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    A importância da aprendizagem cooperativa na qualidade das interações que se estabelecem entre as crianças

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    Dissertação de mestrado, Educação Pré-Escolar, Escola Superior de Educação e Comunicação, Universidade do Algarve, 2017O presente relatório de investigação surgiu no âmbito da unidade curricular de Prática de Ensino Supervisionada do Mestrado em Educação Pré-Escolar. Na prática, em contexto de jardim de infância, houve a necessidade de estimular e promover interações positivas entre as crianças para que existisse uma convivência saudável, inclusiva e democrática no ambiente educativo. A partir desta realidade procurei investigar a relação entre a aprendizagem cooperativa e a qualidade das interações que as crianças estabeleciam entre si. Neste sentido, os principais objetivos do estudo foram a realização de atividades no âmbito da aprendizagem cooperativa, bem como a promoção e o desenvolvimento de competências sociais e de interações positivas. O estudo de natureza qualitativa centra-se em dois grupos heterogéneos de crianças que realizaram um leque diversificado de atividades de caráter cooperativo. A técnica utilizada para a recolha de dados foi a observação direta, complementada por gravações audiovisuais e registos escritos, mais precisamente notas de campo. Os resultados da investigação evidenciam que a prática de atividades de aprendizagem cooperativa contribuí para a mobilização de valores e competências sociais, ou seja, assiste-se a um desenvolvimento do saber ser, saber estar e saber relacionar-se e cooperar com os outros. E, por conseguinte, a qualidade das interações que se estabelecem entre as crianças é potenciada através da aprendizagem cooperativa

    Previsão da procura turística em Portugal: cointegração, modelos ECM e modelos univariados

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    Neste estudo é desenvolvida a metodologia da análise de cointegração e dos modelos ECM aplicados à procura turística em Portugal – objectivo principal do nosso estudo – sendo também analisados alguns modelos de séries temporais univariados. Os países sobre os quais recaiu a nossa análise foram a Alemanha, Espanha, França, Holanda e Reino Unido, uma vez que estes são os principais países emissores de turistas. O período de análise corresponde aos anos de 1975 a 1994 (dados anuais), e os dados de 1995-1997 foram utilizados para efectuar previsões, com um horizonte temporal de um ano. Um estudo comparativo em termos da precisão das previsões entre os modelos ECM e os modelos Naive 1 e 2, Alisamento Exponencial e Análise da Curva da Tendência mostrou que os resultados obtidos para os modelos ECM são desapontantes, à semelhança de Kulendran e King (1996). Os modelos Naive 1 e 2 mostraram ser os melhores modelos de previsão, seguidos do modelo de alisamento exponencial

