore que peu d'intérêt au sein de la population, ce qui fait dire à certains que la problématique de l'eau est le défi environnemental global le plus sous-estimé de notre temps. Une recension d'écrits nous a permis de nous rendre compte que si les jeunes ne se mobilisent pas autour de la question de l'eau, cela pourrait être davantage dû au fait que les politiciens se cantonnent dans le déni de la crise de l'eau, que celle-ci n'est pas mise de l'avant par les médias et qu'elle n'est pas (ou trop peu) considérée par le secteur de l'éducation, qu'à leur prétendue désaffection pour la chose politique. Les jeunes semblent en effet continuer à se mobiliser autour d'enjeux situés aux deux pôles suivants : les engagements au niveau local et régional (plus accessibles) et les luttes à l'échelle de la planète (plus globalement préoccupantes), dont la mondialisation et ses impacts sur les individus et l'environnement. Par contre, ils veulent faire de la politique autrement et manifestent le désir que les changements soient initiés par la population plutôt qu'imposés par des politiciens en qui ils n'ont plus confiance. Cette recherche a été effectuée au cégep du Vieux Montréal en 2010-2011. Elle a pour but de caractériser le rapport à l'eau chez les cégépiens en vue de contribuer à enrichir l'action éducative favorisant leur engagement social dans les questions relatives à l'eau. Les objectifs de cette étude exploratoire consistent à caractériser les représentations de l'eau et des problématiques socio-écologiques relatives à l'eau chez les cégépiens et à mettre au jour le rôle social que s'attribuent (ou non) les jeunes face à la problématique de l'eau. Dans cette recherche, nous présentons d'abord la problématique de l'eau et la question de l'engagement des jeunes. Puis, nous présentons le champ de l'éducation relative à l'environnement et ouvrons sur celui de l'étude des représentations sociales, ainsi que sur le décalage entre savoir et agir. Nous exposons également la méthodologie de recherche qualitative utilisée, dont les stratégies de cueillette de données, soit le questionnaire, le groupe de discussion et l'exercice pratique. Par la suite, nous présentons et discutons les résultats obtenus. Nous appuyant sur la typologie des représentations de l'environnement de Lucie Sauvé, nous présentons une typologie des représentations de l'eau chez les cégépiens. Cette typologie, qui rend compte d'une diversité d'éléments de représentation de l'eau chez les cégépiens, pourrait s'avérer pertinente lors de la planification de situations pédagogiques auprès de groupes semblables. Nous nous penchons ensuite sur certains éléments qui peuvent expliquer le décalage observé chez les jeunes entre savoir et agir. En effet, bien que les étudiants interrogés se disent préoccupés par la question de l'eau, peu d'entre eux adoptent des façons d'agir permettant d'économiser l'eau et peu s'engagent pour la cause de l'eau. Il semble qu'un certain nombre de facteurs puissent expliquer ces ruptures, dont l'abondance de l'eau au Québec, le faible risque à court terme des pénuries d'eau dans la région, le caractère lent et graduel de la dégradation de la situation de l'eau dans le monde, la complexité et le caractère systémique de la problématique de l'eau et une connaissance insuffisante de la question de l'eau en général. Les étudiants attribuent cette lacune à un manque de formation à travers leur parcours scolaire et à un manque d'information émanant des médias. Ils émettent des souhaits sur le type de contenus de cours auxquels ils aimeraient avoir accès pour mieux se former sur la question de l'eau et sur l'environnement en général. Ils identifient aussi le type d'information relative à l'eau qui devrait, selon eux, être accessible au grand public. Nous nous attardons ensuite sur les courants d'éducation relative à l'environnement qui semblent les plus appropriés pour répondre aux besoins et aux souhaits des cégépiens au regard de leur formation relative à l'eau. Nous concluons enfin avec des pistes pour la conception de projets éducatifs de nature à favoriser l'engagement des jeunes dans la résolution de la crise de l'eau et ouvrons quelques avenues pour poursuivre la recherche sur le rapport des jeunes à l'eau.\ud ______________________________________________________________________________ \ud MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : éducation relative à l'environnement, eau, cégep, représentations sociales, engagement

