Synthesis of Oligosaccharides Derived from Lactulose (OsLu) Using Soluble and Immobilized Aspergillus oryzae β-Galactosidase

β-Galactosidase from Aspergillus oryzae offers a high yield for the synthesis of oligosaccharides derived from lactulose (OsLu) by transgalactosylation. Oligosaccharides with degree of polymerization (DP) ≥ 3 have shown to possess higher in vitro bifidogenic effect than di- and tetrasaccharides. Thus, in this work, an optimization of reaction conditions affecting the specific selectivity of A. oryzae β-galactosidase for synthesis of OsLu has been carried out to enhance OsLu with DP ≥ 3 production. Assays with β-galactosidase immobilized onto a glutaraldehyde–agarose support were also carried out with the aim of making the process cost-effective and industrially viable. Optimal conditions with both soluble and immobilized enzyme for the synthesis of OsLu with DP ≥ 3 were 50 °C, pH 6.5, 450 g/L of lactulose, and 8 U/mL of enzyme, reaching yields of ca. 50% (w/v) of total OsLu and ca. 20% (w/v) of OsLu with DP 3, being 6′-galactosyl-lactulose the major one, after a short reaction time. Selective formation of disaccharides, however, was favored at 60 °C, pH 4.5, 450 g/L of lactulose and 8 U/mL of enzyme. Immobilization increased the enzymatic stability to temperature changes and allowed to reuse the enzyme. We can conclude that the use, under determined optimal conditions, of the A. oryzae β-galactosidase immobilized on a support of glutaraldehyde–agarose constitutes an efficient and cost-effective alternative to the use of soluble β-galactosidases for the synthesis of prebiotic OsLu mixturesThis work has been supported by projects AGL2014-53445-R from Ministerio de Economía y Competitividad; ALIBIRD-CM S-2013/ABI-2728 from Comunidad Autónoma de Madrid and COOPB20099 from CSI

Topical application of probiotics in skin: adhesion, antimicrobial and antibiofilm in vitro assays

Aims: When skin dysbiosis occurs as a result of skin disorders, probiotics can act as modulators, restoring microbial balance. Several properties of selected probiotics were evaluated so that their topical application could be considered. Methods and Results: Adhesion, antimicrobial, quorum sensing and antibiofilm assays were carried out with several probiotic strains and tested against selected skin pathogens. All tested strains displayed significant adhesion to keratin. All lactobacilli with the exception of Lactobacillus delbrueckii, showed antimicrobial activity against skin pathogens, mainly due to organic acid production. Most of them also prevented biofilm formation, but only Propioniferax innocua was able to break down mature biofilms. Conclusions: This study demonstrates that although all tested probiotics adhered to human keratin, they showed limited ability to prevent adhesion of some potential skin pathogens. Most of the tested probiotics successfully prevented biofilm formation, suggesting that they may be successfully used in the future as a complement to conventional therapies in the treatment of a range of skin disorders. Significance and Impact of study: The topically used probiotics may be a natural, targeted treatment approach to several skin disorders and a complement to conventional therapies which present many undesirable side effects.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

La actividad de estudio en educación primaria: Valor subjetivo, motivos y autopercepción

En este trabajo se indaga acerca de cómo los escolares de Educación Primaria valoran la actividad del estudio, de cuáles son sus principales motivaciones para estudiar, así como acerca de su autopercepción como estudiantes. Participaron 180 alumnos de 2º, 4º y 6º curso de Educación Primaria y para la recogida de datos se empleó un cuestionario con preguntas abiertas y cerradas. Los principales hallazgos indican que los estudiantes de primaria conceden un alto valor al estudio, tanto porque les permite aprender o conseguir mejores resultados académicos, como por su potencial utilidad para la vida futura. Además, la motivación para estudiar es en general elevada e independiente de la percepción que sus profesores-tutores tienen acerca de su motivación académica global y de su rendimiento académicoIn this paper, we investigate how Primary School students value the study activity, their main motives for study and their self-perception as students. The sample was composed by 180 Primary School students, from second, fourth and sixth grades. Data was obtained by a questionnaire of open and close questions. The main results show that Primary School students give a high value to study, both because it permits them to learn or obtain better academic results, and because its potential utility for the life in the future. In addition, the motivation to study is, in general, high and independent from the perception that their teachers-tutors have about their overall academic motivation and their academic achievement

Evaluación de métodos de laboratorio para la predicción de la digestibilidad in vivo de la materia orgánica de ensilajes de hierba y planta entera de maíz