    O Yap1 no stress causado pelo excesso de cobalto em S. cerevisiae

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    Mestrado em BiotecnologiaA capacidade dos organismos em alterar os seus padrões de expressão de genes em resposta a perturbações do meio ambiente é essencial para a sua viabilidade. Neste trabalho, utilizando Saccharomyces cerevisiae como organismo eucariota modelo, foi estudada a relevância do factor de transcrição da família Yap, o Yap1, na desintoxicação do excesso de cobalto. Os resultados obtidos neste trabalho demonstram que, após a incubação das células com cobalto, o factor de transcrição Yap1 é acumulado no núcleo, através de um mecanismo independente de Orp1/Gpx3. Verificámos que o cobalto tem a capacidade de ligar-se directamente ao Yap1, sugerindo que, à semelhança do que acontece com outros metais, seja este o mecanismo de retenção nuclear após o stress. Confirmámos que uma vez no núcleo, o Yap1 medeia a indução de genes envolvidos na regulação do stress oxidativo em levedura (tais como GPX2, SOD1, TRR1 e TRX2) e constatámos que a presença de cobalto aumenta os níveis de carbonilação das proteínas, sendo esse aumento mais acentuado na ausência de Yap1. Verificámos ainda que os níveis de cobalto estão levemente diminuídos no mutante yap1 ao contrário do ferro que está em concentrações mais elevadas neste mutante relativamente à estirpe selvagem, quer na presença como na ausência de cobalto. Este facto leva-nos a propor que o cobalto altere a homeostase do ferro e que em consequência, conjuntamente com a diminuição das defesas anti-oxidantes, gere stress oxidativo. Foi descrito que a glutationa (GSH) é importante na homeostase do ferro e o excesso de cobalto leva ao aumento dos níveis de ferro intracelulares. Verificámos não só que a expressão de GSH1 está diminuída aos 30 minutos de tratamento do mutante yap1 com cobalto mas também que a adição de GSH faz recuperar os fenótipos de crescimento na presença deste metal. Finalmente apresentámos um modelo de acção do factor Yap1 no stress provocado pelo cobalto.The ability of organisms to reprogram gene expression in response to changes in the environment is essential for their viability. In this work, using Saccharomyces cerevisiae as a eukaryotic model organism, we studied the relevance of the transcription factor, Yap1, in the detoxification of cobalt excess. The results here reported show that after incubation of cells with cobalt, Yap1 accumulates in the nucleus, through a mechanism independent of the peroxidase Orp1/Gpx3. We found that cobalt has the ability to directly bind to Yap1, suggesting that this is the mechanism for its nuclear retention after cobalt treatment. We confirmed that, once in the nucleus, Yap1 mediates the induction of genes involved in the regulation of oxidative stress in yeast (such as GPX2, SOD1, TRX2 and TRR1). Moreover, we found that the presence of cobalt increases the levels of protein carbonylation, being the damage more pronounced in the absence of Yap1. It was also found that cobalt levels are slightly decreased in the yap1 mutant. In contrast, the iron concentration is higher in this mutant than in the wild type, in the presence and absence of cobalt. This led us to propose that the cobalt alters iron homeostasis and iin consequence generate oxidative stress. It was reported that glutathione (GSH) is important in the homeostasis of iron. As the excess of cobalt leads to increased levels of intracellular iron, we found not only that in the yap1 mutant GSH1 expression is decreased after 30 minutes of treatment with cobalt but also, the addition of GSH can recover the growth phenotypes in the presence of this metal. . Finally we present a working model of the transcription factor Yap1 in stress caused by cobalt

    Ritmos musicales como puente entre el arquitecto y el usuario

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    Ponència presentada a: Session 5: Del diseño a la construcción. Sostenibilidad (temas de diseño ambiental) / From design to construction. Sustainability (environmental design issues

    Evaluation of the behaviour of bio-based nanostructures in food systems

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    Dissertação de mestrado em BiotecnologiaThe growing consumers’ interest in healthier foods has led the food industry to develop functional foods specifically designed to improve human health, well-being, and performance. Curcumin is a natural polyphenol that presents numerous biological activities. However, curcumin has low water solubility, poor chemical stability, and low bioavailability. Lipid-based nanostructured delivery systems can be used to encapsulate curcumin. In this study, solid lipid nanoparticles (SLNs) encapsulating curcumin were developed and incorporated into a gelatine food matrix. SLNs (before and after incorporation in the gelatine) were characterized through mean diameter (Z-average diameter), polydispersity index (PDI) and zeta potential (ζ-potential) by Dynamic light scattering (DLS). Gelatine and gelatine-SLNs were evaluated through colour, texture, and rheology during 21 days of storage. In vitro digestion of the SLNs and gelatine-SLNs was performed and curcumin bioaccessibility, stability, and bioavailability were measured. The degree of hydrolysis (DH) of proteins and the production of free fatty acids (FFA) of gelatine and gelatine-SLNs were evaluated at gastric and intestinal phases, respectively. During 21 days, the Z-average diameter of the SLNs was maintained and the ζ-potential slightly decreased. The incorporation of the SLNs into gelatine did not significantly change neither the initial particle size nor PDI. ζ-potential of SLNs and gelatine-SLNs is different and this is due to the fact that gelatine has a slightly positive surface charge. The total colour difference (TCD) of the gelatine and gelatine-SLNs remained constant during 21 and 14 days of storage, respectively. The addition of SLNs did not lead to changes in the textural parameters of the gelatine, however, they promoted more solid behaviour to this food matrix. The value of DH of proteins in the gelatine and gelatine-SLNs were 47.8 % and 52.2 %, respectively. The total production of FFA of gelatine-SLNs was almost double of that of SLNs. Curcumin bioaccessibility and bioavailability were not statistically different between SLNs and gelatine-SLNs. However, the stability was higher in the gelatine-SLNs sample, suggesting that this food matrix provides a protective effect to curcumin. Finally, these results suggest that SLNs encapsulating curcumin and their incorporation in the gelatine food matrix is a promising application for the food industry

