Molecular biology techniques – A brief correlation between applied techniques in translational science and plant agriculture

This report aims to describe, how through my academic and professional life, I have developed a set of skills that allow me to apply for a “Hortofruticultura” Master’s degree. After finishing my 5 years degree in 2005, I worked for Jardim Vista SA as an Agronomist, afterwards I went to the UK where I worked as a Research Technician/Research Assistant for 9 years. In September 2016 I started working as a lab technician in Universidade do Algarve for 6 months. More recently, in April 2017, I joined the Syngenta team in Moncarapacho as a Senior Grower and Quality Management Designate. In the UK, I took part in several scientific projects, mainly related to molecular biology. Considering that I have been involved in completely different scientific subjects in these 9 years, I decided to talk about some of the molecular biology techniques that I have learnt throughout these years and that are also used in Molecular Farming. With an increase in the world population, the impact of climate change and its effect on plant pathogens and plant diseases there is a need for healthy plants with a high production and better yields to fulfil those needs. Development of modified plants has progress through plant breeding and biotechnology that plays a major role in understanding how to modify plant genome or plant physiology to respond to those needs. By sequencing and studying the plants genome it is possible to understand and manipulate the characteristics of plants. Molecular farming, produces valuable proteins, peptides and small molecules through the use of both these techniques, plant molecular breeding and biotechnology. Some routine molecular biology techniques used in plant biotechnology are common to the projects where I participated and are described in this report, namely DNA extraction, PCR, colony PCR, agarose gel electrophoresis, bacterial genetic transformation, protein expression, SDS-PAGE and Western Blot. These techniques are the base for the study of better ways to improve plants, preparing agriculture for the actual and future challenges. Keywords: Molecular biology, biotechnology, agriculture, plant breeding, molecular farming.O objetivo deste trabalho é descrever a minha formação e aptidões adquiridas ao longo do meu percurso profissional, e como estas contribuíram para o desenvolvimento das minhas competências, as quais me permitem requerer o grau de Mestre. Após concluir o meu curso de 5 anos letivos em 2005 fui trabalhar como Engenheira Agrónoma para a empresa Jardim Vista SA. Posteriormente fui para o Reino Unido onde trabalhei como Técnica de Laboratório/Assistente de Laboratório durante 9 anos. Em Setembro de 2016 comecei a trabalhar como técnica de laboratório na Universidade do Algarve. Mais recentemente, em Abril de 2017 integrei a equipa da Syngenta em Moncarapacho como Senior Grower e Quality Management Designate. No Reino Unido, fui colaboradora de vários projetos científicos, os quais estavam maioritariamente relacionados com a área da biologia molecular. Considerando que durante estes 9 anos fiz parte de projetos que abordavam temas completamente diferentes, decidi abordar algumas das técnicas de biologia molecular que aprendi ao longo destes anos e que também são usadas na área da Agricultura Molecular e Melhoramento de Plantas. Com o nível de população a aumentar e o impacto das alterações climáticas, a necessidade de produzir plantas sem elementos patogénicos e destas serem mais produtivas e atingir elevadas produções, e eventualmente apresentarem resistência a herbicidas, assim como a produção de proteínas de interesse específico (Agricultura Molecular) também aumentou. O melhoramento de plantas em conjunto com a Biotecnologia têm um papel extremamente importante na compreensão e na descodificação da informação do DNA associado a estas necessidades, pois através da manipulação genética é possível alterar o genoma das plantas de modo a satisfazer as exigências atuais. Com o estudo do genoma das plantas é possível perceber e manipular as características que pretendemos alterar e melhorar. “Molecular farming” produz proteínas, péptidos e pequenas moléculas bastante valiosas, resultado dos estudos de melhoramento de plantas acoplado aos progressos na área da biotecnologia. Algumas das técnicas utilizadas em biotecnologia descritas nesta tese são a extração de DNA, o PCR, o colony PCR, a eletroforese, a transformação genética, a expressão proteíca, SDS-PAGE e Western Blot. Estas técnicas permitem-nos estudar métodos mais eficazes de melhorar as plantas para que a agricultura esteja melhor preparada para os desafios atuais e futuros. Palavras-chave: Biologia molecular, biotecnologia, agricultura, melhoramento de plantas, agricultura molecular

