Therapeutic Effect of Human Adipose Tissue-Derived Mesenchymal Stem Cells in Experimental Corneal Failure Due to Limbal Stem Cell Niche Damage

Producción CientíficaLimbal stem cells are responsible for the continuous renewal of the corneal epithelium. The destruction or dysfunction of these stem cells or their niche induces limbal stem cell deficiency (LSCD) leading to visual loss, chronic pain, and inflammation of the ocular surface. To restore the ocular surface in cases of bilateral LSCD, an extraocular source of stem cells is needed to avoid dependence on allogeneic limbal stem cells that are difficult to obtain, isolate, and culture. The aim of this work was to test the tolerance and the efficacy of human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (hAT-MSCs) to regenerate the ocular surface in two experimental models of LSCD that closely resemble the different severity grades of the human pathology. hAT-MSCs transplanted to the ocular surface of the partial and total LSCD models developed in rabbits were well tolerated, migrated to inflamed tissues, reduced inflammation, and restrained the evolution of corneal neovascularization and corneal opacity. The expression profile of the corneal epithelial cell markers CK3 and E-cadherin, and the limbal epithelial cell markers CK15 and p63 was lost in the LSCD models, but was partially recovered after hAT-MSC transplantation. For the first time, we demonstrated that hAT-MSCs improves corneal and limbal epithelial phenotypes in animal LSCD models. These results support the potential use of hAT-MSCs as a novel treatment of ocular surface failure due to LSCD. hAT-MSCs represent an available, non-immunogenic source of stem cells that may provide therapeutic benefits in addition to reduce health care expenses.This work was supported by Instituto de Salud Carlos III, CIBER‐BBN, Spain (CB06/01/003 MINECO/FEDER, EU); Regional Center for Regenerative Medicine and Cell Therapy, Castilla y León, Spain; Ministry of Science and Innovation, Spain (SAF2010–14900); Ministry of Economy and Competitiveness and European Regional Development Fund, Spain (SAF2015–63594‐R MINECO/FEDER, EU

Vacuolating cytotoxin and variants in Atg16L1 that disrupt autophagy promote Helicobacter pylori infection in humans

Peer reviewedPreprin

Enhanced Disease Severity in Helicobacter pylori-Infected Mice Deficient in Fas Signaling

Recent evidence suggests that immune-mediated gastric epithelial cell apoptosis through Fas-Fas ligand interactions participates in Helicobacter pylori disease pathogenesis. To define the role of Fas signaling in vivo, H. pylori strain SS1 infection in C57BL/6 mice was compared to that in mice deficient in the Fas ligand (gld). gld mice had a degree of gastritis similar to that of C57BL/6 mice after 6 weeks (gastritis score, 5.2 ± 0.6 [mean ± standard error] versus 3.5 ± 0.8) and 12 weeks (4.0 ± 0.7 versus 3.4 ± 0.5) of infection. Bacterial colonization was comparable in each group of mice at 12 weeks of infection (2.1 ± 0.3 versus 1.6 ± 0.3 for gld and C57BL/6, respectively; the difference is not significant). Sixty-seven percent of H. pylori-infected gld mice displayed atrophic changes in the gastric mucosa, compared with 37% of infected C57BL/6 mice, at 12 weeks. In addition, atrophic changes were more severe in H. pylori-infected gld mice (P < 0.05). Splenocytes isolated from H. pylori-infected C57BL/6 mice had a twofold increase in production of the Th1 cytokine gamma interferon (IFN-γ) in response to H. pylori antigens at both 6 and 12 weeks compared to controls (143 ± 65 versus 69 ±26 pg/ml and 336 ± 73 versus 172 ± 60, respectively). In contrast, there was a lack of detectable IFN-γ in gld mice infected with the bacterium. H. pylori-infected C57BL/6 mice had increased epithelial cell apoptosis compared with sham-infected C57BL/6 mice (35.0 ± 8.9 versus 12.3 ± 6.9; P < 0.05). Epithelial cell apoptosis did not differ between H. pylori-infected and control gld mice (5.2 ± 1.6 versus 6.5 ± 2.9 [not significant]). These data demonstrate that mice with mutations in the Fas ligand develop more severe premalignant mucosal changes in response to infection with H. pylori in association with both an impaired gastric epithelial cell apoptotic response and IFN-γ production. The Fas death pathway modulates disease pathophysiology following murine infection with H. pylori. Deregulation of the Fas pathway could be involved in the transition from gastritis to gastric cancers during H. pylori infection

XXX Congreso Nacional de Técnico Superior en Laboratorio Clínico y Biomédico y Técnico Superior de Anatomía Patológica y Citodiagnóstico. "Genómica y Terapias Dirigidas".

