Etude de l’interaction de Mycoplasma hominis PG21 avec les cellules dendritiques humaines. : Caractérisation de la fraction bioactive du mycoplasme et réponse immunitaire innée de la cellule

Mycoplasma hominis is involved in urogenital tract infections, neonatal infections or disseminated infections particularly in immunocompromised patients. Mycoplasmas have no cell wall and their membrane is the main interface mediating the interaction between the mycoplasma and its environment. Lipoproteins that are anchored to the extracellular side of the plasma membrane are known to induce the maturation of human dendritic cells (hDCs), to stimulate the pro-inflammatory cytokine production by hDCs and to polarize the adaptive immune system. We studied the interaction of M. hominis PG21 with hDCs in order to assess the lipoproteins that can induce the stimulation of hDCs, to determine the lipoproteins that are regulated upon interaction of the mycoplasma with the host cell and to evaluate the innate host cell response. Using a double extraction strategy with two non-denaturing detergents, Sarkosyl then Triton X-114, and separation by SDS-PAGE, we found that 20 lipoproteins may induce the secretion of IL-23 by the hDCs, especially the MHO_4720 lipoprotein. We showed that a synthetic lipopeptide corresponding to the N-terminus part of the MHO_4720 lipoprotein can stimulate the hDCs in a dose-dependent manner. Using qRT-PCR for the evaluation of the transcriptional regulation of the 48 lipoprotein-coding genes of M. hominis PG21, we also determined that 21 lipoproteins were upregulated upon 4h and 24h of contact of M. hominis with hDCs. Finally, the hDC innate immune response was evaluated by PCR array and ELISA. We observed a caspase 5-dependent production of IL- 1β corresponding to the activation of an inflammasome.Mycoplasma hominis est une bactérie opportuniste qui peut être responsable d’infections du tractus urogénital, d’infections néonatales ou d’infections disséminées notamment chez les patients immunodéprimés. La membrane des mycoplasmes constitue l’interface d’interaction directe avec le milieu extérieur en raison de l’absence de paroi. Cette membrane contient de nombreuses lipoprotéines qui ont le pouvoir d’activer des cellules dendritiques humaines (hDCs), d’induire la production de cytokines et de polariser le système immunitaire adaptatif. Nous avons étudié l’interaction de M. hominis PG21 avec les hDCs en nous penchant d’une part sur la fraction du mycoplasme qui active les hDCs et d’autre part sur la réponse immunitaire innée des hDCs. Apres avoir déterminé les lipoprotéines contenues dans un extrait TX-114 de M. hominis PG21, nous avons enrichi en lipoprotéines bioactives une fraction de vésicules membranaires du mycoplasme par une double extraction utilisant deux détergents non dénaturants, le Sarkosyl puis le Triton X-114. Apres séparation par SDS-PAGE, nous avons identifié vingt lipoprotéines qui pourraient entrainer la sécrétion d’IL-23 par les hDCs, notamment la lipoprotéine MHO_4720. Un lipopeptide synthétique correspondant à la fraction N-terminale de MHO_4720 est capable de stimuler les hDCs. En analysant les variations transcriptionnelles des gènes codant pour les 48 lipoprotéines de M. hominis PG21 par qRT-PCR, nous avons également déterminé que 21 lipoprotéines sont surexprimées après 4h ou 24h de contact entre le mycoplasme et les hDCs. Enfin, la réponse cellulaire a été évaluée par PCR array et ELISA. Nous avons observé l’activation d’inflammasome(s) par la mise en évidence de la production d’IL-1β dépendant de la caspase 5

Success of passive and active restoration of lowland hay meadows with regard to current and historical references

