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    Análise histórica dos cargos em comissão no Brasil

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    Monografia (graduação)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciência Política, 2014.O objetivo do presente trabalho é analisar a Administração Pública brasileira no contexto atual no que diz respeito aos cargos públicos e à forma como são acessados. Sabe-se que existe uma quantidade alta de cargos em comissão no governo atualmente e que esses cargos são de livre nomeação e exoneração pela autoridade competente. Fazendo uma análise do histórico da administração pública e dos cargos públicos ao longo da história do Brasil, tentaremos alcançar as causas de esse tipo de cargo ainda existir, levando em consideração que estamos em uma era de luta contra problemas como nepotismo e corrupção e busca da impessoalidade no governo

    Produção de proteínas quiméricas como bioferramentas no estudo da desintegrina e metaloprotease ADAM23

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    Orientador : Prof. Dr. Silvio Marques ZanataDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 31/03/2015Inclui referências : f. 155-165Resumo: ADAM23 é uma proteína transmembrana, da família ADAM (A Disintegrin and Metalloprotease), altamente expressa em células neuronais, cujo papel biológico não está bem elucidado. Sabe-se que a ADAM23 está envolvida no processo de adesão celular em neuroblastomas através da interação com integrinas. Mecanismos de adesão celular envolvendo a ADAM23 humana, informações sobre o seu processamento intracelular e as propriedades do seu ectodomínio podem servir para a compreensão do papel estrutural e biológico dessa proteína. O presente estudo visou o desenvolvimento de vetores de expressão para a produção de quimeras protéicas constituídas pelo ectodomínio de ADAM23 e a região Fc de IgG humana (domínios CH2 e CH3). As quimeras serão utilizadas como bioferramentas no estudo do processamento de ADAM23 e da sua função na adesão e proliferação celular. Os fragmentos de nucleotídeos que codificam os resíduos 60-792 (ADAM23C1) e 287-792 (ADAM23C2) da ADAM23 humana foram clonados no vetor pINFUSE-hIgG1-Fc2 (secreção através do peptídeo sinal da IL-2) enquanto a sequência 1-792 foi clonada no vetor pcDNA3.1-hIgG1-Fc2 (secreção utilizando o peptídeo sinal da ADAM23). As três construções foram transfectadas nas linhagens N2A (neuroblastoma de camundongo), HEK-293T (rim humano) e CHO-K1 (ovário de hamster) e tanto os extratos celulares como os sobrenadantes de cultura foram analisados para a expressão das quimeras. A linhagem N2A apresentou a mais eficiente secreção das três proteínas quiméricas. As quimeras ADAM23C1 e ADAM23C2, foram adequadamente expressas e recuperadas dos sobrenadantes das culturas de células N2A e HEK-293T. A quimera ADAM23C3 (full-length do ecdomínio) foi identificada sempre na forma processada, indicando que seu peptídeo sinal foi reconhecido pelas maquinarias de secreção e processamento das células utilizadas. Diferentes métodos de purificação das quimeras foram comparados, sendo que a precipitação por sulfato de amônio mostrou-se ser o mais adequado, por aliar economicidade de recursos e retenção da estrutura da proteína. Paralelamente foi avaliada a expressão de ADAM23 em diferentes linhagens e tecidos, além do estabelecimento da localização celular das formas imatura e processada da ADAM23. Com a ajuda do anticorpo monoclonal DL11C8 foi possível determinar que a forma processada de ADAM23 (70 kDa) é a mais abundante no encéfalo de camundongos e é expressa na face externa da membrana plasmática da linhagem N2A. Estes dados mostram pela primeira vez que há uma baixa expressão da forma de 100 kDa (não-processada) no sistema nervoso, ao contrário do que foi observado em linhagens tumorais. A relevância da razão de expressão entre as formas imatura e processada para a função da ADAM23 no sistema nervoso, como a sua relevância na progressão do fenótipo tumoral merecem mais investigação. Palavras-chave: ADAM23. Ectodomínio. Desintegrina. Metaloprotease. Proteínas Fc quiméricas.Abstract: ADAM23 is a transmembrane protein, member of ADAM (A Disintegrin and Metalloprotease) family, highly expressed in neuronal cells, whose biological role is not yet totally elucidated. It is known that ADAM23 is involved in the cellular adhesion process in neuroblastoma. ADAM23 interacts with integrins promoting cell adhesion. However, ADAM23 full-involvement in cellular adhesion mechanisms remains to be established. The present study aimed for the development of biological tools, particularly the production of expression vectors that code for chimeric proteins containing human ADAM23 ectodomain fused to a human IgG Fc region. Nucleotide fragments coding for the residues 60-792 (ADAM23C1) and 287-792 (ADAM23C2) were cloned in the vector pINFUSE-hIgG1-Fc2 while the sequence 1-792 (ADAM23C3) was inserted onto modified plasmid pcDNA3.1-hIgG1-Fc2. Three different cell lineages (N2A, HEK-293T and CHO-K1) were transfected with the expression plasmids and the chimeric proteins detected in both cell extracts and culture supernatants by monoclonal antibody DL11C8. N2A cell lineage presented the most efficient expression/secretion of the three chimeric proteins. CHO-K1 showed chimeric ADAM23C1 and ADAM23C2 secretion, although ADAM23C3 was not observed in supernatants. The full-length construction (C3) was always detected as a processed protein, indicating that endogenous ADAM23 signal peptide and processing signals were correctly translated by cellular host machinery. Several protocols were compared for purification of chimeric proteins from culture supernatant, being ammonium sulfate salting-out the most practical and convenient. Besides, it was established that mature ADAM23 (70 kDa) is the abundant form in the mouse brain and the processed protein is located at N2A cell surface. In addition it was showed, for the first time, that non-processed ADAM23 (100 kDa) has low expression in the central nervous system when compared with the processed 70 kDa form. Interestingly, tumoral cell lines (MDA-MB-435 and N2A) presented the opposite behavior. If the non-processed/mature ratio profile is specific for each cell line or has a role in the tumoral phenotype will be further investigated in future. Key words: ADAM23. Ectodomain. Disintegrin. Metalloprotease. Fc chimeric proteins

