Cataloguing gramophone disc records at the Museum of the University of Aveiro: a contribution to the integration of sound documents in multidisciplinary information platforms

The University of Aveiro, in Portugal, currently holds a total of around 7359 gramophone disc records in its custody. This large number of gramophone disc records is a result of donations by individual collectors since 2012. These individual collectors took safeguarding initiatives, reuniting gramophone disc records that contained diverse repertoires such as fado, musical theatre, sound plays, Portuguese popular music, classical western music, poem recitation, religious music, and others. The disc records within these collections were published by several record companies, many of which are out of activity or of unknown origin. The labels are often either damaged, incomplete, or riddled with syntax errors and inaccurate translations. Catalogue, publisher and matrix numbers are not standardized across publishers. Reissues are sometimes difficult to identify due to the commercial and business practices common at the time. In order to describe the contents of these disc records, it is essential to listen, analyse and research said disc records thoroughly. The institutionalization of these collections requires digital preservation protocols. Due to the typology of these types of collections, there are dichotomies and different approaches regarding their treatment. Following a harmonization approach, in a GLAM scenario (Galleries, Libraries, Archives, Museums), with this paper, I intend to share my experience in dealing with different norms of organization and representation of sound sources, and the guidelines that were followed in their implementation in the Museum of the University of Aveiro. With this case study, I also hope to promote the discussion about new approaches in the treatment of these types of collections.publishe

Compreensão de metáforas por crianças com síndrome de Asperger : um estudo com crianças em idade escolar

Mestrado em Ciências da Fala e da AudiçãoA investigação vigente constitui um estudo piloto sobre a compreensão metafórica com crianças com Síndrome de Asperger em idade escolar. A realização deste estudo advém da necessidade da procura de soluções que possam contribuir para a delineação do processo de intervenção terapêutico e educacional, visando dotar estas crianças com ferramentas de apoio à sua integração social. Objetivos: O estudo corrente pretende [1a] verificar o efeito da Síndrome de Asperger na compreensão de metáforas primárias (MP), comparando com crianças com desenvolvimento típico e [1b] verificar se existem diferenças na compreensão das MP; [2] investigar o efeito do contexto linguístico verbal oral, em que as MP se encontram integradas, no processamento metafórico; e [3] analisar o efeito do tipo de tarefa na compreensão das MP. Método: Neste trabalho de natureza quantitativa, procedeu-se a uma análise descritivo-correlacional das competências no processamento metafórico em 6 crianças com Síndrome de Asperger e a 10 crianças com desenvolvimento típico entre os 8 e os 13 anos. Os dados foram recolhidos após a obtenção de autorizações para a recolha de dados, mediante a aplicação de uma grelha de caracterização da amostra; e a aplicação de um instrumento de avaliação da compreensão de MP (Teste de Compreensão de MP adaptado). Resultados: Os resultados obtidos [1] Indicam haver efeito da SA na compreensão de MP; [2] sugerem a existência de variabilidade na compreensão das MP; [3] apontam para a influência da complexidade do contexto linguístico verbal oral na compreensão de MP das crianças com SA; e [4] sugerem a ausência do efeito de tarefa na compreensão metafórica. Conclusões: O estudo piloto corrente permitiu concluir que as crianças com SA apresentam dificuldades na compreensão metafórica comparativamente aos seus pares com desenvolvimento típico, possivelmente relacionado com o seu sistema conceptual restrito e pelas reduzidas experiências diárias. A complexidade de unidades contextuais linguísticas poderá também condicionar a compreensão metafórica. Desta forma, sugere-se incluir no processo de intervenção terapêutica e educacional, o desenvolvimento linguístico da compreensão de metáforas, através de experiências diversificadas, com recurso a materiais que estimulem mais do que um sentido em simultâneo, e integradas em contextos linguísticos de complexidade crescente.The current research is a pilot study about the metaphorical comprehension in school children with Asperger´s syndrome. This survey emerges from the need to seek solutions that can contribute to the delineation of the therapeutic and educational intervention process, aiming to enable these children with tools to support their social integration. Objectives: The current study aims [1a] to verify the effect of Asperger's Syndrome in primary metaphors (MP) comprehension, compared with typically developing children and [1b] to analyze the existence of differences in MP comprehension; [2] investigate the effect of oral verbal linguistic context, in which the MP are integrated, in the metaphorical processing; and [3] analyze the effect of the type of task in the metaphorical comprehension. Methods: In this study of quantitative nature it was proceeded to a descriptivecorrelational analysis of processing metaphorical skills in 6 children with Asperger’s syndrome and 10 typically developing children, between 8 and 13 years old. The collected data was made after permission obtainment due to that, through the application a questionnaire to pattern characterization, and use of an instrument for evaluation MP comprehension (Test of MP comprehension adapted). Results: The results obtained [1] show the SA effect on the MP understanding; [2] suggest the existence of variability in metaphor comprehension; [3] indicate the influence of the complexity of oral verbal linguistic context in Asperger´s syndrome metaphorical comprehension, and [4] suggest a lack of type of task effect in the metaphorical processing. Conclusions: The present pilot study concluded that children with Asperger´s syndrome exhibit difficulties in a metaphorical comprehension delay, compared with their typically developing peers, possibly related to their conceptual system restricted, and for yours day-by-day experiences decrease. The complexity of contextual linguistic units may also limit the metaphorical comprehension. Thus, it is suggested to include in the therapeutic and educational intervention process, promote the development of linguistic of metaphors processing, through several experiences and using materials that stimulate more than one sense simultaneously, and integrated into linguistic contexts of increasing complexity

