39 research outputs found

    Trichomoniasis : are we giving the deserved attention to the most common non-viral sexually transmitted disease worldwide?

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    Etiology: Trichomonas vaginalis is the etiologic agent of trichomo-niasis, the most common non-viral sexually transmitted disease (STD) in the world. Transmission: Trichomoniasis is transmitted by sexual intercourse and transmission via fomites is rare. Epidemiology, incidence and prevalence: The WHO estimates an incidence of 276 million new cases each year and preva-lence of 187 million of infected individuals. However, the infection is not noti-fiable. Pathology/Symptomatology: The T. vaginalis infection results in a vari-ety of clinical manifestations - in most cases the patients are asymptomatic, but some may develop signs typically associated to the disease. Importantly, the main issue concerning trichomoniasis is its relationship with serious health consequences such as cancer, adverse pregnancy outcomes, infertility, and HIV acquisition. Molecular mechanisms of infection: To achieve success in parasitism trichomonads develop a complex process against the host cells that includes dependent- and independent-contact mechanisms. This multi-factorial pathogenesis includes molecules such as soluble factors, secreted proteinases, adhesins, lipophosphoglycan that culminate in cytoadherence and cytotoxicity against the host cells. Treatment and curability: The treat-ment with metronidazole or tinidazole is recommended; however, cure fail-ures remain problematic due to noncompliance, reinfection and/or lack of treatment of sexual partners, inaccurate diagnosis, or drug resistance. There-fore, new therapeutic alternatives are urgently needed. Protection: Strategies for protection including sexual behavior, condom usage, and therapy have not contributed to the decrease on disease prevalence, pointing to the need for innovative approaches. Vaccine development has been hampered by the lack of long-lasting humoral immunity associated to the absence of good animal models

    COMPARISON OF PERMANENT STAINING METHODS FOR THE LABORATORY DIAGNOSIS OF TRICHOMONIASIS

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    Trichomonas vaginalis is the etiologic agent of trichomoniasis, the most common non-viral sexually transmitted disease (STD) in the world. The diagnosis is based on wet mount preparation and direct microscopy on fixed and stained clinical specimens. The aim of this study was to compare the performance of different fixing and staining techniques used in the detection of T. vaginalis in urine. The smears were fixed and submitted to different methods of permanent staining and then, the morphological aspects of the parasites were analyzed and compared. The Papanicolaou staining with ethanol as the fixative solution showed to be the best method of permanent staining. Our data suggest that staining techniques in association with wet mount examination of fresh specimens contribute to increase the sensitivity in the diagnosis of trichomoniasis

    Trichomonicidal and parasite membrane damaging activity of bidesmosic saponins from Manilkara rufula

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    The infection caused by Trichomonas vaginalis is the most common but overlooked nonviral sexually transmitted disease worldwide. Treatment relies on one class of drugs, the 5- nitroimidazoles, but resistance is widespread. New drugs are urgently needed. We reported the effect of crude and purified saponin fractions of Manilkara rufula against Trichomonas vaginalis. The compound responsible for antitrichomonal activity was isolated and identified as an uncommon bidesmosic saponin, Mi-saponin C. This saponin eliminated parasite viability without toxicity against the human vaginal epithelial line (HMVII). In addition, the isolated saponin fraction improved the metronidazole effect against a metronidazole-resistant isolate and dramatically reduced the cytoadherence of T. vaginalis to human cells. Investigation of the mechanism of death showed that the saponin fraction induced the parasite death due to profound membrane damage, inducing a disturbance of intracellular content without nuclear damage. To the best of our knowledge, this is the first report of antitrichomonal activity in the bidesmosic saponins of Manilkara rufula

    Trichomonicidal and parasite membrane damaging activity of bidesmosic saponins from Manilkara rufula

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    The infection caused by Trichomonas vaginalis is the most common but overlooked nonviral sexually transmitted disease worldwide. Treatment relies on one class of drugs, the 5nitroimidazoles, but resistance is widespread. New drugs are urgently needed. We reported the effect of crude and purified saponin fractions of Manilkara rufula against Trichomonas vaginalis. The compound responsible for antitrichomonal activity was isolated and identified as an uncommon bidesmosic saponin, Mi-saponin C. This saponin eliminated parasite viability without toxicity against the human vaginal epithelial line (HMVII). In addition, the isolated saponin fraction improved the metronidazole effect against a metronidazole-resistant isolate and dramatically reduced the cytoadherence of T. vaginalis to human cells. Investigation of the mechanism of death showed that the saponin fraction induced the parasite death due to profound membrane damage, inducing a disturbance of intracellular content without nuclear damage. To the best of our knowledge, this is the first report of antitrichomonal activity in the bidesmosic saponins of Manilkara rufula

    Tolerância do feijoeiro a herbicidas aplicados na cultura da cana-de-açúcar

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    This work was aimed to evaluate the selectivity of main herbicides used in sugar cane crop applied in pre or post emergence conditions to common bean (“Jalo” Group – cultivar “Jalo Precoce”). In pre emergence modality the treatments evaluated consisted of: ametryn (2.500 g ha-1), tebuthiuron (800 g ha-1), [hexazinone + diuron] (237.6 + 842.4 g ha-1), metribuzin (1,440 g ha-1), clomazone (800 g ha-1), isoxaflutole (112.5 g ha-1), sulfentrazone (600 g ha-1), imazapic (105 g ha-1), trifluralin (1,800 g ha-1), S-metolachlor (1,920 g ha-1), and a check without herbicide application. In post emergence modality treatments evaluated were: MSMA (1,440 g ha-1), MSMA + diuron (1,080 + 420 g ha-1), [hexazinone + diuron] (237.6 + 842.4 g ha-1), metribuzin (1,440 g ha-1), ametryn (1,500 g ha-1), [ametryn + trifloxysulfuron sodium] (1,280 + 32.4 g ha-1), halosulfuron (112.5 g ha-1), 2.4-D (1,005 g ha-1) and mesotrione (120 g ha-1) besides a check without herbicide application. Phytointoxication, stand, plant height, wet and dry matter of shoots, number of plants at harvest, height of first pod insertion, and grain yield were evaluated. S-metolachlor, tebuthiuron, trifluralin and clomazone herbicides showed satisfactory selectivity to bean plants cv. Jalo Precoce, when applied in pre-emergence. However, ametryn [hexazinone + diuron], metribuzin, isoxaflutole, sulfentrazone and imazapic were not selective, even in pre-emergence applications. None of tested herbicides showed selectivity conditions for being used in post-emergence in one bean integrated cultivation system (cv. Jalo Precoce) in areas with sugar cane crop production.O trabalho teve como objetivo avaliar a seletividade dos principais herbicidas utilizados na cultura da cana-de-açúcar, aplicados em pré ou pós-emergência, ao feijão-comum (Grupo Jalo – cultivar Jalo Precoce). Na modalidade de pré-emergência os tratamentos avaliados foram: ametryn (2.500 g ha-1), tebuthiuron (800 g ha-1), [hexazinone + diuron] (237,6 + 842,4 g ha-1), metribuzin (1.440 g ha-1), clomazone (800 g ha-1), isoxaflutole (112,5 g ha-1), sulfentrazone (600 g ha-1), imazapic (105 g ha-1), trifluralin (1.800 g ha-1) e S-metolachlor (1.920 g ha-1), mais uma testemunha sem aplicação. Já na modalidade de pós-emergência os tratamentos foram: MSMA (1.440 g ha-1), MSMA + diuron (1.080 + 420 g ha-1), [hexazinone + diuron] (237,6 + 842,4 g ha-1), metribuzin (1.440 g ha-1), ametryn (1.500 g ha-1), [ametryn + trifloxysulfuron sodium] (1.280 + 32,4 g ha-1), halosulfuron (112,5 g ha-1), 2,4-D (1.005 g ha-1) e mesotrione (120 g ha-1), mais uma testemunha sem aplicação. Foram avaliadas a fitointoxicação, estande e altura de plantas, matéria verde e seca da parte aérea, número de plantas na colheita, altura de inserção da primeira vagem, além da produtividade. Os herbicidas S-metolachlor, tebuthiuron, trifluralin e clomazone apresentaram seletividade satisfatória às plantas de feijão cv. Jalo Precoce, quando aplicados em pré-emergência. No entanto, ametryn, [hexazinone + diuron], metribuzin, isoxaflutole, sulfentrazone e imazapic não foram seletivos, também em aplicações de pré-emergência. Nenhum dos herbicidas avaliados apresentou condições de seletividade para ser utilizado em pós-emergência em um sistema de cultivo integrado de feijão (cv. Jalo Precoce) em áreas de produção de cana-de-açúcar