    Estudo in vitro das citocinas envolvidas na resposta inflamatória de macrófagos murinos à infecção pelo vírus da dengue.

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    TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Biológicas. Biologia.A dengue é uma doença que tem como agente etiológico o Dengue virus (DENV), da família Flaviviridae, do gênero Flavivirus. Mais de 50 milhões de infecções ocorrem anualmente no mundo. Níveis altos de diferentes citocinas foram observados na infecção por DENV. Sabe-se que após a infecção pelo DENV in vitro, os macrófagos, após o reconhecimento do vírus, liberam TNF-α, IFN-α, IL-1 e IL-6 fator ativador de plaquetas e histaminas. Outras citocinas também foram correlacionadas in vivo com a doença. Dentre as citocinas pró-inflamatórias encontradas in vivo e in vitro, em células infectadas com o DENV ou em pacientes com a febre hemorrágica da dengue (DHF), estão o TNF-α, o IFN-γ, o IFN-β, a IL-2, a IL-4, a IL-5, a IL-6, a IL-10, o IFN-α e o hCF. Outros mediadores da resposta inflamatória foram encontrados em pacientes com infecção aguda pelo DENV, como a enzima NOS2. As citocinas desempenham um papel sinérgico na superfície endotelial, contribuindo para o extravasamento do plasma e os seus níveis altos resultam no quadro grave da doença. Este estudo acompanhou, através de PCR em tempo real, as diferenças de cinética de expressão dos genes das principais citocinas inflamatórias (TNF-α, IFN-β, IL-10, IL-6 e IL-12p40) e da enzima NOS2 liberadas por macrófagos murinos RAW 264.7 durante a infecção pelo DENV-1 e DENV-4 e durante o estímulo com LPS. No presente trabalho, foram observadas diferenças nas cinéticas de expressão dos genes destas citocinas e enzima quando induzidos por DENV-1, DENV-4 e LPS. Os genes do IFN-β e da IL-6 apresentaram expressão precoce. Os genes do TNF-α, IFN-β, IL-10, IL-6 e IL-12p40 apresentaram expressão intermediária, intermediária-tardia e tardia. O gene da enzima NOS2 também apresentou expressão tardia.Dengue is a disease whose etiological agent is Dengue virus (DENV). This virus belongs to Flaviviridae family and Flavivirus genus. More than 50 million infections occur annually in the world. Elevated levels of different cytokines were observed in Dengue virus infection. It is well known that after DENV in vitro infection, macrophages, after virus recognition, secrete TNF-α, IFN-α, IL-1 and IL-6, which is an activating factor of platelets and histamine. Other cytokines were also in vivo correlated with dengue disease. Among pro-inflammatory cytokines identified in vivo and in vitro, in infected cells or in DHF patients, are TNF-α, IFN-γ, IFN-β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IFN-α and hCF. Other mediators of the inflammatory response were observed in patients with acute DENV infection, for example, the NOS2 enzyme. The cytokines play a mutually synergistic role in endothelial surface, inducing plasma leakage and their elevated level results in dengue severity. This study has identified, through real time PCR technique, the differences among the kinetics of genes expression of the major inflammatory cytokines (TNF-α, IFN-β, IL-10, IL-6 and IL-12p40) and of the NOS2 enzyme released by RAW 264.7 murine macrophage lineage during DENV-1 and DENV-4 infection and during LPS stimuli. In the current study, were observed differences between the gene expression kinetics of these cytokines and enzyme when induced by DENV-1, DENV-4 and LPS. The INF-β and IL-6 genes had early expression. The TNF-α, IFN-β, IL-10, IL-6 and IL-12p40 genes had intermediate, intermediate-late and late expression. The NOS2 gene also had late expression

