Social networks, language learning and language school student sojourners: a qualitative study

This thesis investigates individual language school student sojourners’ learning experiences in the UK. It takes into account the importance of learners learning through interaction with others in the target language community and recognises how learners’ social networks affect their language learning and use. There are many studies about students who study abroad for academic purposes and immigrant learners, but not many relating to individual language learners in private language schools. In order to fill this gap, this study focused on individual language school learners. With the intention of understanding how the social networks and language learning interact over time as part of their sojourner experience, I utilised different theoretical frameworks that have been applied to other groups of language learners and concluded that these frameworks are also applicable to private language school students. I recognised that in order to understand my participants’ learning experiences I needed to interact with them and also observe how they interacted with their social world. Therefore, formal interviews (semi-structured) and informal interviews (informal group meeting or chat) were the main methods for my study together with observation of interaction in various situations. This study identified the expectations that learners had with regard to the target language community, host families and native speakers’ attitudes towards foreign students, and the realisation that these expectations were higher than what was actually encountered. It also identified the steps the individual language learners took to overcome these disappointments and how they reconstructed their relationships with the target language and community respectively. In contrast with many previous studies which only focused on learning from native speakers, my study recognised that learners sometimes can have more interpersonal contact with their fellow students than native speakers. And consequently they benefit more from these contacts, in terms of language learning, than from native speakers. This thesis also helps language learners and language educators recognise basic theoretical frameworks which could help them evaluate the benefits and problems related to learning through interpersonal contact. And with this understanding learners will be able to facilitate their autonomous learning in the target language community

Caracterização molecular e imunológica da nucleosídeo trifosfato difosfohidrolase (NTPDASE 1) de Leishmania amazonensis e de seu domínio B