The restoration of hay meadows is one of the major challenges in temperate Europe, to overcome the drastic loss and degradation of these semi-natural habitats. Evaluation of restoration success requires the definition of a relevant reference ecosystem. Historical phytosociological relevés dating from the 1960s–1970s, before large scale agriculture intensification, may be used as the reference framework for such purposes. However, this reference framework may no longer be pertinent in our present-day ecological and socio-economic context. In this study, we assessed the success of three restoration techniques for lowland hay meadows, based on plant species richness and composition and functional traits, by comparing the restoration trajectories to historical and current references. The three restoration techniques, passive restoration mowing, active fresh hay transfer and active sowing of threshing material, were implemented depending on the initial level of degradation and the proximity to well-preserved meadows. The species composition of restored meadows clearly differed from historical references but converged toward current references, for both passive and active restoration techniques. Historical references are characterized by short, stress-tolerant dicotyledonous plant species with small specific leaf area, indicators of nutrient-poor environments. The gap observed between plant communities of historical and current meadows suggests that the historical data are an over-ambitious target for restoration purposes and can hardly be considered relevant to our present-day context. Therefore, creation of a new reference framework of lowland hay meadows is needed for the adequate implementation of restoration projects. Successful outcomes of active and passive techniques must encourage practitioners to adapt the choice of the restoration method depending on the local ecological context, i.e., level of degradation and proximity to well-preserved habitats

Interaction of Mycoplasma hominis PG21 with human dendritic cells : bioactive fraction of the mycoplasma and innate immune response of the cells

Mycoplasma hominis est une bactérie opportuniste qui peut être responsable d’infections du tractus urogénital, d’infections néonatales ou d’infections disséminées notamment chez les patients immunodéprimés. La membrane des mycoplasmes constitue l’interface d’interaction directe avec le milieu extérieur en raison de l’absence de paroi. Cette membrane contient de nombreuses lipoprotéines qui ont le pouvoir d’activer des cellules dendritiques humaines (hDCs), d’induire la production de cytokines et de polariser le système immunitaire adaptatif. Nous avons étudié l’interaction de M. hominis PG21 avec les hDCs en nous penchant d’une part sur la fraction du mycoplasme qui active les hDCs et d’autre part sur la réponse immunitaire innée des hDCs. Apres avoir déterminé les lipoprotéines contenues dans un extrait TX-114 de M. hominis PG21, nous avons enrichi en lipoprotéines bioactives une fraction de vésicules membranaires du mycoplasme par une double extraction utilisant deux détergents non dénaturants, le Sarkosyl puis le Triton X-114. Apres séparation par SDS-PAGE, nous avons identifié vingt lipoprotéines qui pourraient entrainer la sécrétion d’IL-23 par les hDCs, notamment la lipoprotéine MHO_4720. Un lipopeptide synthétique correspondant à la fraction N-terminale de MHO_4720 est capable de stimuler les hDCs. En analysant les variations transcriptionnelles des gènes codant pour les 48 lipoprotéines de M. hominis PG21 par qRT-PCR, nous avons également déterminé que 21 lipoprotéines sont surexprimées après 4h ou 24h de contact entre le mycoplasme et les hDCs. Enfin, la réponse cellulaire a été évaluée par PCR array et ELISA. Nous avons observé l’activation d’inflammasome(s) par la mise en évidence de la production d’IL-1β dépendant de la caspase 5.Mycoplasma hominis is involved in urogenital tract infections, neonatal infections or disseminated infections particularly in immunocompromised patients. Mycoplasmas have no cell wall and their membrane is the main interface mediating the interaction between the mycoplasma and its environment. Lipoproteins that are anchored to the extracellular side of the plasma membrane are known to induce the maturation of human dendritic cells (hDCs), to stimulate the pro-inflammatory cytokine production by hDCs and to polarize the adaptive immune system. We studied the interaction of M. hominis PG21 with hDCs in order to assess the lipoproteins that can induce the stimulation of hDCs, to determine the lipoproteins that are regulated upon interaction of the mycoplasma with the host cell and to evaluate the innate host cell response. Using a double extraction strategy with two non-denaturing detergents, Sarkosyl then Triton X-114, and separation by SDS-PAGE, we found that 20 lipoproteins may induce the secretion of IL-23 by the hDCs, especially the MHO_4720 lipoprotein. We showed that a synthetic lipopeptide corresponding to the N-terminus part of the MHO_4720 lipoprotein can stimulate the hDCs in a dose-dependent manner. Using qRT-PCR for the evaluation of the transcriptional regulation of the 48 lipoprotein-coding genes of M. hominis PG21, we also determined that 21 lipoproteins were upregulated upon 4h and 24h of contact of M. hominis with hDCs. Finally, the hDC innate immune response was evaluated by PCR array and ELISA. We observed a caspase 5-dependent production of IL- 1β corresponding to the activation of an inflammasome

Interaction of Mycoplasma hominis PG21 with human dendritic cells : bioactive fraction of the mycoplasma and innate immune response of the cells

