Special issue on advances in marine biotechnology: exploitation of Halophyte plants

Halophyte (salt tolerant) plants encompass roughly 1% of the world’s plant species that can thrive in a multitude of saline biotopes, where glycophytes (non-salt tolerant) cannot [1,2]. They are highly resistant to the abiotic constraints characteristic of saline ecosystems, such as salinity, drought, extreme temperatures, and UV radiation, having evolved specialized morphological and physiological adaptations in response to the challenges of living in such harsh conditions [1,3]. The response mechanisms to handle abiotic stress include the synthesis and accumulation of bioactive metabolites, like phenolic compounds, terpenoids, vitamins, etc. These molecules are usually powerful antioxidants but can display other biological activities such as enzyme inhibition, antimicrobial, antiinflammatory, and antitumoral activities, among others, thus granting halophytes with potential biotechnological applications for the food, pharmaceutical and cosmetic industriesinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

Informal learning in Portuguese companies: the managers' perceptions

Regardless of the advances that technology and instructional design have brought, there is lack of information regarding an emergent topic of the 21stcentury business: informal learning. Academic research does not fully cover its state, and much less considers the Portuguese reality. Following this line of reasoning, the purpose of this dissertation is to address informal learning, withdrawing and clarify "How managers in companies operating in Portugal face informal learning". The study follows a qualitative method, with a content analysis of eleven interviews to managers from companies of diverse industries. The main results are presented in the form of four streams of analysis: "concept", "antecedents", "organizational supporting methods" and "outcomes". The findings show that, more than a modality of training, informal learning is a journey which shapes knowledge, through a combination of diversified learning tools and experiences. Results highlight that managers are aware of its importance and are giving way to disruptive pedagogical events in their respective companies, to ensure that employees "reflect" on their own learning needs, access key "organizational" resources and rely on "peer-to-peer interaction" to expand their knowledge. The results suggest that informal learning boosts communication and increases motivation and engagement level, contributing to improved organizational performance. The study finalizes with guidelines to reshape and complement traditional formal training programs, established in most organizations. These practical implications delineate a structure and advocate informal learning, delving into its design.Apesar dos avanços tecnológicos e da engenharia pedagógica tornaram possíveis, existe pouca informação relativamente a um tema emergente do contexto empresarial do século XXI: aprendizagem informal. A investigação académica não aborda por completo o seu estado de arte, e tampouco a realidade portuguesa. Assim, o propósito desta é abordar o tema da aprendizagem informal e clarificar "Como é que os gestores nas empresas a operar em Portugal encaram a aprendizagem informal". Este estudo segue o método qualitativo, com a análise de conteúdo de onze entrevistas a gestores, de empresas a operar em indústrias diversas. Os resultados principais são apresentados na forma de quatro linhas de análise: "conceito", "antecedentes", "métodos organizacionais de apoio" e "consequências". Os resultados demonstram que, mais do que uma modalidade de formação, a aprendizagem informal é uma jornada que reconfigura a aprendizagem, através da combinação de diversas técnicas e experiências de aprendizagem. Os resultados destacam que os gestores estão cientes da importância desta vertente da aprendizagem e estão a abrir caminho a eventos pedagógicos disruptivos, que asseguram que os colaboradores "refletem "acerca das suas necessidades de aprendizagem, acedem a "recursos organizacionais" chave e contam com a "interação com os pares" para alargar o seu conhecimento. Os resultados sugerem que a aprendizagem informal acelera a comunicação, aumenta a motivação e o nível de comprometimento, contribuindo para a melhoria do desempenho organizacional. O estudo conclui com linhas guia para moldar e complementar os programas tradicionais de aprendizagem formal, estabelecidos na maioria das empresas. Estas implicações práticas visam delinear uma estrutura e suportar a aprendizagem informal, investigando a sua conceção

Reactivity of human fetal and adult immortalized hepatocytes to potentially toxic bilirubin and bile acid species

Dissertação apresentada para a obtenção do Grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina, pela Universidade Nova de Lisboa, Faculdade de Ciências e TecnologiaCholestasis is the reduction or stoppage of bile flow. When bile flow is interrupted, the bile compounds, namely bile acids and bilirubin, accumulate into the hepatocyte causing cellular injury and cell death. The hepatocyte function under cholestasis must be studied using liver cell lines closely resembling human primary hepatocytes. However, most of the cell lines used is derived from hepatic tumors which have altered gene expression. In this project, we used the novel non-neoplasic cell line, HHL-5, which retain primary adult hepatocyte phenotype. In addition, we used the fetal hepatocyte cell line WRL-68, which was shown to present similar morphological properties and antigenic profile of human fetal hepatocytes in situ. Using these two cell lines, we evaluated whether fetal and adult hepatocytes respond differently to conditions that mimic cholestasis with associated jaundice, never evaluated in vitro before. The hepatocytes were exposed to 100 μM glycochenodeoxycholic acid(GCDCA), 100 μM conjugated bilirubin (CB), 100 μM unconjugated bilirubin (UCB), 100 μM GCDCA + 100 μM CB + 100 μM UCB or vehicle alone, in the presence of 100 μM human serum albumin (HSA), at various time points. After, we assessed cellular toxicity analyzing cytolysis by lactate dehydrogenase (LDH) release and apoptosis by caspase-3 activity and nuclear fragmentation. There was a significant increase of all these parameters in hepatocytes stimulated with the GCDCA+CB+UCB mixture. LDH release significantly increased after 48 h incubation for GCDCA+CB+UCB treatment (~40%, P<0.01) in the adult cell line. This increase was also statistically significant when compared to GCDCA, CB or UCB incubation alone (P<0.05). Relatively to WRL-68 cells, the release of LDH also increased significantly (~22%) after 48 h incubation with GCDCA+CB+UCB when compared to control (P<0.05), GCDCA (P<0.05) or UCB (P<0.01) incubations. Regarding caspase-3 activity, the increase was evident for GCDCA+CB+UCB treatment. In the adult cell line, it increased ~1.5-fold after 6 h (P<0.01 vs. control, P<0.01 vs. GCDCA, P<0.05 vs. UCB), peaking at 12 h (~3.5-fold, P<0.05 vs. control, P<0.05 vs. GCDCA) and remaining elevated after 24 h (P<0.01 vs. control, P<0.01 vs. GCDCA, P<0.05 vs. CB, P<0.01 vs. UCB). In the fetal cell line, the peak of caspase-3 activity with the same treatment occurred earlier and in a higher magnitude. Indeed, caspase-3 activity increased 4-fold after GCDCA+CB+UCB treatment at 6 h incubation (P<0.05) and this activation was sustained until 12 h incubation(P<0.01). Concerning nuclear fragmentation, in both cell lines, hepatocytes incubated with GCDCA+CB+UCB exhibited profound changes in nuclear morphology, consistent with apoptosis, in a more marked way than when incubated with GCDCA, CB or UCB alone. The results showed similar data to those previously obtained for caspase-3 activity

Analysis of the breathing apparatus of the cerambycid species that colonizes pines infected by the pine wood nematode, Bursaphelenchus xylophilus (Steiner and Buhrer, 1934) Nickle, 1970, with special emphasis to the insect-vector Monochamus galloprovincialis (Olivier, 1795).