Memórias e histórias de mulheres-professoras da educação infantil da rede municipal de educação de Belo horizonte-MG / Memories and stories of women teachers of early childhood education of the municipal network of education of Belo Horizon-MG

Este artigo apresenta resultados parciais da pesquisa de dissertação apresentada ao Programa de Pós-graduação em Gestão Social, Educação e Desenvolvimento Local do Centro Universitário UNA. A dissertação foi concluída em 2020 e buscou compreender os modos como três professoras da educação infantil da Rede Municipal de Educação de Belo Horizonte-MG construíram sua identidade profissional e permaneceram na docência, por meio dos procedimentos da história oral de vida, metodologia qualitativa baseada na coleta de depoimentos orais que ocorreram em 2019. Com os resultados obtidos, foi possível concluir que a constituição identitária e permanência na docência das mulheres-professoras tem estreita ligação com as socializações primárias, secundárias e com a construção dos papéis sociais, podendo ser articuladas a cinco categorias: a) valores familiares; b) o brincar; c) o lugar do trauma e a resistência em repetir essas aprendizagens; d) os processos de escolarização; e) consciência de si e desejos na atuação docente. Tais resultados poderão contribuir para a formação continuada de professores e autoproduções em torno da gestão social e desenvolvimento local

Callose synthase and xyloglucan endotransglucosylase gene expression over time in Citrus × clementina and Citrus × sinensis infected with citrus tristeza virus

Citrus tristeza virus (CTV) is a virus that already caused great losses in citrus producing regions. The cell wall of plant cells plays an important role in the defence response to viruses. Following several studies indicating that cell wall enzyme transcripts of callose synthase 7 (calS7) and xyloglucan endotransglucosylase 9 (xth9) are modified during a viral infection, transcript expression of calS7 isoform x5 (calS7x5) and xth9 was evaluated over time in Citrus x sinensis 'Valencia Late' (VL) and Citrus x clementina 'Fina' (CL), infected with the severe CTV isolate T318A, by quantitative (q) PCR. qPCR analysis of healthy and CTV infected citrus was performed at 15 days, 10 months and at 31 months post-inoculation (dpi/mpi), respectively. The CTV titer, evaluated at the three time-points by qPCR, increased over time in bark tissues, with VL plants exhibiting a titer about 5 times higher than CL 31 mpi. CTV infection did not cause significant changes in calS7x5 gene expression over time in both citrus cultivars. However, CTV infection was associated with significant up-regulation of xth9 in VL compared to controls 31 mpi. This study highlights that CTV infection can affect the expression of specific cell wall-associated genes over time and that this influence was distinct for VL and CL. This study provides further insight into the CTV-citrus host interaction, with the long-term response of VL to a severe CTV isolate involving a high expression of the xth9 gene.DL57/2016/CP1361/project CT0015; ALG01–0145-FEDER-30957;info:eu-repo/semantics/publishedVersio

A Valepotriate Fraction of Valeriana glechomifolia Shows Sedative and Anxiolytic Properties and Impairs Recognition But Not Aversive Memory in Mice

