Astrocytic CB1R-mediated calcium signalling: impact in glutamate transport and interaction with adenosine receptors

Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, em 2018Os astrócitos são células multifuncionais que coexistem com os neurónios no sistema nervoso central, cuja morfologia pode variar conforme localização e/ou função. Na sinapse, interagem direta e indiretamente com os terminais pré-sinápticos, pós-sinápticos, e astrócitos vizinhos, uma vez que possuem recetores específicos para neurotransmissores, sendo capazes de libertar gliotransmissores que, por sua vez, se ligam a recetores presentes nos terminais nervosos. Esta comunicação bidirecional entre astrócitos e neurónios leva então ao conceito de sinapse tripartida. Além da gliotransmissão, os astrócitos também são responsáveis pela maioria da captação de glutamato nas sinapses. O glutamato é o principal neurotransmissor excitatório com um papel crucial na sinalização neuronal. Após ter cumprido a sua função como neurotransmissor, é necessário a saída rápida deste da fenda sináptica de modo a impedir excitotoxicidade. Para tal, astrócitos e neurónios expressam transportadores de glutamato. A atividade destes transportadores é controlada de forma fina por vários componentes intra e extracelulares como fatores de crescimento, neuromoduladores, sinalização de cálcio, etc. Atualmente, cannabis é a droga ilícita mais consumida nos países desenvolvidos. A planta cannabis sativa possui centenas de substâncias psicoativas, como o THC, que se ligam a recetores específicos no cérebro e periferia que, iniciando uma cascada de eventos, levam aos efeitos psicoativos da cannabis, já conhecidos. Hoje em dia sabe-se que os mamíferos são capazes de produzir e degradar endocanabinóides que também se ligam a estes recetores funcionando como neurotransmissores retrógrados. O sistema endocanabinóide passou a ser conhecido por um sistema regulador homeostático com uma sinalização intra e intercelular. Os recetores de canabinóides mais estudados são os recetores de cannabinóides tipo 1 (CB1R) e recetores de cannabinóides tipo 2 (CB2R). O CB1R tem uma expressão mais dominante no sistema nervoso central (SNC) enquanto o recetor CB2 é mais expresso no sistema imunitário. Durante a transmissão sináptica, os terminais pré-sinápticos libertam neurotransmissores na fenda sináptica que, por sua vez, se vão ligar aos recetores expressos nos terminais pós-sinápticos. Uma vez ligados, dependendo do tipo de neurónio/célula, os neurotransmissores podem conduzir a uma variedade de respostas, como inibição, excitação e/ou síntese de segundos mensageiros. Por vezes, os terminais pós-sinápticos respondem ao estímulo através da síntese de endocanabinóides. Estes, por sua vez, são libertados na fenda sináptica ligando-se e ativando os recetores canabinóides. No cérebro, a atividade desses recetores pode afetar múltiplas funções biológicas, como perceção da dor, digestão, aprendizagem, memória, ansiedade e funções cognitivas. Isso é feito através da regulação da transmissão sináptica e da plasticidade, como a inibição da libertação do transmissor, o controlo da excitabilidade neuronal e a regulação da plasticidade sináptica de curto e longo prazo. O CB1R é um recetor acoplado à proteína G (GPCR) do sistema canabinóide com sete domínios transmembranares. A expressão deste não é uniforme ao longo do cérebro, sendo mais expresso no cerebelo, gânglios basais e córtex. Todavia, a baixa expressão do recetor não significa necessariamente que a sua função não é relevante. Nos neurónios, os CB1Rs são geralmente acoplados a Gi/o e, em alguns casos, a Gs, enquanto que nos astrócitos há evidências deste recetor estar acoplado a Gq/11. Nestas células, sabe-se que a ativação deste recetor leva à mobilização de cálcio das reservas intracelulares através da atividade de fosfolipase C (PLC). Semelhante ao CB1R, os recetores de adenosina são um grupo de proteínas GPCR que são ativadas por ligação com a adenosina. Até à data, quatro subtipos de recetores de adenosina foram descobertos e clonados: A1, A2A, A2B e A3. Os recetores A1 e A3 de adenosina são inibitórios sendo acoplados a Gi/o inibindo a acumulação de cAMP e a atividade de proteína quinase A (PKA), enquanto que os receptores A2A e A2B são excitatórios, acoplados a proteínas Gs cuja ativação leva ao aumento de cAMP e ativação de PKA. No SNC, a adenosina é considerada um neuromodulador potente e os recetores A1 e A2A de adenosina estão associados a funções cerebrais