Mycoplasma hominis est une bactérie opportuniste qui peut être responsable d’infections du tractus urogénital, d’infections néonatales ou d’infections disséminées notamment chez les patients immunodéprimés. La membrane des mycoplasmes constitue l’interface d’interaction directe avec le milieu extérieur en raison de l’absence de paroi. Cette membrane contient de nombreuses lipoprotéines qui ont le pouvoir d’activer des cellules dendritiques humaines (hDCs), d’induire la production de cytokines et de polariser le système immunitaire adaptatif. Nous avons étudié l’interaction de M. hominis PG21 avec les hDCs en nous penchant d’une part sur la fraction du mycoplasme qui active les hDCs et d’autre part sur la réponse immunitaire innée des hDCs. Apres avoir déterminé les lipoprotéines contenues dans un extrait TX-114 de M. hominis PG21, nous avons enrichi en lipoprotéines bioactives une fraction de vésicules membranaires du mycoplasme par une double extraction utilisant deux détergents non dénaturants, le Sarkosyl puis le Triton X-114. Apres séparation par SDS-PAGE, nous avons identifié vingt lipoprotéines qui pourraient entrainer la sécrétion d’IL-23 par les hDCs, notamment la lipoprotéine MHO_4720. Un lipopeptide synthétique correspondant à la fraction N-terminale de MHO_4720 est capable de stimuler les hDCs. En analysant les variations transcriptionnelles des gènes codant pour les 48 lipoprotéines de M. hominis PG21 par qRT-PCR, nous avons également déterminé que 21 lipoprotéines sont surexprimées après 4h ou 24h de contact entre le mycoplasme et les hDCs. Enfin, la réponse cellulaire a été évaluée par PCR array et ELISA. Nous avons observé l’activation d’inflammasome(s) par la mise en évidence de la production d’IL-1β dépendant de la caspase 5.Mycoplasma hominis is involved in urogenital tract infections, neonatal infections or disseminated infections particularly in immunocompromised patients. Mycoplasmas have no cell wall and their membrane is the main interface mediating the interaction between the mycoplasma and its environment. Lipoproteins that are anchored to the extracellular side of the plasma membrane are known to induce the maturation of human dendritic cells (hDCs), to stimulate the pro-inflammatory cytokine production by hDCs and to polarize the adaptive immune system. We studied the interaction of M. hominis PG21 with hDCs in order to assess the lipoproteins that can induce the stimulation of hDCs, to determine the lipoproteins that are regulated upon interaction of the mycoplasma with the host cell and to evaluate the innate host cell response. Using a double extraction strategy with two non-denaturing detergents, Sarkosyl then Triton X-114, and separation by SDS-PAGE, we found that 20 lipoproteins may induce the secretion of IL-23 by the hDCs, especially the MHO_4720 lipoprotein. We showed that a synthetic lipopeptide corresponding to the N-terminus part of the MHO_4720 lipoprotein can stimulate the hDCs in a dose-dependent manner. Using qRT-PCR for the evaluation of the transcriptional regulation of the 48 lipoprotein-coding genes of M. hominis PG21, we also determined that 21 lipoproteins were upregulated upon 4h and 24h of contact of M. hominis with hDCs. Finally, the hDC innate immune response was evaluated by PCR array and ELISA. We observed a caspase 5-dependent production of IL- 1β corresponding to the activation of an inflammasome

Caractérisation de la fraction bioactive de Mycoplasma hominis PG21 activant les cellules dendritiques humaines

BORDEAUX2-BU Santé (330632101) / SudocSudocFranceF

Paris 20e, Église Saint-Germain-de-Charonne : du cimetière carolingien à l’édifice moderne : [rapport de fouille]