    Otimização do processo de producão de biodiesel e glicerol a partir do óleo de palma e soja por modelagem no software dwsim / Optimization of biodiesel and glycerol production process from palm oil and soy by modeling in dwsim software

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    O biodiesel é um biocombustível renovável que é obtido através de um processo químico denominado transesterificação. Por meio desse processo, os triglicerídeos presentes em diversos óleos e gorduras animais reagem com um álcool primário mais comumente adotado, o etanol ou metanol, gerando como subproduto o glicerol. Nesse sentido, a utilização de simuladores comerciais para otimização dos processos produtivos em unidades de produção de biodiesel é de fundamental importância, uma vez que estes contribuem para minimização de custos atrelados aos processos fabris. Assim, este trabalho tem por objetivo a simulação de dois processos produtivos, um contendo o óleo de palma e o outro óleo de soja, aplicando o software DWSIM v5.874. Para isso, as simulações foram realizadas adotando os mesmos parâmetros de operação, de forma a identificar como cada matéria-prima se comporta na conversão da transesterificação. Por meio das simulações, foi verificado que o óleo de palma (processo II) obteve um melhor rendimento na etapa de recuperação do etanol de reciclo, sendo observado que houve um excedente de 136,84 kg.h-1 de etanol com temperatura de 79,15 °C, quando comparado com o óleo de soja (processo I), que obteve um excedente de 152,94 kg.h-1 de etanol destilado a 79,12 °C. Analisando os resultados, foi identificado que o processo I obteve uma corrente de operação de saída de 1044,02 kg.h-1 de biodiesel a 71,68° C com 99,97% de purificação e 0,03% de impurezas na composição, e o processo II com um rendimento total de 1049,42 kg.h-1 e 99,99% de pureza e 0,01% de impurezas em sua composição final. Deste modo, foi evidenciado que o processo II obteve um maior rendimento na conversão do etanol em excesso e uma maior produção de biodiesel em relação ao processo I

