82. Cftr Gene Targeting in Murine ES Cells Mediated by the SFHR Technique

Small Fragment Homologous Recombination (SFHR)-mediated targeting is a gene therapy strategy where a specific genomic locus is modified through a target exchange between a small DNA fragment (SDF) and genomic DNA. Here we demonstrate that SFHR can stably introduce a 3-bp deletion (corresponding to |[Delta]|F508) within Cftr (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) locus in the genome of mouse embryonic stem (ES) cells. SDFs (about 6.4|[times]|105 molecules per cell) carrying the |[Delta]|F508 mutation were transfected by nucleofection protocol. About 12% of transcript corresponding to deleted allele was detected and about 60% of the electroporated cells no longer had measurable CFTR-dependent chloride efflux. The CFTR activity was also analyzed by measuring the chloride efflux by the fluorescence microscopy-coupled digital video imaging system in each ES cell colony, previously loaded with MQAE, a chloride sensitive dye. An average of 4-6 regions for each cell colony was analysed to verify the genotypic homogeneity of each colony. In fact all regions examined in each colony showed a similar significant chloride efflux after PKA activation. Moreover on twelve electroporated ES colonies analysed, eight were successfully mutated (Cl- efflux not significantly different from zero) while four colonies showed Cl-efflux CFTR-dependent not significantly different from the untreated ones

Clinical Features and Outcome of 79 Dogs With Digital Squamous Cell Carcinoma Undergoing Treatment: A SIONCOV Observational Study

In dogs, digit squamous cell carcinoma (SCC) is uncommon. Clinical signs are frequently underestimated, leading to a diagnostic delay. The purpose of this retrospective study was to report our experience regarding the clinical presentation, diagnostic work-up, treatment and outcome of 79 client-owned dogs with SCC of the digit. The greatest majority (84.8%) of dogs was dark-coated. Schnauzers represented approximately one third of the study population, and had a poorer outcome compared with other breeds. The majority of SCCs occurred in the front limbs (61%), and bone lysis was frequently observed (92.4%). Approximately 9% of dogs had involvement of multiple digits, and this was associated with a shorter time to progression (TTP; P = 0.047). Similarly, a duration of clinical signs >90 days was associated with a shorter TTP (P = 0.02). Regional lymph node metastases were documented in 17.7% of dogs at admission and were significantly associated with tumor-related death (P < 0.001). At presentation, none of the dogs had evidence of distant metastasis. Digit amputation achieved adequate local tumor control in the majority of cases. Adjuvant chemotherapy and radiation therapy were carried out in 21.5% of cases, with uncertain benefit. Due to the relatively non-aggressive clinical behavior of digit SCC, chemotherapy should only be offered in the case of metastatic disease. Approximately one fourth of dogs developed de novo SCCs during the follow-up. Careful examination of the digits should be encouraged in breeds considered at high risk and in dogs with a previous history of digital SCC

Increased incidence of invasive meningococcal disease of serogroup C / clonal complex 11, Tuscany, Italy, 2015 to 2016

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Padrões hematológicos em Cebus apella, anestesiados com quetamina

Blood samples were collected from 124 captive Capuchin monkeys (Cebus apella) at Fundação Parque Zoológico de São Paulo, anesthetized with ketamine (10 mg/kg, IM). Hematological parameters (RBC, WBC, differential count, hematocrit, hemoglobin, MCV, MCH and MCHC) were determined, and influence of sex and age on hematologic values was studied.Amostras de sangue foram colhidas de 124 macacos-prego (Cebus apella) da Fundação Parque Zoológico de São Paulo, anestesiados com quetamina (10 mg/kg, IM), com a finalidade de determinar os seguintes parâmetros hematológicos: contagens globais de hemácias e leucócitos, contagem diferencial de leucócitos, hematócrito, hemoglobina e índices hematimétricos (VCM, HCM e CHCM), expressos em média e desvio padrão. Estudou-se a influência do sexo e da idade sobre os referidos parâmetros

Trunk anatomical features and essential oils composition of woody-shrub species of the ecotone and steppe from the Northwestern region of Chubut Province

