Parcerias público-privadas: as vantagens teóricas e o seu impacto real no sector ferroviário português

O presente trabalho incide sobre o tema das Parcerias Público-Privadas e as suas vantagens teóricas. As limitações orçamentais, que desenham as políticas públicas na União Europeia, têm obrigado os governos a optar por soluções que lhes permitam continuar a exercer as responsabilidades de provisão de serviços públicos essenciais à sociedade. A utilização das PPP como alternativa de financiamento para a provisão desses serviços públicos e infra-estruturas associadas, tem vindo, ao longo da década de 90, a ganhar uma enorme expressão. Aquilo que procuraremos explorar nesta dissertação será uma comparação entre as vantagens teóricas associadas à aplicação deste regime contratual, face aos impactos obtidos na sua aplicação real. Para o efeito, optámos por estudar duas parceri as entre o Sector Público e o Sector Privado: a concessão Fertagus e a concessão Metro Sul -Tejo. Este conjunto representa o universo total das PPP no sector ferroviário português.This essay is about the Public-Private Partnerships and their theoretical advantages. Budget restraints, that draw the public politics in the European Union, have forced the governments to opt for solutions that allow them to continue to be responsible in providing public services that are essential to society. The use of PPP as an financing alternative for providing these public services and associated infra -structures, has come to, since the beginning of the 90s, gain a big importance. What we look forward to explore in this essay is to compare the theoretical advantages associated to the application of this contractual regime, to the impacts of their actual implantation. For that matter, we opted for studying tw o partnerships between the Public Sector and the Private Sector: The Fertagus Concession and the Metro Sul-Tejo Concession. These two represent the whole universe of the PPP in the Portuguese Railroad sector

Evolução da Estrutura de Capital e Rendibilidade do Sector Farmacêutico nos últimos 14 anos (2006-2019)

Mestrado em Gestão e EmpreendedorismoEste estudo pretende analisar a evolução da rendibilidade e estrutura de capital das empresas que compõem o setor farmacêutico em Portugal. Posteriormente é comparado o setor farmacêutico português com todas as empresas que constituem o mercado português e por último é feita uma análise comparativa entre o setor farmacêutico português e o setor farmacêutico em 4 das maiores economias europeias. Para fazer estas comparações são analisados alguns indicadores económicos e financeiros, incidindo os mesmos na estrutura de capital e rendibilidade, com base em dados obtidos na Central de Balanços do Banco de Portugal (CBBP) para um período de 14 anos, de 2006 a 2019, abrangendo o período pré-crise financeira iniciada em 2007 e terminando antes da crise epidemiológica provocada pela SARS-CoV-2, responsável pela doença Covid-19. Para o estudo da rendibilidade e estrutura de capital são abordados alguns indicadores, entre os quais, rendibilidade dos capitais próprios (RCP), rendibilidade do ativo (ROA), margem EBITDA (Earnings Before Interest, Taxes, Depreciation and Amortization), financiamentos obtidos e autonomia financeira, tal como uma breve abordagem a algumas teorias, nomeadamente, Modigliani & Miller, Trade-Off e Pecking Order. Estes indicadores são tratados para os 3 subsetores do setor farmacêutico português, comparando-os com as empresas em geral e posteriormente comparando-o ao setor europeu para 4 das maiores economias da União Europeia (EU), Espanha, França, Alemanha e Itália.This study aims to analyse the evolution of profitability and capital structure of companies that make up the pharmaceutical sector in Portugal. Subsequently, the Portuguese pharmaceutical sector is compared with all companies in the Portuguese market and, finally, a comparative analysis is made between the Portuguese pharmaceutical sector and the pharmaceutical sector in 4 of the largest European economies. To make these comparisons, an analysis is made of some economic and financial indicators, focusing them on the capital structure and profitability, based on data obtained from Banco de Portugal’s Balance Sheet Centre for a period of 14 years, from 2006 to 2019, spanning the pre-financial crisis period that began in 2007 and ending before the epidemiological crisis caused by SARS-CoV-2, accountable for Covid-19 disease. For the study of profitability and capital structure, some indicators were addressed, including Return on Equity (ROE), Return on Assets (ROA), EBITDA (Earnings Before Interest, Taxes, Depreciation and Amortization) margin, obtained financing and financial autonomy, such as a brief approach to some theories, namely Modigliani & Miller, Trade-Off and Pecking Order. These indicators are handled to the 3 subsectors of the Portuguese pharmaceutical sector, comparing them with companies in general and afterward comparing it to the european sector for 4 of the largest economies in the European Union (EU), Spain, France, Germany, and Italy.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