Tese de mestrado, Ecologia e Gestão Ambiental, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2020A Doença da Murchidão do Pinheiro foi primeiramente detetada em Portugal em 1999 na Marateca, Península de Setúbal. O agente causador desta doença, que leva à morte da árvore infetada, é Bursaphelenchus xylophilus, um nematode micofágico, oriundo da América do Norte, que coloniza várias espécies de coníferas, especificamente Pinus spp, usando como vetor um inseto do Género Monochamus (Coleoptera). Enquanto que as espécies nativas da América apresentam resistência, ou alguma tolerância à infeção por parte do nematode, as espécies Asiáticas e Europeias são suscetíveis, desenvolvendo uma sintomatologia característica, que leva ao rápido apodrecimento e morte da árvore. Este facto suporta a teoria de que o Nematode da Madeira do Pinheiro (como ficou conhecido) terá sido transportado desde a América até ao Japão, onde a doença foi inicialmente detetada no início do século XX, em madeira infetada e não tratada. Após a entrada no Japão, o nematode espalhou-se rapidamente pela China, Tailândia e Coreia. A doença é o resultado de uma complexa interação entre o nematode, o inseto-vetor, a conífera hospedeira e vários fatores climáticos, o que atrasou a atribuição de uma relação causa-efeito entre a presença do nematode e os sintomas da doença, permitindo a larga propagação da mesma. Em Portugal, e na Europa, tem afetado essencialmente espécies como Pinus nigra, P. sylvestris e P. pinaster, representado perdas significativas de rendimentos e de biodiversidade. Devido ao seu grande potencial destrutivo, o Nematode de Madeira do Pinheiro (NMP) está listado na Diretiva Europeia 2000/29/CE para medidas de proteção contra a introdução e propagação de organismos prejudiciais o que levou a restrições na comercialização de madeiras e de subprodutos não tratados tal como de plantas vivas. O nematode, que mede apenas 1.5 milímetros, tem uma alta taxa de reprodução e um ciclo de vida de duas fases, uma em que se alimenta de fungos e outra em que se alimenta de células vivas do parênquima. Também se desenvolve de duas formas distintas; se as condições forem favoráveis desenvolve-se rapidamente sob a forma “Reprodutora”, se as condições começarem a ser desfavoráveis, ou seja, quando a árvore hospedeira decai, desenvolve-se como uma forma de “Dispersão” que é uma forma mais resistente. É nesta fase que o nematode migra para junto das câmaras pupais do inseto vetor e aguarda pela muda das pupas para infestar os adultos recém-formados. O inseto vetor do Género Monochamus com distribuição em Portugal é M. galloprovincialis (Olivier,1795), um besouro endémico Cerambicídeo, da subfamília Lamiinae, considerado uma praga secundária pelo que não existia muita informação sobre a sua ecologia e anatomia antes da entrada do nematode no país. Tem um ciclo de vida univoltino ou seja, produz descendência apenas uma vez no ano, para se reproduzir tem de se alimentar de rebentos da copa de pinheiros saudáveis, a chamada alimentação de maturação sexual. Os machos produzem feromonas para atrair as fêmeas para a reprodução e as fêmeas para ovipositar necessitam de pinheiros em declínio ou mortos recentemente. As larvas e pupas do inseto vetor, e outros colonizadores dos pinheiros, convivem com juvenis do nematode dentro da madeira do pinheiro durante os vários meses de desenvolvimento do inseto. De alguma forma, o nematode identifica as pupas do inseto vetor e aguarda pela última muda para entrar no sistema respiratório através dos espiráculos dos adultos recém-formados. O inseto depois emerge da árvore hospedeira, transportando o nematode e transmitindo-o para novas árvores durante a sua alimentação, ocorrendo a “Transmissão Primária”. As fêmeas infetadas, quando depositam os seus ovos em árvores enfraquecidas também podem transmitir o nematode, ocorrendo a chamada “Transmissão Secundária”. Inserido no Projeto NEMATRANSFER (PTDC/AGR-FOR/4391/2014), esta dissertação visa a análise do Sistema Respiratório, espiráculos e traqueia, do inseto vetor e de 3 outras espécies colonizadoras do pinheiro bravo, nomeadamente Arhopalus syriacus (Reitter, 1895), Acanthocinus griseus (Fabricius, 1793), e Pogonocherus perroudi Mulsant, 1839 que são as mais abundantes e mais próximas filogeneticamente da espécie vetora, na tentativa de isolar características que possam ser barreiras físicas à entrada do nematode nas espécies não vetores, na expectativa que os dados obtidos possam ser usados na criação de novas medidas de gestão de pragas. Para alcançar o objetivo principal, foram testados protocolos de preparação de exemplares para se conseguir uma caracterização dos espiráculos (tamanho e existência, ou não, de sedas) através de imagens obtidas em Microscopia Eletrónica de Varrimento (MEV) e medições da traqueia e suas ramificações usando Micro Tomografia de raio X (Micro-CT) e modelos 3D dos exemplares. A Micro-CT é uma técnica não invasiva, baseada na interação dos raios X com os diferentes constituintes da amostra, que permite a observação da anatomia interna dos exemplares uma vez que produz imagens de alta resolução que podem depois ser integradas para gerar um volume virtual da mesma. Esta técnica permite também individualizar partes dos exemplares, por exemplo certos órgãos, usando o software CTAnalyzer (distribuído por BRUKER®), também conhecido como “Segmentação”. A MEV é amplamente usada para observar estruturas ao nível da superfície das amostras. Um feixe de eletrões, chamados eletrões primários, passa rapidamente pela superfície da amostra. Antes da observação em MEV, a mostra é metalizada com ouro, ou ouro-paládio, para promover a emissão de eletrões, chamados eletrões secundários, o impulso elétrico é depois detetado e transformado numa imagem. Para a preparação e estabilização dos exemplares para suportarem estas técnicas, tentou-se a Fixação Química com glutaraldeído e tetróxido de ósmio seguida de Secagem pelo método do Ponto Crítico e como alternativa a este processo moroso, a Liofilização que consiste numa sublimação a baixa pressão e temperatura. Obtivemos sucesso em ambos os procedimentos, com percentagens semelhantes entres estes, no entanto não foi possível preparar o mesmo número de indivíduos com ambas as técnicas, pois as larvas recolhidas não eram igualmente distribuídas pelas quatro espécies em análise e algumas larvas morreram antes da muda. Os exemplares estabilizados foram observados no microscópio eletrónico para avaliar a sua integridade e foram distribuídos entre as técnicas de observação, MEV ou Micro-CT. Devido ao moroso processo de estabilização e ao tempo gasto na resolução dos problemas metodológicos e na agilização do processo de tratamento dos exemplares, não foi possível atingir as repetições inicialmente planeadas e necessárias para uma avaliação estatística adequada sobre o sucesso entre os diferentes métodos de preparação. As fotografias dos espiráculos, obtidas na