A novel method using nuclear magnetic resonance for plasma protein binding assessment in drug discovery programs.

A new methodology based on Nuclear Magnetic Resonance (NMR) was developed to determine plasma protein binding (PPB) of drug candidates in drug discovery programs. A strong correlation was found between the attenuation of NMR signals of diverse drugs in the presence of different plasma concentrations and their fraction bound (f b ) reported in the literature. Based on these results, a protocol for a rapid calculation of f b of small molecules was established. The advantage of using plasma instead of purified recombinant proteins and the possibility of pool analysis to increase throughput were also evaluated. This novel methodology proved to be very versatile, cost-effective, fast and suitable for automation. As a plus, it contemporarily provides a quality check and solubility of the compound

ANTOLOGÍA DE TEXTOS PARA LA UNIDAD DE APRENDIZAJE: ESTUDIOS FUNCIONALISTAS DE LA COMUNICACIÓN

ANTOLOGÍ

Establishment of an in Vitro Human Blood-Brain Barrier Model Derived from Induced Pluripotent Stem Cells and Comparison to a Porcine Cell-Based System

The blood-brain barrier (BBB) is responsible for the homeostasis between the cerebral vasculature and the brain and it has a key role in regulating the influx and efflux of substances, in healthy and diseased states. Stem cell technology offers the opportunity to use human brain-specific cells to establish in vitro BBB models. Here, we describe the establishment of a human BBB model in a two-dimensional monolayer culture, derived from human induced pluripotent stem cells (hiPSCs). This model was characterized by a transendothelial electrical resistance (TEER) higher than 2000 Ω∙cm2 and associated with negligible paracellular transport. The hiPSC-derived BBB model maintained the functionality of major endothelial transporter proteins and receptors. Some proprietary molecules from our central nervous system (CNS) programs were evaluated revealing comparable permeability in the human model and in the model from primary porcine brain endothelial cells (PBECs)

Synthesis and Biological Evaluation of RGD–Cryptophycin Conjugates for Targeted Drug Delivery

Borbély AN, Figueras Agustí E, Martins A, et al. Synthesis and Biological Evaluation of RGD–Cryptophycin Conjugates for Targeted Drug Delivery. Pharmaceutics. 2019;11(4): 151.Cryptophycins are potent tubulin polymerization inhibitors with picomolar antiproliferative potency in vitro and activity against multidrug-resistant (MDR) cancer cells. Because of neurotoxic side effects and limited efficacy in vivo, cryptophycin-52 failed as a clinical candidate in cancer treatment. However, this class of compounds has emerged as attractive payloads for tumor-targeting applications. In this study, cryptophycin was conjugated to the cyclopeptide c(RGDfK), targeting integrin αvβ3, across the protease-cleavable Val-Cit linker and two different self-immolative spacers. Plasma metabolic stability studies in vitro showed that our selected payload displays an improved stability compared to the parent compound, while the stability of the conjugates is strongly influenced by the self-immolative moiety. Cathepsin B cleavage assays revealed that modifications in the linker lead to different drug release profiles. Antiproliferative effects of Arg-Gly-Asp (RGD)–cryptophycin conjugates were evaluated on M21 and M21-L human melanoma cell lines. The low nanomolar in vitro activity of the novel conjugates was associated with inferior selectivity for cell lines with different integrin αvβ3 expression levels. To elucidate the drug delivery process, cryptophycin was replaced by an infrared dye and the obtained conjugates were studied by confocal microscop

PRISM (Polarized Radiation Imaging and Spectroscopy Mission): A White Paper on the Ultimate Polarimetric Spectro-Imaging of the Microwave and Far-Infrared Sky

PRISM (Polarized Radiation Imaging and Spectroscopy Mission) was proposed to ESA in response to the Call for White Papers for the definition of the L2 and L3 Missions in the ESA Science Programme. PRISM would have two instruments: (1) an imager with a 3.5m mirror (cooled to 4K for high performance in the far-infrared---that is, in the Wien part of the CMB blackbody spectrum), and (2) an Fourier Transform Spectrometer (FTS) somewhat like the COBE FIRAS instrument but over three orders of magnitude more sensitive. Highlights of the new science (beyond the obvious target of B-modes from gravity waves generated during inflation) made possible by these two instruments working in tandem include: (1) the ultimate galaxy cluster survey gathering 10e6 clusters extending to large redshift and measuring their peculiar velocities and temperatures (through the kSZ effect and relativistic corrections to the classic y-distortion spectrum, respectively) (2) a detailed investigation into the nature of the cosmic infrared background (CIB) consisting of at present unresolved dusty high-z galaxies, where most of the star formation in the universe took place, (3) searching for distortions from the perfect CMB blackbody spectrum, which will probe a large number of otherwise inaccessible effects (e.g., energy release through decaying dark matter, the primordial power spectrum on very small scales where measurements today are impossible due to erasure from Silk damping and contamination from non-linear cascading of power from larger length scales). These are but a few of the highlights of the new science that will be made possible with PRISM.Comment: 20 pages Late