    Edible coatings based on chitosan-beeswax emulsions

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    Dissertação para obtenção do Grau de Mestre em Engenharia Química e BioquímicaThe use of edible biopolymer-based films and coatings is an environmentally friendly technology that offers substantial advantages for increase of shelf-life of many food products including fruits and vegetables. The development of this kind of films and coatings is a technological challenge for the industry and a very active research field worldwide. In this work biodegradable edible films of chitosan with different contents of beeswax were prepared and characterized. Their hygroscopic properties and water vapour permeability, as well as their CO2 and O2 permeability, mechanical, optical and superficial properties were determined. All the obtained films are transparent with a slightly yellowish colour. They are homogeneous and dense, despite the films with beeswax presented some cracks and depressions in their structure. The incorporation of beeswax increases the films hydrophobicity, higher contact angle values, but still prevails their hydrophilic nature. Regarding the mechanical properties, these films are flexible and elastic, but the increase of beeswax content increases their brittleness. The films showed decreased water vapour permeability as well as decreased hydrophilic properties, with the increase of beeswax content. The sorption and diffusion coefficients were evaluated for water vapour transport. The permeability decrease was mainly due to the reduction of the diffusion coefficient. A reduction of the water vapour permeability and a significant reduction in oxygen permeability were achieved with the inclusion of beeswax in the polymeric matrix. Comparing to the films without beeswax, the water vapour permeability decreased 32% and the oxygen permeability 90% for the films with 10% beeswax. Regarding the carbon dioxide permeability, it increased about 240% for the films with 10% beeswax. From the results, it is thought that these films are promising to be used in food packaging mainly for fruits and vegetable coating, mainly due to their barrier properties that allow the products to breathe and inhibit the oxidation process

    Nanoscale Memristor: Great potential for memory and synapse emulator for computing applications

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    This work reports the fabrication and electrical characterization of Metal-Insulator-Metal (MIM) devices for neuromorphic applications using zinc-tin-oxide (ZTO) and indium-gallium-zinc-oxide (IGZO) as the switching layers and molybdenum (Mo) for the devices ‘contacts. A lithographic mask was used along with physical vapor deposition (PVD) processes for the production of the different samples’ layers. Using ZTO as a switching layer in order to replace other elements that are becoming scarce such as indium or gallium is of relevant importance, therefore it was first attempted a ZTO based MIM device. Upon electrical characterization the ZTO devices show an analog behavior without the need of current compliance (being therefore self-limited), good multilevel storage property, reliability and a stable state retention for long periods of time. It is suspected a 2D type of switching mechanism, based on the tunneling through a Schottky barrier at the interface, however the details of the exact mechanism aren’t yet clear. Furthermore, the device is highly prone to interact with humidity present in the atmosphere and some fabrication steps, which is a possible explanation for the anticlockwise RESET. A second batch of ZTO devices was fabricated in order to remediate the RESET process, using a passivation step, however the RESET direction wasn’t affected although the rectification properties of the devices were enhanced. Since upon pulse testing the ZTO devices behaved erratically, this switching layer was discarded and IGZO used instead. With this alternative amorphous oxide semiconductor material, the symmetry and linearity of the conductance change was evaluated and transition from STP (Short-Term Potentiation) to LTP (Long-Term Potentiation) successfully demonstrated upon pulse repetition, showing similar decay fashion to human memory, following a Kohlrausch-Williams-Watts function (commonly called “stretched-exponential function”)

