The role of costimulatory pathways during the activation of human T cells

Die Arbeit beinhaltet 22 Abbildungen. Für eine effiziente T-Zellaktivierung sind zwei Signale notwendig. Signal 1 entsteht bei der Interaktion zwischen dem MHC-Peptid Komplex und dem T-Zellrezeptorkomplex. Signal 2, auch als kostimulatorisches Signal bezeichnet, wird von akzessorischen Molekülen, welche auf antigenpräsentierenden Zellen (APC) exprimiert sind, auf deren Rezeptoren, die sich auf T-Zellen befinden, übertragen. Diese Signale spielen eine wichtige Rolle in der Regulation der T-Zellantwort. Überdies stellen diese Signalwege, bei Erkrankungen die mit unerwünschter T-Zellantwort verbunden sind, hervorragende therapeutische Ziele dar. Eine Verstärkung von kostimulatorischen Signalen kann auch zu verbesserten Immunantworten gegen Tumore und Pathogene führen. In Tiermodellen aber auch in klinischen Studien wurde vielfach gezeigt, dass agonistische und antagonistische Antikörper oder Fusionsproteine hervorragende Werkzeuge zur Manipulation von kostimulatorischen oder koinhibitorischen Signalwegen darstellen. Bis heute ist eine Vielzahl verschiedener kostimulatorischer und koinhibitorischer Liganden beschrieben. Ein Überblick darüber wird im ersten und zweiten Teil dieser Dissertation gegeben. Das Ziel dieser Arbeit war es, die Rolle von verschiedenen kostimulatorischen und koinhibitorischen Signalwegen in der Aktivierung humaner T-Zellen zu untersuchen. Dafür sollte ein experimentelles System entwickelt werden mit dem es möglich ist die Rolle einzelner kostimulatorischer Signalwege in der T-Zellaktivierung zu evaluieren. Aufgrund der Tatsache, dass APC eine Vielzahl von Oberflächenmolekülen exprimieren, ist es schwierig den Effekt einzelner Liganden auf die T-Zellaktivierung zu erfassen. Basierend auf einem von uns entwickelten experimentellen System (beschrieben in Teil drei dieser Arbeit) wurde die Funktion ausgewählter Signalwege analysiert. Dieses System, die sogenannten T-Zellstimulatorzellen, basiert auf einer murinen Thymomzelllinie die ein single-chain anti-CD3 Fragment exprimiert und auf diese Weise Signal 1 in T-Zellen induziert. In diesem System kann jedes beliebige kostimulatorische oder koinhibitorische Molekül koexprimiert werden, das dann Signal 2 an die T-Zelle vermittelt. T-Zellstimulatorzellen sind ein ausgezeichnetes Werkzeug um verschiedene kostimulatorische Moleküle miteinander zu vergleichen und die Funktion von Liganden, die eine Rolle bei kostimulatorischen Prozessen spielen, zu evaluieren. Weiters kann damit untersucht werden, welche Effekte immunmodulatorische Medikamente auf T-Zellaktivierung haben. Der vierte Teil der Arbeit analysiert die Funktion von B7-H3 in der humanen T-Zellaktivierung. In dieser Studie konnten wir in verschiedenen experimentellen Systemen und in verschiedenen T-Zellsubpopulationen zeigen, dass das von B7-H3 vermittelte Signal stark inhibitorisch auf die T-Zellproliferation und Zytokinproduktion wirkt. Weiters konnten wir TREML2 (triggering receptor expressed on myeloid cells like transcript 2), kürzlich als Rezeptor für das murine B7-H3 beschrieben, als Rezeptor für humanes und murines B7-H3 ausschließen. In Teil fünf dieser Arbeit wird der Einfluss einzelner kostimulatorischer Signale auf die Wirkung der immunsuppressiven Medikamente Azathioprine und Cyclosporin A behandelt. Wir konnten zeigen, dass die IC50 (mittlere inhibitorische Hemmkonzentration) Konzentration für Cyclosporin A durch Signale über CD28 deutlich erhöht wird, während Signale über CD2, 4-1BB, ICOS oder LFA-1 seine inhibitorische Wirkung nicht wesentlich beeinträchtigen. Im Gegensatz dazu wurde der inhibitorische Effekt von Azathioprine durch unterschiedliche kostimulatorische Signale nicht beeinflusst. Die Aktivierung von T-Zellen wird durch das komplexe Zusammenspiel verschiedenster kostimulatorischer und inhibitorischer Moleküle reguliert. In dieser Arbeit wird ein ausführlicher Überblick über die gegenwärtig beschriebenen kostimulatorischen und koinhibitorischen Signalwege in der humanen T- Zellaktivierung geboten. Weiters entwickelten wir ein experimentelles System, mit dem man hervorragend den Beitrag einzelner Moleküle zur T-Zellproliferation erfassen kann. Mit Hilfe dieses Systems und anderer methodischer Ansätze, wurde eine umfassende Evaluierung der Rolle von B7-H3 in der T-Zellaktivierung durchgeführt. Darüber hinaus konnten wir zeigen, dass kostimulatorische Signalwege die Wirkung von bestimmten immunsuppressiven Medikamenten stark herabsetzen, während sie andere nicht beeinflussen. Diese Ergebnisse können möglicherweise Einfluss auf Behandlungsstrategien, beispielsweise Kombination von herkömmlichen immunsuppremierenden Medikamenten mit CTLA-4 Fusionsproteinen, welche spezifisch den CD28 Signalweg targeten, haben.It is well established that full activation of T cells requires the interaction of the TCR complex with the peptide-MHC complex (Signal 1) and additional signals (Signal 2). These second signals are generated by the interaction of accessory molecules expressed on antigen presenting cells (APC) with their receptors on T cells. Numerous costimulatory and coinhibitory pathways have been described, but many aspects of these pathways are still incompletely understood. By acting as potent regulators of host-protective as well as pathological processes, T cell costimulatory pathways play a pivotal role in immunity and thus are promising therapeutic targets. It is evident that a better understanding of the function of T cell costimulatory molecules is a prerequisite for the development of efficient therapeutic strategies. Since APC harbor a plethora of stimulating and inhibitory surface molecules, the contribution of individual costimulatory molecules is difficult to assess on these cells. Thus, we have developed a system, called T cell stimulator cells, that can give signal 1 to human T cells via a membrane-bound anti-CD3 antibody fragment. By expressing human costimulatory/coinhibitory ligands on these cells, their role in T cell activation processes can readily be analyzed. Here, we showed that our system of T cell stimulator cells is an excellent tool to evaluate the functional role of ligands implicated in T cell activation processes and to investigate the effect of immunomodulatory drugs on T cell activation. In detail, we assessed the functional dualism of B7-H3, a recently identified B7 homolog, in human T cell activation, since activating as well as inhibitory roles have been ascribed to this molecule. Based on various experimental conditions we found that B7-H3 potently down-modulated human T cell responses. Using T cells that received distinct costimulatory signals, we investigated the interplay between costimulation and immunosuppression. We found that CD28 signals, but not costimulation via CD2, 4-1BB, ICOS or LFA-1 greatly increased the IC50 (mean inhibitory concentration) for Cyclosporine A. By contrast, the inhibitory effects of azathioprine were not influenced by this T cell costimulatory signals. Studies on individual costimulatory pathways can complement investigations using experimental systems employing natural human APC or animal studies to get a better insight into the intricate processes that govern human T cell responses

Barriers to health care access and service utilization of refugees in Austria: Evidence from a cross-sectional survey

This paper provides evidence on (1) refugees' subjective well-being, (2) their access and barriers to health care utilization and (3) their perception of health care provision in Austria, one of the countries most heavily affected by the European "refugee crisis". It is based on primary data from the Refugee Health and Integration Survey (ReHIS), a cross-sectional survey of roughly five hundred Syrian, Iraqi and Afghan refugees. Results indicate that refugees' self-rated health falls below the resident population's, in particular for female and Afghan refugees. Whereas respondents state overall high satisfaction with the Austrian health system, two in ten male and four in ten female refugees report unmet health needs. Most frequently cited barriers include scheduling conflicts, long waiting lists, lack of knowledge about doctors, and language. Although treatment costs were not frequently considered as barriers, consultation of specialist medical services frequently associated with co-payment by patients, in particular dental care, are significantly less often consulted by refugees than by Austrians. Refugees reported comparably high utilization of hospital services, with daycare treatment more common than inpatient stays. We recommend to improve refugees' access to health care in Austria by a) improving the information flow about available treatment, in particular specialists, b) fostering dental health care for refugees, and c) addressing language barriers by providing (web-based) interpretation services

Psychosoziale Gesundheit und gesellschaftliche Teilhabe in Österreich: Zur Prävalenz von Angststörungen und Depressionen unter syrischen, irakischen und afghanischen Geflüchteten

Flucht und Asyl haben lange die öffentlichen Debatten in Europa bestimmt. In vielen Ländern haben rechtspopulistische Parteien an Bedeutung gewonnen. Eine Einigung darüber, wie die Europäische Union ihre Verantwortung gegenüber den weltweiten Fluchtbewegungen wahrnehmen kann, scheint in weiter Ferne. Der vorliegende Band trägt zu einer Ausdifferenzierung dieser Debatten bei. Einerseits regt er dazu an, Flucht und Asyl aus einer internationalen und historischen Perspektive sowie aus dem Blickwinkel der Betroffenen neu zu denken. Andererseits präsentiert er empirische Ergebnisse zur politischen und zivilgesellschaftlichen Auseinandersetzung mit Geflüchteten, zu ihrer Integration in den Arbeitsmarkt sowie zu den Möglichkeiten und Grenzen ihrer gesellschaftlichen und kulturellen Teilhabe

Fatal Rickettsia conorii subsp. israelensis Infection, Israel

Fatal Rickettsia conorii subsp. israelensis Infection, Israe

T cell stimulator cells, an efficient and versatile cellular system to assess the role of costimulatory ligands in the activation of human T cells.