críticas, como a libertação e captação de neurotransmissores e plasticidade sináptica. Nos astrócitos, a atividade dos recetores A2A de adenosina está correlacionada com a captação diminuída de aspartato e a regulação da memória, enquanto que os recetores A1 estão correlacionados com a ativação da PLC, sono e fatores de crescimento. O objetivo deste estudo foi entender melhor a sinalização de cálcio mediada pelo CB1R e averiguar a sua relevância na atividade de transportadores de glutamato em astrócitos, assim como estudar a interação entre os recetores de adenosina e o CB1R em astrócitos. Para este fim, foram realizados ensaios de imunocitoquímica, imagiologia de cálcio e captação de glutamato radioativo em culturas primárias de astrócitos. As culturas primárias de astrócitos foram preparadas do córtex cerebral de Sprague Dawley com 0-2 dias, sendo usadas células com 3 semanas em cultura. Nos ensaios de imagiologia de cálcio, foi observada a evolução do cálcio intracelular ao longo do tempo, incubando a cultura de astrócitos com uma sonda FURA-2AM. Nos ensaios de captação de glutamato, foi vista a quantidade de glutamato radioativo incorporada pelos astrócitos. A captação mediada pelo transportador GLAST ou GLT-1 é dada pela diferença entre o transporte total (na ausência de qualquer antagonista) e o transporte obtido quando um destes transportadores é bloqueado. Em imunocitoquímica, a expressão do CB1R, assim como dos principais transportadores de glutamato GLT-1 e GLAST, foi encontrada em culturas primárias de astrócitos. A expressão dos transportadores GLAST e GLT-1 não foi uniforme. O GLT-1 apresentou uma expressão mais alta na área ao redor do núcleo enquanto que o GLAST aparentou ter uma expressão mais alta na membrana e no espaço intracelular. Em imagiologia de cálcio, a presença do agonista seletivo do CB1R induziu transientes de cálcio, sendo que a amplitude e a frequência destes era dependente da concentração de agonista. Na presença de um antagonista seletivo do CB1R, o efeito foi abolido, levando à conclusão que a sinalização de cálcio induzida por ACEA é mediada pela ativação do CB1R. Esta sinalização de cálcio foi abolida na presença de um depletor de reservas de cálcio intracelulares enquanto que, em condição de baixa concentração de cálcio extracelular, a amplitude e frequência diminuíram. Na presença de um antagonista de PLC (U73122), o efeito também foi abolido. Quando a proteína Gi/o foi inibida na presença de um antagonista especifico, PTx, a frequência destes diminuía sem alterações na amplitude, sugerindo fortemente algum tipo de participação por parte de um recetor que não o CB1R acoplado a Gi/o na sinalização de cálcio. Quando o crosstalk entre CB1R e A2AR foi avaliado, observou-se que a pré-ativação de A2AR diminuiu a frequência e a amplitude dos transientes de cálcio mediados por CB1R. Por outro lado, quando o A2AR foi inibido, a frequência de transientes mediada por CB1R aumentou quando comparada à incubação de ACEA isolado. Quando o recetor de adenosina A1 foi previamente inibido, a frequência de transientes induzida pelo CB1R pareceu diminuir. Em ensaios de uptake de glutamato, a presença de ACEA aumentou a captação de glutamato em astrócitos, através de um aumento da constante cinética Vmax na atividade do transportador GLAST sem diferença em Km. Na presença do antagonista do CB1R, este efeito foi abolido, assim como na presença de antagonista de PLC. Já na presença de um antagonista de PKC, uma proteína abaixo na sinalização da via de sinalização de PLC, observou-se uma potenciação do transporte, o que indica que esta proteína é provavelmente não participativa na via. Para saber se a sinalização de cálcio e potenciação do transporte de glutamato mediadas pela ativação do CB1R são efeitos paralelos ou em série, ativou-se o CB1R na presença de um quelante de cálcio. Nesta condição, não se observou potenciação de transporte de glutamato, o que leva a crer que a sinalização de cálcio iniciada pela ativação de CB1R leva à potenciação da atividade do transportador GLAST. Concluindo, em astrócitos, a ativação do CB1R induz transientes de cálcio intracelulares cuja amplitude e frequência têm um comportamento dose-resposta. A ativação de PLC e as reservas de cálcio intracelulares são essenciais para a ocorrência destes transientes. Isto sugere fortemente o acoplamento de Gq/11 ao CB1R, que está de acordo com estudos anteriores. Por sua vez, estes transientes aumentam o transporte de glutamato através do aumento da atividade