Producción CientíficaIntroducción: Las células madre responsables de la regeneración continua del epitelio corneal se localizan en el denominado “limbo esclero-corneal”, la zona de transición entre la córnea y la esclera-conjuntiva. Cuando se produce una disfunción o pérdida de estas células madre limbares se desarrolla el Síndrome de Insuficiencia Límbica (SIL), patología que se caracteriza principalmente por la presencia de conjuntivalización, neovascularización y defecto epitelial corneal y por la aparición de dolor crónico y pérdida de visión. Actualmente, la reparación del epitelio de la superficie ocular después de haber sufrido un SIL es un gran desafío. Con el fin de estudiar con precisión la eficacia de nuevas terapias en el tratamiento de esta patología, es necesario desarrollar nuevos modelos animales que reproduzcan los diferentes grados de severidad del SIL en humanos. Objetivo: Desarrollar y clasificar modelos de SIL que engloben diferentes grados de inflamación de la superficie ocular (de leve a severo), y relacionarlos con los diferentes grados de severidad de SIL en humanos. Materiales y método: Se desarrolló un modelo parcial de SIL en 6 conejos y un modelo total de SIL en 10 conejos. Para ello, en el ojo derecho de cada conejo se realizó una desepitelización completa de la córnea con n-heptanol y una peritomía limbar quirúrgica de 180º (modelo parcial) o 360º (modelo total). Se evaluó semanalmente la neovascularización corneal, la opacificación y el defecto epitelial utilizando una escala de 0 a 4 (de menor a mayor severidad) y realizando un seguimiento total de 11 semanas. Posteriormente, los conejos fueron eutanasiados y se recogieron los globos oculares para realizar un estudio histológico. Los tejidos se fijaron y se incluyeron en parafina, después se realizaron cortes en el micrótomo y se tiñeron con la técnica de tinción de PAS. Se evaluó el grado de daño tisular, la presencia de infiltrados inflamatorios y el número de células caliciformes en el limbo y la córnea central. Resultados: Las córneas de conejo de los modelos parcial y total de SIL desarrollaron opacidad, defectos epiteliales y neurovascularización durante las 3-4 semanas posteriores a la lesión. La opacidad corneal, la ulceración y la neovascularización fueron significativamente mayores en el modelo total que en el modelo parcial. En 4 de los 10 conejos del modelo total se observó mayor severidad de los signos clínicos, desarrollándose una conjuntivalización que les cubría la córnea totalmente. En la histología se observó que el estroma corneal y limbar del modelo de SIL total presentaba una mayor desorganización y un número significativamente mayor de células inflamatorias y de células caliciformes con respecto al modelo de SIL parcial. Los resultados mostraron el desarrollo de diferentes grados progresivos de la enfermedad. Se desarrolló un SIL leve en la superficie ocular del 100% de los conejos con SIL parcial. En cambio, en el modelo total de SIL, se observó el desarrollo de un SIL moderado en la superficie ocular del 60% de los conejos y un SIL severo en el 40% de los conejos. Conclusiones: Se ha desarrollado un modelo experimental eficiente de inflamación después de producir un SIL parcial o total. Se han observado grados progresivos de severidad (leve, moderado y severo), que se asemejan mucho a los grados que se producen en esta patología en humanos y por lo tanto, estos modelos serán de utilidad para el estudio preliminar de la eficacia de nuevos tratamientos para el SIL antes de realizar un posible ensayo clínico.Ministerios de Economía y Competitividad (SAF2015-63594-R MINECO/FEDER, UE) y de Ciencia e Innovación, España (SAF2010-14900); Instituto de Salud Carlos III, España (CIBER-BBN, CB06/01/003 MINECO/FEDER). Centro de Medicina Regenerativa y Terapia Celular, de Castilla y León, España

3er. Coloquio: Fortalecimiento de los Colectivos de Docencia

Las memorias del 3er. Coloquio de Fortalecimiento de Colectivos de Docencia deben ser entendidas como un esfuerzo colectivo de la comunidad de académicos de la División de Ciencias y Artes para el Diseño, en medio de la pandemia COVID-19, con el fin de: • Analizar y proponer acciones concretas que promuevan el mejoramiento de la calidad docente en la División. • Proponer acciones que permitan continuar fortaleciendo los cursos con modalidad a distancia (remotos). • Ante un escenario que probablemente demandará en el mediano plazo, transitar del modelo remoto a un modelo híbrido, proponer acciones a considerar para la transición de los cursos. • Planear y preparar cursos de nivelación de conocimientos, para cuando se transite a la impartición de la docencia de manera mixta o presencial, dirigidos a los alumnos que no hayan tenido oportunidad de desarrollar actividades relevantes para su formación, como prácticas de talleres y laboratorios, visitas, o alguna otra actividad relevante