MEV, foram analisadas com o software ImageJ e as medições obtidas foram trabalhadas em Excel. Foi medida a área total de 199 espiráculos de 1 pupa e 9 adultos M. galloprovincialis, 2 pupas e 10 adultos A. Syriacus, 3 A. griseus adultos e 1 P. perroudi. tal como a área do espiráculo não coberta por sedas e a circularidade, uma razão entre a área e o perímetro, automaticamente calculada pelo ImageJ, que permite classificar a forma do espiráculo como mais circular, se o valor se aproximar de 1, ou mais elíptica se o valor se aproximar de 0. Os resultados obtidos através das medições feitas, indicam que os espiráculos dos adultos de M. galloprovincialis são os que apresentam a menor percentagem de área descoberta, ou seja, a área em que não há sedas a cobrir a entrada do espiráculo, quando comparados com os adultos das outras três espécies estudadas, que não desempenham um papel de disseminação do nematode. Enquanto que os espiráculos dos adultos das espécies A. syriacus e A. griseus estão mais desprotegidos, tendo uma menor percentagem de cobertura de sedas, os espiráculos de M. galloprovincialis têm mais sedas que poderão ser facilitadoras do movimento do nematode para dentro do espiráculo enquanto também preservam um nível de humidade favorável à sobrevivência, e à própria movimentação, do NMP. Por outo lado, as pupas de M. galloprovincialis apresentam uma cobertura de sedas ainda maior que o adulto da mesma espécie, o que nesta fase de desenvolvimento do inseto pode atuar como uma barreira física à entrada do nematode e que poderá explicar por que razão este só infecta o inseto adulto. Apesar de várias dificuldades em agilizar o processo de segmentação que acabou por inviabilizar a individualização da rede de ramificações da traqueia, através das radiografias obtidas da Micro-CT foi possível identificar quatro principais ramificações na cabeça e tórax e duas ramificações no abdómen de insetos das espécies M. galloprovincialis, A. syriacus e A. griseus, que são consistentes com as descrições morfológicas consultadas. Também foi possível medir o diâmetro das ramificações, nesses mesmos indivíduos, e posteriormente fez-se uma estimativa do volume das traqueias observadas. Os resultados obtidos das medições, indicam que o volume total da traqueia é maior em insetos maiores, o que corrobora o fato de as traqueias se estenderem por todo o corpo para que o oxigénio chegue a todos os órgãos e tecidos. Ao comparar o macho e a fêmea de M. galloprovincialis é notável a diferença de volume da traqueia ao nível do abdómen, sendo o da fêmea praticamente o dobro do macho, mas o volume total de ambos é semelhante o que sugere que poderá haver uma distribuição desigual das ramificações da traqueia consoante o sexo, para esta espécie, o que não se verifica no macho e fêmea de A. griseus que foram também medidos. Todos estes pontos resultantes do trabalho feito e da comparação entre a espécie vetor do NMP e as outras espécies estudadas, que convivendo com o nematode nas árvores hospedeiras não desempenham um papel de disseminadoras, poderão trazer novas perspetivas sobre a complexa interação entre o inseto vetor e o NMP. Todo o trabalho feito na preparação dos indivíduos é também uma mais valia para futuros trabalhos que tenham como objetivos a observação de estruturas anatómicas semelhantes. Todos os dados obtidos são originais e podem ser relevantes para futuras propostas de gestão do NMPThe Pine Wilt Disease (PWD) is caused by a non-indigenous nematode, Bursaphelenchus xylophulis, that disseminates widely through a flying insect-vector, Monochamus galloprovincialis (Oliver, 1795), colonizer of the pine tree, leading the trees to death due to the clogging of the tree vessels. It remains unknown how the nematode identifies and infect the newly formed adult individuals of the vector species. Whereby, in the procedure of the project NEMATRANSFER (PTDC/AGR-FOR/4391/2014), we compare anatomic structures of pupae and adult insects of the vector species and other three cerambycid species, Arhopalus syriacus (Reitter, 1895), Acanthocinus griseus (Fabricius, 1793), and Pogonocherus perroudi Mulsant, 1839, in as attempt to recognize differences that may be considered as physiological barriers to nematode entry in non-vector species. To accomplish the main goal, several protocols were tried to achieve a characterization of the spiracles (measures, existence, or not, of bristles) using Scanning Electron Microscopy images and to measure the tracheal system (its length, ramifications, etc.) with Micro-computed Tomography and 3D models using proper software. From the obtained SEM results we presume that, while the non-vector species spiracles’, have lower bristles coverage, the insect-vector has only a small area not covered by them. This can imply that the bristles should help the nematode to tangle itself and crawl into the trachea while provide a moisture environment that also favour the nematode survival and movement. On the other hand, the bristles coverage of the pupae may be so dense that in this stage of the insect development it can work like an obstacle for the nematode entrance. This may be the reason why the PWN enter the spiracles only when the newly adult insects are formed. It has found evidence that the shape of the spiracles may represent an important feature to explain how PWN colonizes the insect-vector, or why it prefers M. galloprovincialis over the other species. In what concerns the Micro-CT results, we were able to identify four main tracheal trunks in the head and thorax and two main trunks in the abdomen of M. galloprovincialis, A. syriacus and A. griseus specimens. Also it was possible to measure tracheal trunks in one lyophilized specimen, in specimens fixated with glutaraldehyde and osmium tetroxide, and critical point dried, and even in not treated specimens, although in this last case it was harder to find the main trachea trunks lengthwise the entire body of the insect. The volume estimated values obtained are consistent with the insects’ body length, being higher in bigger specimens, and diameter and number of the main trunks are consistent with the described morphology of the trachea ramifications for Coleoptera insects. By comparing the abdominal tracheal volumes of both M. galloprovincialis male and female specimens, it seems that a differential ramification arrange occurs, as the female abdominal tracheal volume is twice of the male while the total volume is similar. All the worked done for the stabilization and preparation of the samples to endure SEM and Micro-CT is an asset for future similar studies. Our results, obtained by comparing the vector species with the non-vector species, that also share the host tree but do not have a role in the spread of the nematode may bring some understanding about the complex interaction between the PWN and the insect- vector. All our data are original and may be relevant for future pest managements measures