    Impact of seawater acidification in starfish regeneration: a proteomic approach

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    Tese de mestrado, Biologia Molecular e Genética, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2015Since the start of the industrial revolution (XVIII century), atmospheric levels of carbon dioxide (CO2) have been rising at a far greater rate than previously experienced, increasing CO2 dissolved in seawater. This process is recognized as ocean acidification and can severely damage calcifying organisms. Since echinoderms have an endoskeleton composed of magnesium calcite, they are predicted to be a sensitive taxa affected by this acidic environment. Taking into account that some species of this filo have a faster regeneration capacity under low pH, analysis of the proteome represents a powerful tool to examine these physiological trait at a molecular level. Trying to strengthen this work on ocean acidification effects, we studied Asterias rubens’ behaviour by observing their preference in choosing a leading arm when submitted to different regeneration time-points (non-regeneration and regeneration after 1, 4, 9 and 14 days) and at two pH environments (control (CpH) – 8.1 and low (LpH) – 7.7). It was concluded that they do not have a preference leading arm before ablation in both pH environments. Although, one day after ablation they drastically decrease the use of the wounded arms, as expected, while the non-amputated arms did not suffer any changes. Furthermore, after nine days subjected to these conditions, it seems that sea stars recovered completely the movement of the amputated arms. Asterosaponins search was also a vital part of this work, since they are known for having important functions in sea stars. We observed that two of the nine asterosaponins detected in the control pH were also detected in low pH samples, and that their concentration decreased, suggesting that acidic pH may alter their biosynthesis. Proteins from both cell-free coelomic fluid (CFF) and radial nerve cord (RNC) were extracted, digested and further analyzed by nano LC-MS/MS. We were able to identify 298 proteins, being 81% of all proteins identified differentially expressed. A surprising finding was the almost absence of stress proteins in an acidic pH environment. In this work, we propose a correlation between an acidic environment and asterosaponins’ biological effects. The decline in diversity and amount of these biomolecules can be caused by already known decreases in respiratory rate and cholesterol absorption. Although, asterosaponins might have positive effects in predation and reproduction. The detected increase in vitellogenin expression seems to be associated with the amplified spawning event induced by the low levels of asterosaponins at acidic pH, thereby also enhancing reproduction.Desde o início da revolução industrial (século 18) que os níveis atmosféricos de dióxido de carbono (CO2) têm aumentado a um ritmo nunca antes registado (de 280ppm para 380ppm, e espera-se que duplique no final do século), essencialmente devido à emissão de gases com efeito de estufa resultantes de atividades humanas. Como consequência, a concentração de CO2 dissolvido nos oceanos também aumenta, e por sua vez, também a concentração de iões hidrogénio e iões bicarbonato, conduzindo a uma diminuição de pH e de iões carbonato. Este conjunto de reações é designado por acidificação dos oceanos, e pode danificar seriamente o funcionamento de organismos marinhos que de alguma forma utilizam o processo de biocalcificação na sua estrutura corporal. Os equinodermes possuem um endosqueleto composto por calcite de magnésio, têm uma extraordinária capacidade de regeneração, mas também são osmoconformadores. Isto significa que o fluido celómico (CF) que preenche a cavidade corporal é muito semelhante, a nível de composição iónica, ao ambiente externo a que está submetido. Embora também muito idêntico, o pH do fluido celómico é geralmente 0.11-0.58 unidades mais baixo que o pH do exterior, devido a taxas de difusão de CO2 mais ou menos lentas, que podem aumentar ou reduzir a concentração de dióxido de carbono no CF, respetivamente. Por estas razões prevê-se que os equinodermes sejam um taxa sensível a ambientes ácidos. Apesar de se esperar que todas as espécies sejam afetadas de forma negativa, é do conhecimento científico que algumas espécies deste filo crescem e desenvolvem-se mais depressa quando expostas a pH ácido, enquanto outras apresentam diminuição de metabolismo ou redução da expressão proteica global. Considerando a diversidade incongruente de resultados publicados, e tendo a estrela-do-mar comum A. rubens como espécie-alvo, realizámos análises de expressão proteica para estudar estas observações fisiológicas de uma perspetiva molecular. Por forma a ter um estudo mais completo sobre o efeito da acidificação nesta espécie, observámos estrelas-do-mar sob diferentes tempos de regeneração (não-amputação e amputação após 1 dia, 4, 9 e 14) submetidas a dois pHs (controlo (CpH) – 8.1 e ácido (LpH) – 7.7), com o propósito de determinar com que braço preferencialmente elas iniciavam a deslocação. Os braços escolhidos para amputação foram os mais próximos à madreporita. As estrelas-do-mar não apresentaram preferência no braço ‘líder’ antes de amputadas e sob CpH, o que não é consistente com resultados já publicados. No entanto, como esperado, os braços amputados apresentaram uma