La poética de la resistencia en los poemas sobre la Guerrilha do Araguaia: el corpus del periódico <i>Resistência</i>

Este artigo analisa dois poemas que tem como tema a Guerrilha do Araguaia, que são parte de um conjunto de textos poéticos publicados no jornal Resistência, em fevereiro de 1979, no Brasil. A análise considerou os aspectos históricos relacionados ao tema e a constatação da questão central: quais elementos presentes indicam o enquadramento dos poemas em uma poética da resistência.This article analyzes two poems whose theme is the Guerrilha do Araguaia, which are part of a set of poetic texts published in the Resistência newspaper, in February 1979, in Brazil. The analysis considered the historical aspects related to the theme and the verification of the central question: which elements present indicate the framing of the poems in a poetics of resistance.Este artículo analiza dos poemas que tienen como tema la Guerrilla del Araguaia, que integran un conjunto de textos poéticos publicados en el periódico Resistencia, en febrero de 1979, en Brasil. El análisis consideró los aspectos históricos relacionados al tema y la constatación de la cuestión central: qué elementos presentes en los poemas permiten ubicarlos dentro de una poética de la resistencia.Facultad de Humanidades y Ciencias de la Educació

Estratégias analíticas baseadas em espectrometria de massa para identificação de modificações nitro oxidativas em fosfolípidos