La Provincia del Chubut tiene una superficie aproximada de 224.686 km2, donde los bosques subantárticos se extienden hacia el oeste y el noroeste. Están compuestos por árboles nativos como la lenga, el coihue, el alerce o lahuán, el ciprés, el maitén, el ñire y el radal, entre otros. En el ecotono bosque-estepa incursionan algunas de estas especies arbóreas, pero existe mayor predominancia de arbustos de muy bajo porte. El objetivo de este trabajo fue analizar, sobre la base de los caracteres anatómicos del leño secundario, aspectos xeromórficos de arbustos patagónicos y determinar la presencia y la composición de los aceites esenciales en sus follajes. Se realizó el estudio anatómico de algunas especies arbustivas, comprendidas en las siguientes familias botánicas: Apiaceae, Asteraceae, Fabaceae, Lamiaceae, Malvaceae, Rhamnaceae, Solanaceae y Verbenaceae. Se realizó el estudio anatómico de: Adesmia boronioides (Fabaceae), Ameghinoa patagonica (Asteraceae), B. obovata, B. salicifolia, (Asteraceae), Clinopodium darwinii (Lamiaceae), Corynabutilon bicolor (Malvaceae), Diostea juncea (Verbenaceae), Discaria chacaye (Rhamnaceae), Fabiana imbricata (Solanaceae), Mulinum spinosum (Apiaceae), Ochetophila trinervis (Rhamnaceae), Schinus johnstonii y S. patagonicus (Anacardiaceae). Los elementos observados, analizados y medidos permitieron obtener resultados y establecer analogías y diferencias entre las especies. La mayoría de los arbustos presenta: porosidad de circular a semicircular en xilema temprano, y porosidad difusa, disposición dendrítica, ulmoide, en racimos, y oblicua en zigzag, en xilema tardío. En sección transversal, los poros se distribuyen solitarios, múltiples radiales cortos, largos y en cadena; en sección tangencial se observaron radios uni a multiseriados, homocelulares y heterocelulares. El sistema de radios es heterogéneo. Los espesamientos helicoidales están presentes en las paredes de los vasos y las traqueidas vasculares de varias especies. En el leño de otras, se hallaron traqueidas vasicéntricas y fibrotraqueidas. Las perforaciones reticuladas solo fueron halladas en algunos vasos de Ochetophila trinervis; y perforaciones radiovasculares, en D. chacaye. Las demás especies tienen vasos con perforaciones simples. Los valores de índice de vulnerabilidad, mesomorfismo, índice de fibras/vasos y frecuencia promedio de poros/mm2 obtenidos, demuestran que los arbustos estudiados habitan en sitios de xerófitos a extremadamente xéricos del ecotono-estepa del Chubut. El 64% de las especies mostró contenidos importantes de aceites esenciales. Este resultado estaría en concordancia con algunas hipótesis que plantean la presencia de estos metabolitos secundarios como adaptación a las condiciones xerófitas.Chubut Province has an area of about 224.686 km², and therein the sub Antarctic forest extends to the West and Northwest. Native trees such as lenga, coihue, alerce or lahuán, cypress, maitén, ñire and radal, among others, are the most frequent species present. Meanwhile in the forest-steppe of the ecotone some of these tree species are also present but with a greater predominance of very low bearing shrubs. The objective of this study was to analyze the xeromorphic aspects of patagonian shrubs based on the anatomical characters of the secondary wood and on the presence and composition of essential oils in their foliage. The anatomical study was conducted on: Adesmia boronioides (Fabaceae), Ameghinoa patagonica (Asteraceae), Baccharis linearis, B. obovata, B. salicifolia, (Asteraceae), Clinopodium darwinii (Lamiaceae), Corynabutilon bicolor (Malvaceae), Diostea juncea (Verbenaceae), Discaria chacaye (Rhamnaceae), Fabiana imbricata (Solanaceae), Mulinum spinosum (Apiaceae), Ochetophila trinervis (Rhamnaceae), Schinus johnstonii y S. patagonicus (Anacardiaceae). The anatomical elements observed, analyzed and measured, allowed establishing analogies and differences between the species. Most of the bushes presented: circular to semicircular porosity in spring wood, and diffuse-porous, dendritic provision, ulmoid, in clusters, and oblique zigzag in autumn-winter wood. In cross section, the pores were solitare, multiple radial short, long and chain; uni multiseriate, homocellular and heterocellular rays were observed in the tangential section. The radio system was heterogeneous. The helical thickening was present in the vessel walls and vascular tracheids, of several species. Fibrotracheids and vasicentric tracheids were found in the others woods. The reticulate perforations were only found in some vessels of Ochetophila trinervis; and radiovasculars drillings in D. chacaye. Other species had vessels with simple perforations. Index values of vulnerability, mesomorphism, index of fibers/vessels and frequency average pores/mm² obtained, demonstrated that the shrubs under study live in xerophytic to extremely xeric conditions in the ecotone-steppe in Chubut. About 64% of the species showed essential oils content. These results would be consistent with some hypotheses posed that the presence of these secondary metabolites constitutes a possible adaptation to xerophytic conditions.Fil: Guerra, Pedro E.. Universidad Nacional de la Patagonia "San Juan Bosco". Facultad de Ingeniería - Sede Esquel; ArgentinaFil: González, Silvia Beatriz. Universidad Nacional de la Patagonia "San Juan Bosco". Facultad de Ciencias Naturales - Sede Esquel; ArgentinaFil: Kirner, Helga J.. Universidad Nacional de la Patagonia "San Juan Bosco". Facultad de Ingeniería - Sede Esquel; ArgentinaFil: Retta, Daiana Sabrina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Di Leo Lira, Paola Maria del Rosario. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Instituto de Química y Metabolismo del Fármaco; ArgentinaFil: Gómez, Mariano F.. Centro de Investigación y Extensión Forestal Andino Patagónico; Argentin

