Caracterización de las alteraciones plaquetarias inducidas por interferones tipo I

Fil: Rivadeneyra, Leonardo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Buenos Aires, ArgentinaLos interferones tipo I (IFN I) son elementos claves en la respuesta inmune antiviral que regulan diferentes procesos de varios tipos celulares gracias a su capacidad inmunomoduladora y antiproliferativa. Varios tipos de interferones han sido aprobados para su uso en humanos para el tratamiento de la hepatitis C y, junto con la quimioterapia y la radioterapia, en el tratamiento del cáncer entre otros. A pesar de sus efectos beneficiosos, uno de los efectos no deseados es la inducción de trombocitopenia debido a su efecto antiproliferativo. Además, la disminución del número de plaquetas es un fenómeno frecuentemente observado durante el curso de diferentes infecciones virales. Estudios previos incluyendo reportes de nuestro grupo, mostraron que los IFN I eran capaces de regular selectivamente la producción plaquetaria abriendo nuevos mecanismos sobre el modo de acción de esta citoquina. De esta manera, en este trabajo de Tesis profundizamos el conocimiento del rol de los IFN I sobre el proceso de megacario/trombopoyesis. Utilizando un modelo de generación de megacariocitos y producción de plaquetas humanas in vitro encontramos que el Poly (I:C) (mimético de los productos ARN doble cadena de replicación viral e inductor de la síntesis de IFN I), además de alterar cuantitativamente la biogénesis plaquetaria, también produce alteraciones a nivel cualitativo ya que las plaquetas de cultivos tratados con este ARN doble cadena presentaron una menor capacidad de unir fibrinógeno, una de sus principales funciones hemostáticas. Esta alteración fue reproducida por IFN? y ??recombinante humano y no estuvo asociada a una menor expresión de su principal receptor, la integrina ?IIb?3. Los hallazgos in vitro fueron confirmados en modelos experimentales in vivo en los cuales se observó que la administración de Poly (I:C) en ratones indujo un aumento en los niveles de IFN? tanto plasmáticos como medulares. Este aumento se vio acompañado de una disminución en el recuento plaquetario y un aumento en el volumen plaquetario medio (VPM). La trombocitopenia no fue debida a un mayor consumo de plaquetas ni a un menor número de megacariocitos, sino a un aumento en el tamaño de los mismos y un menor contacto con los sinusoides medulares. Las plaquetas de los animales tratados mostraron disminuida su función hemostática (unión de fibrinógeno y liberación de factor von Willebrand) y pro inflamatoria (exposición de P-selectina, formación de agregados mixtos y liberación de RANTES). La alteración en el recuento y la funcionalidad plaquetaria tuvieron un fuerte impacto en la hemostasia primaria prolongando el tiempo de sangría y disminuyendo la adhesión de las plaquetas. Sin embargo, de manera contraria, el spreading plaquetario y la retracción del coágulo fueron mayores. Las alteraciones observadas tanto en el tamaño de los megacariocitos como en su distribución en la médula ósea, así como en las respuestas efectoras de las plaquetas mostraron una correlación lineal con los niveles de IFN I producidos, fueron reproducidas por la administración de Imiquimod (un inductor de IFN I estructural y funcionalmente diferente al Poly (I:C)) y ninguna de ellas se observó en ratones deficientes del receptor de los IFN I que fueron tratados con ambos inductores. En conjunto, estos datos presentan a los IFN I como nuevos reguladores de la megacario/trombopoyesis y señalan que el aumento de estas citoquinas podría ser uno de los mecanismos asociados a la trombocitopenia que subyace a las infecciones virales u otras patologías que cursan con altos niveles de IFN I. Además, estos hallazgos abren nuevas avenidas para la investigación de los procesos que subyacen a la fisiopatología de la biogénesis plaquetaria

Mecanismos moleculares involucrados en las respuestas inflamatorias mediadas por plaquetas en acidosis