Doutoramento em BioquímicaOs lípidos são considerados alvos importantes das espécies reativas de nitrogénio (RNS, do inglês Reactive Nitrogen Species), formadas em condições de stresse nitroxidativo. As RNS podem levar à formação de uma grande variedade de lípidos modificados, formados através de reações de nitração, nitrosação e nitroxidação. Os ácidos gordos nitrados (NO2-FA) têm sido descritos como os principais produtos endógenos formados pela reação entre ácidos gordos e RNS, e já foram detetados em plasma, urina e tecidos. Os NO2-FA são considerados compostos bioativos com um importante papel como agentes anti-inflamatórios, anti-hipertensivos e anti-trombóticos, estando envolvidos na modulação de complicações metabólicas e inflamatórias. Apesar da relevância da nitração de lípidos, maioritariamente descrita para os NO2-FA, a nitração de fosfolípidos, que são os principais constituintes das membranas celulares, permanece um campo de investigação pouco explorado continuando a existir uma falha de conhecimento no que diz respeito ao tipo de produtos fosfolipídicos que podem ser formados em condições de stresse nitroxidativo, e quais os seus papéis nos sistemas biológicos. Para ultrapassar esta questão, os principais objetivos desta tese de doutoramento consistiram no desenvolvimento de abordagens baseadas em espectrometria de massa (MS) para a) a identificação de diferentes fosfolípidos nitrados e nitroxidados, b) a identificação dos padrões de fragmentação característicos dos fosfolípidos modificados, c) aplicar as estratégias desenvolvidas e baseadas em espectrometria de massa para detetar fosfolípidos nitrados e nitroxidados in vivo em modelos de doença, d) avaliar o papel dos fosfolípidos nitrados e nitroxidados como agentes anti-inflamatórios e antioxidantes e e) avaliar a sua interação com proteínas. De um modo geral, pretendemos contribuir para o conhecimento das modificações químicas em fosfolípidos induzidas em condições de stresse nitroxidativo e a significância biológica desses produtos. Para alcançarmos os objetivos propostos, os derivados nitrados dos fosfolípidos (NO2-PL), nomeadamente os derivados nitro de fosfatidilcolinas (NO2-PC), fosfatidiletanolaminas (NO2-PE) e fosfatidilserinas (NO2-PS), contendo diferentes ácidos gordos, foram estudados por MS. Os NO2-PL foram sintetizados utilizando nitrónio tetraflouroborato (NO2BF4), mimetizando condições de stresse nitroxidativo, e foram posteriormente identificados por MS com ionização por electrospray (ESI-MS) e caracterizados por espectrometria de massa tandem (ESI-MS/MS). O seu padrão de fragmentação típico foi identificado e incluí a perda do grupo nitro (HNO2) e a formação de ácidos gordos nitrados. Esta metodologia baseada em MS, permitiu a deteção de oito derivados nitrados de fosfolípidos, sete NO2-PCs e uma NO2-PE, em mitocôndrias isolados do coração de um modelo animal de diabetes mellitus tipo 1 obtido pela administração de streptozotocina (STZ). Estas descobertas irão contribuir para a compreensão dos mecanismos de nitração em ambientes biológicos e para estabelecer a relevância fisiológica dos NO2-PLs. Além disso, outros derivados nitrados e nitroxidados das PCs e PEs com diferentes combinações de ácidos gordos foram também sintetizados utilizando o modelo biomimético de nitroxidação e, posteriormente, foram estudados por cromatografia líquida (LC) acoplada à espectrometria de massa e MS/MS. Os derivados modificados de fosfolípidos incluíram: derivados nitroso e dinitroso, nitro e dinitro, e nitronitroso, em conjunto com derivados nitroxidados. A fragmentação típica para cada uma estas modificações foram a perda de HNO e HNO2, as perdas combinadas de HNO (HNO2) e a cabeça polar dos fosfolípidos, e ainda iões produto correspondentes às cadeias de ácido gordo modificadas, nomeadamente iões [NOn-FA+On+H]+ e [NOn-FA+On-H]- (n=1-2). Estas fragmentações permitiram identificar PCs nitradas, incluindo NO2-PC, (NO2)2-PCs, (NO2)(NO)-PC, NO-PC; PEs nitradas, NO2-PEs; e uma PC nitroxidada (NO2)(2O)-PC em cardiomioblastos H9c2 em condições de starvation, mas não foram detetadas em células em condições de isquémia nem no controlo. A relevância fisiológica das PCs e PEs nitradas e nitroxidadas observadas exclusivamente em cardiomioblastos H9c2 em condições de starvation permanece desconhecida mas estas espécies podem ter um papel na cardioproteção que merece ser explorada. Para avaliar os possíveis efeitos biológicos dos NO2-PL, os produtos nitrados/nitroxidados da POPC, nomeadamente os derivados NO2-POPC, foram incubados com macrófagos Raw 264.7, uma linha celular de monócitos de ratinho estimulada com LPS, demonstrando ter propriedades anti-inflamatórias pela diminuição da expressão da forma induzível da óxido nítrico sintase (iNOS). Os produtos nitrados/nitroxidados da POPC demonstraram ainda ter propriedades antioxidantes, nomeadamente como scavengers, demonstrada pela capacidade de reduzir os radicais ABTS●+, DPPH● e peroxílo (ensaio ORAC). Tendo em conta que os efeitos biológicos dos lípidos nitrados ocorre via modificações pós-transducionais de proteínas, também avaliámos a capacidade dos produtos nitrados/nitroxidados da POPC em interagir com proteínas, especificamente a adição dos derivados NO2-POPC, principais produtos formados durante a nitração biomimética da POPC, com a vimentina que é um filamento intermediário. Para avaliar o efeito da NO2-POPC foram utilizados ensaios de competição in vitro, onde as suas interações foram avaliadas utilizando western blotting. A interação dos produtos nitrados/nitroxidados da POPC com a vimentina protegeu-a da modificação pela iodoacetamida biotinilada. Os produtos nitrados/nitroxidados da POPC também induziram alterações na organização da rede de vimentina. Estes efeitos foram avaliados, utilizando microscopia confocal, em células de carcinoma adrenal SW13, as quais expressam construções específicas de vimentina. Os resultados obtidos com esta tese de doutoramento fornecem novas informações baseadas em abordagens avançadas de MS para a identificação de modificações em PLs induzidas pelas RNS nomeadamente em condições de stresse