    ANAFILAXIA NA EMERGÊNCIA: REVISÃO DA LITERATURA

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    Introduction: Anaphylaxis corresponds to an acute systemic immune reaction that has a frequent rate in the emergency. In many cases, its evolution is unpredictable and serious, demanding better knowledge of this disease by professionals. Methodology: A literature review was carried out. Data collection was carried out in SCIELO and PUBMED using the following health descriptors: “Anaphylaxis; Diagnosis; Emergency; Epidemiology; Therapy". Results: We selected 19 articles published in English and Portuguese between the years 2012 and 2020. Anaphylaxis usually results from an immunological mechanism against different antigens exposed to a previously sensitized person. Its pathogenesis involves direct activation of mast cells, which promote the release of inflammatory mediators. Such substances trigger the abrupt onset of symptoms. During seizures, patients have symptoms that predominate in the integumentary and respiratory systems. Diagnosis is symptomatic. Therapeutic management must be quick to prevent severe complications and the drug of choice is adrenaline. The understanding of this condition is still outdated by some health professionals, which supports the ineffective clinical management of some patients as well as the higher occurrence of death. Conclusion: Anaphylaxis is a potentially fatal clinical condition that must be correctly managed in the emergency, to reduce the number of deaths. However, their insufficient knowledge by some doctors and access to adrenaline in the country make it difficult for this to happen.Introducción: La anafilaxia corresponde a una reacción inmunitaria sistémica aguda que tiene una frecuencia frecuente en la emergencia. En muchos casos, su evolución es impredecible y grave, exigiendo un mejor conocimiento de esta enfermedad por parte de los profesionales. Metodología: Se realizó una revisión de la literatura. La recolección de datos se realizó en SCIELO y PUBMED utilizando los siguientes descriptores de salud: “Anafilaxia; Diagnóstico; Emergencia; Epidemiología; Terapia". Resultados: Se seleccionaron 19 artículos publicados en inglés y portugués entre los años 2012 y 2020. La anafilaxia suele ser el resultado de un mecanismo inmunológico frente a diferentes antígenos expuestos a una persona previamente sensibilizada. Su patogenia implica la activación directa de mastocitos, que promueven la liberación de mediadores inflamatorios. Estas sustancias desencadenan la aparición repentina de síntomas. Durante las convulsiones, los pacientes tienen síntomas que predominan en los sistemas tegumentario y respiratorio. El diagnóstico es sintomático. El manejo terapéutico debe ser rápido para prevenir complicaciones graves y la droga de elección es la adrenalina. La comprensión de esta condición aún está desactualizada por algunos profesionales de la salud, lo que respalda el manejo clínico ineficaz de algunos pacientes, así como la mayor ocurrencia de muerte. Conclusión: La anafilaxia es una condición clínica potencialmente fatal que debe ser manejada correctamente en la sala de emergencias para reducir el número de muertes. Sin embargo, su conocimiento insuficiente por parte de algunos médicos y el acceso a la adrenalina en el país dificultan que esto suceda.Introdução: A anafilaxia corresponde a uma reação imunológica sistêmica aguda que apresenta uma taxa frequente na emergência. Em muitos casos, sua evolução é imprevisível e grave, demandando um melhor conhecimento dessa enfermidade pelos profissionais. Metodologia: Realizou-se uma revisão de literatura. A coleta de dados foi efetuada no SCIELO e no PUBMED com o uso dos descritores em saúde: “Anafilaxia; Diagnóstico; Emergência; Epidemiologia; Terapêutica”. Resultados: Selecionou-se 19 artigos publicados em inglês e em português entre os anos de 2012 e 2020. A anafilaxia geralmente decorre de um mecanismo imunológico contra diferentes antígenos expostos a uma pessoa previamente sensibilizada. Sua patogênese envolve a ativação direta dos mastócitos, que promovem a liberação de mediadores inflamatórios. Tais substâncias desencadeiam o início abrupto dos sintomas. Durante as crises, os pacientes apresentam sintomas predominantes nos sistemas tegumentar e respiratório. O diagnóstico é sintomatológico. O manejo terapêutico deve ser rápido para prevenir complicações severas e o fármaco de escolha é a adrenalina. A compreensão acerca dessa condição ainda está defasada por alguns profissionais de saúde, o que embasa a condução clínica ineficaz de alguns pacientes bem como a maior ocorrência de óbito. Conclusão: A anafilaxia é uma condição clínica potencialmente fatal que deve ser manejada corretamente na emergência, para reduzir o número de óbitos. Contudo, o seu insuficiente conhecimento por alguns médicos e acesso à adrenalina no país dificultam que isso ocorra

    Os aspectos patogênicos do SARS-CoV-2 e as novas perspectivas terapêuticas contra a Covid-19: uma revisão integrativa da literatura / The pathogenic aspects of SARS-CoV-2 and the new therapeutic perspectives against Covid-19: an integrative literature review

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    Segundo a Organização Mundial da Saúde (OMS), em relação à COVID-19, o Brasil ocupa a terceira colocação no ranking mundial em termos de casos confirmados, e é o segundo país com o maior número absoluto de óbitos, atrás apenas dos Estados Unidos. Em todo o mundo, ocorreram mais de 3 milhões de mortes e, nesse contexto, além dos esforços voltados para a vacinação em massa, existe também uma corrida mundial por novos tratamentos. Desse modo, o presente estudo tem por objetivo reunir informações atualizadas acerca de terapias vistas como potencialmente eficazes no tratamento de pacientes com COVID-19. Realizou-se uma revisão de literatura integrativa sobre os aspectos estruturais e patogênicos do vírus SARS-CoV-2, bem como acerca das seguintes classes de fármacos: anticoagulantes, antiandrogênios e anticorpos monoclonais. Os estudos demonstraram resultados benéficos quanto a esses medicamentos. Contudo, as pesquisas apresentaram limitações quanto aos métodos, às doses implementadas e aos possíveis riscos envolvidos. Assim, é necessário que mais avaliações empíricas sejam realizadas para se demonstrar com maior exatidão as vantagens e desvantagens desses fármacos, a fim de proporcionar melhora significativa com efeitos colaterais mínimos e, possivelmente, garantir uma recuperação total desses pacientes