do transportador GLAST, numa via independente de PKC. A inibição do recetor de adenosina A2A aumenta a sinalização de cálcio mediada pelo CB1R, implicando uma interação direta entre estes dois recetores.Astrocytes are the major glial cell type in the central nervous system (CNS) being responsible for many actions in the CNS. Astrocytes express several types of G-protein coupled receptors, namely the cannabinoid type one receptors (CB1R) that are activated by endocannabinoids released from neurons. Usually these receptors are coupled to Gi/o proteins although there are reports of Gq/11 coupling. In astrocytes, CB1R activation leads to phospholipase C (PLC)-dependent Ca2+ mobilization from internal cellular stores, which will then have key roles in brain function. Astrocytes also express adenosine A2A receptors (A2AR) that, when activated by adenosine, have several modulatory effects, such as the control of glutamate transport. Thus, both type of receptors, CB1R and A2AR, are of pivotal importance in modulation of neuronal excitability. Interaction between CB1R and A2AR have been well studied in neurons, nevertheless nothing is known concerning this crosstalk in astrocytes. From the several roles of astrocytes in the CNS, the glutamate uptake mediated by specific glutamate transporters is one of the most relevant functions, since this function prevents excitotoxicity due to glutamate accumulation in the synaptic cleft. To achieve the suitable glutamate transport from the extracellular space, astrocytes express mainly the glutamate transporters GLAST and GLT-1. Having in mind the lack of information regarding the effect of CB1R in astrocytes, the main aim of this work was to study the role of CB1R activation-mediated calcium signaling upon GLAST transporter in rat primary astrocytic cultures. This study was designed to better understand the role of CB1R activation on astrocytic calcium signalling and to study its relevance upon glutamate transport. Furthermore, this work aimed to study the crosstalk between CB1R and A2AR upon calcium signaling and glutamate uptake. Primary astrocytic cultures from cortex were prepared from Sprague Dawley pups (0-2 days old). Calcium signaling and [3H]-glutamate uptake experiments were performed with 18-23 DIC astrocytes. Calcium signaling experiments were performed using FURA-2AM dye and specific transport mediated by GLAST was achieved by the difference of total glutamate transport and transport in presence of UCPH-101, a specific blocker of this transporter. In primary cultures of astrocytes it was observed that CB1R activation with ACEA led to calcium transients, whose amplitude and frequency was dose-dependent for the two tested ACEA concentrations (0.5 and 1.0 μM). The occurrence of these transients was abolished in the presence of antagonists of CB1R, AM251 (1 μM), of PLC, U73122 (3 μM) and a chelator of intracellular calcium stores, CPA (10 μM). Low extracellular calcium concentration decreased both frequency and amplitude of the transients while inhibition of Gi/o protein, with PTx (5μg/ml), decreased significantly frequency with no significant changes in amplitude. By performing glutamate uptake assays, it was observed that GLAST was the main glutamate transporter in primary astrocytic cultures. CB1R activation increased significantly the Vmax kinetic constant of the GLAST transporter. This potentiation involved PLC and calcium signalling, but was PKC independent. When evaluating the crosstalk between CB1R and A2AR, it was observed that activation of A2AR decreased both frequency and amplitude of CB1R-mediated calcium transients. On the other hand, when the A2AR was inhibited, CB1R-mediated transients frequency was higher when compared to ACEA incubation alone. When adenosine A1 receptor was previously inhibited, the CB1R-elicited transients ‘frequency seemed to be decreased. In conclusion, CB1R activation triggers calcium transients in astrocytes by PLC activation, in a dose-dependent manner. This calcium signaling then enhances glutamate transport probably by increasing the number of functional GLAST transporters in the plasma membrane. In parallel, adenosine A2AR activation decreases CB1R activity. This highly suggests that, in a synapse context, endocannabinoids released by post-synaptic neurons will activate astrocytic CB1Rs, increasing glutamate transport and contributing to clear up excessive glutamate at the synaptic cleft, and that this effect is possibly controlled by adenosine A2A receptors