Plants of the genus Valeriana (Valerianaceae) are used in traditional medicine as a mild sedative, antispasmodic and tranquilizer in many countries. This study was undertaken to explore the neurobehavioral effects of systemic administration of a valepotriate extract fraction of known quantitative composition of Valeriana glechomifolia (endemic of southern Brazil) in mice. Adult animals were treated with a single intraperitoneal injection of valepotriate fraction (VF) in the concentrations of 1, 3 or 10 mg kg−1, or with vehicle in the pre-training period before each behavioral test. During the exploration of an open field, mice treated with 10 mg kg−1 of VF showed reduced locomotion and exploratory behavior. Although overall habituation sessions for locomotion and exploratory behavior among vehicle control and doses of VF were not affected, comparison between open-field and habituation sessions within each treatment showed that VF administration at 1 and 10 mg kg−1 impaired habituation. In the elevated plus-maze test, mice treated with VF (10 mg kg−1) showed a significant increase in the percentage of time spent in the open arms without significant effects in the number of total arm entries. VF at 3 mg kg−1 produced an impairment of novel-object recognition memory. In contrast, VF did not affect fear-related memory assessed in an inhibitory avoidance task. The results indicate that VF can have sedative effects and affect behavioral parameters related to recognition memory

Código alfabético e site educacional / Alphabetic code and educational site

As crianças que se encontram em processo de apropriação do sistema de escrita precisam estabelecer uma correspondência entre as letras (os signos) e o significado (o que a escrita representa). Esta pesquisa tem por objetivo verificar uma proposta metodológica com uso de um Site Educacional que foi desenvolvido contendo diversos materiais de apoio didático, que serve para ampliar as possibilidades em desenvolver a capacidade cognitiva e motora dos alunos. Os instrumentos e estratégias necessárias para desenvolver a escrita e/ou alfabetização estão presentes nos diversos Objetos Educacionais Digitais (OED) que armazenados no site podem contribuir com o professor no processo de construção do código alfabético. Esta proposta foi testada no período de três anos consecutivos em três turmas de Educação Infantil na faixa etária de 5 anos. Utilizou - se uma pesquisa descritiva e documental com abordagem na realidade e observação no laboratório de informática e sala de aula. Foi percebido que a criança de hoje são nativas digitais e de uma geração Touch Screen com facilidade no manuseio de tablet, smartphone e computador, além de demonstrarem grande interesse por projeções, devido as articulações sonoras, cores e movimentos que atraem e encantam este público infantil. Dentro da proposta foi trabalhado um paralelo entre mídias digitais e analógicas. Esta pesquisa contribui para um ensino inovador na alfabetização com uso de tecnologia digital na sala de aula apoiado com estratégias de representação da linguagem humana. 

From Acne to Zoster - Opportunities of Moulage Techniques in Nursing Education

No matter how good a patient simulator’s acting skills, no one can present a rash on demand. Yet illnesses and conditions involving the skin are manifold, and integumentary findings often prompt further monitoring and investigation, apart from impacting upon the patient’s well-being simply for aesthetic reasons. In fact, beyond obvious points of contact e.g. during wound management, nursing staff are also predestined to discover skin conditions, due to the length of time spent with patients but also because of the closer proximity during acts of personal care. Hence developing practical skills around the detection and care of skin conditions is a relevant objective in medical and nursing education programs alike and contributes to patient safety.In this workshop, we want to introduce modern moulage techniques from makeup to three-dimensional transfer tattoos allowing for the presentation of skin conditions in simulation-based education, with visual and haptic fidelity, acting as visual cues in teaching or assessment in medical or nursing education. After a discussion of somewhat obvious scenarios in clinical skills teaching and assessment, the workshop will engage in a deliberation of more uncommon applications and offer participants a chance to experience moulage themselves

Avaliação dos neurônios NADPH-diaforase reativos do jejuno de ratos diabéticos suplementados com ácido ascórbico