Se estudia en este trabajo la capacidad predictiva de la digestibilidad in vivo de la materia orgánica (DMO) de forrajes por los siguientes métodos: a) regresiones basadas en parámetros químicos de fácil determinación en laboratorio, b) digestibilidad in vitro con líquido ruminal según el método Tilley-Terry, c) técnicas de solubilidad enzimática (fibra neutro-detergente celulasa y pepsina-celulasa), d) producción de gas in vitro y d) técnica de reflectancia en el infrarrojo cercano. En la primera parte (A) del artículo se revisa información bibliográfica acerca de la estimación de la digestibilidad in vivo de forrajes por métodos de laboratorio. En la segunda parte (B) se describe el proceso de desarrollo de métodos de laboratorio para la estimación del valor energético de ensilajes de hierba y maíz, realizados en el Centro de Investigacións Agrarias de Mabegondo (CIAM) de A Coruña. Para ello se utilizaron dos colecciones de 197 y 91 muestras de ensilajes de hierba y de planta entera de maíz, respectivamente, que fueron evaluadas in vivo, con ovinos alojados en jaulas metabólicas, en el CIAM, a partir de sucesivos proyectos de investigación. Salvo las determinaciones de producción de gas, realizadas por investigadores del País Vasco en el marco del convenio de colaboración CIAMNEIKER sobre las colecciones gallegas, el resto de técnicas se realizaron y pusieron a punto, en su caso, en el CIAM. Las colecciones se componen de ensilajes procedentes, en su mayor parte, de explotaciones ganaderas y pretenden reflejar, en la mayor medida posible, la variabilidad existente en la práctica en cuanto al tipo de especies pratenses o genotipos de maíz utilizados, así como la tecnología de manejo del ensilado en las explotaciones a lo largo de sucesivas campañas.Los valores medios de DMO (%) fueron 67,8±6,7 (rango 48,5 a 81,0) y 68,6±3,2 (rango 59,1 a 76,8) para los ensilajes de hierba y maíz, respectivamente. Para los ensilajes de hierba, el error mínimo de predicción (medido en términos de la desviación estándar residual de validación cruzada, RSDCV) de los modelos de una sola variable independiente que incluían digestibilidad in vitro con líquido ruminal (DoTT) y fibra neutro-detergente celulasa (DoNDC) fue de ±3,5 y ±3,8 unidades, respectivamente, para el conjunto de muestras de la colección. Para un grupo de 64 muestras de ensilajes de hierba donde se determinó también la solubilidad enzimática por el método pepsina-celulasa (DoPC), el valor de RSDCV fue de ±3,2, ±3,7 y ±3,5, respectivamente, para DoTT, DoNDC y DoPC. Mientras que los valores medios de DoNDC y DoPC fueron 6 y 4 unidades inferiores al valor medio de DMO, éste fue muy similar al de DoTT. El mejor modelo basado en parámetros químicos, que incluía fibra neutro detergente (FND), proteína bruta (PB) y lignina ácido detergente (LAD) como predictores obtuvo un RSDCV de ±4,3 unidades. La utilización de la técnica de producción de gas in vitro, evaluada en un grupo de 72 muestras, mostró una precisión comparable a la obtenida con la técnica de digestibilidad in vitro con inoculo ruminal. El error de predicción obtenido para la técnica NIRS en validación cruzada para el conjunto de la colección se redujo a ±2,9.Para los ensilajes de maíz, el error mínimo de predicción de DMO para los modelos de una sola variable con DoTT, DoPC y DoNDC fue de ±2,3, ±2,7 y ±2,8 unidades, y de ±2,4 para el mejor modelo multivariable que incluía LAD, PB, y fibra bruta (FB) como predictores. En contraste con lo observado para los ensilajes de hierba, el valor medio de DoTT de los ensilajes de maíz fue superior al de DMO en aproximadamente 6 unidades, mientras que los de DoNDC y DoPC inferiores en 2,7 y 3,4 unidades, respectivamente, siguiendo la misma tendencia observada en los ensilajes de hierba. La desaparición de materia seca de las bolsas de nylon incubadas in situ durante 72 h mostró una precisión comparable a la obtenida con la técnica de digestibilidad in vitro con líquido ruminal para la estimación de DMO de estos ensilajes. Los errores de predicción en validación cruzada para la técnica de producción de gas in vitro medida en 64 muestras de la colección fueron comparables a los obtenidos para DoTT y, para la técnica NIRS, inferiores a los obtenidos por cualquier otro método (RSDCV ±2,0)