Chemical and biological characterization of halophyte plants with ethnopharmacological use in the Algarve coast

This work aimed to investigate the potential of medicinal halophytes as sources of bioactive compounds with health-promoting properties, while validating their traditional uses and searching for new bioactivities/applications. Halophytes are salt-tolerant plants that survive in extreme biotopes and, to cope with environmental stress, are equipped with powerful defence mechanisms, including highly bioactive compounds. Several medicinal halophytes are used in folk therapeutics but, despite their ethnopharmacological importance, are still underexplored. This study focused on five medicinal halophytes from southern Portugal, namely Artemisia campestris L. subsp. maritima Arcangeli (dune wormwood), Crithmum maritimum L. (sea fennel), Eryngium maritimum L. (sea holly), Helichrysum italicum (Roth) G.Don subsp. picardii (Boiss&Reuter) Franco (everlasting), and Plantago coronopus L. (buckshorn plantain). Water and organic extracts were prepared from different plant organs, assessed for in vitro antioxidant, anti-diabetic, anti-hyperpigmentation and anti-protozoan activities, and chemically characterized. The large majority of the extracts have high polyphenolic content and are a potentially good source of these bioactive phytochemicals. They presented a wide diversity of phenolics, especially coumaric, ferulic, syringic, chlorogenic, and p-hydroxybenzoic acids. Minerals were also analysed, and some species may have a nutritional role as mineral supplementary source, particularly sea fennel for macronutrients and dune wormwood for microelements. A preliminary toxicological assessment showed that extracts had overall low toxicity. As for bioactivities, results confirm the strong in vitro antioxidant capacity of the extracts. Everlasting, dune wormwood and sea holly also showed anti-diabetic activity, while dune wormwood had additional anti-hyperpigmentation capacity, and sea fennel had activity against Trypanosoma cruzi. In conclusion, all halophytes can be useful sources of antioxidants to potentially help prevent oxidative-stress related diseases, while everlasting, dune wormwood and sea holly may additionally help control glucose levels. Dune wormwood is also a prospective source of compounds to prevent skin darkening and sea fennel may provide effective anti-T. cruzi molecule(s).Este trabalho teve como objetivo principal explorar o potencial de plantas halófilas medicinais enquanto fontes de compostos bioativos com aplicação terapêutica, e ao mesmo tempo validar os seus usos na “medicina” popular e procurar novas bioatividades e / ou aplicações. As plantas halófilas possuem uma elevada tolerância ao sal e completam o seu ciclo de vida em biótopos extremos, tais como zonas costeiras de influência salina. Para resistirem ao stress ambiental, estão equipadas com poderosos mecanismos de defesa que incluem a produção de compostos altamente bioativos, cujas atividades biológicas poderão ajudar a explicar a utilização de algumas destas plantas como remédios populares e para alimentação humana (e animal). De facto, inúmeras plantas halófilas são utilizadas no tratamento de várias doenças e infeções, principalmente em áreas rurais onde as plantas medicinais ainda são uma importante fonte terapêutica. No entanto, estas plantas são pouco exploradas e são também poucas as descrições das suas bioatividades, apesar da sua importância etnofarmacológica. Na região do Algarve (sul de Portugal), poucas espécies têm sido estudadas apesar do seu potencial conteúdo em moléculas bioativas. Assim, com o intuito de expandir o nosso conhecimento acerca das possíveis propriedades terapêuticas e promotoras de saúde e bem-estar deste tipo de plantas, este trabalho estudou cinco plantas halófilas medicinais comuns no Algarve, escolhidas pelos seus usos medicinais e potenciais atividades biológicas, nomeadamente Artemisia campestris L. subsp. maritima Arcangeli (madorneira), Crithmum maritimum L. (funcho marítimo), Eryngium maritimum L. (cardo marítimo), Helichrysum italicum (Roth) G.Don subsp. picardii (Boiss&Reuter) Franco (perpétua das areias) e Plantago coronopus L. (diabelha). O objetivo foi desvendar o seu potencial enquanto fontes de compostos e / ou extratos bioativos com aplicações terapêuticas, cosméticas e / ou nutricionais. Para tal, à semelhança de preparações tradicionais, foram preparados extratos aquosos e / ou orgânicos de diferentes órgãos (raízes, caules, folhas e / ou flores), e avaliados quanto às suas atividades antioxidante, antidiabética, anti-hiperpigmentação e anti-protozoária in vitro. Adicionalmente, para o funcho marítimo, cardo marítimo e perpétua das areias, os extratos foram estudados na sua dose de ingestão tradicional, i.e., usando a medida “chávena-de-chá” (e também a medida “gotas”, no caso das tinturas do cardo), para analisar as plantas duma perspetiva de utilização medicinal típica. Os extratos foram ainda caracterizados quimicamente. Os extratos foram caracterizados em relação aos compostos fitoquímicos presentes por métodos espectrofotométricos para determinar o seu conteúdo em fenólicos totais (TPC), para além do conteúdo em outros grupos fenólicos (flavonóides totais, taninos condensados, etc.). Em geral, todos os extratos analisados têm um elevado conteúdo polifenólico e são, potencialmente, boas fontes destes compostos fitoquímicos bioativos. De um modo geral, os extratos da perpétua das areias tiveram o maior conteúdo em fenólicos totais, seguidos pelos extratos da madorneira, enquanto que o cardo marítimo teve o mais baixo TPC. De notar que, globalmente, os órgãos aéreos (folhas e flores) de todas as plantas mostraram ter conteúdos fenólicos mais elevados do que os restantes órgãos. Os extratos foram ainda caracterizados por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) ou por Ultra-HPLC para determinar o seu perfil polifenólico e outros compostos tentativamente identificáveis. Foi encontrada uma grande diversidade de fenólicos nestas plantas halófilas, sendo os mais abundantes: verbascósido e luteolina-7-O-glucosídeo na diabelha, ácidos clorogénico, neo- e cripto-clorogénico no funcho marítimo, ácidos quínico e clorogénico na perpétua das areias e na madorneira, e carvacrol e naringenina no cardo marítimo. Os compostos fenólicos mais comuns foram os ácidos fenólicos, com uma ligeira prevalência dos ácidos hidroxicinâmicos. Os ácidos cumárico e ferúlico foram identificados nas cinco plantas, e os ácidos p-hidroxibenzoico, siríngico e clorogénico estavam presentes em pelo menos quatro das espécies. O conteúdo em minerais foi também analisado nos extratos das folhas da diabelha e dos órgãos do funcho marítimo, cardo marítimo e madorneira. O sódio foi o elemento mais abundante encontrado, e os outros minerais estavam presentes em valores representativos de uma pequena porção da ingestão diária recomendada para adultos. De um modo geral, os resultados salientaram um possível papel nutricional destas plantas enquanto fonte mineral suplementar, particularmente o funcho marítimo para os macronutrientes e a madorneira para os micronutrientes. Foi efetuada também uma avaliação toxicológica preliminar aos extratos do funcho marítimo, madorneira e perpétua das areias, através da sua capacidade para diminuir a viabilidade de diferentes linhas celulares. Os extratos apresentaram, de um modo geral, baixa toxicidade. Os extratos foram também analisados quanto a propriedades antioxidante, antidiabética e anti-hiperpigmentação, através de uma bateria de ensaios para testar in vitro atividades de captação de radicais e de quelação de metais, capacidade de inibição de enzimas digestivas e de inibição da tirosinase, respetivamente. As decocções, tinturas e óleos essenciais da perpétua das areias e do funcho marítimo, foram também testados in vitro para a atividade antiprotozoária contra Trypanosoma cruzi, o agente causativo da doença de Chagas. Os extratos da perpétua das areias e da madorneira detiveram a maior capacidade antioxidante, seguidas pelos do funcho marítimo; contudo, os extratos do cardo marítimo demonstraram a mais potente atividade quelante do ferro. Os extratos da perpétua, madorneira e cardo revelaram ainda atividade antidiabética, apesar de apenas os do cardo serem capazes de inibir todas as enzimas hidrolisantes de hidratos de carbono; contudo, os extratos da madorneira foram os mais eficientes a inibir a α-glucosidase, mais ainda que o controlo positivo (acarbose). Apenas os extratos da madorneira apresentaram capacidade de inibir a tirosinase. O extrato aquoso do funcho marítimo foi o mais ativo e seletivo contra T. cruzi. De um modo geral, os resultados confirmaram a forte capacidade antioxidante in vitro dos extratos, evidenciando que todas as cinco plantas halófilas podem ser úteis como fontes de moléculas ou produtos antioxidantes e, como tal, poderão ajudar a prevenir doenças relacionadas com stress oxidativo. O potencial antidiabético dos extratos da perpétua das areias, da madorneira e do cardo marítimo podem ainda auxiliar no controlo dos níveis de glucose, ajudando pacientes com diabetes mellitus tipo 2. Por outro lado, os extratos da madorneira são também possíveis fontes de compostos para prevenção / tratamento de hiperpigmentação da pele, enquanto que os do funcho marítimo poderão ser fontes de moléculas anti-T. cruzi. No geral e em conclusão, o resultado deste trabalho demonstra que as cinco espécies de plantas halófilas estudadas são prospectivamente boas candidatas a serem utilizadas como alimento (as folhas da diabelha, por exemplo), em bebidas à base de plantas (como por exemplo tisanas de funcho e cardo marítimos e de perpétua das areias), como fontes de moléculas de relevo (ex.: compostos anti-T. cruzi do funcho marítimo), ou como matéria prima para as indústrias cosmética (como a madorneira para problemas de hiperpigmentação) e farmacêutica (ex.: a perpétua das areias, a madorneira e o cardo marítimo para o controlo da diabetes), e ainda para o segmento comercial de alimentos funcionais e / ou nutracêuticos (todas as cinco plantas halófilas enquanto antioxidantes potentes para prevenção de condições relacionadas com stress oxidativo). Adicionalmente, o perfil químico e atividades biológicas podem ajudar a explicar os usos tradicionais destas plantas

Development of a membrane based detection of Candida albicans

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica , apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015Candida é uma família de fungos, normalmente, presente na flora gastrointestinal, nos orgãos genitais, no sistema respiratório e na pele de pessoas saudáveis e, até determinada quantidade, não trazem nenhum risco. Apenas 17 espécies de Candida podem ser consideradas como patogénicas para o ser humano e, dentro deste grupo, Candida albicans é a espécie mais comum e pode ser facilmente encontrada em ambiente hospitalar, comida, solo e outros animais, sendo, por isso, a probabilidade de adquirir este fungo elevada. Candida albicans é unicelular e com forma ovóide, tendo entre 4 e 6 μm de diâmetro. Esta espécie reproduz-se produzindo blastoconídios (ou gêmulas) e quando o processo de divisão não está completo produz pseudo-hífas ou, dependendo das condições, pode mesmo produzir hífas. O nível de desenvolvimento de hífas promove a patogenicidade deste tipo de fungos. C. albicans cresce aerobicamente em ambientes com temperaturas entre 25 e 37ºC e formam colónias redondas e brancas após 48 - 72h de incubação em pratos de agar. Como foi referido, C. albicans é geralmente inofensiva. No entanto, certas alterações no corpo, como variações de pH, podem provocar o crescimento excessivo deste fungo, potenciando a sua patogenicidade e tornando-se a causa de uma série de condições médicas incluindo infecções vaginais ou orais. Estas infecções podem ter também fontes exógenas, como uso de catéteres ou transmissão entre pessoas. Quando a infecção por C. albicans, designada por Candidíase, atinge a corrente sanguínea facilmente se dissemina para outros orgãos internos. Este é o estágio de infecção mais grave pois o seu diagnóstico é difícil e, caso não seja feito em tempo útil, pode ter consequências graves. Este fungo pode atingir a corrente sanguínea quando o sistema imunitário do doente se encontra comprometido. O uso excessivo de antibióticos, o crescimento do números de tratamentos invasivos aplicados (como quimioterapia e o transplante de órgãos) que comprometem o sistema imunológico dos doentes, juntamente com o aumento de portadores de HIV faz com que o grupo de risco seja elevado e tem provocado um aumento do número de casos de Candidíase Invasiva. As espécies de Candida são a causa de 70-80% de infecções do sangue causadas por fungos, e 45-65% destes casos são causados por Candida albicans. Para além dos custos médicos que estes casos representam, 40% deles levam os pacientes à morte, sendo as infecções causadas por Candida albicans consideradas um problema de saúde pública. A principal razão para a elevada taxa de mortalidade referida deve-se ao facto deste tipo de infecções gerarem sintomas que são comuns a outros tipos de problemas, como febre ou outro tipo de sintomas dependendo do orgão atingido. Caso o organismo não responda ao tratamento utilizado, os órgãos do paciente podem parar de funcionar. Outra razão que contribui para dificultar o tratamento eficiente deste tipo de infecções são as próprias técnicas de diagnóstico presentes no mercado. O uso de técnicas de cultura é o mais utilizado para diagnóstico de infecções por fungos. No entanto, esta técnica demora entre 4 a 16 dias até confirmação do resultado definitivo e, para além disso, é muito pouco sensível, sendo 50% dos resultados falsos negativos. Outra técnica utilizada é ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay), um teste imunoenzimático que permite a detecção de antigénios específicos (por exemplo, determinados anticorpos no plasma sanguíneo). Este teste é usado no diagnóstico de várias doenças e baseia-se na ligação do analito a ser detectado ao anticorpo específico desse analito e na posterior adição de um substracto que, caso essa ligação antigénio-anticorpo se verifique, muda de cor. Em adição, a densidade óptica deste produto dá informações sobre a concentração de antigénio presente. Esta técnica é altamente sensível mas bastante complexa e trabalhosa, demorando entre 2 a 3 dias para o resultado final. Concluindo, os métodos de detecção utilizados actualmente, são, em geral, complexos e demorados. Sendo por isso necessária a investigação de métodos mais rápidos, sensíveis e fáceis de utilizar. A área de biosensores está em grande desenvolvimento pelo seu potencial de redução da duração do processo de detecção e obtenção do resultado final, no entanto, ainda é necessário mais investigação para que eles sejam eficientes o suficiente para o seu uso na prática. Um biosensor é um sistema que converte uma resposta biológica a um analito específico num sinal mensurável. Os sistemas de transdução destes sinais podem ser, por exemplo, piezoeléctricos, ópticos ou electroquímicos. Os sensores electroquímicos são bastante utilizados na área de biosensores, inclusive com aplicações biomédicas com o objectivo de estudar as propriedades electroquímicas dos materiais e reações entre diferentes elementos biológicos. Um tipo de elementos biológicos associados aos sensores electroquímicos são anticorpos que funcionam como o elemento que permitem a identificação e detecção de diferentes tipos de antigénios, como fungos. Esta associação entre biossensores electroquímicos e anticorpos têm apresentado bons resultados em termos de sensibilidade e selectividade. Assim, tendo em conta a necessidade existente de um novo sistema de detecção de Candida albicans mais eficiente, este projecto consistiu no desenvolvimento de um biossensor electroquímico baseado na funcionalização de eléctrodos de ouro aplicados na superfície de uma membrana com anticorpos específicos C. albicans e cuja a reacção entre anticorpos e células provoca uma alteração da impedância da superfície dos eléctrodos permitindo assim a detecção da presença de Candida albicans na amostra analisada. A produção dos eléctrodos é feita sobre uma membrana pois a ideia do projecto final, que deverá continuar em desenvolvimento, é a produção de um sistema de filtragem que permita a separação dos vários elementos constituintes do sangue das células de C. albicans, de modo que o processo de tratamento da amostra e a sua detecção sejam feitos no mesmo dispositivo e em simultâneo. O projecto foi dividido em três grandes etapas. A primeira etapa consistiu na utilização da técnica ELISA, por ser um método já bastante desenvolvido e utilizado, para analisar os anticorpos utilizados e ter esta experiência como referência para os resultados futuros. No entanto, embora seja uma técnica comum, é bastante difícil de optimizar. Ainda assim, foi possível concluir que tipo de anticorpos a utilizar nas etapas seguintes é anti-candida policlonal e qual o limite de detecção desta técnica, 1680 CFU/ml (CFU significa unidade formadora de colónias e corresponde ao número de colónias contabilizadas na amostra em análise). A segunda etapa consistiu no estudo de qual a técnica de funcionalização mais eficiente a ser aplicada nas superfícies de ouro dos eléctrodos. Esta é uma das fases mais críticas no desenvolvimento de um sensor, pois é através da funcionalização adequada dos eléctrodos que é possível que a detecção ocorra. Assim, dependendo do processo de modificação da superfície, o sensor vai ser mais ou menos eficiente, quer a nível de selectividade, quer a nível de sensibilidade. Foram testados dois métodos diferentes, sendo que ambos utilizam a molécula LC-SPDP (succinimidyl 6-(3-[2-pyridyldithio]-propionamido)hexanoate) como cross-linker. No Protocolo 1, esta molécula foi previamente ancorada aos anticorpos e só depois eles foram aplicados à superfície. No Protocolo 2, o cross-linker foi primeiro aplicado à superfície dos eléctrodos e só depois os anticorpos foram utilizados para finalizar a modificação da superfície. Como método de avaliação da eficiência dos protocolos as células foram marcadas com um marcador de fluorescência, e após o tratamento das superfícies, incubação das células e lavagem para remoção das células que não foram capturadas pelos anticorpos, as superficies foram analisadas ao microscópio e o número de células à superfície foi contado. O Protocolo 1 verificou-se mais eficiente e, por isso foi o aplicado à última etapa do projecto. A última etapa do projecto consistiu no desenvolvimento do sistema electroquímico de detecção de Candida albicans em meio de cultura. Para tal, foi aplicado o Protocolo 1 de funcionalização e analisados vários espectros de impedância obtidos nas várias experiências que foram efectuadas de forma a caracterizar o sensor e optimizar o processo de detecção. Foram estudadas várias fases, desde optimização do processo de limpeza da superfície dos eléctrodos sem a degradar; testadas várias concentrações de anticorpos na funcionalização dos eléctrodos e, por fim, foram realizados testes para estudar a sensibilidade e selectividade do sensor na detecção de C. albicans. Dentro das várias experiências efectuadas foram obtidos resultados bastante promissores tendo sido possível atingir níveis de detecção de concentrações relevantes para a aplicação em ambiente clínico, 150 CFU/ml.Candida albicans (C. albicans) is a yeast that can be found in 80% of the population. It is a normal constituent of the human flora and is commonly found in the gastrointestinal tract and in the female genital tract. In people with low immunity, such as HIV (human immunodeficiency virus) patients and radiotherapy patients, this common yeast can cause serious problems. In fact, Candidemia is one of the most common fungal infections in human and it is difficult to eradicate due to the resistance of this yeast. The detection systems available nowadays involve techniques such yeast culturing and PCR (polymerase chain reaction) that are in general time consuming. In order to reduce the time of detection and also to identify early stages of the infection (low concentrations of yeast) we propose a new system of filtration of the blood sample integrated with electrochemical gold electrodes functionalized with specific antibodies to detect C. albicans. The novel sensor consists of the gold electrodes directly fabricated on a filter membrane. Electrochemical sensors are widely used in the biosensor field in order to study and detect reactions between different biological elements transforming these reactions into electrical signals. The first step of building a functional sensor is the development of the functionalization protocol. Here, we tested two different protocols of antibody immobilization. Protocol 1 consists of the attachment of a cross-linker on the tip of the antibody allowing for a better affinity to the surface and an oriented position of the antibody during the functionalization. Protocol 2 has the same purpose as Protocol 1, to allow a better affinity and orientation of the antibodies, but it is made with a different order. The attachment of a cross-linker is directly made on to the gold electrodes’ surface and, only after the preparation of the surface, the antibody is incubated to bind to the cross-liker. In order to compare both protocols, the C. albicans cells were marked with a fluorescent cell tracker and the number of cells in each sample was counted. The protocol with best results was Protocol 1. After the selection of the best functionalization protocol, the developed membrane-based sensor capable of detecting Candida albicans yeast in culture broth is presented in this work. The yeast cells were captured on electrodes specifically functionalized with anti-C.albicans antibodies during 15 minutes incubation and detection is achieved by electrochemical impedance spectroscopy. The sensor allows for quick detection of the yeast cells at clinically relevant concentrations (150 CFU/ml)