Identificação e gestão dos últimos dias e horas de vida

Relatório de Prática Clínica apresentado à Escola Superior de Saúde Dr. Lopes Dias do Instituto Politécnico de Castelo Branco para cumprimento dos requisitos necessários à obtenção do grau de Mestre em Cuidados Paliativos, realizado sob a orientação científica da Mestre Ângela Sofia Lopes Simões, Professora Adjunta convidada pela Escola Superior de Saúde Dr. Lopes Dias do Instituto Politécnico de Castelo BrancoO presente Relatório tem como fim a descrição e reflexão das atividades realizadas na Unidade Curricular de Prática Clínica do Mestrado em Cuidados Paliativos da Escola Superior de Saúde Dr. Lopes Dias. O período de Prática Clínica, para o qual foram definidos previamente em Projeto objetivos, atividades e competências, foi realizado num Serviço de Cuidados Paliativos, em contexto de internamento hospitalar e no serviço de atual prática profissional – Unidade de Cuidados Continuados Integrados da Santa Casa da Misericórdia de Castelo Branco. Como tal, foram dispensadas um total de 300 horas, 200 destas destinadas ao Serviço de Cuidados Paliativos e as 100 restantes em projeto de melhoria dos cuidados no serviço de origem. Recorrendo-se a observações direta e participante, validando a prática com a evidência científica atual, é descrito o modelo de organização e funcionamento do Serviço de Cuidados Paliativos referido, referindo-se a tipologia da prestação de cuidados. São refletidas as atividades desenvolvidas e as competências adquiridas nas áreas-chave dos Cuidados Paliativos: comunicação, controlo de sintomas, apoio à família e trabalho em equipa. Cruzando a observação direta e participante com a imersão na literatura mais atual demonstra-se a aquisição de competências na estruturação e implementação de programas em Cuidados Paliativos. O projeto de melhoria dos cuidados implementado no serviço de origem teve como temática Identificação e Gestão dos Últimos Dias e Horas de Vida, baseando-se a sua implementação no estudo do indicador de qualidade proposto na Unidade Curricular Teórica Trabalho de Equipa e Organização de Serviços. A forte possibilidade de melhorar a assistência aos doentes em Últimos Dias e Horas de Vida, e o elevado número de admissões de doentes terminais na Unidade de Cuidados Continuados Integrados, motivou a escolha do tema. Através da ação de formação dirigida à equipa multidisciplinar e da elaboração de um plano de cuidados em Últimos Dias e Horas de Vida foi possível melhorar a qualidade dos cuidados aos doentes assistidos e respetivas famílias, respondendo-se às principais necessidades identificadas no doente em fim de vida pela LACDP (2014): reconhecimento, comunicação, envolvimento, apoio, planeamento e atuação.ABSTRACT: This report aims at the description and reflection of the activities held in the Course of Master of Clinical Practice in Palliative Care of Escola Superior de Saúde Dr Lopes Dias. The period of Clinical Practice, to which were previously set in Project objectives, activities and skills, was carried out in a ward of Palliative care, in hospital context and current ward of professional practice - Unidade de Cuidados Continuados Integrados da Santa Casa da Misericórdia de Castelo Branco. As such, 300 hours were dispensed in total, 200 of these, intended to Palliative Care and the remaining 100 in care improvement project, in the original ward. Making use of direct and participatory observation, validating the practice with the current scientific evidence, it's described the model of organization and functioning of that Palliative Care Services, referring to the type of care. They are reflected the activities and skills acquired in the key areas of palliative care: communication, control of symptoms, family support and teamwork. Crossing the direct observation and participant with the immersion in the most current literature, it is demonstrated the acquisition of skills in the structuring and implementation of programs in palliative care. The care improvement project implemented in the original ward had as theme Identification and Management of the Last Days and hours of life, based on its implementation in the study of the quality indicator proposed in the Course Theoretical Teamwork and Service Organization. The strong possibility of improving care to patients in the Last Days and hours of life and the high number of patient admissions to the Palliative Care Units, has motivated the choice of subject. Through the training action directed at the multidisciplinary team and the development of a care plan in the Last Days and hours of life, it was possible to improve the quality of care for assisted patients and their relatives, responding to the main needs identified in the patient in the end of life by LACDP (2014): recognition, communication, involvement, support, planning and acting

A influência das ilustrações na compreensão textual na Educação Pré-escolar e no Ensino do 1.º Ciclo do Ensino Básico

Mestrado em Educação Pré-Escolar e em Ensino do 1ºCiclo do Ensino BásicoEsta investigação foi executada no âmbito da Prática de Ensino Supervisionada do Mestrado em Educação Pré-Escolar e Ensino do 1.º Ciclo do Ensino Básico (CEB) da Escola Superior de Educação de Santarém. Durante os estágios curriculares foi desenvolvido um estudo com o tema “A influência das ilustrações na compreensão textual na Educação Pré-escolar e no Ensino do 1.º Ciclo do Ensino Básico”, tendo por base a importância das ilustrações na compreensão de textos. A investigação assentou na metodologia investigação-ação com a seguinte questão central: De que forma as ilustrações contribuem para a compreensão textual nos primeiros anos de escolaridade? Após o tratamento e análise dos dados recolhidos, os resultados evidenciaram dois aspetos importantes acerca da pertinência das ilustrações para a compreensão textual: textos com enredo mais temático são compreendidos com maior dificuldade quando não acompanhados das ilustrações; já os textos de natureza mais figurativa são compreendidos pelos sujeitos deste estudo sem a presença das suas respetivas ilustrações.This research was carried out as part of the Supervised Teaching Practice of the Master's Degree in Pre-School Education and Teaching of Primary Education at the School of Education of Santarém. During the curricular internships, a study was carried out on the subject of "The influence of illustrations on text comprehension in Pre-school education and Primary education", based on the importance of illustrations in text comprehension. The research was based on an action research methodology with the following central question: How do illustrations contribute to text comprehension in the early years of schooling? After processing and analyzing the data collected, the results highlighted two important aspects regarding the relevance of illustrations for textual understanding: texts with a more thematic plot are understood with greater difficulty when not accompanied by illustrations; texts of a more figurative nature are understood by the subjects of this study without the presence of the respective illustrations.N/