    USO DE MARCADORES BIOLÓGICOS PARA AVALIAÇÃO PROGNÓSTICA DE PACIENTES COM COVID-19: UMA REVISÃO DE LITERATURA

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    Objective: The COVID-19 disease causes, mainly, infection of the lower respiratory tract, although some patients may develop complications in other systems, requiring intensive care. Thus, given the variation in the severity of cases, which ranges from asymptomatics to serious conditions, new studies started to approach some biomarkers to predict the disease’s prognosis.  Therefore, this article aims to evaluate the principal biomarkers mentioned in the literature to forecast COVID-19 patient's prognosis. Methods: A narrative literature review was carried out using the PUBMED / Medline and SciELO databases, in order to identify the main biomarkers that can be used in the prognostic assessment of patients with COVID-19. Free and complete articles were analysed, in portuguese and english languages, since they have been published within 1 year. In this way, 40 studies made up the final sample. Results: It was analyzed the albumin, d-dimer (DD), lactic dehydrogenase (LDH), ferritin, fibrinogen, interleukin 6 (IL-6), lymphopenia and neutrophilia, procalcitonine, C reactive protein (PCR) and cardiac troponin T and I, characterizing the peculiarities of each one facing the disease. Conclusion: It was evident that DD, LDH, IL-6, lymphopenia, neutrophilia and CRP were highlighted as the best biomarkers to predict severity and worst prognosis in COVID-19 patients. However, all mentioned studies present pontual limitations, which requires more studies to measure and evaluate other biomarkers.  Objetivos: El COVID-19 causa principalmente infección de las vías respiratorias inferiores, sin embargo, algunos pacientes pueden experimentar complicaciones en otros sistemas, requiriendo cuidados intensivos. Por lo tanto, dada la variación en la gravedad de los casos, que van desde condiciones asintomáticas hasta severas, se comenzaron a estudiar los marcadores biológicos como medidas predictivas en el pronóstico de la enfermedad. Por lo tanto, este estudio tuvo como objetivo evaluar los principales biomarcadores mencionados en la literatura para predecir el pronóstico de los pacientes. Métodos: Se realizó una amplia revisión de la literatura narrativa a través de las bases de datos pubmed/medline y scielo, con el fin de describir los principales biomarcadores que pueden ser utilizados en la evaluación pronóstica de pacientes con COVID-19. Se analizaron artículos completos y gratuitos, publicados hace 1 año, en inglés y portugués, de modo que la muestra final fue compuesta por 40 estudios. Resultados: Se analizaron albúmina, DINMER DD, DESHIDROGENASA LÁCTICA (DHL), FERRITINA, FIBRINÓGENO, interleucina 6 (IL-6), linfopenia y neutrofilia, procalcitonina, proteína C reactiva (PCR) y troponina cardíaca T y yo, caracterizando las peculiaridades de cada uno frente a la enfermedad. Conclusión: Dd, DHL, IL-6, linfopenia, neutrofilia y PCR fueron notorios como los mejores predictores de gravedad y peor resultado de COVID-19. Sin embargo, todos los estudios mencionados tienen limitaciones, y se necesitan más estudios para evaluar otros biomarcadores. Objetivos: A COVID-19 provoca, principalmente, infecção do trato respiratório inferior, entretanto, alguns pacientes podem cursar com complicações em outros sistemas, exigindo cuidados intensivos. Portanto, dada a variação da severidade dos casos, que vão de quadros assintomáticos a graves, começou-se a estudar os marcadores biológicos como medidas preditivas no prognóstico da doença. Por isso, este estudo teve como objetivo avaliar os principais biomarcadores mencionados na literatura para predizer o prognóstico dos pacientes. Métodos: Fora realizada uma revisão de literatura narrativa, de caráter amplo por meio das bases de dados PUBMED/Medline e SciELO, a fim de descrever os principais biomarcadores que podem ser utilizados na avaliação prognóstica de pacientes com COVID-19. Foram analisados artigos completos e gratuitos, publicados há 1 ano, nas línguas inglesa e portuguesa, de forma que, 40 estudos compuseram a amostra final. Resultados: Analisou-se a albumina, dímero D (DD), desidrogenase lática (DHL), ferritina, fibrinogênio, interleucina 6 (IL-6), linfopenia e neutrofilia, procalcitonina, proteína C reativa (PCR) e troponina cardíaca T e I, caracterizando as peculiaridades de cada um diante da doença. Conclusão: Foi notório o destaque do DD, DHL, IL-6, linfopenia, neutrofilia e PCR como os melhores preditores de gravidade e de pior desfecho da COVID-19. Entretanto, todos estudos mencionados apresentam limitações, sendo necessários mais estudos para avaliação de outros biomarcadores.&nbsp