It is well established that full activation of T cells requires the interaction of the TCR complex with the peptide-MHC complex (Signal 1) and additional signals (Signal 2). These second signals are generated by the interaction of costimulatory ligands expressed on antigen presenting cells with activating receptors on T cells. In addition, T cell responses are negatively regulated by inhibitory costimulatory pathways. Since professional antigen presenting cells (APC) harbour a plethora of stimulating and inhibitory surface molecules, the contribution of individual costimulatory molecules is difficult to assess on these cells. We have developed a system of stimulator cells that can give signal 1 to human T cells via a membrane bound anti-CD3 antibody fragment. By expressing human costimulatory ligands on these cells, their role in T cell activation processes can readily be analyzed. We demonstrate that T cell stimulator cells are excellent tools to study various aspects of human T cell costimulation, including the effects of immunomodulatory drugs or how costimulatory signals contribute to the in vitro expansion of T cells. T cell stimulator cells are especially suited for the functional evaluation of ligands that are implicated in costimulatory processes. In this study we have evaluated the role of the CD2 family member CD150 (SLAM) and the TNF family member TL1A (TNFSF15) in the activation of human T cells. Whereas our results do not point to a significant role of CD150 in T cell activation we found TL1A to potently costimulate human T cells. Taken together our results demonstrate that T cell stimulator cells are excellent tools to study various aspects of costimulatory processes

"I'm not proud, I'm just gay": lesbian and gay youths' discursive negotiation of otherness

This article outlines the shared identity construction of five gay and lesbian members of an LGBT youth group, situated in a conservative, working-class, Northern English town. It is shown that the young people’s identity work emerges in response to the homophobia and ‘othering’ they have experienced from those in their local community. Through ethnography and discourse analysis, and using theoretical frameworks from interactional sociolinguistics, the strategies that the young people employ to negotiate this othering are explored; they reject certain stereotypes of queer culture (such as Gay Pride or being ‘camp’), and aim to minimise the relevance of their sexuality to their social identity. It is argued this reflects both the influence of neoliberal, ‘homonormative’ ideology, which casts sexuality in the private rather than public domain, and the stigma their sexuality holds in their local community. These findings point to the need to understand identity construction intersectionally

Low birth weight in offspring of women with depressive and anxiety symptoms during pregnancy: results from a population based study in Bangladesh

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>There is a high prevalence of antepartum depression and low birth weight (LBW) in Bangladesh. In high- and low-income countries, prior evidence linking maternal depressive and anxiety symptoms with infant LBW is conflicting. There is no research on the association between maternal mental disorders and LBW in Bangladesh. This study aims to investigate the independent effect of maternal antepartum depressive and anxiety symptoms on infant LBW among women in a rural district of Bangladesh.</p> <p>Methods</p> <p>A population-based sample of 720 pregnant women from two rural subdistricts was assessed for symptoms of antepartum depression, using the Edinburgh Postpartum Depression Scale (EPDS), and antepartum anxiety, using the State Trait Anxiety Inventory (STAI), and followed for 6-8 months postpartum. Infant birth weight of 583 (81%) singleton live babies born at term (≥37 weeks of pregnancy) was measured within 48 hours of delivery. Baseline data provided socioeconomic, anthropometric, reproductive, obstetric, and social support information. Trained female interviewers carried out structured interviews. Chi-square, Fisher's exact, and independent-sample <it>t </it>tests were done as descriptive statistics, and a multiple logistic regression model was used to identify predictors of LBW.</p> <p>Results</p> <p>After adjusting for potential confounders, depressive (OR = 2.24; 95% CI 1.37-3.68) and anxiety (OR = 2.08; 95% CI 1.30-3.25) symptoms were significantly associated with LBW (≤2.5 kg). Poverty, maternal malnutrition, and support during pregnancy were also associated with LBW.</p> <p>Conclusions</p> <p>This study provides evidence that maternal depressive and anxiety symptoms during pregnancy predict the LBW of newborns and replicates results found in other South Asian countries. Policies aimed at the detection and effective management of depressive and anxiety symptoms during pregnancy may reduce the burden on mothers and also act as an important measure in the prevention of LBW among offspring in Bangladesh.</p