A relação entre hiperglicemia e neuropatia diabética foi demonstrada em várias pesquisas. Entre as teorias propostas para sua etiologia destaca-se o estresse oxidativo. O papel do óxido nítrico como elo entre os fatores neuropatogênicos metabólico e vascular que ativam a neuropatia diabética tem sido ressaltado. Este estudo objetivou avaliar a quantificação e a morfometria da área do perfil do corpo celular (CBPA) de neurônios mioentéricos NADPH-diaforase reativos (NADPH-dp) do jejuno de ratos diabéticos e suplementados com Ácido Ascórbico (AA), uma vez que alterações nos neurônios mioentéricos parecem estar relacionadas aos distúrbios gastrointestinais observados no diabetes mellitus (DM). Vinte ratos machos da linhagem Wistar (Rattus norvergicus) foram distribuídos em 4 grupos (n=5): controle (C), controle suplementado (CS), diabético (D) e diabético suplementado (DS). O DM foi induzido através de injeção de estreptozootocina (50mg/kg de peso corporal). Uma semana depois da indução e confirmação do DM (glicemia), animais dos grupos CS e DS receberam, via gavagem, 50mg de AA três vezes por semana. Após 90 dias de período experimental, os animais foram anestesiados com dose letal de thiopental intravenosa (40mg/kg) e o jejuno foi retirado e processado para a técnica histoquímica da NADPH-diaforase. Preparados de membrana foram obtidos para análises quantitativa e morfométrica dos neurônios mioentéricos. A quantidade de neurônios do jejuno do Grupo D (96'+ OU -'7,5) não diferiu (P>0,05) dos Grupos DS (116'+ OU -'8,08), C (92'+ OU -'9,7) e CS (81'+ OU -'5,4), mas no Grupo DS o número de neurônios foi superior (P<0,05) aos Grupos C e CS. A CBPA de neurônios do Grupo D (189,50'+ OU -'2,68'mü''m POT. 2') e DS (195,92'+ OU -'3,75'mü''m POT. 2') foi menor (P<0,05) do que a dos Grupos C (225,13'+4,37'mü''m POT. 2') e CS (210,23'+ OU -'3,15'mü''m POT. 2'). O DM induzido porestreptozootocina não alterou a área do ) jejuno-íleo, a organização espacial do plexo mioentérico e a densidade de neurônios de NADPH-dp do jejuno. A suplementação de 50mg de AA, três vezes por semana, durante 90 dias, não diminuiu a hiperglicemia, porém teve efeito neuroprotetor nos neurônios mioentéricos, minimizando o aumento na CBPA dos neurônios NADPH-dp e aumentando a quantidade de neurônios reativos a NADPD-diaforaseThe relation between hyperglycemia and diabetic neuropathy has already been demonstrated in some studies. Among the theories proposed for its etiology the oxidative stress stands out. The performance of nitric oxide as a link between the metabolic and vascular neuropathogenic factors that triggers the diabetic neuropathy has already been put forward. This study aimed to assess the quantification and measurements of the cell body profile area (CBPA) of NADPH-diaphorase reactive (NADPH-dp) myenteric neurons of the jejunum of diabetic rats (induced by streptozotocin) supplemented with Ascorbic Acid (AA). These changes in the myenteric neurons seem to be related to the gastrointestinal disturbances observed in diabetes mellitus (DM). Twenty male Wistar rats (Rattus norvegicus) were distributed in 4 groups (n=5): controls (C), control supplemented (CS), diabetic (D), and diabetic suplemented (DS). DM was induced by estreptozotocin (50mg/kg body wt). One week after the induction and confirmation of the DM (glycemia exam), animals of the groups CS and DS received 50mg of AA three times a week by gavage. After 90 days of experiment, the animals were anesthetized with lethal thiopental dose (40mg/kg) and the collected jejunum processed for the histochemistry NADPH-diaphorase technique. Whole-mount preparations were obtained for quantitative and morphometric analysis of the myenteric neurons. A quantity of jejunum neurons in the Group D (96'+ OU -'7.5) was not different (P>0.05) from Group DS (116'+ OU -'8.08), C (92'+ OU -'9.7), and CS (81'+ OU -'5.4), but in Group DS the quantity was higher (P<0.05) than in Group C and CS. The CBPA of neurons from Group D (189.50'+ OU -'2.68'mü''m POT. 2') and DS (195.92'+ OU -'3.75'mü''m POT. 2') were lower (P<0.05) than from Group C (225.13'+ OU -'4.37'mü''m POT. 2') and CS (210.23'+ OU -'3.15'mü''m POT. 2'). The streptozotocin-induced DM did not change the jejunum-ileum area, the jejunum myenteric plexus space organization and the density of NADPH-dp neurons. The 50g AA-supplementation, three times a week, during 90 days, did not decrease hyperglycemia; however, it had a neuroprotective effect on the myenteric neurons, minimizing the increase on the CBPA of NADPH-dp neurons and increasing the amount of NADPD-dp neuron