New reporters for antibiotic discovery

Tese de mestrado em Microbiologia Aplicada, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, em 2018Staphylococcus aureus é uma bactéria patogénica nosocomial, versátil e com grande capacidade de adaptação a diversos ambientes. A penicilina constituiu a primeira linha de tratamento eficaz contra graves infeções causadas por esta bactéria. No entanto, a evolução da mesma levou ao aparecimento e posterior disseminação de estirpes produtoras de penicilinases. De forma a contornar este problema inicial de resistência antimicrobiana, foram desenvolvidos compostos sintéticos derivados da penicilina, nomeadamente, meticilina e oxacilina. Estes compostos passaram a ser utilizados como terapia antimicrobiana contra infeções de estirpes resistentes à penicilina. O uso clínico destes antibióticos conduziu à emergência de estirpes resistentes à meticilina (methicillin-resistant Staphylococcus aureus - MRSA) e subsequente evolução da sua resistência a todos os antibióticos disponíveis. Posteriormente, ocorreu a disseminação da multirresistência de algumas destas estirpes até à situação atual, o que levou a um aumento, à escala mundial, da mortalidade associada a infeções causadas por S. aureus, mesmo em indivíduos considerados saudáveis (sem outras patologias associadas). Dado que esta bactéria patogénica surge em formas resistentes a vários antibióticos, aos quais era previamente suscetível, o número de opções de tratamento ao qual se pode recorrer é reduzido, sendo na maioria dos casos utilizada vancomicina, ou alternativamente daptomicina e linezolida. Contudo, já existem casos e estudos de estirpes de S. aureus resistentes a estes compostos. Embora em Portugal a prevalência de MRSA esteja aparentemente a diminuir, estas estirpes continuam a ser um problema bastante grave, correspondendo a cerca de 50% das estirpes isoladas, o que constitui um dos números mais elevados a nível europeu. Deste modo, a investigação de novas estratégias que permitam o tratamento eficaz destas infeções é de elevada importância. Para o desenvolvimento de novos tratamentos antimicrobianos é necessário compreender não só os mecanismos de ação dos antibióticos, como também os que estão subjacentes à resistência aos mesmos e que foram adquiridos por S. aureus. O problema mundial da (multi)resistência a antibióticos em conjunto com as dificuldades recorrentes em descobrir novos compostos eficazes no combate a infeções microbianas, requerem a urgente inovação no desenvolvimento de técnicas que auxiliem no processo de identificação de novos alvos. Limitações na diversidade de químicos eficazes e identificação de alvos, juntamente com reduzidas concentrações disponíveis de produtos naturais, levaram à estagnação do processo de descoberta de antibióticos. Como tal, as técnicas base envolvidas na descoberta de compostos antimicrobianos são atualmente combinadas, de forma a contornar as suas restrições individuais e possibilitar resultados mais robustos. Os ensaios de screening direcionados a alvos específicos são um exemplo claro desta inovação, analisando e comparando a resposta de estirpes geneticamente modificadas com a da estirpe parental. Podendo utilizar sistemas de fluorescência ou de bioluminescência e requerendo quantidades reduzidas de compostos de interesse/a testar durante os