Functional analysis of human enhancers using the zebrafish embryo

In the post-genomic era the availability of genome-wide datasets has revealed an unexpected complexity of transcriptional regulation. In this context, where most enhancer predictions are based on computational analyses, functional validations are lacking. This thesis investigated the utility of the transgenic zebrafish embryo as an in vivo vertebrate model to study the function of candidate human enhancers, and detect subtle changes in enhancer function caused by disease-associated variants. Our functional validations indicated that despite the evolutionary distance between human and fish, 60% of the conserved enhancers predicted by a combination of chromatin signatures, TF binding events and bidirectional transcription, lead to reporter expression that recapitulates the patterns of either zebrafish or human genes. To improve the reliability of zebrafish transgenesis, a targeted integration system mediated by PhiC31 integrase was validated for enhancer testing. I demonstrated that this method overcomes position effect variation commonly found in transposon-based assays. However, enhancer-driven expression could not be detected when I attempted to quantitate TCF7L2-associated enhancer variants, indicating the need for further studies to understand the limitations of the zebrafish model. Taken together, my results provide strong support for zebrafish as a valuable in vivo model to study the function of mammalian transcriptional regulatory elements

The sport as a strategic tool in the construction of the Canal + Spain brand

La identidad de una institución o empresa constituye la base argumental sobre la que articula su actividad y pretende ser percibida por su público, un objetivo para el que resulta imprescindible la construcción de una imagen de marca. En esta comunicación se describe y analiza cómo se concibió el posicionamiento y la imagen de marca de Canal + España desde su lanzamiento en el mercado televisivo en 1990, y cómo el contenido deportivo se articuló desde el principio como uno de los elementos básicos y diferenciales en la consolidación de esa imagen de marca.The identity of an institution or company is the based to its activity and to the perception by the public, a purpose for which it is essential the building a brand image. This communication describes and analyzes how the positioning and branding of Canal + Spain since its launch in the television market at 1990 was conceived, and how the sports were articulated early on as one of the differential and decisive elements in the consolidation of this brand

Nuevas estrategias terapéuticas en diabetes mellitus tipo 1

El principal determinante del riesgo de complicaciones derivadas de la diabetes mellitus tipo 1 se debe a los altos niveles de glucosa en sangre mantenidos durante largo tiempo. Para conseguir un beneficio terapéutico en pacientes con diabetes mellitus es necesario desarrollar tratamientos que permitan de manera segura, efectiva y estable mantener la normoglucemia. Lamentablemente, el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 1 mediante el aporte exógeno de insulina no es capaz de conseguir niveles estables de glucosa en sangre, de manera que con frecuencia se producen casos de severa hipoglucemia o hiperglucemia. Hasta la fecha la única solución para reestablecer de manera permanente la normoglucemia se consigue mediante el trasplante de páncreas o de islotes pancreáticos. Sin embargo, a medida que se incrementa el número de centros especializados en el trasplante de islotes, mayor es la necesidad de islotes para su trasplante. Así pues, el estudio de nuevas fuentes de células productoras de insulina así como de nuevos tratamientos que permitan preservar o incluso aumentar la masa de células beta en los pacientes con diabetes mellitus representa un objetivo de primera necesidad en este campo. En este sentido, en la última década ha habido un avance significativo en el campo de la biología de las células madre. Sin embargo, la identificación de células apropiadas para la generación de nuevas células beta, además del desarrollo de técnicas para la caracterización de estas células, así como de ensayos y modelos animales apropiados para probar su capacidad de diferenciación tanto in vitro como in vivo son de vital importancia para la puesta en marcha de nuevas estrategias terapéuticas basadas en la aplicación de las células madre para el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 1

Cálculo, diseño y optimización de la estructura portante sustentadora en una instalación de cable esquí

En este trabajo se ha realizado el cálculo y diseño de la estructura portante de un Cable esquí. Se ha establecido la configuración óptima a efectos de amplitud de zona practicable y minimización de tensiones en la estructura. El proyecto incluye el cálculo y diseño de las pilones con sus respectivas zapatas, anclajes y tirantes además del diseño de elementos auxiliares como el contrapeso

Pancreas agenesis mutations disrupt a lead enhancer controlling a developmental enhancer cluster.