nitroxidativo, o que irá ser crucial para a sua identificação em amostras biológicas, e ainda para o desvendar dos seus potenciais papéis a nível biológico.Lipids are considered important targets of reactive nitrogen species (RNS), under nitroxidative stress conditions. Various RNS can lead to a great variety of modified lipids, formed via nitration, nitrosation and nitroxidation reactions. Nitro-fatty acids (NO2-FA) have been reported as major endogenous products formed between fatty acids (FA) and RNS, and have been detected in plasma, urine, and tissues. NO2-FA are considered important bioactive molecules with roles as anti-inflammatory, anti-hypertensive, and anti-thrombotic agents being involved in modulation of metabolic and inflammatory complications. In spite of the relevance of lipid nitration, it has been mainly focused on NO2-FAs, but in contrast, putative nitration of phospholipids (PL), the major constituents of cell membranes, remains an unexplored field of research. There are no studies regarding the type of PL products that can be formed under nitroxidative stress conditions and their possible roles in biological systems. To overcome this issue, the main goals of this PhD were the development of mass spectrometry (MS)-based approaches a) to identify different PL nitrated and nitroxidized products, b) to identify the characteristic fragmentation pattern of modified PL, c) to apply the developed MS-based strategies to detected nitrated and nitroxidized PL species in in vivo models of disease, d) to evaluate the role of nitrated and nitroxidized PLs as anti-inflammatory and as antioxidants, and c) to evaluate their adduction to proteins. Overall it is expected to contribute for the understanding of the chemical modifications induced by nitroxidative stress to PLs and their biological significance. To accomplish our goal, first we analyzed nitrated PL species (NO2-PL), namely nitro derivatives of phosphatidylcholine (NO2-PC), phosphatidylethanolamine (NO2-PE) and phosphatidylserine (NO2-PS), bearing different FA by MS. NO2-PL were synthesized using nitronium tetrafluoroborate (NO2BF4) in a biomimetic system of nitroxidative stress conditions. NO2PL were identified by electrospray (ESI)-MS and characterized by ESI tandem mass spectrometry (ESI-MS/MS). The typical fragmentation pattern of NO2-PL was determined and included the loss of nitro group (HNO2) and the formation of nitrated fatty acids. The MS reported ions allowed us to detect eight nitrated derivatives of PLs, seven NO2-PCs and one NO2-PE, in cardiac mitochondria isolated from heart of a well-characterized animal model of type 1 diabetes mellitus (T1DM) obtained by administration of streptozotocin (STZ). These findings will contribute for the understanding of nitration in biological environments, and to establish the physiological relevance of NO2-PL species. In addition, different nitrated and nitroxidized derivatives of PCs and PEs with different combinations of FA were also generated using the biomimetic model of nitroxidation and were studied by liquid chromatography (LC)-MS and MS/MS approaches. Single and multiple nitrated derivatives of PLs such as nitroso and dinitroso, nitro and dinitro, nitronitroso derivatives, together with nitroxidized derivatives were identified and their specific fragmentation pathways were assigned. Typical reporter product ions of these modifications were loss of HNO and HNO2, the combined loss of HNO (or HNO2) and polar head groups, and [NOn-FA+On+H]+ and [NOn-FA+On-H]- (n=1-2) product ions corresponding to the modified fatty acyl chains, depending on each modification. These reported fragmentations allowed the identification of nitrated PCs, including NO2-PC, (NO2)2-PCs, (NO2)(NO)-PC, NO-PC; nitrated PEs, NO2-PEs; and nitroxidized PCs, (NO2)(2O)-PC in cardiomyoblast H9c2 cells under starvation conditions, but not in cells under ischemia neither in control. The physiological relevance of nitrated and nitroxidized PCs and PEs species observed exclusively in cardiomyoblast cells (H9c2) under starvation is still unknown but could have a role in cardioprotection that deserves to be explored. To evaluate the putative biological effects of NO2-PL, nitrated/nitroxidized products of POPC, namely the NO2-POPC derivatives, were incubated with Raw 264.7 macrophages, a mouse leukaemic monocyte cell line, stimulated with LPS, and revealing anti-inflammatory properties by decreasing the expression of the inducible nitric oxide synthase (iNOS). Nitrated/nitroxidized products of POPC also showed antioxidant properties, namely as scavenging agents, demonstrated by reducing the ABTS●+, DPPH● and peroxyl radicals (ORAC assay). Considering that the biological effects of nitrated lipid occur via post-translational modification (PTM) of proteins, we had also evaluated the ability of nitrated/nitroxidized products of POPC to interact with proteins. For that it was studied the adduction of NO2-POPC derivatives, the major product formed during biomimetic nitration of POPC, with vimentin, an intermediate filament protein, assessed using in vitro gel-based competition assay, and their interactions were evaluated using western blotting. The interaction of nitrated/nitroxidized products of POPC with vimentin shielded its modifications by biotinylated iodoacetamide. The effects of nitrated/nitroxidized products of POPC in the organization of vimentin network was also evaluated in SW13 adrenal carcinoma cell line expressing defined vimentin constructs using confocal microscopy. The results gathered in his study revealed that nitrated/nitroxidized products of POPC can interact with vimentin and induced changes in the organization of vimentin network. Overall, the results gathered in this PhD thesis provide new tool based on advanced MS approaches to identify structural modification of phospholipids induced by RNS namely under nitroxidative stress, that can be successfully used to pinpoint these nitrated species in different systems, and will be crucial for their identification in biological samples, and to unveil some of their potential roles in biological systems