By in silico analysis, an antigenic conserved B domain was previously identified within nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (NTPDases) of plants and parasites. The r-potDomB, a recombinant belonging to the conserved B domain (r78- 117) from the potato apyrase, was obtained by heterologous expression, and its reactivity with polyclonal anti-potato apyrase antibodies confirmed the existence of epitopes which induce humoral immune response in mammalian. The cloning of the gene from the Leishmania amazonensisNTPDase 1 (LamNTPDase1; NCBI AFJ22627.1) and in silico analysis reinforced the hypothesis of B-domain conservation within NTPDases. The r-potDomB, synthetic peptides LbB1LJ and LbB2LJ derived from the B-domain from LeishmaniaNTPDase 1, and the antibodies raised against these biomolecules, were used as molecular tools for specific studies of the L. amazonensisNTPDase 1 and leishmaniasis. By Western blots, theNTPDase 1 was identified as bands of 48 and 63 kDa in membrane, microsomal and flagellar fractions of promastigotes. By ultrastructural immunocytochemical, the antibodies localized the NTPDase 1 at the surface of plasma membrane, nucleus, mitochondria and kinetoplast, at flagellar pocket and flagellum, confirming its widespread distribution in this parasite. In silico analysis suggested possible post-translational modifications of the NTPDase 1, including its conjugation with SUMO protein. The polypeptides of 48 and 63 kDa and one co-migrant of 12 kDa were isolated of promastigotes by non-denaturing gel electrophoresis. By Western blots and mass spectrometry, the identity of NTPDase1 in the polypeptides of 48 e 63 kDa was confirmed. By mass spectrometry, the polypeptide of 12 kDa was identified belonging to the SUMO protein family and, also, added to the polypeptide of 63 kDa. The polypeptides of 63 and 12 kDa, but not 48 kDa, were recognized in Western blots by immune serum anti-SUMO1, suggesting binding between NTPDase 1 and SUMO, a modification described for the first time among members of the NTPDase family. BALB/c mice were infected with promastigotes, and the antibodies from these animals recognized the pure NTPDase, but not SUMO, confirming its antigenicity. During disease progression, high reactivity between r-potDomB, LbB1LJ or LbB2LJ and IgG2a antibodies of the promastigote-infected mice was observed at 40 days post-infection, revealing both the B-domain antigenicity and its ability for induce the production of this subtype in early disease stages. The IgG1 reactivity was significantly higher at 90-120 days post-infection, coinciding with the most active stage of the disease, suggesting participation of the domain in immuneregulatory events. The r-potDomB induced delayed type-hypersensitivity reaction in Swiss mice, a cellular immune response, with a concomitant increase in the levels of IgG2a and IFN-y. The r-potDomB, in the absence of adjuvant, used in pre-immunization of amastigotes-infected Swiss mice, stimulated the production of IgG2a and IFN-y, and promoted partial protection against leishmaniasis progression, as observed by measuring of footpad swelling and histopathological analysis. The results stimulate biotechnological use of the r-potDomB, or derivatives of this biomolecule, in formulations and experimental protocols of immunotherapy and/or vaccination against leishmaniasis.Por análises in silico, um domínio B conservado e antigênico foi previamente identificado em nucleosídeo trifosfato difosfohidrolases (NTPDases) de plantas e parasitos. O r-potDomB, um recombinante derivado do domínio B (r78-117) da apirase de batata, foi obtido por expressão heteróloga, e a sua reatividade com anticorpos policlonaisanti-apirase de batata confirmaram a existência de epitopos indutores de resposta imune humoral em mamíferos. A clonagem do gene da NTPDase1 de Leishmania amazonensis (LamNTPDase1; NCBI: AFJ22627.1) e as análises in silico reforçaram a hipótese de conservação do domínio B de NTPDases. O r-potDomB, os peptídeos sintéticos LbB1LJ e LbB2LJ derivados do domínio B de NTPDase1 de Leishmania, e os anticorpos produzidos contra estas biomoléculas, foram usados como ferramentas moleculares para estudos específicos da NTPDase1 de L. amazonensis e da leishmaniose. Por “Western blots”, a NTPDase1 foi identificada como bandas de 48 e 63 kDa em frações de membrana, microssomal e flagelo de promastigotas. Por análise imunocitoquímicaultraestrutural, os anticorpos localizaram a NTPDase1 na superfície de membrana plasmática, núcleo, mitocôndria e cinetoplasto, bolsa flagelar e flagelo, confirmando sua ampla distribuição neste parasito. Análises in silico sugeriram as possíveis modificações pós-traducionais da NTPDase1, incluindo a sua conjugação com proteína SUMO. Os polipeptídeos de 48 e 63 kDa e um co-migrante de 12 kDa foram isolados de promastigotas por eletroforese em gel não-desnaturante. Por “Western blots” e espectrometria de massas, a identidade da NTPDase1 foi confirmada nospolipeptídeos de 48 e 63 kDa. Por espectrometria de massas, o polipeptídeo de 12 kDa foi identificado como pertencente à família de proteínas SUMO e, também, adicionado aopolipeptídeo de 63 kDa. Os polipeptídeos de 63 kDa e 12 kDa, mas não o de 48 kDa, foram reconhecidos em “Western blots” pelo soro imune anti- SUMO1, sugerindo a ligação entre NTPDase1 e SUMO, uma modificação descrita pela primeira vez entre os membros da família das NTPDases. Camundongos BALB/c foram infectados com promastigotas, e os anticorpos destes animais reconheceram a NTPDase1 pura, mas não SUMO, confirmando sua antigenicidade. Durante a progressão da doença, alta reatividade entre r-potDomB, LbB1LJ ou LbB2LJ e anticorpos IgG2a dos camundongos infectados foi observada aos 40 dias pós-infecção, revelando a antigenicidade do domínio B e a sua habilidade de induzir a produção deste subtipo nos estágios iniciais da doença. A reatividade de IgG1 foi significativamente maior aos 90-120 dias pós-infecção, coincidindo com o estágio mais ativo da doença, sugerindo participação do domínio em eventos imunoregulatórios. O r-potDomB induziu reação de hipersensibilidade tardia em camundongos Suíços, uma resposta imune celular, com elevação concomitante dos níveis de IgG2a e IFN-y. O r-potDomB, na ausência de adjuvante, usado na préimunização de camungondos Suíços infectados com amastigotas, estimulou a produção de IgG2a e IFN-y, e promoveu proteção parcial contra a progressão da leishmaniose como observado por medida de edema de patas e análises histopatológicas.Os resultados estimulam o aproveitamento biotecnológico do rpotDomB, ou derivados desta biomolécula, em formulações e em protocolos experimentais de imunoterapia e/ou vacinação contra leishmanioses.FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerai

Galhas em Calliandra brevipes Benth (Fabaceae: Mimosoidae): uma abordagem metabólica em um novo modelo vegetal co-habitado por distintos himenópteros galhadores

Calliandra brevipes presents globose (GG) and fusiform galls (GF) induced by Tanaostigmodes mecanga and T. ringueleti, respectively. The seasonal changes in phenolic content of both galls, and in non-galled stem and leaf were analyzed over one year. The phenolic variation profile of galled or non-galled tissues of C. brevipes was similar during the analyzed period, but it is strongly influenced by the variations in the pluviometric levels increasing during hydric stress. The phenolic levels were in similar amounts between the two galls and, in the period of drastic changes in pluviometric levels, the alterations were significantly higher in non-galled tissues when compared to the galled tissues, suggesting that the two distinct species of Tanaostigmodes manipulate the phenolic level in a similar way. Therefore, the alterations in phenolic contents could be primarily associated to the pluviometric changes, constituting a direct defense against the hydric stress. The phytochemical screening showed the presence of flavonoids, coumarins and tannins in galled and non-galled samples. Saponins were found only in non-galled samples, suggesting that the galled tissues are less toxic to the herbivory. Triterpenoids were detected in GG, but not in GF, suggesting that each inducer explore in a different way the plant metabolism. In addition, flavonoids content and antioxidant activity were differentiated in both galls, being significantly higher in fusiform gall. Chromatographic and densitometric analyses showed that GG and GF present sucrose, glucose and fructose contents 1.5-3 and 2 times higher, respectively than those found in non galled tissue. The secondary metabolites and carbohydrate analyses evidenced that both galls tissues are less toxic and constitute a better nutrient source for the herbivory than the non-galled tissues. Protein fractionation and densitometric analysis showed common polypeptides to both galls (80, 69, 61, 52, 32 kDa) possibly essentials for their basic neoformations, and specific polypeptides in either globose (globose: 97, 75, 34 kDa) or fusiform gall (40, 33 kDa), which could be associated to the different gall morphotypes and their metabolic pathways. Together, the protein, flavonoid and antioxidant analyses showed that each inducer, although closer phylogenetically, manipulate the host by specific pathways in the same plant. Phosphohydrolitic analysis showed that CS equally hydrolyzed either ATP, ADP, UDP or GDP. In GG, the UDP, GDP, and ADP were hydrolyzed approximately 1.5-3 folds higher than that found in CS. AMP hydrolyzes was 10 folds higher in GG confirming that this tissue increase their mechanisms capable of hydrolyzing nucleotides. ADPase and UDPase activities from CS and GG were 10-32% stimulated by 5 mM calcium, and inhibited by the addition of 5 mM EDTA or EGTA (88 to 100%), thus confirming the divalent cation dependence. Little ATPase inhibition by orthovanadate was detected suggesting the presence of a P-type ATPase, while sodium azide, dicyclohexylcarbodiimide, and bafilomycin did not affect significantly the ATPase activity. A band of 75 kDa was recognized by polyclonal anti-potato apyrase antibodies in CS or GG, confirming the presence of an apyrase in Calliandra brevipes. By immunofluorescence microscopy, using anti-potato apyrase antibodies, and by cytochemical techniques, using ADP as substrate, the apyrase was located on the external surface and inside of the nutritive cells that compose the central chamber. The high apyrase activity in globose gall of C. brevipes could be participating in carbohydrate biosynthesis, in the salvage pathway of nucleosides and/or cell proliferation, for the feeding and survival of the insect.Calliandra brevipes apresenta uma galha globosa (GG) e uma fusiforme (GF), induzidas por Tanaostigmodes mecanga e T. ringueleti, respectivamente. As