La législation canadienne et les réfugié(e)s

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal

Effets du facteur activateur des plaquettes (PAF) sur la modulation de l'expression des récepteurs de l'interleukine-2 (IL-2R) chez les lymphocytes humains

Le facteur activateur plaquettaire (PAF) est un glycéro-phospholipide qui agit sur plusieurs types cellulaires via un récepteur membranaire lié à une protéine G. II est impliqué dans la défense immunitaire et/ ou l'inflammation. Des études antérieures avaient démontré que le PAF inhibait la prolifération des lymphocytes du sang périphérique (PBL) activés par la phytohemagglutinine (PHA). Étant donné que l’IL-2 est impliqué dans la prolifération lymphocytaire lorsqu'il interagit sur son récepteur membranaire de haute affinité (IL-2R), le PAF pourrait inhiber la prolifération en modulant négativement l'expression du IL-2R et/ou la productif d'IL-2. Nos études faites sur des lymphocytes humains isolés du sang périphérique de donneurs adultes et volontaires, démontrent que lorsque les lymphocytes sont co-stimulés par la PHA, le PAF ne module pas les niveaux d'accumulation d'ARNm des IL-2R ni l'expression des protéines-récepteurs à la surface. La production d’lL-2 n'est pas modulée par le PAF après 24 heures d'incubation. Mais, après 48 heures, on observe une augmentation significative de la quantité d'IL-2 dans le surnageant à des concentrations de PAF de 10-8 et 10-6 M. En parallèle, des études faites sur des lymphocytes non co-stimulés ont démontré que le PAF modulait de façon transitoire les niveaux d'AR^6Il du ILr2Rp. A 6 heures, le PAF inhibe de façon dose-dépendante l'expression en ARNm du IL-2R?. Après 12 heures, seule la concentration de 10-10 M de PAF inhibe de façon spécifique l'expression de la chaîne ?. Après 24 heures, l'expression de la chaîne ? augmente à cette même concentration de PAF. Quant à la chaîne ?, on ne détecte pas de modulation des niveaux d'ARNm. Nos études de cytofluorométrie montrent que le PAF (10-10 M) inhibe de façon significative l'expression du IL-2R? à la surface après 24 heures mais il augmente son expression après 48 heures. L'expression de IL-2R? à la surface est augmentée de façon significative par le PAF après 24 et 48 heures. On observe, dans ce cas, une augmentation significative de prolifération après 72 heures. Cette étude démontre que l'inhibition de prolifération induite par le PAF chez les lymphocytes activés par la PHA ne s'effectuerait par pas la voie des IL-2R. Par contre, chez les lymphocytes non co-stimulés, le PAF module l'expression des IL-2R et cette modulation pourrait expliquer l'augmentation de prolifération observée après 72 heures

The Potential Impact of Blockchain Technology on Audit Practice

In today’s debate about the disruptive effect of Blockchain, audit and control professions are not in the spotlight while the characteristics of the technology (transparency, traceability and integration of rules and procedures in the technology itself) combined with current technical developments, process and service innovation, applications such as smart contracts and publicly-held registers, have the potential to significantly change audit and control activities. In this context, we conducted a study based on the grounded theory to understand how auditors in Switzerland anticipate the impacts of Blockchain on their daily activities. Based on the findings, three hypotheses have emerged. First, the potential disruptive effect of the technology on the profession is not anticipated, particularly by smaller audit firms. Second, the profession might go through a paradigm shift in two ways: become more IT than accounting oriented and become more forward than backward-looking. Lastly, the profile of the auditors will change