La acidosis es una característica del microambiente inflamatorio presente en situaciones de injuria vascular, tumor, aterosclerosis y enfermedades inflamatorias pulmonares. Las plaquetas además de ser elementos claves en la hemostasia y la trombosis, también juegan un rol importante en estas patologías. En estudios previos mostramos que el descenso del pH apaga las funciones hemostáticas de las plaquetas y promueve respuestas inflamatorias mediadas por la expresión de P-selectina en la superficie plaquetaria. En este trabajo estudiamos los mecanismos moleculares involucrados en estos procesos. Mientras la fosforilación de algunas moléculas involucradas en la activación plaquetaria (Src, Akt y ERK) fue significativamente inhibida en acidosis, la activación de p38 o NFκB no fue modificada o aumentó respectivamente, con el descenso del pH. El incremento en la expresión de P-selectina observado en acidosis se mantuvo en presencia de inhibidores de Src (PP1), PI3K/Akt (Ly294002) y ERK (U0126). Este fenómeno tampoco fue modificado por la incubación individual de las plaquetas con bloqueantes de p38 (SB203580) o NFκB (Ro1069920), pero sí disminuyó significativamente ante la presencia simultánea de ambos inhibidores. En concordancia con el aumento en la expresión de P-selectin, la formación de agregados plaquetas-leucocitos, así como la migración de leucocitos en presencia de plaquetas, aumentó en acidosis y ambos fenómenos fueron revertidos por la presencia conjunta de SB203580 y Ro1069920. Estos resultados indican que las respuestas inflamatorias mediadas por plaquetas en condiciones de acidosis requieren la activación simultánea de p38 y NFκB y plantean la posibilidad de nuevos blancos terapéuticos para el tratamiento de la inflamación.Fil: Etulain, Julia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Carestia, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rivadeneyra, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fondevila Sancet, Juan Carlos. Clínica Bazterrica. Servicio de Hematología; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Con la ayuda de Dios. Crónica de luchas indígenas actuales por el territorio en la Sierra Nororiental de Puebla

Los cuatro autores de este texto hemos intercambiado mucho durante una estancia de Pierre Beaucage en la Sierra Nororiental de Puebla en septiembre-octubre 2016. Hemos recorrido sitios de proyectos hidroeléctricos, hemos asistido a varios encuentros y hemos dialogado con los principales actores populares que participan en la lucha contra la construcción de represas y de líneas de alta tensión. El texto que sigue resume nuestras observaciones y nuestras reflexiones; su redacción ha sido la oca..

Role of neutrophils in CVB3 infection and viral myocarditis

Coxsackievirus B3 (CVB3) is a globally prevalent enterovirus of the Picornaviridae family that is frequently associated with viral myocarditis (VM). Neutrophils, as first responders, may be key cells in determining viral disease outcomes; however, neutrophils have been poorly studied with respect to viral infection. Although neutrophils have been ascribed a relevant role in early cardiac inflammation, their precise role in CVB3 infection has not yet been evaluated. In this study, we aimed to determine if the interaction between human neutrophils and CVB3 could lead to viral replication and/or modulation of neutrophil survival and biological functions, and whether neutrophil depletion in a murine model has a beneficial or harmful effect on CVB3 infection. Our results show that CVB3 interacted with but did not replicate in human neutrophils. Neutrophils recognized CVB3 mainly through endosomal TLR-8, and infection triggered NFκB activation. Virus internalization resulted in increased cell survival, up-regulation of CD11b, enhanced adhesion to fibrinogen and fibronectin, and the secretion of IL-6, IL-1β, TNF-α, and IL-8. Supernatants from infected neutrophils exerted chemotactic activity partly mediated by IL-8. The infected neutrophils released myeloperoxidase and triggered neutrophil extracellular trap formation in the presence of TNF-α. In mice infected with CVB3, viral RNA was detected in neutrophils as well as in mononuclear cells. After neutrophil depletion, mice showed reduced VM reflected by a reduction in viral titers, cell exudates, and CCL-2 mRNA levels, as well as the abrogation of reactive cardiomyocyte hypertrophy. Our results indicate that neutrophils have relevant direct and indirect roles in the pathogenesis of CVB3-induced VM.Instituto de Biotecnología y Biología MolecularFacultad de Ciencias Exacta