Indicadores de bem-estar animal em suínos na fase de crescimento e engorda

A presente dissertação teve como objetivo avaliar a influência das condições ambientais em indicadores comportamentais e fisiológicos de bem-estar animal (BEA) em suínos. Num período de 60 dias, 7 fêmeas foram sujeitas a 4 situações ambientais: período de habituação em termoneutralidade (TN1), Frio (F), termoneutralidade (TN2) e Calor (C) com 15 dias de duração cada. Através de ferramentas de zootecnia de precisão e análises laboratoriais foram estudados indicadores comportamentais como o índice de proximidade (IP) e o número de visitas ao comedouro; e fisiológicos como a temperatura superficial (ts) e retal (tr), níveis sanguíneos da hormona T3, cortisol e alfa-amílase e salivares das duas últimas. Verificaram-se diferenças significativas, quer nos indicadores comportamentais, quer nos fisiológicos de acordo com as variações ambientais destacando-se, entre outras, a diminuição do índice de proximidade na situação C (p<0.001) e o aumento da hormona T3 na situação F (p<0.05). Os resultados obtidos realçam o potencial do uso de ferramentas de zootecnia de precisão para avaliação do BEA de suínos e a importância do ambiente térmico nos indicadores comportamentais e fisiológicos de BEA em suínos recomendando-se, para estes últimos, a realização de estudos mais aprofundados, principalmente em relação aos indicadores hormonais; “Animal Welfare Indicators in Pigs in the Growth and Fattening Phase” ABSTRACT: This dissertation aimed to evaluate the influence of environmental conditions on behavioral and physiological indicators of animal welfare in swine. In a period of 60 days, 7 females were subjected to 4 environmental situations: period of habituation in thermoneutrality (TN1), Cold (F), thermoneutrality (TN2) and Heat (C) with a duration of 15 days each. Through precision livestock tools and laboratory analyzes, behavioral indicators such as the proximity index (IP) and the number of visits to the feeder; and physiological variables such as surface temperature (ts) and rectal (tr), blood levels of the hormone T3, cortisol and alpha-amylase and salivary from the last two were studied. There were significant differences, both in behavioral and physiological indicators according to environmental variations, with emphasis on the decrease in the proximity index in situation C (p <0,001) and the increase in hormone T3 in the situation F (p <0,05). The results obtained highlight the potential of the use of precision livestock tools for the assessment of swine welfare and the importance of the thermal environment in the behavioral and physiological indicators of welfare in swine, recommending, for the latter, more in-depth studies, mainly in relation to hormonal indicators

Nutrição e genes em doenças intestinais

Tese de doutoramento, Ciências e Tecnologias da Saúde (Nutrição), Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2011A nutrição é um dos principais factores modificáveis das doenças crónicas. Para além da sua indispensável função como veículo de nutrientes para o organismo, desempenha também um efeito fisiológico primordial ao ser parte integrante de muitas reacções ao nível celular. É sabido que por um lado os nutrientes podem alterar a expressão e transcrição genética condicionando mecanismos envolvidos na doença, e por outro podem também influenciar a predisposição para certas patologias como resultado da variabilidade genética individual. Este último aspecto poderá justificar respostas diferentes a estímulos nutricionais idênticos frequentemente detectadas em estudos que avaliam a relação entre dieta e doença. No cancro do cólon e recto (CCR) e na doença de Crohn (DC), duas patologias que afectam o tracto gastrintestinal influenciando a relação individuo/dieta e consequente metabolização dos nutrientes, muita atenção é dada ao estado nutricional dos indivíduos. São vários os estudos que avaliam não só a importância dos nutrientes/alimentos no risco de doença, como também no comportamento e actividade da mesma. Apesar dos inúmeros estudos, os seus resultados são muitas vezes discordantes em ambas as doenças; nalguns, determinados nutrientes parecem ser ou protectores ou promotores, ao passo que noutros esse efeito já não se observa. A hipótese em questão parece poder estar relacionada com a heterogeneidade genética das populações em estudo. O conjunto dos quatro estudos que compõem esta tese pretende explorar a influência de variáveis nutricionais e genéticas no desenvolvimento de duas doenças intestinais, em concreto o CCR e a DC. Os estudos pretendem dar a conhecer de forma mais pormenorizada o padrão e estado nutricional de duas populações distintas. Foram igualmente estudados alguns exemplos de nutrigenética: a) foi estimado o risco de CCR associado à interacção entre a ingestão de determinados nutrientes e polimorfismos de genes de susceptibilidade, e de metilação do ácido desoxirribonucleico (DNA); b) no caso da DC, uma doença inflamatória, avaliou-se o efeito da interacção entre os polimorfismos em genes que codificam as citocinas pró e anti-inflamatórias e o tipo de gordura da dieta, também esta com influência no perfil inflamatório

Técnicas de antimicrobial stewardship e a sua eficácia na prática clínica pediátrica