variações sazonais no conteúdo fenólico de ambas as galhas, de caule e folha não galhados (CS e FS, respectivamente) foram analisadas durante 12 meses. O perfil de variação do teor fenólico nos tecidos galhados e não galhados de C. brevipes foi similar ao longo do período analisado, apresentando-se fortemente influenciado pelas variações na precipitação pluviométrica, ocorrendo maior acúmulo fenólico quando o vegetal estava sob estresse hídrico. Os conteúdos fenólicos de ambas as galhas foram similares e, no período de drásticas mudanças na precipitação pluviométrica, estes sofreram alterações significativamente menores do que as sofridas pelos tecidos não galhados, sugerindo que as duas espécies de Tanaostigmodes modulam o conteúdo fenólico no tecido galhado de maneira similar. Assim, notou-se que as alterações no conteúdo fenólico podem estar primariamente associadas às mudanças pluviométricas, constituindo uma defesa direta contra o estresse hídrico. Na triagem de metabólitos secundários, flavonóides, cumarinas e taninos foram detectados em tecidos galhados e não galhados de C. brevipes. Saponinas foram encontradas somente em amostras de tecidos não galhado, mostrando que as galhas apresentam menor toxicidade para o herbívoro. Triterpenóides foram encontrados em GG e esteróides em GF, sugerindo que cada galhador explora diferencialmente o metabolismo do hospedeiro. Adicionalmente, o conteúdo de flavonóides e a atividade antioxidante também estavam diferenciados em ambas as galhas, sendo maiores na galha fusiforme. Na análise cromatográfica e densitométrica de carboidratos, GG e GF apresentaram conteúdos de sacarose, glicose e frutose maiores do que os encontrados em tecidos não galhados, 1,5-3 vezes e 2 vezes, respectivamente. A análise de saponinas e carboidratos evidenciou que ambas as galhas apresentam menor toxicidade e constituem uma fonte mais nutritiva para o herbívoro do que o tecido não galhado. O fracionamento e a análise densitométrica de proteínas, detectou polipeptídeos comuns a ambas as galhas (80, 69, 61, 52, 32 kDa) provavelmente essenciais para a organização básica desta neoformação, bem como específicos a cada uma (galha globosa: 97, 75, 34 kDa; galha fusiforme: 40, 33 kDa) que podem estar associadas aos distintos morfotipos e suas vias metabólicas. Em conjunto, a análise de proteínas, flavonóides e a atividade antioxidante mostram que cada galhador manipula o hospedeiro de maneira peculiar, mesmo quando duas espécies galhadoras filogeneticamente tão próximas parasitam um hospedeiro comum. Quanto à análise fosfohidrolítica, CS hidrolisou igualmente ATP, ADP, UDP ou GDP. Na GG, o UDP, GDP, e ADP foram hidrolisados aproximadamente 1,5-3 vezes mais do que no CS, já o AMP foi 10 vezes mais hidrolisado na GG. Em conjunto, estes dados confirmam que este tecido exacerba os mecanismos capazes de hidrolisar nucleotídeos, possivelmente devido sua maior atividade metabólica. Atividades ADPásica e UDPásica de CS e GG foram 10-32% estimuladas por 5 mM de Ca2+, e inibidas pela adição de 5 mM EDTA ou EGTA (88 a 100%), confirmando a dependência destas atividades à cátions bivalentes. Uma pequena inibição por ortovanadato foi detectada sugerindo a presença de P-ATPases, enquanto azida sódica, DCCD e bafilomicina não inibiram significativamente a atividade ATPásica. Uma apirase de 75 kDa foi identificada em CS e GG de C. brevipes, e provavelmente contribuiu com a atividade fosfohidrolítica observada. Foi constatada a presença de apirase e de atividade ADPásica nas células nutritivas que delineiam a câmara larvar por microscopia de imunofluorescência e citoquímica, respectivamente. A alta atividade apirásica na galha globosa de C. brevipes pode estar associada à biossíntese de carboidratos, recuperação de nucleosídeos e/ou proliferação celular, contribuindo assim, para a nutrição e sobrevivência do galhador.FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerai

Protozoários ciliados ( Protista, Ciliophora ) no conteúdo do rúmen e do retículo de bovinos