Laboratory services contribution to supporting public health and health services in Portuguese-speaking countries

Objetivo: promover o debate sobre a importância do laboratório no apoio à saúde pública e aos serviços de saúde nos países de língua portuguesa, numa perspetiva global e de uma só saúde. Métodos: revisão de literatura, análise dos documentos preparatórios das comunicações do 5º Congresso Nacional de Medicina Tropical, apresentações realizadas pelos oradores de Cabo Verde, Angola e Portugal e o debate que se seguiu. Resultados: identificaram-se os desafios que deverão ser ultrapassados de forma a criar uma rede de laboratórios de diagnóstico que possa estimular o acesso universal das populações aos cuidados de saúde, tendo-se proposto medidas e estratégias com base na experiência dos sistemas de saúde dos diferentes países de língua portuguesa. Reviu-se o contributo dos Laboratórios do IHMT/NOVA para esta estratégia. Conclusão: não há acesso universal a cuidados de saúde de qualidade sem serviços de diagnóstico laboratorial de qualidade. Assim, deve-se promover uma correta, eficaz e sustentável inter-relação entre laboratórios de referência nacionais, hospitalares e privados e ainda laboratórios de investigação, todos cooperando em sintonia com os serviços de saúde de modo a garantir os melhores cuidados de saúde. Objective: To promote the debate on the importance of the laboratory services in supporting public health and health services in Portuguese-speaking countries, from a global and One Health perspective. Methods: literature review, analysis of the preparatory papers for the 5th Tropical Medicine National Congress, presentations by speakers from Cape Verde, Angola and Portugal and the ensuing debate. Results: we identified the challenges that must be overcome in order to create a network of diagnostic laboratories that can stimulate universal access to health care for the populations. Measures and strategies based on the experience of health systems in different Portuguese-speaking countries are proposed. The contribution of the IHMT/NOVA Laboratories to this strategy was reviewed. Conclusion: There is no universal access to quality health care with-out quality laboratory diagnostic services and without promoting a correct, effective and sustainable interrelationship between national reference laboratories, hospital and private, and research laboratories, all cooperating in line with health services to ensure the best quality health care.publishersversionpublishe

Recuperação e preservação de recursos hídricos urbanos: parceria entre Universidade e Prefeitura para criação e manutenção de áreas de lazer nas lagoas de Feira de Santana/BA / Recovery and preservation of urban water resources: partnership between University and Mayor for the creation and maintenance of recreation areas in the lagoons of Feira de Santana/BA