Sequence variants in cis-acting enhancers are important for polygenic disease, but their role in Mendelian disease is poorly understood. Redundancy between enhancers that regulate the same gene is thought to mitigate the pathogenic impact of enhancer mutations. Recent findings, however, have shown that loss-of-function mutations in a single enhancer near PTF1A cause pancreas agenesis and neonatal diabetes. Using mouse and human genetic models, we show that this enhancer activates an entire PTF1A enhancer cluster in early pancreatic multipotent progenitors. This leading role, therefore, precludes functional redundancy. We further demonstrate that transient expression of PTF1A in multipotent progenitors sets in motion an epigenetic cascade that is required for duct and endocrine differentiation. These findings shed insights into the genome regulatory mechanisms that drive pancreas differentiation. Furthermore, they reveal an enhancer that acts as a regulatory master key and is thus vulnerable to pathogenic loss-of-function mutations

Ultra-processed foods and type-2 diabetes risk in the sun project: A prospective cohort study

The association between ultra-processed foods (UPF) consumption and the risk of type 2 diabetes (T2D) has not been much explored. We aimed to evaluate the association between consumption of UPF and the incidence of T2D

Factores de riesgo cardiovascular en pacientes con cáncer de mama ¿Existe correlación con las referencias internacionales?

Introducción: el cáncer y las enfermedades cardiovasculares son dos entidades patológicas separadas. Sin embargo, poseen varias similitudes y posibles interacciones, que incluyen varios factores de riesgo similares. Objetivo: determinar y correlacionar los factores de riesgo cardiovascular en pacientes con cáncer de mama. Metodología: estudio longitudinal, prospectivo. Población: pacientes con diagnóstico de cáncer de mama que consultan en el Hospital Nacional de Itauguá y en el Instituto Nacional del Cáncer, Paraguay, entre marzo y agosto 2017. Se recogieron las variables relacionadas con las características basales de las pacientes y factores de riesgo cardiovascular. Resultados: se incluyeron 170 pacientes, con edad media 50±13 años. Los factores de riesgo cardiovascular detectados fueron diabetes mellitus 14,7%, hipertensión arterial 51,8%, tabaquismo 3,5%, sedentarismo 38,3%, sobrepeso/obesidad 70%. La mediana de colesterol LDL fue 131,5 mg/dL. El 26,5% tenían con score de Framingham con riesgo elevado y moderado. En la correlación por método de Spearman entre score de riesgo de Framingham y presión arterial diastólica se obtuvo significancia estadística tanto con la presión arterial en brazo (r 0,244, p 0,001) como en miembro inferior (r 0,27, p 0,0001). En la correlación entre IMC y presión arterial diastólica se obtuvo r 0,15 (p 0,03). Conclusión: se halló correlación estadística entre valores elevados de presión arterial diastólica con obesidad/sobrepeso, así como con riesgo cardiovascular moderado a alto. Se debe considerar la hipertensión arterial diastólica como factor de riesgo cardiovascular en pacientes con cáncer de mama

SIRT3-mediated inhibition of FOS through histone H3 deacetylation prevents cardiac fibrosis and inflammation

Sirtuin 3 (SIRT3) is a deacetylase that modulates proteins that control metabolism and protects against oxidative stress. Modulation of SIRT3 activity has been proposed as a promising therapeutic target for ameliorating metabolic diseases and associated cardiac disturbances. In this study, we investigated the role of SIRT3 in inflammation and fibrosis in the heart using male mice with constitutive and systemic deletion of SIRT3 and human cardiac AC16 cells. SIRT3 knockout mice showed cardiac fibrosis and inflammation that was characterized by augmented transcriptional activity of AP-1. Consistent with this, SIRT3 overexpression in human and neonatal rat cardiomyocytes partially prevented the inflammatory and profibrotic response induced by TNF-?. Notably, these effects were associated with a decrease in the mRNA and protein levels of FOS and the DNA-binding activity of AP-1. Finally, we demonstrated that SIRT3 inhibits FOS transcription through specific histone H3 lysine K27 deacetylation at its promoter. These findings highlight an important function of SIRT3 in mediating the often intricate profibrotic and proinflammatory responses of cardiac cells through the modulation of the FOS/AP-1 pathway. Since fibrosis and inflammation are crucial in the progression of cardiac hypertrophy, heart failure, and diabetic cardiomyopathy, our results point to SIRT3 as a potential target for treating these diseases.ACKNOWLEDGEMENTS: This work was supported by funds from the Spanish Ministry of Economy and Competitiveness (SAF2015-64146-R and RTI2018-093999-B-100) and the “Fundació La Marató de TV3” to M.V.-C., and from the Instituto de Salud Carlos III (FIS PI15/01224) to J.F.N. CIBER de Diabetes y Enfermedades Metabólicas Asociadas (CIBERDEM) and CIBER de Fisiopatología de la Obesidad y Nutrición (CIBEROBN) are initiatives of the Instituto de Salud Carlos III - Spanish Ministry of Economy and Competitiveness. The pcDNA4- myc-HisA-SIRT3 and pcDNA4-myc-HisA-H248Y-SIRT3 plasmids were a gift from Toren Finkel (Center for Molecular Medicine, National Heart, Lung and Blood Institute, NIH, Bethesda, MD, USA). We thank the University of Barcelona’s Language Advisory Service for their assistance