Relatório de estágio

A proposta de criação de um diploma europeu em psicologia surge como consequência de um grupo de trabalho constituído no âmbito do projecto EuroPsy, financiado pela União Europeia, através do programa Leonardo da Vinci. Este projecto procura harmonizar a formação profissional dos psicólogos, nos diversos países europeus, de forma a cumprir os seguintes objectivos: (1) avaliar os curricula existentes; (2) orientar o desenvolvimento curricular; (3) promover o intercâmbio de estudantes e de profissionais de psicologia; (4) servir de base para um diploma europeu em psicologia; (5) identificar o desenvolvimento das qualificações em países onde a psicologia é uma disciplina emergente (EuroPsy, 2005). Este projecto reflecte o processo de mudança, no âmbito do ensino superior, ao nível da Europa, cujos princípios fundamentais foram enunciados na Declaração de Bolonha. Desta forma, o objectivo deste processo de alteração do processo de formação, visa, fundamentalmente, uniformizar as formações, de forma a facilitar a comparação dos curricula, com o intuito de ajudar na mobilidade e o intercâmbio de estudantes, docentes e investigadores e tornar automático o reconhecimento, nos diversos países europeus, da formação académica de nível superior obtida em qual quer dos países envolvidos neste acordo. Segundo o Diploma do Psicólogo Europeu (EuroPsy), o objectivo principal da prática como profissional de psicologia é desenvolver e aplicar princípios, conhecimentos, modelos e métodos de uma forma ética e científica, tendo em vista a promoção do desenvolvimento, bemestar e eficácia dos indivíduos, grupos, organizações e sociedade. Para tal, o psicólogo deve desenvolver um conjunto de competências, que se dividem em dois grupos principais, o das competências primárias e o das competências secundárias. O primeiro grupo abrange 20 competências que se agrupam em seis categorias e que, de acordo com o Europy, todo e qualquer psicólogo deve ser capaz de demonstrar. Estas estão relacionadas com os papéis profissionais, nomeadamente, (1) especificação de objectivos, (2) avaliação prévia, (3) desenvolvimento, (4) intervenção, (5) avaliação posterior e por fim (6) comunicação. No grupo das competências secundárias, diferenciam-se nove categorias que estão relacionadas com a prática profissional em geral e nas quais o psicólogo deve evidenciar as competências primárias, designadamente: (1) estratégia profissional, (2) desenvolvimento profissional contínuo, (3) relações profissionais, (4) pesquisa e desenvolvimento, (5) marketing e “venda”, (6) gestão de clientes, (7) gestão da prática, (8) garantia de qualidade e, (9) auto-reflexão. A atribuição do Diploma do Psicólogo Europeu depende, assim, da capacidade de treino, desenvolvimento, e de colocar em prática cada uma das competências referidas anteriormente. Neste sentido, para a obtenção do grau de Mestre em Psicologia pela Universidade da Beira Interior, é indispensável que sejam desenvolvidas competências e trabalho em três áreas principais: na avaliação, na intervenção e na investigação psicológicas. O presente relatório reflecte o trabalho desenvolvido ao longo de um ano de estágio, no qual foi possível adquirir competências nas áreas anteriormente mencionadas e encontra-se dividido em quatro capítulos. No capítulo 1 é apresentada uma contextualização da Instituição onde decorreu o estágio, nomeadamente o Departamento de Psiquiatria e Saúde Mental do Centro Hospitalar Cova da Beira. É levada a cabo uma descrição desta instituição, quer em termos de recursos físicos, quer humanos, assim como da forma de organização do estágio ao longo dos meses. O capítulo 2 é dedicado à apresentação das actividades de avaliação e intervenção desenvolvidas no estágio. São assim focados três casos clínicos realizadas conceptualizações e reflexões acerca dos mesmos. Ao longo do capítulo 3 é descrita a actividade de investigação desenvolvida. Nesta procura-se perceber em que medida o relacionamento conjugal e a saúde mental estão relacionados. Conclui-se este trabalho com uma reflexão acerca do ano de estágio. Procura-se, de forma resumida, referir as principais dificuldades enfrentadas, obstáculos superados, e aprendizagens efectuadas ao longo desta etapa de formação