Foram registrados os protozoários ciliados do rúmen ocorrentes em bovinos e verificado o comportamento de escape do rúmen ao retículo por ciliados isotriquídeos. Foram analisadas amostras do conteúdo ruminal e do conteúdo do retículo de 20 bovinos submetidos a jejum de no mínimo 12 horas, totalizando 40 amostras. Estas foram fixadas em formalina 18,5% (v/v). Avaliaram-se quantitativamente os seguintes gêneros de ciliados: Charonina Strand, 1928; Isotricha Stein, 1859, Dasytricha Schuberg, 1888, Entodinium Stein, 1859, Eodinium Kofoid & MacLennan 1932, Metadinium Awerinzew & Mutafowa, 1914, Ostracodinium Dogiel, 1927 e Epidinium Crawley, 1923. Houve predominância de organismos do gênero Entodinium que representaram, respectivamente, 43,9% no rúmen e 34,8% no retículo. O maior número dfe ciliados dos gêneros Isotricha e Dasytricha no retículo em relação ao rúmen confirmaram o comportamento de escape ao retículo dos ciliados isotriquídeos em bovinos submetidos ao jejum

Análise de proteínas e da atividade fosfohidrolítica em galha entomógena de uma espécie de leguminosae

Uma galha caulinar típica de Calliandra brevipes é caracterizada por uma estrutura globosa de aproximadamente 15 mm que se desenvolve em resposta a infestação por pequenas vespas, representando uma interação planta-inseto. A galha totalmente formada contém vários tipos de tecidos que são organizados em camadas. Uma camada de células nutritivas delineia a câmara central provendo uma rica origem de metabólitos essenciais ao desenvolvimento dos insetos. A quantidade de proteínas foi quantificada em preparações de tecidos de caule normal e galhado de C. brevipes. A quantidade de proteínas no tecido galhado foi aproximadamente 4 vezes maior do que aquela encontrada em caule normal. As atividades fosfohidrolíticas foram também analisadas e comparadas. As duas preparações degradaram diferentes substratos, mas comparadas àquelas observadas em caule normal. Atividade ATPásica da preparação de galha foi aproximadamente 25% inibida pela adição de ortovanadato de sódio, sugerindo o envolvimento de ATPases do tipo P. Adicionalmente, a atividade ATPásica de tecido galhado foi 31% e 75% inibida por EDTA e EGTA, respectivamente, revelando que esta atividade hidrolítica foi dependente de cálcio. Nós hipotetizamos que a exacerbação da quantidade de proteínas em tecido galhado de C. brevipes, e particularmente a elevação de atividades fosfohidrolíticas, aumentam os mecanismos de proteção e participam em processos metabólicos que permitem a sobrevivência do inseto

Seroprevalence and risk factors of toxoplasmosis in cattle from extensive and semi-intensive rearing systems at Zona da Mata, Minas Gerais state, Southern Brazil

Submitted by sandra infurna ([email protected]) on 2016-07-21T10:47:10Z No. of bitstreams: 1 jose_nicolau_etal_IOC_2013.pdf: 327874 bytes, checksum: 3b4887d6e8257917cc4e8d110a445e3c (MD5)Approved for entry into archive by sandra infurna ([email protected]) on 2016-07-21T11:01:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 jose_nicolau_etal_IOC_2013.pdf: 327874 bytes, checksum: 3b4887d6e8257917cc4e8d110a445e3c (MD5)Made available in DSpace on 2016-07-21T11:01:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 jose_nicolau_etal_IOC_2013.pdf: 327874 bytes, checksum: 3b4887d6e8257917cc4e8d110a445e3c (MD5) Previous issue date: 2013Universidade Federal de Juiz de Fora. Curso de Pós-Graduação em Ciências Biológicas - Biologia e Comportamento Animal. Juiz de Fora, MG, Brasil.Universidade Federal de Juiz de Fora. Departamento de Zoologia. Juiz de Fora, MG, Brasil.Universidade Federal de Juiz de Fora. Departamento de Estatística. Juiz de Fora, MG, Brasil.Universidade Federal de Juiz de Fora. Departamento de Estatística. Juiz de Fora, MG, Brasil.Universidade Federal de Juiz de Fora. Departamento de Bioquímica. Juiz de Fora, MG, Brasil.Universidade Estadual de Londrina. Laboratório de Protozoologia. Londrina, PR, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Toxoplasmose. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Toxoplasmose. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Laboratório de Toxoplasmose. Rio de Janeiro, RJ, Brasil.Concerning the infection of humans by T. gondii, limited efforts have been directed to the elucidation of the role of horizontal transmission between hosts. One of the main routes of transmission from animals to humans occurs through the ingestion of raw or insufficiently cooked meat. However, even though the detection of T. gondii in meat constitutes an important short-term measure, control strategies can only be accomplished by a deeper understanding of the epidemiology of toxoplasmosis. The present study aimed to investigate the seroprevalence of toxoplasmosis in cattle from Zona da Mata, Minas Gerais, Brazil, and to identify associated risk factors, through an epidemiological investigation