Clinical Features and Outcome of 79 Dogs With Digital Squamous Cell Carcinoma Undergoing Treatment: A SIONCOV Observational Study

In dogs, digit squamous cell carcinoma (SCC) is uncommon. Clinical signs are frequently underestimated, leading to a diagnostic delay. The purpose of this retrospective study was to report our experience regarding the clinical presentation, diagnostic work-up, treatment and outcome of 79 client-owned dogs with SCC of the digit. The greatest majority (84.8%) of dogs was dark-coated. Schnauzers represented approximately one third of the study population, and had a poorer outcome compared with other breeds. The majority of SCCs occurred in the front limbs (61%), and bone lysis was frequently observed (92.4%). Approximately 9% of dogs had involvement of multiple digits, and this was associated with a shorter time to progression (TTP; P = 0.047). Similarly, a duration of clinical signs >90 days was associated with a shorter TTP (P = 0.02). Regional lymph node metastases were documented in 17.7% of dogs at admission and were significantly associated with tumor-related death (P < 0.001). At presentation, none of the dogs had evidence of distant metastasis. Digit amputation achieved adequate local tumor control in the majority of cases. Adjuvant chemotherapy and radiation therapy were carried out in 21.5% of cases, with uncertain benefit. Due to the relatively non-aggressive clinical behavior of digit SCC, chemotherapy should only be offered in the case of metastatic disease. Approximately one fourth of dogs developed de novo SCCs during the follow-up. Careful examination of the digits should be encouraged in breeds considered at high risk and in dogs with a previous history of digital SCC

Estado nutricional e adequação calórica – proteica de pacientes neurológicos internados em uma Unidade de Terapia Intensiva: Nutritional status and calorific suitability – protein of neurological patients interned in an Intensive Therapy Unit

Introdução: O presente estudo teve como objetivo analisar o estado nutricional e a adequação calórico-proteica de pacientes neurológicos internados em uma Unidade de Terapia Intensiva Neurológica. Métodos: estudo descritivo do tipo retrospectivo, realizada através da análise dos registros de terapia nutricional de pacientes internados na Unidade de Terapia Intensiva Neurológica do Instituto de Medicina Integral Prof. Fernando Figueira (IMIP), durante o ano de 2019. Resultados: A amostra foi composta por 60 pacientes, com idade média de 69,47 ± 13,66 anos, o tempo de terapia nutricional enteral foi de 20,18 ± 21,98 dias, dentre os quais à maior prevalência foi de pacientes femininos (58,3%). Foi analisada a caracterização demográfica, clínica e a caracterização nutricional de pacientes neurológicos acompanhados em uma Unidade de Terapia Intensiva (UTI); paciente com Acidente Vascular Cerebral Isquêmico + Hipertensão Arterial Sistêmica (35,2%) e os com desfecho clínico com maior percentual de alta (54,5%). Sendo também observado que a maioria dos pacientes eram eutróficos (66,1%). Conclusão: Foi possível verificar que o paciente neurológico é um paciente que possui risco nutricional, tornando-se necessário um acompanhamento nutricional adequado