Benefícios económico-sociais de uma nova tecnologia médica em Portugal

Mestrado em Economia e Gestão de Ciência, Tecnologia e InovaçãoObjectivo: Pretende-se com este estudo avaliar o benefício social líquido de três programas de monitorização da terapêutica de controlo para prevenção de fenómenos trombo-embólicos, nomeadamente AVC's - análise em laboratório, na consulta ou em auto-monitorização. Esta avaliação permite decidir sobre qual o melhor programa, do ponto de vista económico-social. Metodologia: Através de dados obtidos em questionários a doentes e junto do Hospital de Cascais, identificaram-se e quantificaram-se os custos e os benefícios em cada sector da sociedade - doente e sua família, hospital e outros sectores. Resultados: O benefício social líquido é maior e positivo no programa em que a monitorização da terapêutica é feita em Auto-Monitorização (1,373 M€). Nos restantes programas, os benefícios sociais líquidos são negativos: -1,714 M€ no programa em que a análise é feita no laboratório e -0,336 M€ no programa em que é feita na consulta. Conclusão: A tecnologia inovadora point-of-care, utilizada na Análise na Consulta e na Auto-Monitorização, permite que estes programas tenham maior benefício social líquido que o programa que utiliza a tecnologia clássica (Análise em Laboratório).Objectives: This study's purpose is to evaluate the net social benefit of three programs of therapy control monitoring the thromboembolic phenomena prevention, namely strokes - laboratory analysis, analysis at the doctor's office or self-monitoring. This evaluation should create some insight on how to decide on the best program in the society's viewpoint.Methods: With the data obtained from questionnaires and at the Cascais' Hospital, the costs and benefits were identified and quantified in each society's sector - patient and family, health care sector and other sectors.Results: The net social benefit is positive and larger in the program in which the therapy control is self-monitored (1,373 M€). In the other programs, the net social benefits are negative: -1,714 M€ in the laboratory analysis program and -0,336 M€ in the analysis at the doctor's office.Conclusion: The new point-of-care technology, used in the analysis at the doctor's office and in self-monitoring programs, allows them to have larger net social benefits than the one using the laboratory analysis

Laparoscopia em ruminantes : utilização de uma técnica mini-invasiva na correcção do deslocamento do abomaso à esquerda

Dissertação de Mestrado Integrado em Medicina VeterináriaO objectivo deste trabalho é descrever as principais aplicações da laparoscopia em ruminantes e o uso desta técnica na correcção do deslocamento abomasal, de forma regular, na clínica de animais de pecuária. A área da endoscopia tem tido uma evolução notável nas últimas décadas, para a qual têm também contribuído os avanços verificados a nível tecnológico. Em laparoscopia de ruminantes são geralmente usados laparoscópios rígidos e as principais vantagens desta cirurgia incluem o facto de ser mini-invasiva, a redução da duração do procedimento, poucas complicações e tempo de recuperação pós-cirúrgico mais curto. As principais desvantagens incluem o preço do equipamento, a curva de aprendizagem e a perda de sensação táctil em comparação com a cirurgia aberta. São indicados neste trabalho os tipos de equipamento comummente usados e sugestões de cuidados pré e pós cirúrgicos. A anatomia abdominal observada através do laparoscópio e possíveis abordagens cirúrgicas são também referidas. No que diz respeito ao deslocamento abomasal, para além de várias técnicas disponíveis para a sua correcção, é descrita a patogenia da doença, os factores de risco, a influência de doenças concomitantes e é apresentado um conjunto de casos observados na Clínica para Ruminantes (medicina interna e cirurgia) em Gießen submetidos a cirurgia laparoscópica segundo o método de Janowitz. A abomasopéxia por meio de colocação de toggle abomasal, seja pelo método de Janowitz, Christiansen ou Newman, Anderson e Silveira, são técnicas que podem ser praticadas com facilidade na clínica de campo.ABSTRACT - Laparoscopy in ruminants: using a mini-invasive procedure for correction of the leftsided displaced abomasum. - The aim of this dissertation is to describe the main applications of laparoscopy in ruminants and the use of this method for the correction of the displaced abomasum, in a regular basis, in farm animals’ practice. The evolution on the endoscopy field during the past decades was remarkable, for what is also important the great advances verified in technology area. Rigid laparoscopes are commonly used in ruminants’ laparoscopy. Some advantages that are related with this kind of surgery are the mini-invasiveness, the reduction of the surgical time, the few complications and a recovery period faster than with conventional surgery. The main drawbacks are the price of the equipment, the learning curve and the lost of the tactile sensation comparing with open surgery. In this paper, there is a review of the equipment commonly used and some suggestions for pre and post-surgical care. The laparoscopic abdominal anatomy and some possible approaches are also referred. About the abomasum displacement, a description of various techniques used on its correction i