Trabalho Final do Curso de Mestrado Integrado em Medicina, Faculdade de Medicina, Universidade de Lisboa, 2020A descoberta dos antibióticos revolucionou a saúde e as amplas vantagens destes fármacos conduziram à sua utilização alargada. No entanto, nos últimos anos, a sua utilização inapropriada tem-se associado ao problema crescente das resistências aos antibióticos. Como forma de combater este problema, surgiu o conceito de Antimicrobial Stewardship, que se faz valer de várias estratégias, com o objetivo de promover o uso adequado de antibioterapia e diminuir as resistências aos antibióticos. Esta investigação procurou enumerar as estratégias de Antimicrobial Stewardship, abordando a eficácia de cada uma na população pediátrica. Apesar da escassez de estudos que avaliem diretamente o seu impacto nas taxas de resistências, as estratégias mostraramse globalmente vantajosas na diminuição do uso de antibióticos, encurtamento da duração dos internamentos e custos associados. Alguns estudos associaram as estratégias a uma estabilização ou diminuição das resistências, embora seja necessário difundir a utilização deste parâmetro como outcome em estudos futuros. Esta investigação permitiu ainda destacar duas técnicas centrais: a técnica de prospective audit with feedback e a técnica de pré-autorização, que, quando utilizadas em conjunto, apresentam melhores resultados. Apesar de se ter encontrado elevada adesão às técnicas implementadas, também se concluiu que o seu sucesso é ditado pela sua aplicabilidade prática, adaptando-se à realidade de cada instituição. Em Portugal, os estudos nesta temática são escassos, pelo que se abre caminho para futuras investigações, além de se propor a criação de uma task-force a nível nacional.The discovery of antibiotics revolutionized health and the wide benefits of these drugs led to their widespread use. However, its inappropriate use has been associated with the rising problem of antibiotic resistance. As a way of combating this problem, Antimicrobial Stewardship has emerged, to promote the appropriate use of antibiotics and reduce antimicrobial resistance. This investigation sought to enumerate each strategy, addressing its effectiveness in the pediatric population. Despite the scarcity of studies that directly assess their impact on resistance rates, they all showed advantages in reducing the use of antibiotics, decreasing the length of hospital stay and associated costs. Some studies show that these strategies are associated with stabilization or reduction of antimicrobial resistance, although wider use of this parameter is needed in future studies. This investigation also made it possible to highlight two central techniques: prospective audit with feedback and pre-authorization, which, when used together, present better results. Despite having found high adherence to the techniques implemented, we also concluded that their success is dictated by their practical applicability, adapted to the reality of each institution. In Portugal, studies on this topic are scarce, which opens the way for future research, in addition to proposing the creation of a national task force

Determinantes comportamentais da ingestão de bebidas alcoólicas e consumo de tabaco de mulheres em Portugal: um estudo por questionário

Dissertação de Mestrado realizada sob a orientação da Professora Doutora Marta Moreira Marques, apresentada no Ispa - Instituto Universitário para obtenção do grau de Mestre na especialidade de Psicologia Clínica.A investigação demonstra que a ingestão frequente de bebidas alcoólicas e de consumo tabaco têm consequências sérias ao nível da saúde, sendo que o seu uso tem aumentado cada vez mais principalmente em mulheres, que constituem um grupo de risco por questões biológicas. A presente investigação teve como objetivo principal perceber quais os determinantes da ingestão de bebidas alcoólicas e do consumo de tabaco de mulheres em Portugal, com base no modelo de mudança comportamental COM-B (Capacidade, Motivação, Oportunidade- Comportamento). Procurou-se também aferir a perceção dos participantes sobre a interação entre estes dois comportamentos. Para tal, foi realizado um estudo transversal por questionário (em formato online) que contou com uma amostra de 352 mulheres residentes em Portugal, com idades compreendidas entre os 18 e 71 anos. Os resultados demonstraram existir três fatores do modelo COM-B preditores da frequência da ingestão de bebidas alcoólicas- Motivação Automática (β=0,268; p=0,003), (β=0,275; p=0,028), (β=0,339; p=0,010) e (β=0,536; p<0,001), Motivação Reflexiva (β=0,326; p=0,046) e Capacidade Psicológica (β=0,556; p<0,001) e da quantidade do consumo de bebidas alcoólicas- Motivação Automática (β=0,433; p=0,012) e Motivação Reflexiva (β=0,900; p=0,003), (β=0,966; p=0,004) e (β= 1,929; p<0,001); e dois determinantes da frequência do consumo de tabaco semelhantes aos do comportamento de ingestão de bebidas alcoólicas- Motivação Automática (β=-0,253; p<0,001) e a Motivação Reflexiva (β=-0,426; p=0,015). Em relação à interação entre os dois tipos de consumo (e.g. se o consumo de um influencia o consumo do outro), as participantes reportaram considerar que a ingestão de bebidas alcoólicas contribui para o consumo de tabaco. Estes resultados contribuem para um maior conhecimento científico acerca dos determinantes do consumo das duas substâncias. Ao se identificar os determinantes comuns de vários comportamentos de saúde, neste caso associados à adição, é possível realizar intervenções de mudança comportamental que possam ser dirigidas a mais do que um comportamento de saúde, de forma a rentabilizar recursos e poder intervir em vários comportamentos de saúde paralelamente.ABSTRACT: Research shows that frequent drinking and smoking have serious health consequences, and that their use is increasing, especially among women, who are at risk for biological reasons. The main objective of this research was to understand the determinants of alcohol and tobacco consumption among women in Portugal, based on the COM-B (Capacity, Motivation, Opportunity-Behavior) model of behavioral change. We also sought to gauge participants' perceptions of the interaction between these two behaviors. To this end, a cross-sectional questionnaire study (in online format) was carried out with a sample of 352 women living in Portugal, aged between 18 and 71. The results showed that there were three factors from the COM-B model that were predictive of the frequency of alcohol consumption - Automatic Motivation (β=0,268; p=0,003), (β=0,275; p=0,028), (β=0,339; p=0,010) and (β=0,536; p<0,001), Reflective Motivation ((β=0,326; p=0,046) and Psychological Capacity (β=0,556; p<0,001), and the quantity of alcohol consumption - Automatic Motivation (β=0,433; p=0,012) and Reflective Motivation (β=0,900; p=0,003), (β=0,966; p=0,004) and (β= 1,929; p<0,001); and two determinants of the frequency of tobacco consumption similar to those of alcohol consumption behavior - Automatic Motivation (β=-0,253; p<0,001) and Reflective Motivation (β=-0,426; p=0,015) . With regard to the interaction between the two types of consumption (e.g. whether the consumption of one influences the consumption of the other), the participants reported that they believe that the consumption of alcoholic beverages contributes to the consumption of tobacco. These results contribute to greater scientific knowledge about the determinants of consumption of the two substances. By identifying the common determinants of various health behaviors, in this case associated with addiction, it is possible to carry out behavioral change interventions that can target more than one health behavior, in order to make the most of resources and be able to intervene in various health behaviors in parallel