diminuição do número de movimentos um dia após a regeneração ser imposta, enquanto o número de movimentos dos braços não-amputados permaneceu igual. Após nove dias os movimentos dos braços amputados foram restabelecidos para os valores iniciais (sem amputação), e por isso considerámos que as estrelas recuperaram o movimento normal dos braços. É vantajoso para a estrela-do-mar que este movimento seja restabelecido o mais rapidamente possível, para que possa, entre outros, alimentar-se e/ou fugir de possíveis predadores. Para estudar os fatores moleculares que possam estar envolvidos em resposta a uma futura diminuição do pH dos oceanos, foram recolhidos dois tipos de amostra: fluido celómico (dois pHs e 15 dias pós-amputação), e nervo radial (RNC; dois pHs e não-amputação; dois pHs e 15 dias pós-amputação). O CF foi centrifugado para que fossem retirados os coelomócitos, designando-se desta forma fluido celómico livre de células (CFF). Este fluido foi submetido a centrifugação e ultrafiltração para separar a fração de alta massa molecular (proteínas) da fração de baixa massa molecular. Esta última contém asterosaponinas, moléculas que são conhecidas por terem funções importantes a nível de sinalização química mas também a nível digestivo e reprodutivo, e que por isso considerámos essenciais neste estudo. Esta fração foi então sujeita a extração de fase sólida (SPE) com diferentes eluições de acetonitrilo e ácido fórmico para isolamento das asterosaponinas, e posteriormente analisadas por ESI-MS. Os dados foram adquiridos por um espectrofotómetro linear ion trap mass Thermo Finnigan LTQ, controlado pelo software Xcalibur v 2.0, também usado na análise dos espectros resultantes da leitura das amostras. Todas as asterosaponinas investigadas estavam presentes no pH controlo, mas apenas duas delas foram detetadas em estrelas-do-mar submetidas a pH ácido. Para além disto, as suas concentrações diminuíram em pH ácido. Tendo em conta que a A. rubens apresenta um baixa taxa de respiração após 27 dias exposta a pH 7.7 do que quando submetida a pH 8.1, podemos assumir que este decréscimo irá alterar a disponibilidade de ATP, e consequentemente comprometer a biossíntese de asterosaponinas. Por sua vez, a diminuição destas biomoléculas poderá ter efeitos negativos a nível digestivo, através da redução da absorção de colesterol, mas poderá também ter efeitos positivos ao nível da predação. As proteínas do CFF foram extraídas e precipitadas com recurso a ácido tricloroacético e beta-mercaptoetanol, enquanto as proteínas do RNC foram extraídas e precipitadas recorrendo a azoto líquido e a um buffer suplementado com SDS, Tris-HCl, DTT, um cocktail anti-protease e PMSF. A quantificação das proteínas do CFF e RNC foi feita com recurso ao QuantiPro BCA Assay KIT 0.5-30μg/mL protein, e a digestão, embora diferente, teve como base o uso de redutores de pontes persulfureto (DTT e TCEP), iodoacetamida para alquilação das cisteínas e tripsina para quebrar a proteína em péptidos. As amostras digeridas de ambos os tecidos foram analisadas por nano LC-MS/MS. Foram identificadas 213 proteínas no RNC, mas apenas uma estava presente em todas as condições estudadas. Por esta razão, podemos concluir que o procedimento experimental deve ser otimizado. A análise do CFF permitiu identificar 298 proteínas, das quais 19% eram comuns às duas condições de pH. De acordo com estes resultados, 81% de todas as proteínas identificadas estavam diferencialmente expressas. Comuns a ambas as condições de pH, e como esperado, foram detetadas actinas, tubulinas e ubiquitinas. A quantificação realizada permitiu observar um aumento de expressão significativo apenas em 2 proteínas no pH ácido: alfa-tubulina e vitellogenina 1. A primeira está envolvida na formação do citoesqueleto, e por isso, será importante numa fase de rápida proliferação celular. A segunda proteína é responsável pelo transporte de lípidos para os oócitos, e o seu aumento de expressão parece aumentar o número de eventos de desova em estrelas-do-mar. Os baixos níveis de asterosaponinas presentes em pH ácido também parecem favorecer este acontecimento, aumentando desta forma, o sucesso reprodutivo. Com base em estudos recentes realizados em corais e em zooplâncton, previa-se um aumento na expressão de proteínas de stress em condições de pH ácido. No entanto, no presente estudo, as estrelas-do-mar submetidas a esta condição de pH, exibiram apenas uma proteína de stress. Para melhor compreensão dos efeitos da acidificação dos oceanos em cada uma das proteínas aqui identificas, será necessário realizar estudos mais detalhados para avaliar o impacto biológico da expressão proteica diferencial que observámos

    Pulmonary rehabilitation is successful in mild Chronic Obstructive Pulmonary Disease

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    Pulmonary rehabilitation (PR) is effective in improving healthrelated quality of life of patients with moderate-to-very-severe COPD. However, the effects of PR in patients with mild COPD have been scarcely explored. The overall findings show that PR improves exercise tolerance, dyspnea, muscle strength, physical activity and health-related quality of life in patients with mild COPD, and that most of these benefits last for at least 6 months. This study is a relevant step towards the integration of PR as part of the first-line management of patients with mild COPDpublishe
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