Estudo de alterações em lípidos associados à doença de Alzheimer

Mestrado em BioquimicaAlzheimer disease is characterized by defects in the signaling mediated by acetylcholine. Tacrine was used as acetylcholinesterase (AChE) inhibitor approved for the treatment of Alzheimer’s disease. However, tacrine treatment has some toxicological effects associated with mitochondrial dysfunction, ROS generation and lipid peroxidation. Deregulation in sphingolipid metabolism is also associated with establishment and progression of this disease. In this study, mass spectrometry was used to identify the membrane phospholipid profile of rats brain non-synaptic mitochondria, before and after treatment with tacrine and its analogues (samples T1 and T2). The results obtained with this study allowed us to understand that treatment with tacrine induces changes in mitochondrial phospholipid content, seems to increase the susceptibility to oxidation of mitochondrial PS, and affects mitochondrial bioenergetics. O tratamento com os análogos T1 e T2 parece induzir menores alterações nos parâmetros avaliados, quando em comparação com a tacrina. Treatment with T1 and T2 analogues seems to induce less change in evaluated parameters, comparing with tacrine. T1 analogue was shown to be the most efficient of all in its inhibitory capacity for AchE activity. This work contributes to a better understanding of the effects of tacrine in brain mitochondrial function, and to research of new tacrine analogues with more inhibitory efficiency and with lower toxicological effects. To better understand the changes in sphingolipid-induced oxidative stress, a possible process underlying Alzheimer's disease, we studied the oxidative modification of specific SM (d18:1/16:0), SPC (d18:1) and Cer (d18:1/18:0) induced by hydroxyl radical generated under conditions of Fenton reaction (H2O2 and Fe2+), using mass spectrometry. The results of this study allowed us to identify for the first time, several oxidation products produced during the oxidation of SM and SPC. This work contributes to a better understanding of the behavior of some sphingolipids under conditions of oxidative stress, important for its possible detection in biological systems.A doença de Alzheimer é caracterizada por defeitos na sinalização mediada pela acetilcolina. A tacrina foi anteriormente utilizada como inibidor da acetilcolinesterase (AChE) aprovado para o tratamento da doença de Alzheimer. Contudo, o tratamento com tacrina apresentava alguns efeitos tóxicos associados à disfunção mitocondrial, produção de ROS e peroxidação lipídica. Alterações no metabolismo de esfingolípidos também estão associadas com o desenvolvimento e progressão desta doença. Neste estudo, a espectrometria de massa foi utilizada para identificar o perfil fosfolipídico das membranas mitocondriais não-sinápticas de cérebro de ratos, antes e após o tratamento com a tacrina, e seus análogos (amostras T1 e T2). Os resultados obtidos com este estudo permitiu-nos perceber que o tratamento com tacrina induz alterações no conteúdo dos fosfolípidos mitocondriais, parece aumentar a susceptibilidade da PS mitocondrial à oxidação, e afecta a bioenergética mitocondrial. O tratamento com os análogos T1 e T2 parece induzir menores alterações nos parâmetros avaliados, quando em comparação com a tacrina. O análogo T1 mostrou ser o mais eficiente na capacidade de inibir a actividade da AchE. Este trabalho contribui para uma melhor compreensão dos efeitos da tacrina na função mitocondrial cerebral, e para a pesquisa de novos análogos da tacrina, com mais eficiência inibitória e com menos efeitos toxicológicos. Para melhor compreender as alterações de esfingolípidos induzidas por stresse oxidativo, um possível processo subjacente à doença de Alzheimer, estudaram-se as modificações oxidativas específicas de SM (d18:1/16:0), SPC (d18:1) e Cer (d18:1/18:0) induzidas pelo radical hidroxilo gerado sob condições da reacção de Fenton (H2O2 e Fe2+), utilizando a espectrometria de massa. Os resultados obtidos com este estudo permitiram-nos identificar, pela primeira vez, vários produtos de oxidação produzidos durante a oxidação da SPC e SM. Este trabalho contribui para uma melhor compreensão do comportamento de alguns esfingolípidos sob condições de stresse oxidativo, fundamental para a sua possível detecção em sistemas biológicos

Conexões matemáticas : potencialidades e contributos na educação pré-escolar e no 1º ciclo do ensino básico