    Estudo das vias/mecanismos de internalização e tráfego intracelular da desintegrina e metaloprotease ADAM23

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    Orientador: Prof. Dr. Silvio Marques ZanataTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa : Curitiba, 20/03/2020Inclui referências: p. 113-121Resumo: ADAM (A Disintegrin and Metalloprotease) é uma família de proteínas transmembranas envolvidas em funções biológicas tais como: liberação de fatores de crescimento e citocinas, desenvolvimento da musculatura e fertilização. No sistema nervoso as ADAMs parecem ter papéis importantes no desenvolvimento, regulando proliferação, migração, diferenciação e sobrevivência de vários tipos celulares, bem como a regulação do crescimento axonal e mielinização. Para estudar a internalização de ADAM23, foi utilizado um ensaio de biotinilação de proteínas de superfície celular de neuroblastomas transientemente transfectados com ADAM23. Foi observado que ADAM23 foi constitutivamente internalizada e esteve relativamente estável em quantidade na membrana plasmática por 72h após o início da internalização. Após o início da internalização, ADAM23 co-localizou com ambos endossomos precoce e de reciclagem, parecendo ser rapidamente transportada de volta para a membrana pela via do Rab4 ou mais lentamente pela via do Rab11. A partir do ensaio com a marcação com anti-ADAM23, a ADAM23 pareceu ser rapidamente (menos de 1 h) e continuamente reciclada, considerando a rápida reciclagem vista através de Rab4. A reciclagem de ADAM23 através de ambos os endossomos de reciclagem rápida (Rab4) e lenta (Rab11) pode ter a ver com duração e estabilidade da quantidade de proteína ADAM23 na superfície celular. Além disso, foi vista co-localização da ADAM23 com endossomo precoce (EEA1) e com endossomo intermediário (Rab5). Foi observada também co-localização da ADAM23 com fagossomo Rab7 o pré-cursor da via lisossomal. Considerando o papel da ADAM23 no câncer e em doenças neurológicas como epilepsia, o potencial da sua atividade na membrana plasmática, especialmente interagindo com integrinas, LGIs e PrPc, sua localização na superfície celular, sua internalização e reciclagem provavelmente são mecanismos bem controlados. A regulação da expressão de ADAM23 na membrana, o processo de endocitose e a reciclagem da ADAM23 podem estar relacionados à severidade dessas condições clínicas e ser potenciais alvos terapêuticos. Dessa forma, o presente trabalho teve como objetivo a descrição da via de internalização da ADAM23 e seu tráfego intracelular. Palavras-chave: ADAM23. Desintegrina metaloprotease. Endocitose. Internalização. Endossomo. Reciclagem. Degradação. Estabilidade.Abstract: ADAM (A Disintegrin and Metalloprotease) is a family of transmembrane proteins involved in a variety of biological functions such as: growth factors and cytokines secretion, muscular tissue development and fertilization. In nervous system, many ADAMs seem to have important roles during development, regulating proliferation, migration, differentiation and survival of various cell types, in addition to axonal growth and mielinization regulation. In order to study ADAM23 internalization, it was performed a biotynilation assay of plasma membrane proteins in transiently ADAM23 transfected neuroblastomas. It was observed that ADAM23 was constitutively internalized and that this protein quantity was relatively stable in plasma membrane 72h after the beginning of internalization. After the initiation of internalization, ADAM23 co-localized with both early and recycling endosomes, suggesting that ADAM23 might be quickly transported back to plasma membrana through Rab4 endosome or more slowly through endosome Rab11 pathway. Through anti-ADAM23 labeling assay, ADAM23 seemed to be rapidly (less than 1 hour) and continuously recycled, considering its co-localization with Rab4. ADAM23 recycling through rapid (Rab4) and slow (Rab11) recycling pathways might be related to ADAM23 duration and stability at cell surface. In addition, it was observed ADAM23 colocalization with early endosome (EEA1) and with intermediate endosome (Rab5). Interestingly, it was also seen ADAM23 colocalization with Rab7 phagosome, the lysosomal pathway precursor. Regarding ADAM23 role in cancer and in neurological diseases such as epilepsy, its potential of activity in plasma membrane, specially interacting with integrins, LGIs and PrPc, its location at cell surface, its internalization and recycling are probably wellcontrolled mechanisms. The regulation of ADAM23 expression at plasma membrane, the endocytosis process and recycling of ADAM23 might be related to clinical severity and be potential therapeutic targets. In this matter, the present work had as an objective the description of the internalization pathway and intracellular traffic of ADAM23. Keywords: ADAM23. Disintegrin Metalloprotease. Endocytosis. Internalization. Endosome. Recycling. Degradation