Sobre la biotransformación de 24-metilencolesterol a withanólidos en Acnistus breviflorus : Nuevos withanólidos de Jaborosa bergii, Jaborosa leucotricha y Jaborosa odonelliana

El objetivo del presente trabajo fue por una lado comprobar laintervención de 24-metilencolesterol como precursor de withanólidosen Acnistus breviflorus y mediante experimentos de doblemarcación con este trazador isotópicamente marcado con 3H y 14Cdeterminar si la cadena lateral del mismo hasta carbono 24 seconservaba en su camino a withanólidos. Para llevar a cabo esteestudio se requería sintetizar al mencionado esterol marcado con 14C en carbono 24 y con 3H en alguna posición del núcleoesteroidal no modificable en su conversión a withanólidos. Por otra parte se tuvo como objetivo el aislamiento y elucidaciónestructural de withanólidos de tres especies del género Jaborosa dado que el aporte de nuevas estructuras permite en muchoscasos la postulación de rutas biosintéticas que involucran aesos compuestos como posibles intermediarios, contribuyendo ademasa la taxonomía del genero. Los temas desarrollados en esta tesis fueron: 1- Introducción. En este capítulo se dan ejemplos de los principalessistemas de sustitución encontrados en los withanólidos deesqueleto esteroidal no modificado y se describen además otroscompuestos agrupados también bajo el nombre genérico de witha—nólidos cuyas caracteristicas comunes son un esqueleto básico,modificado o no, del tipo ergostano y distintos grados de oxidaciónen los carbonos 1, 22 y 26. Se mencionan, además, las propiedadesbiológicas de algunos withanólidos y se resumen los antecedentesbiosínteticos relacionados con la intervención de distintos esterolesen la biosíntesis de estos compuestos así como las experienciasrelacionadas a la formación de la cadena lateral de losmismos. 2- Nithanólidos en Jaborosa bergii, Jaborosa leucorricha y Jaborosa odonelliana. En primer lugar se hace una breve referenciaa los métodos utilizados anteriormente en la separación dewithanólidos. Luego se describe el aislamiento y elucidaciónestructural de estos compuestos de las tres especies mencionadas. Apartir de Jaborosa bergii fueron aislados y caracterizadospor metodos químicos y espectroscópicos 5 nuevos withanólidos detipo 24,25-epoxilactoles. Los mismos poseían una estructura 14β,17βhidroxilada no descripta anteriormente en la literatura de esteroides. Por otro lado se analizó el comportamiento por CLAR de loswithanólidos mayoritarios aislados de esta especie y se realizó unestudio de la conformación de la cadena lateral de dos de estoscompuestos comparando los resultados obtenidos con los valores deconstantes de acoplamiento medidas experimentalmente. De la parte aérea de Jaborosa leucotricha se aislaron doswithanólidos, uno de los cuales se identificó comojaborosalactona L (aislado anteriormente por Giordano y col.) y otro que se caracterizócomo el 19-hidroxi-2,3-dehidroderivado del anterior, resultandoel primer withanólido natural 19-hidroxilado. Se estudiótambién, por primera vez, el extracto de los frutos de esta especiedel cual se aisló jaborosalactona L y mediante el programa computacionalanteriormente mencionado se analizó la conformación de lacadena lateral del withanólido nuevo aislado. Apartir de Jaborosa odonelliana se aisló y caracterizó pormétodos químicos, espectroscópicos y de difracción de rayos X unwithanólido de estructura novedosa que resultó el primer withanólidonatural de tipo espiránico. 3- Sintesis de 24-metilencolesterol [24-14C] y [7-3H]. Sedesarrolló un camino de síntesis de 24-metilencolesterol [24-14C]a partir de 20β-carboxaldehídopregn-4-en-3-ona (61) comercial. Lamarcación isotópica se introdujo a partir de bromoacetato de etilo [1-14C] obteniéndose un rendimiento radioquimico total de 47%. Lasecuencia descripta permite no sólo obtener el esterol mencionadosino que provee un método eficiente de síntesis de ácido 3β-hidroxicolenico [24-14C] y de acetato de 24-cetocolesterol [24-14C]. Resultaron especialmente exitosas las reacciones de obtenciónde 3-oxocola-4,22-dien-24-oato de etilo mediante una reacción de Wittig entre 61 carbetoximetilentrifenilfosforano en acetonitrilo,la reacción de obtención de acetato de 24-cetocolesterol apartir del cloruro del ácido 3β-acetoxicolenico y un reactivo organocadmicode tipo "ate-complex" y la inserción de un grupo metilenoen condiciones de no enolización para la obtención de 24-meti1encolesterol. En lo referente a la obtención del esterol [7-3H] resultóespecialmente interesante la introducción del tritio en posición 7por reacción del acetato de 7-bromo-24-cetocolesterol con un cianoborohidrurode sodio modificado con cloruro de zinc. 4- Estudios de biosíntesis de withanólidos. Se confirmó laexistencia de la ruta alternativa encontrada en la biosíntesis dewithanólidos en Acnistus breviflorus mediante el aislamiento delcarbono 26 de jaborosalactona A marcada, biosintetizada a partir demevalonolactona [2-14C]. El carbono 26 se aisló como benzofenonaa partir de 84 y como ácido benzoico a partir de 83. Se comprobóla intervención de 24-metilencolesterol como precursor de withanólidosen Acnistus breviflorus mediante experiencias de incorporacióndel esterol marcado con 14C en la posición 24. Se realizaronexperimentos de doble marcación con este precursor marcado con 3H en la posición 7 y con l4C en la posición 24 (3H/14C 0,7) observándose que los withanólidos y el 24-metilencolesterolaislados de las hojas inoculadas presentaban la misma relación 3H/14C que el esterol precursor. De esta forma se pudo establecerque la cadena lateral de 24-metilencolesterol hasta carbono 24 no se pierde en su biotransformación a withanólidos. 5- Parte experimental. Se describe la parte experimental de lalabor realizada que incluye los datos numéricos de los espectros delos compuestos descriptos y no incluídos en tablas.Fil: Monteagudo, Edith Sandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Caracterización de pacientes adultos con COVID-19 ingresados en Unidad de Cuidados Intensivos. Cienfuegos, enero-febrero de 2022