Mestrado em Educação Pré-Escolar e Ensino do 1º Ciclo do Ensino Básico (Relatório de Estágio).O presente relatório resulta do nosso estágio pedagógico realizado no âmbito das unidades curriculares de Prática Educativa Supervisionada I e II, do Mestrado em Educação Pré-Escolar e Ensino do 1º Ciclo do Ensino Básico, da responsabilidade do Departamento de Ciências da Educação da Universidade dos Açores, representando, assim, o percurso realizado nos dois níveis de ensino, através de uma análise retrospetiva. O documento discute a necessidade de se estabelecerem conexões matemáticas, nas suas diferentes vertentes, destacando-se aquela que promove a aprendizagem da Matemática com os contextos reais, de vivência do dia-a-dia. São descritas e analisadas, criticamente, algumas tarefas realizadas no contexto do Pré-escolar e do 1º Ciclo do Ensino Básico, que se centraram em torno do tema das conexões matemáticas e que procuraram, simultaneamente, promover nos alunos o gosto pela Matemática. Do trabalho elaborado, foi possível concluir sobre a importância da prática matemática baseada no estabelecimento de conexões entre as diferentes áreas e domínios, valorizando-se todas elas, e não apenas a aprendizagem segmentada da Matemática. Foi possível concluir, ainda, que a implementação de tarefas de conexão permite despertar o gosto nos alunos para a Matemática em contextos de aprendizagem não orientados diretamente para esta área, fazendo-os entender que a Matemática é uma forma de pensar e de agir sobre o mundo que os rodeia. Tendo em conta que este relatório decorre do trabalho realizado no estágio pedagógico, apresentam-se, de forma refletida, algumas das estratégias de aprendizagem que mais se destacaram nas práticas. Enquadra-se também o trabalho realizado teoricamente, contextualizando a formação e a prática do professor em Portugal, a importância da Matemática na Educação Pré-Escolar e no 1º Ciclo do Ensino Básico e algumas aspetos específicos do tema foco deste relatório. Para uma análise fidedigna das práticas, foi necessário a utilização de algumas técnicas e instrumentos de recolha de dados, os quais são enumerados no capítulo referente à metodologia, que abarca, ainda, os objetivos que nos propusemos atingir com este trabalho.ABSTRACT: This report is a result of our pedagogical training carried out within the curricular units of Supervised Educational Practice I and II from the Master’s Degree in Preschool Education and Primary School Teaching, under the responsibility of the Educational Sciences Department of the University of the Azores, thus representing the work performed within both levels of education, thorough a retrospective analysis. The document discusses the need to establish mathematical connections, within their different aspects, highlighting the one that promotes the learning of Mathematics in real everyday contexts. Several tasks are critically described and analyzed within the context of Preschool and Primary School. These were focused on the mathematical connections and simultaneously aimed at increasing the student’s interest in Mathematics. Through this work it was possible to conclude on the importance of the practice of Mathematics based on the establishment of connections between the different areas, valuing all of them, and not only the learning of Mathematics. It was also possible to conclude that the implementation of connection tasks stimulates the student’s interest in Mathematics within contexts which are not directly oriented towards this area, making them understand that Mathematics is a way of thinking and acting upon the world around them. Considering that this report results from a pedagogical training, several learning strategies, which stood out the most during the practices, are thoughtfully presented. The theoretical work is also settled, contextualizing training and the practice of teaching in Portugal, the importance of Mathematics in Preschool Education and Primary School, and several specific aspects from the main topic of this report. In order to obtain a reliable analysis of practices, it was necessary to use several techniques and tools for data collection mentioned in the chapter concerning methodology, which also covers the aims of this work

Discovery of bioactive nitrated lipids and nitro-lipid-protein adducts using mass spectrometry-based approaches

Nitro-fatty acids (NO2-FA) undergo reversible Michael adduction reactions with cysteine and histidine residues leading to the post-translational modification (PTM) of proteins. This electrophilic character of NO2-FA is strictly related to their biological roles. The NO2-FA-induced PTM of signaling proteins can lead to modifications in protein structure, function, and subcellular localization. The nitro lipid-protein adducts trigger a series of downstream signaling events that culminates with anti-inflammatory, anti-hypertensive, and cytoprotective effects mediated by NO2-FA. These lipoxidation adducts have been detected and characterized both in model systems and in biological samples by using mass spectrometry (MS)-based approaches. These MS approaches allow to unequivocally identify the adduct together with the targeted residue of modification. The identification of the modified proteins allows inferring on the possible impact of the NO2-FA-induced modification. This review will focus on MS-based approaches as valuable tools to identify NO2-FA-protein adducts and to unveil the biological effect of this lipoxidation adducts.publishe