New platinum(II) complexes conjugate at position 7α of 17β-acetyl-testosterone as new combi-molecules against prostate cancer : design, synthesis, structure-activity relationships and biological evaluation

Prostate cancer is a major public health problem worldwide and, more specifically, new treatments for hormone-refractory cancers are highly sought by several research groups. Although platinum(II)-based chemotherapy and other strategies grow in interest to treat castration-resistant prostate cancer (CRPC), they still exhibit modest activity on CRPC and overall patient survival. In this study, we designed and prepared new combi-molecules using 17β-acetyl-testosterone and amino acid platinum(II) complexes linked at the position 7α to target and to improve the antiproliferative activity of platinum(II)-based chemotherapy on prostate cancer cells. Twelve chemical intermediates and six new combi-molecules were prepared and characterized. Structure-activity relationships studies show that the platinum complex moiety is essential for an optimal cytocidal activity. Moreover, stereochemistry of the amino acid involved in the platinum complexes had only minor effects on the antiproliferative activity whereas pyridinyl (10a and b) and thiazolyl (10f) complexes exhibited the highest cytocidal activities that are significantly superior to that of cisplatin used as control on human prostate adenocarcinoma LNCaP (AR+), PC3 (AR-) and DU145 (AR-). Compounds 10a, b and f arrested the cell cycle progression in S-phase and induced double strand breaks as confirmed by the phosphorylation of histone H2AX into γH2AX. Compounds 10a and f showed 33 and 30% inhibition, respectively of the growth of HT-1080 tumors grafted onto chick chorioallantoic membranes. Finally, compounds 10a and 10f exhibited low toxicity on the chick embryos (18 and 21% of death, respectively), indicating that these new combi-molecules might be a promising new class of anticancer agents for prostate cancer

Structural and antimicrobial properties of human pre-elafin/trappin-2 and derived peptides against Pseudomonas aeruginosa

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>Pre-elafin/trappin-2 is a human innate defense molecule initially described as a potent inhibitor of neutrophil elastase. The full-length protein as well as the N-terminal "cementoin" and C-terminal "elafin" domains were also shown to possess broad antimicrobial activity, namely against the opportunistic pathogen <it>P. aeruginosa</it>. The mode of action of these peptides has, however, yet to be fully elucidated. Both domains of pre-elafin/trappin-2 are polycationic, but only the structure of the elafin domain is currently known. The aim of the present study was to determine the secondary structures of the cementoin domain and to characterize the antibacterial properties of these peptides against <it>P. aeruginosa</it>.</p> <p>Results</p> <p>We show here that the cementoin domain adopts an α-helical conformation both by circular dichroism and nuclear magnetic resonance analyses in the presence of membrane mimetics, a characteristic shared with a large number of linear polycationic antimicrobial peptides. However, pre-elafin/trappin-2 and its domains display only weak lytic properties, as assessed by scanning electron micrography, outer and inner membrane depolarization studies with <it>P. aeruginosa </it>and leakage of liposome-entrapped calcein. Confocal microscopy of fluorescein-labeled pre-elafin/trappin-2 suggests that this protein possesses the ability to translocate across membranes. This correlates with the finding that pre-elafin/trappin-2 and elafin bind to DNA <it>in vitro </it>and attenuate the expression of some <it>P. aeruginosa </it>virulence factors, namely the biofilm formation and the secretion of pyoverdine.</p> <p>Conclusions</p> <p>The N-terminal cementoin domain adopts α-helical secondary structures in a membrane mimetic environment, which is common in antimicrobial peptides. However, unlike numerous linear polycationic antimicrobial peptides, membrane disruption does not appear to be the main function of either cementoin, elafin or full-length pre-elafin/trappin-2 against <it>P. aeruginosa</it>. Our results rather suggest that pre-elafin/trappin-2 and elafin, but not cementoin, possess the ability to modulate the expression of some <it>P.aeruginosa </it>virulence factors, possibly through acting on intracellular targets.</p