Les premières traces d’occupation sur le site, un fossé et des trous de poteaux, datent du IXe siècle et à l’exception de deux tessons de céramique gallo-romaine, nous notons l’absence de mobilier résiduel plus ancien. Il semblerait donc qu’une première mise en valeur de la campagne à cet endroit ait eu lieu au cours de l’époque carolingienne, c’est-à-dire deux siècles environ avant la première mention de Charonne dans un acte de Robert II à la fin du Xe siècle.Rapidement, une série de trente-deux sépultures est observée sur le site. Le mobilier céramique, rare dans ces contextes funéraires du haut Moyen Âge, appartient à l’horizon chronologique des IXe et Xe siècles. La densité des structures funéraires parait exclure l’hypothèse d’un groupe d’inhumations isolées au sein de l’habitat comme cela peut être le cas à cette période (Pecqueur 2003). Et si, en l’état actuel de nos connaissances, aucun édifice religieux n’existe alors, il faut voir en ce groupe d’inhumations la naissance d’un cimetière villageois qui sera à l’origine de la première église selon un processus de polarisation décrit par M. Lauwers notamment (Lauwers 2005, voir en particulier le chapitre V sur la formation de l’espace funéraire chrétien).Nous assistons en effet à une structuration de cet espace funéraire par la construction de l’église originelle que nous nous proposons de dater du début du XIIe siècle (l’église est citée pour la première fois en 1140). Le creusement d’une abside semi-circulaire vient alors percer les anciennes sépultures et deux départs de maçonneries prolongeant l’abside vers l’ouest indiquent que nous sommes certainement en présence d’un édifice de type basilical à une nef de 7,50 m de largeur. À ce premier état de l’église de Charonne sont associées vingt sépultures qui sont creusées au pied du chevet, à l’extérieur de l’édifice. Pour cette période, aucune inhumation in ecclesia n’a été repérée. Dans le comblement des fosses sépulcrales, nous retrouvons de façon classique des dépôts de vases flammulés datés du XIVe siècle. Au milieu du XVe siècle, l’église est reconstruite presque entièrement. Le nouveau chevet plat est agrandi vers l’est, englobant ainsi l’espace qui auparavant accueillait les inhumations de la phase précédente. Les deux piliers qui soutiennent encore la voûte du chœur sont installés sur la maçonnerie de l’ancienne abside. Deux séries d’aménagement structurent l’espace intérieur : entre les deux piliers du chœur, une maçonnerie continue comportant en son centre un fût de colonne devait servir de fondation pour un dispositif de séparation entre la nef et l’espace réservé au clergé (jubé, chancel ?) ; au sud, des cloisons de plâtre fermaient également l’espace entre les deux dernières travées du collatéral sud. Seul un étroit couloir devait permettre de circuler entre les deux.L’opération de fouille du chœur de l’église Saint-Germain de Charonne a permis d’appréhender les premières traces d’occupation sur le versant de la butte de Ménilmontant à l’époque carolingienne. Il s’agit de fait du premier témoignage concernant l’existence du village. Le site est très intéressant du point de vue de l’évolution des pratiques funéraires puisqu’il permet de suivre la structuration de cet espace sacré sur plus d’un millénaire, depuis l’époque où nous sommes en présence très probablement d’une nécropole isolée jusqu’à la création de l’église au XIIe siècle puis au travers de toutes ses évolutions de la fin du Moyen Âge jusqu’à l’époque contemporaine

Effect of substrate fertility on tank-bromeliad performances

International audiencePurpose: Members of the plant family Bromeliaceae can uptake nutrients directly from their leaves via leaf absorbing trichomes and their roots have long been reduced to anchorage function, thus overlooked. Recently, evidence has accumulated for a significant role for the roots of some species of tank bromeliads in both water and nutrients absorption. However, to date, little attention has been paid to the importance of the substrate fertility for the structure of the roots and the growth and performances of tank bromeliads.Methods: This study investigated the effect of substrate fertility on Aechmea aquilega regarding leaf and root traits, nutrient content, and growth. Seeds of this tank bromeliad were sowed in a greenhouse in French Guiana in three different substrates: a nutrient-poor, a nutrient-rich and a mixed substrate. The performances of 15-month-old A. aquilega were assessed by measuring leaf and root traits related to nutrient acquisition and resources capture.Results: We show that plants growing in nutrient-poor substrate grew twice slower and were smaller than plants grown on the nutrient-rich substrate with fewer leaves and roots, lower total dry mass, and smaller leaves and root length. Overall, 70% of measured traits responded significantly to the experimental treatments indicating that the response of A. aquilega to nutrient availability is a combination of physiological processes, leaf and root structure, and chemistry.Conclusion: This study is the first to show that the fertility of the substrate on which the bromeliad A. aquilega grows has a strong and lasting effect on the plant performances and may be a relevant factor for bromeliad ecolog