    Diagnóstico inicial: cultura afro-brasileira e preconceito

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    Anais do II Seminário Seminário Estadual PIBID do Paraná: tecendo saberes / organizado por Dulcyene Maria Ribeiro e Catarina Costa Fernandes — Foz do Iguaçu: Unioeste; Unila, 2014O Subprojeto Interdisciplinar Letras Espanhol/Letras Português, integrante do Programa Institucional de Bolsa de Iniciação à Docência (PIBID), da Universidade Estadual do Norte do Paraná, tem como objetivo trabalhar com a influência das culturas africana e hispânica na formação da cultura brasileira, ressaltando a importância dessa miscigenação na constituição da identidade brasileira. Por meio da literatura insólita, de forma dinâmica e contextualizada, o subprojeto procura mostrar aos alunos a diversidade peculiar ao povo brasileiro, enfatizando-se a superação de preconceitos. Para identificar o conhecimento empírico dos alunos do Ensino Fundamental sobre o tema, em consonância com a proposta didática de Gasparin (2009), foi aplicado um questionário, que possibilitou obter e analisar os dados apresentados neste trabalh

    Fechamento de Capital das Firmas: uma discussão teórico-empírica

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    As empresas são agentes de mercado movidos por decisões estratégicas, dentre as quais se destacam as escolhas com relação ao financiamento e controle dessas firmas. Manter o capital aberto ou fechado é uma decisão que tem sido destacada nos últimos anos pela literatura. Neste sentido, este estudo visa apresentar os principais argumentos teóricos desenvolvidos para explicar as características e motivações deste fenômeno. Além disso, são apresentados os principais direcionamentos com relação às duas principais formas que essas transações ocorrem: as aquisições alavancadas e as aquisições pela gestão. Por fim, apresentam-se evidências empíricas que identificaram e estudaram essas operações. O estudo busca contribuir com a literatura a partir da apresentação de um ensaio teórico-empírico com relação às decisões da firma com relação ao fechamento de capital

    SUBNOTIFICAÇÃO NO SINAN E FATORES GERENCIAIS E OPERACIONAIS ASSOCIADOS: REVISÃO SISTEMÁTICA DA LITERATURA

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    Objetivou-se identificar os índices de subnotificação de doenças e agravos de notificação compulsória no Sistema Nacional de Agravos de Notificação (Sinan) e fatores gerenciais e operacionais associados. Adotou-se como método a revisão sistemática da literatura, com buscas de publicações no período 2004-2014, nas bases de dados indexadas da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS); US National Library of Medicine (PubMed);  Coleção Scopus e Scientific Electronic Library Online (Scielo). Das 509 publicações identificadas, 50 atenderam aos critérios de inclusão e categorias de análise foram descritas conforme a abrangência dos temas que emergiram dos estudos incluídos. Indicadores de subnotificação ou de sub-registros e fatores associados foram sistematizados e apontam para fragilidades nos processos de notificação que refletem na qualidade dos dados do Sinan. Ações são necessárias para superar as dificuldades e potencializar as melhorias para que a vigilância em saúde opere com dados consistentes para a tomada de decisões com vista à melhoria da saúde da população