    Nucleosídeo trifosfato difosfohidrolase e ecto-5'-nucleotidase de Trichomonas vaginalis : metabolismo dos nucleotídeos e nucleosídeo de guanina, efeito na citotoxicidade e modulação da atividade anti-T. vaginalis de floroglucinois

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    Trichomonas vaginalis é o protozoário flagelado que parasita o sistema urogenital humano causando a tricomoníase, a doença sexualmente transmissível não viral mais comum no mundo, sendo registrados aproximadamente 276 milhões de novos casos a cada ano. O sucesso da colonização das células hospedeiras e desenvolvimento da infecção envolve um complexo processo que culmina em citoaderência e citotoxicidade. Nucleotídeos e nucleosídeos são liberados para o espaço extracelular por células em situações de estresse ou lesão tecidual e desencadeiam seus efeitos sinalizadores através da ativação de purinoceptores. Ainda, a hidrólise sequencial de nucleotídeos pelas ectonucleotidases, nucleosídeo trifosfato difosfoidrolase (NTPDase) e ecto-5’-nucleotidase leva à formação de nucleosídeos que são essenciais para o metabolismo de purinas do parasito. Efeitos antagônicos são desencadeados por nucleotídeos e nucleosídeos, respectivamente próinflamatórios e anti-inflamatórios, na mediação de respostas imunes. A atividade dessas enzimas sobre os nucleotídeos da guanina e o efeito de restrição metabólica sobre a hidrólise de nucleotídeos foi avaliada. Além disso, a participação da sinalização mediada pelos nucleotídeos e nucleosídeos também foi avaliada em um modelo de citotoxicidade. Os resultados demonstram que os nucleotídeos GTP, GDP e GMP são substratos para as ectonucleotidases de T. vaginalis com parâmetros cinéticos compatíveis para enzimas dessa família. A condição de restrição de soro aumentou a atividade da NTPDase e da ecto-5’-nucleotidase e o aumento da expressão gênica das TvNTPDase 2 e 4 pode justificar o aumento da atividade. A recaptação de guanosina extracelular foi menor do que a recaptação de adenosina, demonstrada pela razão isotópica C12/C13 no nucleosídeo detectada no DNA dos parasitos. A fim de investigar um possível papel biológico para o acúmulo de guanosina extracelular, bem como avaliar o envolvimento da sinalização purinérgica na citotoxicidade mediada pelo parasito, diferentes isolados de T. vaginalis foram testados frente à capacidade de promover citólise. Todos os isolados foram capazes de promover efeito citolítico em alguma proporção, com destaque para o isolado TV-LACM6, que apresenta um perfil de hidrólise ATP, GTP > AMP > GMP. Quando nucleotídeos e nucleosídeos foram testados, o efeito citotóxico produzido pelo isolado foi potencializado na presença de ATP e GTP. Por outro lado, o efeito foi revertido na presença de eritro-9-(2-hidroxi-3-nonil) adenina (EHNA), um inibidor da adenosina deaminase. Importante, guanosina não foi capaz de reverter o efeito citotóxico produzido pelos trofozoítos, resultado que corrobora com o perfil de hidrólise de nucleotídeos e acúmulo de guanosina exracelular, sendo uma vantagem para o parasito. A possível participação dos receptores de adenosina foi avaliada, entretando os receptores ADORA1 e ADORA2A não parecem estar envolvidos no efeito protetor mediado pela adenosina. Considerando o potencial farmacológico desempenhado por essas enzimas no metabolismo de purinas em protozoários bem como no controle de respostas imunes, a modulação da hidrólise de nucleotídeos pode ser um alvo terapêutico importante e representar um mecanismo sinérgico na atividade antiparasiária de compostos ativos. Nesse sentido, o estudo demonstrou a atividade anti-T. vaginalis de três compostos, e em especial o isoaustrobrasilol B, com IC50 de 38 μM. O composto não apresentou efeitos hemolíticos frente a eritrócitos humanos e apesar de ter demonstrado efeito citotóxico in vitro frente à linhagem de células epiteliais vaginais humanas (HMVII), nenhuma citotoxicidade foi demonstrada no modelo in vivo. Isoaustrobrasilol B foi o único composto que inibiu significativamente as atividades da NTPDase e ecto-5’-nucleotidase e o efeito imune atribuído ao acúmulo extracelular de nucleotídeos foi avaliado. A produção de espécies reativas de oxigênio e interelucina-6 (IL-6) por neutrófilos estimulados por T.vaginalis não foi afetada pelo tratamento com o composto. Por outro lado, a liberação de interleucina-8 (IL-8), a principal interleucina produzida por neutrófilos na tricomoníase, foi aumentada. O efeito sinérgico de redução