Condizionalità europea e identità costituzionali

La presente Sezione monografica trae origine dall’omonimo seminario organizzato presso l’Università degli Studi di Udine nel marzo 2023. Il tema della call for papers alla base del seminario – condizionalità europea e identità costituzionali – è stato scelto in quanto la condizionalità, o meglio le condizionalità, costituiscono meccanismi, di diversa matrice, sempre più presenti e pervasivi nel processo di integrazione europea, sia dal punto di vista quantitativo che da quello qualitativo. Essi agiscono sul versante orizzontale dei fini propri dell’Unione e dei rapporti tra i suoi organi, sul versante verticale dei rapporti tra Unione e Stati membri, sul versante esterno dei rapporti tra Unione e Stati candidati all’adesione, futuri candidati o Stati terzi. Gli strumenti di condizionalità rappresentano, così, uno stress test per alcuni dei tratti caratterizzanti dell’ordinamento sovranazionale, quali il limite delle competenze attribuite, il principio di parità tra Stati, la persistente oscillazione tra modello intergovernativo e modello comunitario, oggi unionale, fino a toccare, nelle più recenti evoluzioni, la stessa capacità prescrittiva dei valori di cui all’art. 2 TUE e la loro tenuta rispetto alle identità costituzionali degli Stati membri. Di qui la scelta di un tema che tocca il cuore dell’integrazione europea da molteplici sfaccettature. La Sezione si apre con un contributo di carattere generale su “L’utilizzo della condizionalità e la trasformazione dello spazio europeo” (A. Baraggia). I successivi contributi si possono raggruppare attorno a quattro nuclei tematici distinti che, tuttavia, si intersecano fra loro in maniera significativa. La condizionalità di bilancio connessa alla protezione dello Stato di diritto è analizzata da Adriano Dirri e Ylenia Guerra – che hanno scritto sulla controversa genesi e sulla «contestata applicazione» del Regolamento 2020/2092, evidenziando sia gli aspetti giuridici che le dinamiche politiche – e da Nicola Maffei, con un contributo che ne offre una lettura in chiave di evoluzione costituzionale dell’Unione, in correlazione con il piano Next Generation EU (NGEU). Il secondo nucleo di riflessione è costituito dalla condizionalità relativa all’utilizzo delle risorse finanziarie, in rapporto con la forma di governo nazionale: Federico Musso mette in luce la diversa incidenza dei vincoli sovranazionali di natura macroeconomica sulle decisioni finanziarie degli Stati membri, mentre Giulio Santini riprende l’elaborazione teorica sul concetto di indirizzo politico, proponendone l’utilizzo come chiave di lettura dell’efficacia dei meccanismi di condizionalità in ambito europeo. Ci si concentra poi su obiettivi settoriali di particolare rilevanza perseguiti dall’Unione con lo strumento della condizionalità. Paola Valerio descrive l’emergere del suo utilizzo per finalità di carattere ambientale, dalla politica di coesione alla politica agricola comune, sino al Dispositivo per la ripresa e la resilienza (cd. Recovery Fund). Roberto Vinceti, invece, approfondisce come il «formante negoziale» sotteso alla condizionalità possa spingere all’armonizzazione degli ordinamenti giudiziari nazionali, pur in assenza di competenze normative dell’Unione, facendo emergere un modello comune che i soli interventi della giurisprudenza sovranazionale non avrebbero potuto forgiare. L’ultima forma di condizionalità esaminata dai contributi della Sezione è quella insita nel procedimento di adesione ed è rivolta agli Stati candidati o potenziali candidati: Edin Skrebo analizza l’esperienza dei Balcani occidentali, e in particolare dei quattro Stati che erano parte della Repubblica Federale di Yugoslavia (Bosnia ed Erzegovina, Serbia, Montenegro e Macedonia del Nord), mentre Tatiana-Maria Cernicova-Dragomir parla dell’«associated trio» di Stati che, nel 2022, ha espresso la volontà di diventare parte dell’Unione: Ucraina, Moldavia e Georgia