Producción de oxigenasas de hidrocarburos por Aspergillus niger por fermentación en estado sólido

Recently, the solid state fermentation (SSF) has been regarded as a big potential process for the development of bioprocesses and products. Among their applications one can find enzyme production that is mainly extracellular. The oxygenases are intracellular enzymes that catalyze reactions in which oxygen atoms from molecular oxygen are directly incorporated into the substrate to form a new hydroxyl or carbonyl group. There are two kinds of oxygenases, the monooxygenases/hydroxylases that catalyze the insertion of only one of the oxygen atoms and the dioxygenases/hydroxylases that catalyze the insertion of both oxygen atoms. The oxygenases have a crucial role in the metabolism and the biosynthesis. They have been used to eliminate pollutants from air, soil and water. Furthermore, in the last ten years, they have become important for the pharmaceuticals design and the production of specialty chemicals. In this thesis it is presented the study of hexadecane consumption by Aspergillus niger, ATCC 9642, with and without glucose by submerged fermentation (SmF) and by solid state fermentation (SSF). This study was undertaken with the aim of selecting a suitable culture medium to produce biomass with oxygenase activity. Oxygenase activity was evaluated in resting cells and in enzyme extracts of biomass obtained by both fermentation systems. The oxygenase was also characterized in terms of activity, stability and specificity. The carbon sources used in both SmF and SSF were different mixtures of glucose and hexadecane. In most of the experiments the ratio C/N ratio was (12.12), the exception was a SSF test were a C/N (16.24) was used. The results include the kinetic characterization of both fermentation systems. They show that independently of the system, the use of glucose as cosubstrate increases the specific growth rate ( ), the specific substrate consumption rate (qS) and the biomass yield with respect of substrate (YSX), compared with the values obtained with hexadecane as sole carbon source. The increases in these parameters are always larger for FEL. However, not all cases had been consumed hexadecane in FEL, while FES always presented hexadecane consumption and this was significantly higher than for the case of FEL. In both fermentation systems, the mineralization of the substrate consumed is greater when using a mixture of substrates, that when using glucose or hexadecane as sole sources of carbon. The respiratory coefficients in both systems were higher than 1.0 when only glucose was consumed. Their values were very close to the theoretical value when hexadecane was consumed in the presence of glucose. The study of water soluble metabolites during the liquid and solid cultures of A. niger with hexadecane and glucose (50 % C-glu, 50 % C-hxd) showed a rapid consumption of glucose with accumulation of citric acid and fructose in SSF. However, no accumulation of any metabolite was detected in FEL. Cell-free extracts obtained by SSF and SmF were concentrated by dehydration or stored at -20 oC to study the oxygenase stability. It was found that the enzymatic extracts lost about 75% of the initial activity in only 7 days at -20 oC and a similar effect was shown by dehydration. The loss of activity was independent of the fermentation system. The measurements of oxygenase activity at different temperatures yield two peaks of activity at 26 and 35 oC. The activities reported in this test were significantly different with an = 0.05 using a t-student test. The oxygenase produced under SSF have no specificity difference for aliphatic hydrocarbons (linear and non linear). But, it increases for aromatic substrates as the complexity of the ring increases. Oxygenase produced under SmF has no specific pattern of specificity. It has activity with aliphatic as well as with aromatics. Albeit, the activities were significantly different and lower, at least 7-folds, compared to SSF. Key words: oxygenases, solid state fermentation, aromatic hydrocarbons, hexadecane, polyurethane matrix support, Aspergillus niger.En los últimos años la fermentación en estado sólido (FES) se ha considerado como un proceso con un gran potencial en el desarrollo de bioprocesos y de productos. Entre sus aplicaciones está la obtención de enzimas. Las enzimas que se obtienen mediante este proceso son principalmente extracelulares. Las oxigenasas son enzimas intracelulares que catalizan reacciones en las cuales los átomos de oxígeno, provenientes de oxígeno molecular, son directamente incorporados en el substrato, formando un nuevo grupo hidroxilo o carbonilo. Existen dos tipos de oxigenasas, las monooxigenasas/hidroxilasas que catalizan la inserción de un solo átomo de oxígeno y las dioxigenasas/hydroxilasas que catalizan la inserción de ambos átomos de oxígeno. Las oxigenasas tienen un papel primordial en el metabolismo y en la biosíntesis. Han sido utilizadas en la remoción de contaminantes de aire, suelo y agua. En los últimos diez años han adquirido una gran importancia en el diseño de medicamentos y en la producción de compuestos de alto valor agregado. En esta tesis se estudió el consumo de hexadecano por Aspergillus niger ATCC 9642 en FEL y en FES en presencia y ausencia de glucosa, con el propósito de seleccionar un medio de cultivo adecuado para producir biomasa con actividad oxigenasa. La actividad oxigenasa fue evaluada en células en reposo y en extractos enzimáticos de la biomasa obtenida por ambos sistemas de fermentación. Las fuentes de carbono usadas en ambos sistemas de fermentación fueron mezclas de glucosa y hexadecano, en diferentes proporciones, pero con la misma relación C/N (12.12). Excepto para un caso de fermentación sumergida en donde se aumentó la relación C/N (16.24). Los resultados incluyen la caracterización cinética de ambos sistemas de fermentación. Entre éstos podemos mencionar que, en ambos sistemas con el uso de glucosa como cosubstrato, se incrementan las tasas específicas de crecimiento ( ), las tasas específicas de consumo de substrato (qS) y los rendimiento de biomasa con respecto al substrato (YSX), comparados con los valores obtenidos cuando sólo se usa hexadecano como substrato. Los aumentos en estos parámetros siempre son mayores para FEL. Sin embargo, no en todos los casos hubo consumo de hexadecano en FEL, mientras que en FES siempre se presentó consumo de hexadecano y el consumo fue en mayores porcentajes que para los casos de FEL. En ambos sistemas de cultivo, la mineralización del substrato consumido es mayor cuando se usa una mezcla de substratos, que cuando se usan glucosa o hexadecano como fuentes únicas de carbono. Los coeficientes respiratorios en ambos sistemas fueron mayores de 1.0 cuando sólo se consumió glucosa. Sus valores fueron muy cercanos al valor teórico cuando se consumió hexadecano en presencia de glucosa. Se llevó a cabo un análisis de los metabolitos hidrosolubles presentes en cultivos líquido y sólido de A. niger con hexadecano y glucosa (50 % C-glu, 50% C-hxd). En el cultivo sólido se observó un rápido consumo de glucosa con acumulación de ácido cítrico y de fructosa. En el cultivo líquido no se observó acumulación de algún metabolito. Se analizó la estabilidad de las oxigenasas en los extractos libres de células obtenidos en FEL y en FES, con tratamientos como la concentración por deshidratación y el almacenamiento a -20 oC de los extractos. Se encontró que los extractos enzimáticos pierden alrededor de 75 % de la actividad inicial tanto por el efecto de la concentración como por el almacenamiento durante 7 días a -20 oC. La pérdida de actividad fue similar independientemente del método de obtención de las mismas. Se observó el efecto de la temperatura en la actividad oxigenasa y se encontró que se presentan dos máximos de actividad, uno a 26 y otro a 35 oC. Las actividades registradas para esta prueba son significativamente diferentes con un =0.05 Se estudió la especificidad de las oxigenasas, obtenidas en cultivo líquido y analizadas con una prueba t-student. en cultivo sólido, encontrándose que el extracto enzimático obtenido en FES no tiene una especificidad diferente para hidrocarburos alifáticos (lineales o ramificados). Sin embargo, la especificidad para compuestos aromáticos se incrementa con la complejidad del anillo. La mayor especificidad se presenta con tolueno y pireno. La actividad del extracto enzimático de FEL no presenta un patrón determinado y muestra actividad tanto con aromáticos como con alifáticos. Se evaluó la actividad oxigenasa en extractos enzimáticos de biomasa obtenida tanto en FEL como en FES, encontrándose que la actividad es significativamente diferente para la biomasa de ambos sistemas de fermentación. La actividad del extracto enzimático de FEL es por lo menos 7 veces menor que la actividad en FES. Palabras clave: oxigenasas, fermentación en estado sólido, hidrocarburos aromáticos, hexadecano, soporte de poliuretano, Aspergillus niger

Nomofobia en relación al bajo rendimiento académico en estudiantes de medicina

Establecer la relación entre la nomofobia y el bajo rendimiento académico en estudiantes de Medicina. MATERIAL Y MÉTODO: Se llevó a cabo un estudio transversal analítico durante 2019. La muestra estuvo constituida por 325 estudiantes de Medicina Humana que cumplieron los criterios de selección. RESULTADOS: El 100% presentaron nomofobia y el 61.8% un nivel moderado. El 23,1% (75 estudiantes) presentaron bajo rendimiento académico. El establecimiento de relación entre nomofobia y bajo rendimiento académico mostró diferencia significativa (X =8.51; p=0.014; p<0.05). El promedio de edad fue de 21,71 ± 2,838; el 60% fueron mujeres, el 22,2% pertenecieron al tercer año, el 70,5% fueron de la localidad, el 79,1% tuvieron padres casados/convivientes, 91,1% refirieron un ambiente de estudio aceptable y la metodología académica fue aceptable en 80,9%. La edad, el año de estudios y la metodología académica mostraron diferencia estadística significativa en cuanto al bajo rendimiento académico (p=0.000, 0.007 y 0.002 respectivamente). CONCLUSIONES: El nivel moderado de nomofobia prevaleció y el rendimiento académico bajo abarcó al 23,1%. Hubo relación entre nomofobia según su nivel y el bajo rendimiento académico. La edad año de estudios y metodología académica también se relacionaron. Se sugiere alertar a la dirección de escuela respectiva, favorecer el uso del cuestionario NMP-Q en castellano y llevar a cabo investigaciones multiinstitucionales y con diseños de casos y controles.To establish the relationship between nomophobia and low academic performance in medical students. MATERIAL AND METHODS: An analytical and cross-sectional study was carried out during 2019. The sample consisted of 325 students of Human Medicine who met the selection criteria. RESULTS: 100% of the sample had nomophobia and 61,8% had a moderate level. Low academic performance were in 75 students 23,1%. The establishment of a relationship between nomophobia and low academic performance showed significant difference (X =8.51; p=0.014; p<0.05). The average age was 21,71 ± 2,838; 60% were women, 22,2% belonged to third year, 70,5% were from the locality, 79,1% had married/cohabiting parents, 91,1% reported an acceptable study environment and the academic methodology was acceptable at 80,9%. Age, year of study and academic methodology showed significant statistical difference in low academic performance (p=0.000, 0.007 y 0.002 respectivamente). CONCLUSION: Moderate nomophobia level prevailed and low academic performance reached 23,1%. There is a relationship between nomophobia according to his level and poor academic performance. The year of studies and academic methodology were also related. It is suggested to alert the respective school management, promote the use of the NMP-Q questionnaire in Spanish and to conduct multi-institutional investigations with case-controls designs.Tesi

Orientaciones para docentes sobre el uso de los cuadernillos de tutoría

La cartilla que a continuación te presentamos te orientará en el uso de los cuadernillos de tutoría, los cuales están dirigidos a estudiantes del 1.° al 6.° grado de Educación Primaria. Este material educativo, sustentado en el perfil de egreso propuesto en el Currículo Nacional de la Educación Básica (CNEB) y los Lineamientos de Tutoría y Orientación Educativa para la Educación Básica, se ha elaborado como un recurso de apoyo para el acompañamiento socioafectivo que realizas en favor de tus estudiantes, a fin de contribuir con el desarrollo de habilidades socioemocionales, promover relaciones positivas y prevenir situaciones que afecten la integridad y los derechos de las niñas y los niños. Aquí encontrarás orientaciones que te ayudarán en el desarrollo de las actividades propuestas. Sin embargo, es indispensable que tengas en cuenta las características de las y los estudiantes a tu cargo, así como las de su entorno familiar y social, para adaptar las actividades a sus necesidades

Microfluidic devices manufacturing with a stereolithographic printer for biological applications

Stereolithographic printers have revolutionized many manufacturing processes with their capacity to easily produce highly detailed structures. In the field of microfluidics, this technique avoids the use of complex steps and equipment of the conventional technologies. The potential of low force stereolithography technology is analysed for the first time using a Form 3B printer and seven printing resins through the fabrication of microchannels and pillars. Manufacturing performance of internal and superficial channels and pillars is studied for the seven printing resins in different configurations. A complete characterization of printed structures is carried out by optical, confocal and SEM microscopy, and EDX analysis. Internal channels with unobstructed lumen are obtained for diameters and angles greater than 500 μm and 60°, respectively. Outward and inward superficial channels in the range of hundreds of microns can be fabricated with an accurate profile, printing them with a perpendicular orientation respect to the base, allowing a proper uncured resin evacuation. Outward channels are replicated by soft lithography using polydimethylsiloxane. Clear, Model and Tough resins show a good behaviour to be used as master, but Amber and Dental resins present a poor topology transference from the master to the replica. According to the needs of devices used for biological and biomedical research, transparency as well as superficial biocompatibility of some resins is evaluated. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) adhesion is confirmed on Amber, Dental and Clear resins, but these cells were only able to grow and progress as a cell culture over the Amber resin. Therefore, Amber showed an adequate biocompatibility, in terms of cell adhesion and growth for HUVECAuthors gratefully thank contracts AEI RTI2018-097063-B-100, AEI/FEDER, UE; ED431B 2020/29; ED431E 2018/08 and ED481D-2021-019, Consellería de Educación Xunta de Galicia/FEDER e Estructuración Xunta de Galicia, IN607A2019-02 and Sociedad española de cardiología y Fundación español del corazón, SEC/FEC-INV-BAS 20/013S

Trabajo por proyectos: aprendizaje con sentido

El presente proyecto de Innovación Educativa Basada en Evidencias (IEBE) fue realizado en el marco del curso Modelos y Estrategias de Enseñanza de la Maestría en Educación del Instituto Tecnológico de Estudios Superiores de Monterrey (ITESM) en México. La investigación se enfocó a la asignatura de Español en nivel secundaria, en dos escuelas de diferentes ciudades del país, Córdoba, Veracruz y Aguascalientes, ambas bilingües, mixtas y del sector privado. Se trata de una investigación realizada en cuatro contextos seleccionados por muestreo no probabilístico. El método de investigación fue mixto, integrando instrumentos cualitativos y cuantitativos para la recolección de datos. La investigación consistió en poner en práctica el método de trabajo por proyectos, como una vía para desarrollar competencias específicas como: integración de la teoría con la práctica, análisis situacional, activación de conocimientos previos, reflexión y análisis como un medio para conocer y comprender la realidad, establecimiento de metas de aprendizaje, desarrollo de automotivación y el pensamiento crítico, participación en la construcción de conocimientos a partir del intercambio de ideas, cognición social e individual, potenciar las habilidades cognitivas, entre otras

Thymol and carvacrol determination in a swine feed organic matrix using Headspace SPME-GC-MS

En los últimos años, el aceite esencial de orégano se ha utilizado como aditivo en alimentos para animales debido a sus propiedades antifúngicas y antibacterianas, así como sustituto sintético de antibióticos. Es deseable desarrollar un método rápido y efectivo de cuantificación de timol y carvacrol en una matriz orgánica de alimento para cerdo. En este trabajo se realiza una comparación de rendimiento entre la técnica de extracción con disolvente Soxhlet utilizando éter de petróleo y acetato de etilo y la técnica de microextracción en fase sólida en el espacio de cabeza (HS-SPME). Se realizó un diseño de experimentos 24 para definir los parámetros de HS-SPME: temperatura de equilibrio de 40 °C, temperatura de extracción de 40 °C, fuerza iónica de 0.57 M y tiempo de extracción de 40 min. El método HS-SPME es más eficiente para la extracción de timol y carvacrol de una matriz orgánica. Los límites de los valores de detección y cuantificación utilizando la extracción Soxhlet con acetato de etilo fueron de 3.7 y 12.5 μl-1 para timol y de 1.4 y 4.7 μg l-1 para carvacrol, respectivamente; mientras que el LDD y el LDC para HS-SPME fueron de 0.9 y 3.1 μg L-1 para timol y de 0.6 y 1.9 μg L-1 para carvacrol, respectivamente. El método de microextracción en fase sólida en el espacio de cabeza tiene el potencial de control de calidad en la industria para compuestos activos presentes en el aceite esencial de orégano como aditivo en una matriz orgánica.In recent years, oregano essential oil has been used as an animal food additive due to its antifungal and antibacterial properties as well as s synthetic antibiotic substitute. It is desirable to develop fast and effective thymol and carvacrol quantification method in a swine feed organic matrix. In this work, a performance comparison between the Soxhlet solvent extraction technique using petroleum ether and ethyl acetate and the head space-solid phase microextraction (HS-SPME) technique is made. A 24 design of experiments is performed for defining HS-SPME parameters: equilibrium temperature of 40 ºC, extraction temperature of 40 ºC, ionic strength of 0.57 M, and extraction time of 40 min. The HS-SPME method is more efficient for extracting thymol and carvacrol extraction from an organic matrix. Limits of detection and quantification values using Soxhlet extraction with ethyl acetate were 3.7 and 12.5 μL-1 for thymol and 1.4 and 4.7 μg L-1 for carvacrol, respectively; while LOD and LOQ for HS-SPME were 0.9 and 3.1 μg L-1 for thymol and 0.6 and 1.9 μg L-1 for carvacrol, respectively. The head space-solid phase microextraction method has the potential for quality control in the industry for active compounds present in oregano’s essential oil as an additive into an organic matrix

Guía de tutoría para docentes del nivel de Educación Primaria

Brinda orientaciones a las y los docentes de Educación Primaria para la planificación e implementación de las acciones de tutoría, tanto a nivel de la institución educativa como del aula, y toma como marco de referencia lo dispuesto en los Lineamientos de Tutoría y Orientación Educativa para la Educación Básica (Resolución Viceministerial N.o 212-2020-MINEDU)

Non-synonymous WNT16 polymorphisms alleles are associated with different osteoarthritis phenotypes

Hereditary factors have a strong influence on osteoarthritis (OA). The Wnt pathway is involved in bone and cartilage homeostasis. Hence, we hypothesized that allelic variations of WNT16 could influence the OA phenotype. We studied 509 Caucasian patients undergoing joint replacement due to severe primary OA. Radiographs were used to classify the OA as atrophic or hypertrophic. Two nonsynonymous polymorphisms of WNT16 (rs2707466 and rs2908004) were analyzed. The association between the genotypes and the OA phenotype was analyzed by logistic regression and adjusted for age and body mass index. A genotype-phenotype association was found in the sex-stratified analysis. Thus, there was a significant difference in the genotypic frequencies of rs2707466 between hypertrophic and atrophic hip OA in males (p = 0.003), with overrepresentation of G alleles in the hypertrophic phenotype (OR 2.08; CI 1.28-3.38). An association in the same direction was observed between these alleles and the type of knee OA, with G alleles being more common in the hypertrophic than in atrophic knee phenotypes (p = 0.008; OR 1.956, CI 1.19-3.19). Similar associations were found for the rs2908004 SNP, but it only reached statistical significance for knee OA (p = 0.017; OR 0.92, CI 0.86-0.989). This is the first study attempting to explore the association of genetic variants with the OA phenotype. These data suggest the need to consider the OA phenotype in future genetic association studies of OA