de viabilidade de trofozoítos e modulação da NTPDase e ecto-5’-nucleotidase pode aumentar a suscetibilidade do T. vaginalis frente à resposta imune do hospedeiro e consequentemente, sua eliminação do sítio de infecção.Trichomonas vaginalis is a flagellate protozoan that parasitizes the human urogenital tract causing trichomoniasis, the most common non-viral sexually transmitted disease, infecting approximately 276 million people worldwide annually. To achieve success in parasitism trichomonads develop a complex process against the host cells that culminate in cytoadherence and cytotoxicity. Nucleotides and nucleosides are released into the extracellular space by cells under stress or injury and they exert their signaling effects through activation of the purinoceptors. Moreover, the ectonucleotidases, nucleoside triphosphate diphosphohydrolase (NTPDase) and ecto-5'-nucleotidase, are capable of hydrolyzing the nucleotides producing nucleosides that are essential to the parasite purine metabolism. The enzymatic cascade mediated by ectonucleotidases is relevant in controlling nucleotides and nucleosides levels as these molecules play antagonistic roles in inflammation, as proinflamatory and anti-inflammatory mediators, respectively. This study investigated the hydrolysis profile of guanine nucleotides in T. vaginalis as the effect of serum limitation condition in the enzymatic cascade. Furthermore, we investigated the influence of extracellular nucleotides and nucleosides on the modulation of the host cell cytotoxicity mediated by T. vaginalis. Results show that guanine nucleotides GTP, GDP, GMP are substrates for T. vaginalis ectonucleotidases, with expected kinetic parameters for this enzyme family. The metabolic restriction condition enhanced NTPDase and ecto-5’-nucleotidase activities and the highest gene expressions found for TvNTPDase 2 and 4 which may explain the enzymatic activity enhance. The extracellular guanosine uptake was lower than that observed for adenosine into parasite DNA measured by isotopic ratio C12/C13 of the nucleosides. In order to investigate the possible biological role for extracellular guanosine accumulation as well as to evaluate the involvment of purinergic signaling in the citotoxicity promoted by the parasite, a collection of T. vaginalis isolates were tested against a human epithelial vaginal cell line (HMVII). Fresh clinical T. vaginalis isolates produced cytolytic effect against human vaginal epithelial cells in a heterogeneous profile. The most cytotoxic isolate, TV-LACM6, presents the hydrolysis profile ATP, GTP > AMP > GMP. When the nucleotides and nucleosides were tested, the cytotoxic effect elicited by TV-LACM6 was increased in presence of nucleotides ATP and GTP. In contrast, the cytotoxicity was reversed by adenosine in presence of erythro-9-(2-hydroxy-3-nonyl) adenine (EHNA), but not by guanosine, which is in agreement with the accumulation of extracellular guanosine and the hydrolysis profile, acting as an advantage for the parasite. ADORA1 and ADORA2A are not involved in the protective mechanism of adenosine. Considering the pharmacological potential that ectonucleotidases play in the context of purine metabolism and in the imune response modulation, nucleotide hydrolysis may represent a therapeutic target as an additional mechanism in association with anti T.vaginalis compounds. The study demonstrated promissing activities for three derivatvies with isoaustrobrasilol B the most activity compound with IC50 38 μM. The compound did not demonstrate any hemolytic activity and although induced cytotoxicity against human epithelial vaginal cells (HMVII), absence of toxicity was obtained when in vivo model was studied. Isoaustrobrasilol B was the only compound that significantly inhibited NTPDase and ecto-5’-nucleotidase activities and the immune modulation attributed to extracellular nucleotide accumulation was evaluated. Reactive oxygen species production and interleukin-6 (IL-6) release by T.vaginalis stimulated neutrophils were not affected by phloroglucinol treatment. On the other hand, interleukin-8 (IL-8), the primarily cytokine produced by neutrophils during trichomoniasis, was significantly enhanced. The associative mechanism of trophozoites death and NTPDase and ecto-5’-nucleotidase modulation may increase the susceptibility of T. vaginalis to host immune responses and, consequently, the elimination from the infection site
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