Feira de Santana é a segunda maior cidade do estado da Bahia - Brasil, com cerca de 600.000 habitantes (IBGE, 2018), sendo a mais populosa do interior baiano. Destaca-se por estar localizada no maior entroncamento rodoviário do Norte/Nordeste brasileiro, contando com três rodovias federais e quatro estaduais. Sua criação está intrinsecamente ligada ao seu importante manancial hídrico, que é composto por importantes bacias como as dos Rios Pojuca e Subaé e a Sub-bacia do Rio Jacuípe, apresentando um grande número de nascentes e lagoas inseridos na área urbana. Além disso, geograficamente está situada entre o litoral úmido do Nordeste brasileiro e a sua região semiárida, localizada no interior.O crescimento da cidade tem ocorrido de forma intensa nas últimas décadas e isso tem afetado drasticamente seus recursos hídricos, pois a apropriação territorial está associada à ocupação das margens dos riachos e das lagoas e sua subsequente degradação, principalmente pela população de baixa renda.Para tentar conter este processo, a Prefeitura Municipal de Feira de Santana (PMFS) está criando parques municipais no entorno das lagoas, visando demarcar as respectivas Áreas de Proteção Permanentes (APP), já que se tem observado um sistemático desrespeito às leis ambientais existentes.Para acelerar esta empreitada, a PMFS buscou consolidar uma parceria com a Universidade Estadual de Feira de Santana (UEFS), buscando auxílio para consolidar as delimitações das APP através de Levantamentos Topográficos Planialtimétricos, que geraram Modelos Digitais dos Terrenos (MDT). Estes levantamentos foram efetuados com equipamentos GNSS (Global Navigation Satellite Systems) e topográficos (estações totais), enquanto os levantamentos altimétricos foram realizados com níveis eletrônicos.Para o processamento dos dados coletados e o ajustamento dos mesmos foi utilizado o software comercial SEEBER (1993) e para a obtenção da altitude final (denominada de altitude ortométrica - H) foi empregado o MAPGEO 2015, software do IBGE para a correção da ondulação geoidal (N) e transformação da altitude elipsoidal (h) em altitude ortométrica (H).Durante o trabalho de campo foram aplicados, concomitantemente, Protocolos de Avaliação Rápida (PAR), que traçaram perfis da situação de cada uma das lagoas inseridas no projeto (Pindoba, Taboa, Chico Maia e Salgada). Esses protocolos serviram de subsídio para as análises locais e comparações gerais entre elas, estabelecendo-se graus de prioridades de ações.Dentro desta parceria, a Universidade contribuiu com uma equipe técnica que delimitou e analisou o grau do impacto ambiental sofrido por cada uma das lagoas, enquanto a Prefeitura atuou/atua procurando utilizar o estudo para efetivar a criação de áreas de lazer no entorno das lagoas.Assim, tem-se um trabalho de delimitação e caracterização dos mananciais que estão sendo requalificados e que passaram ou passarão a servir de áreas de lazer, numa cidade que até a década passada era desprovida de parques e praças. Além disso, a ação visa contribuir ainda, para a contenção da ocupação de áreas ambientalmente frágeis e para a regeneração das mesmas, através de serviços de saneamento no seu entorno, tornando-as mais atrativas e valorizadas pela população

SISTEMA DE APOIO À GESTÃO DE ÁREAS VERDES URBANAS

Considerando a importância das áreas verdes urbanas, o objetivo desse estudo foi construir um Sistema de Inferência Fuzzy (SIF) para avaliar sua condição e recomendar ações de melhoria, aplicado como estudo de caso em Sorocaba/SP. A modelagem do sistema foi baseada na dinâmica populacional e índices de apoio relacionados à área verde por habitante (IAV) e seu percentual de ocupação urbana (PAV), integrados para geração do Índice de Condição da Área Verde Urbana (ICV). Como resultado, constatou-se que Sorocaba/SP possui IAV elevado (104,6 m²/hab.), mas que ocupa apenas 15,6% de sua extensão urbana, conferindo uma condição regular ao município (ICV: 6,4). Entretanto, considerando a distribuição espacial, foi avaliado um déficit expressivo de área verde em quase todas as zonas urbanas, sobretudo no centro, considerado em péssima condição (ICV: 2,7). Em ótima condição, a zona sul foi a melhor avaliada (ICV: 8,9), seguida da zona leste considerada boa (ICV: 7,0). As zonas norte e oeste tiveram IAV superior a 85 m²/hab., mas devido ao baixo percentual de área ocupada (<15%), também apresentaram condição regular. A partir dessa avaliação, além de ações recomendadas pelo SIF, ainda foram projetados incrementos progressivos, contribuindo com diretrizes para gestão