Electrochemical treatment of effluent for the removal of contaminants of emergent concern and culturable microorganisms

project CEMOWAS2 (SOE2/P5/F0505) UIDB/04085/2020 CEECIND/04210/2017The present work aims to study the electrochemical (EC) process applied for the removal of contaminants of emergent concern (CECs) from wastewater after secondary treatment and the effect of the process on the total culturable microorganisms. The EC experiments were performed in a cylindrical open reactor with 500 mL of effluent, and a fixed current density of 8 mA/cm² was applied through mixed metal oxide electrodes. The experiments were conducted in different sets. In the first round (Set 1), the effluent sample was spiked with three CECs (200 ppb each): Caffeine (CAF), carbamazepine (CBZ), and oxybenzone (OXY). For the best treatment period, 6 h, electrodegradation rates ranged from 41 ± 7% for CAF to 95 ± 6% for OXY, with an 87% removal of total culturable microorganisms. In the second round (Set 2), aiming to assess EC process efficiency in a more complex CEC mixture, the effluent was spiked with six more CECs (200 ppb each): Diclofenac (DCF), triclosan (TCS), bisphenol A (BPA), 17β-estradiol (E2), 17α-ethinylestradiol (EE2), and ibuprofen (IBU), giving a total of nine CECs. In this case, the EC process allowed decreasing the CEC content by 19-100% (below the limit of detection), depending on the effluent samples, and the culturable microorganisms by 99.98% after a 6 h treatment. By contributing to CEC degradation and microorganism removal, the EC process proved to be a viable remediation and disinfection technology for secondary effluent from wastewater treatment plants.publishersversionpublishe

Mental health and sexual stigma on LGB senior: A systematic scoping review

Fundação para a Ciência e Tecnologia - FCTN/

Batimastat Induces Cytotoxic and Cytostatic Effects in In Vitro Models of Hematological Tumors

The role of metalloproteinases (MMPs) in hematological malignancies, like acute myeloid leukemia (AML), myelodysplastic neoplasms (MDS), and multiple myeloma (MM), is well-documented, and these pathologies remain with poor outcomes despite treatment advancements. In this study, we investigated the effects of batimastat (BB-94), an MMP inhibitor (MMPi), in single-administration and daily administration schemes in AML, MDS, and MM cell lines. We used four hematologic neoplasia cell lines: the HL-60 and NB-4 cells as AML models, the F36-P cells as an MDS model, and the H929 cells as a model of MM. We also tested batimastat toxicity in a normal human lymphocyte cell line (IMC cells). BB-94 decreases cell viability and density in a dose-, time-, administration-scheme-, and cell-line-dependent manner, with the AML cells displaying higher responses. The efficacy in inducing apoptosis and cell cycle arrests is dependent on the cell line (higher effects in AML cells), especially with lower daily doses, which may mitigate treatment toxicity. Furthermore, BB-94 activated apoptosis via caspases and ERK1/2 pathways. These findings highlight batimastat's therapeutic potential in hematological malignancies, with daily dosing emerging as a strategy to minimize adverse effects.publishersversionpublishe