Role of neutrophils in CVB3 infection and viral myocarditis

Coxsackievirus B3 (CVB3) is a globally prevalent enterovirus of the Picornaviridae family that is frequently associated with viral myocarditis (VM). Neutrophils, as first responders, may be key cells in determining viral disease outcomes; however, neutrophils have been poorly studied with respect to viral infection. Although neutrophils have been ascribed a relevant role in early cardiac inflammation, their precise role in CVB3 infection has not yet been evaluated. In this study, we aimed to determine if the interaction between human neutrophils and CVB3 could lead to viral replication and/or modulation of neutrophil survival and biological functions, and whether neutrophil depletion in a murine model has a beneficial or harmful effect on CVB3 infection. Our results show that CVB3 interacted with but did not replicate in human neutrophils. Neutrophils recognized CVB3 mainly through endosomal TLR-8, and infection triggered NFκB activation. Virus internalization resulted in increased cell survival, up-regulation of CD11b, enhanced adhesion to fibrinogen and fibronectin, and the secretion of IL-6, IL-1β, TNF-α, and IL-8. Supernatants from infected neutrophils exerted chemotactic activity partly mediated by IL-8. The infected neutrophils released myeloperoxidase and triggered neutrophil extracellular trap formation in the presence of TNF-α. In mice infected with CVB3, viral RNA was detected in neutrophils as well as in mononuclear cells. After neutrophil depletion, mice showed reduced VM reflected by a reduction in viral titers, cell exudates, and CCL-2 mRNA levels, as well as the abrogation of reactive cardiomyocyte hypertrophy. Our results indicate that neutrophils have relevant direct and indirect roles in the pathogenesis of CVB3-induced VM.Fil: Rivadeneyra, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Charó, Nancy Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Kviatcovsky, Denise. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: de la Barrera, Silvia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Gomez, Ricardo Martin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin

Catecismo filosófico-teológico de religión

Viral hemorrhagic fevers (VHFs) caused by arenaviruses are acute diseases characterized by fever, headache, general malaise, impaired cellular immunity, eventual neurologic involvement, and hemostatic alterations that may ultimately lead to shock and death. The causes of the bleeding are still poorly understood. However, it is generally accepted that these causes are associated to some degree with impaired hemostasis, endothelial cell dysfunction and low platelet counts or function. In this article, we present the current knowledge about the hematological alterations present in VHF induced by arenaviruses, including new aspects on the underlying pathogenic mechanisms.Instituto de Biotecnologia y Biologia Molecula

Functional responses and molecular mechanisms involved in histone-mediated platelet activation

Histones are highly alkaline proteins found in cell nuclei and they can be released by either dying or inflammatory cells. The recent observations that histones are major components of neutrophil extracellular traps and promote platelet aggregation and platelet-dependent thrombin generation have shown that these proteins are potent prothrombotic molecules. Because the mechanism(s) of platelet activation by histones are not completely understood, we explored the ability of individual recombinant human histones H1, H2A, H2B, H3 and H4 to induce platelet activation as well as the possible molecular mechanisms involved. All histones were substrates for platelet adhesion and spreading and triggered fibrinogen binding, aggregation, von Willebrand factor release, P-selectin and phosphatidylserine (PS) exposure and the formation of platelet-leukocyte aggregates; however, H4 was the most potent. Histone-mediated fibrinogen binding, P-selectin and PS exposure and the formation of mixed aggregates were potentiated by thrombin. Histones induced the activation of ERK, Akt, p38 and NFκB. Accordingly, histone-induced platelet activation was significantly impaired by pretreatment of platelets with inhibitors of ERK (U 0126), PI3K/Akt (Ly 294002), p38 (SB 203580) and NFκB (BAY 11-7082 and Ro 106-9920). Preincubation of platelets with either aspirin or dexamethasone markedly decreased fibrinogen binding and the adhesion mediated by histones without affecting P-selectin exposure. Functional platelet responses induced by H3 and H4, but not H1, H2A and H2B, were partially mediated through interaction with Toll-like receptors -2 and -4. Our data identify histones as important triggers of haemostatic and proinflammatory platelet responses, and only haemostatic responses are partially inhibited by anti-inflammatory drugs.Fil: Carestia, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Rivadeneyra, Leonardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Romaniuk, María Albertina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Fondevila, Carlos. Clínica Bazterrica;Fil: Negrotto, Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; ArgentinaFil: Schattner, Mirta Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentin