Caracterização molecular e análise da resistência a antimicrobianos em isolados de micobactérias de crescimento rápido coletados no Paraná

Orientador : Prof. Dr. Alexandre Welker BiondoTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 24/11/2011Bibliografia: fls. 95-113Resumo: Microbacterias de crescimento rapido (MCR) estao envolvidas em diversos relatos de infeccoes cirurgicas como mamoplastia, tratamentos esteticos e bacteremia associada a laparoscopia. Tambem tem sido associadas a surtos e pseudo-surtos de infeccao hospitalar. Dentre os fatores citados como predisponentes a estes surtos destaca-se a facilidade destes micro-organismos crescerem em agua destilada, a resistencia a solucao de glutaraldeido e a capacidade de formar biofilmes. Esta tese apresenta um trabalho de caracterizacao molecular e investigacao epidemiologica, e dois trabalhos relacionados a resistencia a antimicrobianos. No primeiro trabalho, 39 casos de infeccoes cirurgicas foram estudados; os isolados foram submetidos ao sequenciamento parcial do gene rpoB, perfil de susceptibilidade a antimicrobianos e analise molecular pela tecnica de pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Trinta e seis isolados foram identificados como Mycobacterium massiliense e os outros tres como M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum. PFGE agrupou os 36 isolados de M. massiliense e mostrou o mesmo padrao (BRA 100) observado em outros tres surtos previamente reportados no Brasil, sugerindo assim uma fonte comum de infeccao para todos os pacientes e a disseminacao da cepa nos hospitais brasileiros. No segundo trabalho, 35 isolados resistentes a ciprofloxacina foram estudados quanto a presenca de mutacoes nos genes gyrA e gyrB e sua relacao com a resistencia a ciprofloxacina. No total, 31 isolados apresentaram uma substituicao no codon 90 (Ala-90 ¨Val) e nenhum isolado apresentou mutacao na posicao Asp-94. No entanto, 4 isolados resistentes a ciprofloxacina e um isolado sensivel nao apresentaram mutacoes em Ala-90 e Asp-94. Nenhuma mutacao no gene gyrB foi observada em nossos isolados de M. massiliense. O terceiro trabalho avaliou a presenca das bombas de efluxo LfrA e Tap em 81 isolados clinicos de MCR (M. massiliense, M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum) e sua relacao com a resistencia a ciprofloxacina e doxiciclina, respectivamente. Uma relacao estatistica significativa (Teste exato de Fisher, P < 0.05) foi mostrada entre a presenca das bombas de efluxo estudadas e a resistencia as quinolonas e tetraciclinas.Abstract: Rapidly growing mycobacteria (RGM) are associated with human infections after cosmetic procedures, surgery and post-injection. Also has been involved in outbreaks and pseudo-outbreaks. Predisponent factors include ability to develop in distilled water, glutaraldehyde resistance and capacity to develop biofilm. This thesis presents a study on molecular characterization and epidemiological investigation, and two studies in antimicrobial resistance. In the first study, 39 cases of postsurgical infections were studied; all isolates were submitted to rpoB partial gene sequencing for identification, evaluated for their susceptibility to antimicrobial agents and molecular analysis by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). PFGE clustered all 36 M. massiliense isolates and showed the same pattern (BRA 100) observed in three other outbreaks previously reported in Brazil, suggesting a common source of infection for all patients and reinforcing the hypotheses of spread of M. massiliense BRA100 in Brazilian hospital surgical environment in the recent years. In the second study, was investigated a total of 36 Mycobacterium massiliense clinical isolates for their susceptibility to ciprofloxacin and presence of gyrA and gyrB genes mutations. A total of 31 ciprofloxacin-resistant isolates presented an amino acid substitution at codon 90 (Ala-90 ¨Val) and no isolate presented mutation at position Asp-94. Moreover, 4 ciprofloxacin-resistant and one susceptible isolate had no mutation in Ala-90 and Asp-94. No gyrB mutation was observed in all tested M. massiliense isolates. The third study evaluated the presence of LfrA and Tap efflux pumps among clinical isolates of RGM (M. massiliense, M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum) and the correlation with their susceptibility to ciprofloxacin and doxycycline, respectively. The result obtained with 81 clinical isolates included in the study showed a significant correlation (Fisher fs exact test, P = 0.055) between the presence of the efflux pumps and resistance to quinolones or tetracycline

Avaliação microbiológica da carne bovina moída nas redes de supermercados de Canoinhas/SC

A carne é um ótimo meio para o crescimento de micro-organismos e pode ser responsável pela transmissão de bactérias patogênicas ao homem. O presente trabalho buscou avaliar as condições higiênico-sanitárias da carne moída bovina, proveniente de bancadas frigoríficas comercializadas em cinco supermercados no município de Canoinhas, estado de Santa Catarina. Foram analisadas oito amostras no período de outubro de 2012 a maio de 2013. As análises microbiológicas realizadas foram à pesquisa de Salmonella sp., determinação de coliformes totais, coliformes termotolerantes (NMP/g) e contagem de Staphylococcus aureus (UFC/g). As análises microbiológicas revelaram que não ocorreram diferenças significativas entre as amostras de carne moída dos cinco supermercados. Os resultados encontrados indicam um crescimento acima de 1,1x10³ NMP/g em 47,5% das amostras para coliformes totais, sendo que 57,5% destas foram identificadas como E. coli. Houve presença de S. aureus em 95% das amostras. Todas as amostras analisada apresentaram ausência total de Salmonella sp., estando em conformidade com a legislação brasileira

Análise de resistência à compressão do concreto para diferentes métodos de fabricação: Analysis of concrete compressive strength for different manufacturing methods

O concreto vem sendo um material muito comum e com grande aumento na sua usabilidade, fazendo com que as tecnologias, para melhoramento das suas características, estejam em pauta em muitos trabalhos acadêmicos, inclusive nas indústrias. No presente trabalho optou-se por analisar a compressão do concreto em diferentes tempos de cura, juntamente com os dois tipos de fabricação - manual e mecânico. Conclui-se que para se ter uma compressão que seja efetiva, ou seja, que faça o concreto ser mais resistente, é necessário seguir corretamente o passo a passo da fabricação do concreto e respeitar fatores que podem influenciar nessa resistência, tal como temperatura, tempo e tipo de cura e relação água/cimento, e método de produção, por exemplo

OCORRÊNCIA DE BOTULISMO EM BOVINOS CONFINADOS NO RIO GRANDE DO SUL

Botulismo é a intoxicação causada pela neurotoxina produzida pelo Clostridium botulinum, caracterizando-se por paralisia flácida ou completa da musculatura esquelética. Este trabalho relata um surto de botulismo em bovinos confinados, alimentados com silagem de milho. Amostras de fígado, conteúdo intestinal e ruminal de um dos bovinos com o quadro clínico característico de botulismo e uma porção da silagem de milho foram encaminhados para análise bacteriológica. No laboratório realizaram-se bioensaio em camundongos e soroneutralização, sendo confirmada a suspeita de botulismo tipo C. Este relato visa alertar médicos veterinários e criadores que adotam o confinamento de animais, pois esta prática de manejo aumenta a suscetibilidade ao botulismo, principalmente relacionada ao tipo e qualidade do alimento consumido. PALAVRAS CHAVE: Bovinos, Clostridium botulinum, confinamento

Genomic epidemiology of a national outbreak of post-surgical Mycobacterium abscessus wound infections in Brazil.

An epidemic of post-surgical wound infections, caused by a non-tuberculous mycobacterium, has been on-going in Brazil. It has been unclear whether one or multiple lineages are responsible and whether their wide geographical distribution across Brazil is due to spread from a single point source or is the result of human-mediated transmission. 188 isolates, collected from nine Brazilian states, were whole genome sequenced and analysed using phylogenetic and comparative genomic approaches. The isolates from Brazil formed a single clade, which was estimated to have emerged in 2003. We observed temporal and geographic structure within the lineage that enabled us to infer the movement of sub-lineages across Brazil. The genome size of the Brazilian lineage was reduced relative to most strains in the three subspecies of Mycobacterium abscessus and contained a novel plasmid, pMAB02, in addition to the previously described pMAB01 plasmid. One lineage, which emerged just prior to the initial outbreak, is responsible for the epidemic of post-surgical wound infections in Brazil. Phylogenetic analysis indicates that multiple transmission events led to its spread. The presence of a novel plasmid and the reduced genome size suggest that the lineage has undergone adaptation to the surgical niche

Práticas artísticas no ensino básico e secundário

A educação pela arte faz-se através dos seus materiais, da sua operação, da transformação das matérias em ideias novas, em novas coisas. No seu sucesso está implicada uma literacia, uma capacidade interpretativa, ou crítica, sobre a semiosfera cada vez mais povoada, saturada de mensagens parasitárias. A educação implica uma leitura do mundo (Paulo Freire), que se projeta na interpretação de todas as camadas de expressão contemporânea, muitas vezes massificada, por vezes ainda identitária e significativa. Fala-se aqui de valorizar a identidade, exercer a pedagogia da diferença através de uma capacidade problematizadora. No seu contexto, podem exercer-se pedagogias que exploram a visão crítica do artista em interação com a escola, o artista em residência, no movimento A/ R/ Tography. Ou também exercer-se uma pedagogia triangular, centrando a arte, o contexto, a produção e a sua leitura como uma metodologia (Ana Mae Barbosa). O contexto contemporâneo é pós digital, os conteúdos não pesam nos suportes, e transmitem-se por “dentes azuis” ou redes com muitos Gs (G de Geração sem peso que sucede ao peso da aceleração gravítica). Neste campo pode delinear-se uma metodologia que alicerça o projeto ancorado nos estudos críticos sobre Cultura Visual (Fernando Hernández). Digamos que as práticas pedagógicas se cruzam em diversas direções, tacteando eficácias, expressões, capacidades, inovação. O contexto é cada vez mais voraz: a pele da cultura gosta de massagens (Kerkhove; McLuhan). A Matéria-Prima de que se fala nesta revista é aquela que devolve ao seu lugar um ponto crítico da pós modernidade: o do significante. Os sintagmas são sempre processos, e neles se formam as subjectividades, ou seja, as identidades: no desenrolar do ser, onde se produz verdadeiramente o sentido, bem junto do aqui-e-agora onde está a Matéria-Prima (Foucault).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Caracterização molecular e análise da resistência a antimicrobianos em isolados de micobactérias de crescimento rápido coletados no Paraná

Orientador : Prof. Dr. Alexandre Welker BiondoTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 24/11/2011Bibliografia: fls. 95-113Resumo: Microbacterias de crescimento rapido (MCR) estao envolvidas em diversos relatos de infeccoes cirurgicas como mamoplastia, tratamentos esteticos e bacteremia associada a laparoscopia. Tambem tem sido associadas a surtos e pseudo-surtos de infeccao hospitalar. Dentre os fatores citados como predisponentes a estes surtos destaca-se a facilidade destes micro-organismos crescerem em agua destilada, a resistencia a solucao de glutaraldeido e a capacidade de formar biofilmes. Esta tese apresenta um trabalho de caracterizacao molecular e investigacao epidemiologica, e dois trabalhos relacionados a resistencia a antimicrobianos. No primeiro trabalho, 39 casos de infeccoes cirurgicas foram estudados; os isolados foram submetidos ao sequenciamento parcial do gene rpoB, perfil de susceptibilidade a antimicrobianos e analise molecular pela tecnica de pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Trinta e seis isolados foram identificados como Mycobacterium massiliense e os outros tres como M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum. PFGE agrupou os 36 isolados de M. massiliense e mostrou o mesmo padrao (BRA 100) observado em outros tres surtos previamente reportados no Brasil, sugerindo assim uma fonte comum de infeccao para todos os pacientes e a disseminacao da cepa nos hospitais brasileiros. No segundo trabalho, 35 isolados resistentes a ciprofloxacina foram estudados quanto a presenca de mutacoes nos genes gyrA e gyrB e sua relacao com a resistencia a ciprofloxacina. No total, 31 isolados apresentaram uma substituicao no codon 90 (Ala-90 ¨Val) e nenhum isolado apresentou mutacao na posicao Asp-94. No entanto, 4 isolados resistentes a ciprofloxacina e um isolado sensivel nao apresentaram mutacoes em Ala-90 e Asp-94. Nenhuma mutacao no gene gyrB foi observada em nossos isolados de M. massiliense. O terceiro trabalho avaliou a presenca das bombas de efluxo LfrA e Tap em 81 isolados clinicos de MCR (M. massiliense, M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum) e sua relacao com a resistencia a ciprofloxacina e doxiciclina, respectivamente. Uma relacao estatistica significativa (Teste exato de Fisher, P < 0.05) foi mostrada entre a presenca das bombas de efluxo estudadas e a resistencia as quinolonas e tetraciclinas.Abstract: Rapidly growing mycobacteria (RGM) are associated with human infections after cosmetic procedures, surgery and post-injection. Also has been involved in outbreaks and pseudo-outbreaks. Predisponent factors include ability to develop in distilled water, glutaraldehyde resistance and capacity to develop biofilm. This thesis presents a study on molecular characterization and epidemiological investigation, and two studies in antimicrobial resistance. In the first study, 39 cases of postsurgical infections were studied; all isolates were submitted to rpoB partial gene sequencing for identification, evaluated for their susceptibility to antimicrobial agents and molecular analysis by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). PFGE clustered all 36 M. massiliense isolates and showed the same pattern (BRA 100) observed in three other outbreaks previously reported in Brazil, suggesting a common source of infection for all patients and reinforcing the hypotheses of spread of M. massiliense BRA100 in Brazilian hospital surgical environment in the recent years. In the second study, was investigated a total of 36 Mycobacterium massiliense clinical isolates for their susceptibility to ciprofloxacin and presence of gyrA and gyrB genes mutations. A total of 31 ciprofloxacin-resistant isolates presented an amino acid substitution at codon 90 (Ala-90 ¨Val) and no isolate presented mutation at position Asp-94. Moreover, 4 ciprofloxacin-resistant and one susceptible isolate had no mutation in Ala-90 and Asp-94. No gyrB mutation was observed in all tested M. massiliense isolates. The third study evaluated the presence of LfrA and Tap efflux pumps among clinical isolates of RGM (M. massiliense, M. abscessus, M. chelonae e M. fortuitum) and the correlation with their susceptibility to ciprofloxacin and doxycycline, respectively. The result obtained with 81 clinical isolates included in the study showed a significant correlation (Fisher fs exact test, P = 0.055) between the presence of the efflux pumps and resistance to quinolones or tetracycline