An antigenic domain within a catalytically active leishmania infantum nucleoside triphosphate diphosphohydrolase (NTPDase 1) is a target of inhibitory antibodies.

Weidentified a shared B domainwithin nucleoside triphosphate diphosphohydrolases (NTPDases) of plants and parasites. Now, an NTPDase activity not affected by inhibitors of adenylate kinase and ATPases was detected in Leishmania infantum promastigotes. By non-denaturing gel electrophoresis of detergent-homogenized promastigote preparation, an active band hydrolyzing nucleosides di- and triphosphate was visualized and, following SDS-PAGE and silver staining was identified as a single polypeptide of 50 kDa. By Western blots, it was recognized by immune sera raised against potato apyrase (SA), r-pot B domain (SB), a recombinant polypeptide derived fromthe potato apyrase, and LbB1LJ (SC) or LbB2LJ (SD), synthetic peptides derived fromthe Leishmania NTPDase 1, and by serum samples from dogs with visceral leishmaniasis, identifying the antigenic L. infantum NTPDase 1 and, also, its conserved B domain (r83–122). By immunoprecipitation assays andWestern blots, immune sera SA and SB identified the catalytically active NTPDase 1 in promastigote preparation. In addition, the immune sera SB (44%) and SC or SD (87–99%) inhibited its activity, suggesting a direct effect on the B domain. By ELISA, 37%, 45% or 50% of 38 infected dogs were seropositive for r-pot B domain, LbB1LJ and LbB2LJ, respectively, confirming the B domain antigenicity

Purificação da nucleosídeo trifosfato difosfohidrolase 1 (NTPDase 1) antigênica de Leishmania infantum

As NTPDases (nucleosídeo trifosfato difosfohidrolases) são enzimas que hidrolisam nucleosídeos di- e trifosfatados sob ativação de íons bivalentes. Uma atividade NTPDásica foi caracterizada em promastigotas de Leishmania infantum, um protozoário causador de leishmaniose visceral.Neste trabalho, a NTPDase 1 foi purificada de preparação de promastigotas usando como estratégia eletroforese em gel não-desnaturante e os detergentes deoxicolato de sódio e Triton X-100, os quais preservam a atividade fosfohidrolítica desta enzima. Após eletroforese, incubação do gel com ATP e inibidor de ATPases do tipo P permitiu a visualização de uma única banda com depósito branco de fosfato de cálcio. Esta banda ativa foi isolada e por SDS-PAGE e coloração pela prata foi identificada como polipeptídeos de 50 e 47 kDa. Por Western blot, os dois polipeptídeos foram reconhecidos pelo soro imune anti-LbB1LJ, o qual reconhece especificamente a porção N-terminal do domínio B de NTPDases 1 de Leishmania. Por espectrometria de massas, a identidade da NTPDase 1 foi confirmada pela identificação de seis peptídeos trípticos coincidentes com a NTPDase 1 anotada em seu genoma (NCBI gi|134068433), uma cobertura de 19% de sua sequência primária. As atividades ATPásica (555 ± 93 nmol Pi x mg-1 x min-1) e ADPásica (644 ± 38 nmol Pi x mg-1 x min-1) revelaram um índice de purificação de aproximadamente 62 vezes e uma razão de atividade ATPase/ADPase de aproximadamente 1, confirmando a efetividade desta estratégia para o isolamento da NTPDase 1 de promastigotas de L. infantum