    OUTORGA ONEROSA DO DIREITO DE CONSTRUIR

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    Diante do contexto atual das cidades em que a desigualdade socioeconômica se torna objeto de estudos das diversas áreas do saber, surgi a necessidade de que haja a aplicabilidade das políticas urbanas pré-estabelecidas na Constituição Federal de 1988 e que no ano de 2001 houve uma melhor especificação quanto a aplicação das leis por meio do Estatuto da Cidade. O presente trabalho tem como objetivo, promover a analise discursiva quanto a aplicabilidade do instrumento de política urbana Outorga Onerosa do Direito de Construir, no atual contexto urbano das cidades brasileiras, trazendo para a realidade da cidade de Aracaju/SE, analisando a prática pôr meio do seu plano diretor

    A IMPORTÂNCIA DAS TECNOLOGIAS BIM NA FORMAÇÃO DO TÉCNICO DE EDIFICAÇÕES

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    BIM is a technology that encompasses a set of instruments that allows the creation of virtual models with information that are logically integrated into the computer. The study seeks to investigate the impact of BIM technologies applied to the Building Technician course, understanding how the application of BIM contributes to the improvement of knowledge, the learning process and the training of building technicians. The research uses the deductive approach method, since it starts from the general idea of ​​BIM technology, to present the scenario of the need to study this method in teaching networks of the building technician course. The historical and interpretative method was also used, requiring an overview of the emergence of BIM in the scope of civil construction through literature. The results compel us to conclude that BIM has emerged as one of the main alternatives and developments in the Construction sector in the national and international scenario in recent years. Its application system encompasses all stages of the work, from the initial design phase to the end of the entire execution, and it is also possible to manage, maintain and operate the building after the construction is finished. However, even if it is not in an ideal situation of application and development consolidated in the current scenario, as projections for implementation in the various areas of an enterprise and in teaching, integrating disciplines in the curriculum notes in Civil Construction courses, including the Building Technician, they are favorable projections for the development of the construction sector.El BIM es una tecnología que engloba  instrumentos que permite la creación de modelos virtuales con información que se integra lógicamente en la computadora. El estudio investiga el impacto de las tecnologías BIM aplicadas en el curso de Técnico de Edificación, entendiendo cómo la aplicación de BIM contribuye a la mejora del conocimiento, en el proceso de aprendizaje del profesional técnico. La investigación utiliza el método del enfoque deductivo para presentar el escenario de la necesidad de estudiar este método en las redes de enseñanza del curso de técnico de edificación. También se utilizó el método histórico e interpretativo, requiriendo una visión general del surgimiento del BIM en el ámbito de la construcción civil a través de la literatura. Los resultados concluyen que BIM se ha destacado como una de las principales alternativas y desarrollos del sector de la Construcción en el panorama nacional e internacional en los últimos años. Su sistema de aplicación cubre todas las etapas de la obra, desde la fase de diseño inicial hasta el final de toda la ejecución, y también es posible administrar, mantener y operar el edificio una vez finalizada la construcción. Sin embargo, aunque no se encuentra en una situación ideal de aplicación y desarrollo consolidado en el escenario actual, las proyecciones de implantación en las diferentes áreas de una empresa y en la educación, integrando disciplinas en el plan de estudios de los cursos Civiles, incluyendo Edificaciones Técnicas, son favorables proyecciones para el desarrollo del sector de la construcción.Modelagem da Informação da Construção é uma tecnologia que abrange um conjunto de instrumentos que permite criar modelos virtuais com informações que são integradas de forma lógica no computador. O estudo busca investigar o impacto das tecnologias BIM aplicadas no curso Técnico de Edificações, compreendendo como a aplicação do BIM contribui no aprimoramento do conhecimento, no processo de aprendizagem e formação do profissional técnico de edificações. A pesquisa utiliza-se do método de abordagem dedutivo, vez que se parte da ideia geral da tecnologia BIM, para apresentar o cenário de necessidade do estudo deste método em redes de ensino do curso de técnico de edificações. Utilizou-se também do método histórico e interpretativo, sendo necessário um apanhado do surgimento do BIM no âmbito da construção civil por meio da literatura. Os resultados permitem concluir que o BIM surge como uma das principais alternativas e evoluções no setor da Construção Civil no cenário nacional e internacional nos últimos anos. Seu sistema de aplicação engloba todas as etapas da obra, desde a fase de concepção inicial até o fim de toda execução, sendo possível ainda o gerenciamento, a manutenção e a operação do edifício após o término da construção. Contudo, ainda que não esteja em situação ideal de aplicação e desenvolvimento consolidados no cenário atual, as projeções para a implementação nas diversas áreas de um empreendimento e no ensino, integrando disciplinas nas grades curriculares nos cursos da Construção Civil, incluindo o Técnico em Edificações, são projeções favoráveis para o desenvolvimento do setor construtivo
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