Introducción: el alza de infecciones por la variante Ómicron de la COVID-19 ha constituido un reto para los servicios de salud de Cienfuegos.Objetivo: caracterizar clínicamente a los pacientes ingresados en la Unidad de Cuidados Intensivos especializada en COVID-19 del Hospital General Universitario de Cienfuegos, en el período de enero-febrero de 2022.Material y métodos: se llevó a cabo un estudio descriptivo de corte transversal. La población estudiada fue de 50 pacientes, reportados de graves o críticos, y positivos al test de antígeno y/o a la prueba de reacción en cadena de la polimerasa. Las principales variables fueron edad, sexo, antecedentes patológicos, síntomas iniciales, impresión diagnóstica, complicaciones, necesidad de ventilación mecánica, estadía y egreso. Para el análisis estadístico se utilizaron Microsoft Excel y SPSS versión 26.Resultados: se evidenció una edad promedio de 70 años, un predominio del sexo femenino (26 casos, 52,0%) y de los individuos con antecedentes patológicos personales (49, 98,0%), fundamentalmente hipertensión arterial (32, 64,0%). Los síntomas más comunes fueron la tos (76,0%) y la fiebre (50,0%). La complicación más importante fue la neumonía (50,0%), un 28,0% de los pacientes recibieron ventilación mecánica y 21 fallecieron.Conclusiones: en la población estudiada predominó la edad avanzada y la presencia de comorbilidades relacionadas a enfermedades no transmisibles, lo cual pudo influir en la alta letalidad. Los síntomas iniciales fueron los típicos de la enfermedad. La complicación más importante fue la neumonía, la cual se correspondió con el elevado porcentaje de enfermos que recibieron ventilación mecánica y que fallecieron

Experiencias terapéuticas en la uveítis intermedia Therapeutical experiences in intermediate uveitis

Se realiza el estudio de 41 pacientes portadores de uveítis intermedia donde se definen aspectos de su ubicación anatómica, cuadro clínico y complicaciones como las opacidades vítreas, cataratas, desprendimiento de retina y otras. El predominio del sexo femenino y la edad relativamente joven de los afectados orienta a profundizar en las investigaciones y la terapéutica de sus complicaciones.Forty-one patients with intermediate uveitis are studied to define aspects of anatomical location, clinical picture and complications such as vitrous opacities, cataracts, retinal detachment and others. The predominance of females and relatively young persons among patients indicates that we must delve into the study and treatment of the complications of this disease