estudos/ensaios, este tipo de estirpes modificadas constituem ferramentas úteis para a descoberta de antibióticos, nomeadamente compostos derivados de produtos naturais. Considerando os alvos clássicos de antimicrobianos, estes tipos de screening realizados em células bacterianas possibilitam a descoberta de novos compostos que atuem em enzimas e/ou estruturas envolvidas na síntese da parede celular, metabolismo do ácido fólico, ribossomas, polimerases do RNA, entre outros alvos mais comuns. Todavia, ao aplicar estes screenings a alvos menos estudados e que estão envolvidos em processos igualmente essenciais como, por exemplo, a divisão celular, homeostasia da membrana celular ou biossíntese de ácidos gordos, poderão ser descobertos novos compostos, ou formas mais eficazes de utilizar os já conhecidos, para o tratamento de infeções por MRSA. Devido à constante interação com o ambiente externo e fatores de stress associados, as bactérias utilizam diversos mecanismos para manter a integridade celular, nomeadamente membranar, assegurando, assim, a sua sobrevivência. A membrana citoplasmática está, por isso, envolvida em inúmeros processos desde o transporte de moléculas, respiração, comunicação celular, produção de energia, até à manutenção da força protomotriz. A alteração do potencial de membrana, uma das componentes da força protomotriz, é integrada como estímulo ambiental pela cinase de histidina LytS do sistema regulatório LytSR, que posteriormente desencadeia (via LytR) a reposta celular adequada. Outra forma possível de ativar e induzir uma resposta do sistema LytSR tem por base a fosforilação do regulador de resposta LytR como resultado da acumulação metabólica de acetato em células que se encontram na presença de concentrações elevadas de glucose. A resposta celular mediada por LytR consiste na ativação dos genes do operão lrgAB. Este operão está envolvido na regulação do programa de morte celular programada e tolerância a antibióticos, como a penicilina, funcionando de modo oposto ao operão cidABC dado que os produtos destes genes são homólogos aos sistemas de bacteriófagos de antiholinas e holinas, respetivamente. Quando LytS deteta a dissipação do potencial de membrana, fosforila o ativador LytR que irá, consequentemente, induzir a expressão dos genes lrg. LrgA funciona como uma antiholina, contrariando o efeito de permeabilização membranar da holina CidA, impedindo, assim, a morte celular e subsequente lise. Outro parâmetro que contribui para a sobrevivência e homeostasia da membrana celular é a composição lipídica da mesma. As bactérias produzem ácidos gordos e fosfolípidos através de um sistema diferente do dos seres humanos e outros organismos eucariotas, sendo o metabolismo destes lípidos controlado pelo regulão fap desse mesmo sistema. No centro desta regulação encontra-se o repressor FapR, capaz de regular a sua própria expressão através do controlo do gene fapR que o codifica. Deste modo, a indução do regulão, por compostos que inibam as enzimas desta via de biossíntese lipídica, é conseguida após inibição da atividade do FapR. Por sua vez, repressão mediada pelo FapR é inibida aquando do aumento dos níveis intracelulares de malonil-CoA, um intermediário da biossíntese de ácidos gordos e fosfolípidos, cuja concentração pode ser aumentada ao bloquear/inibir um dos passos enzimáticos da via. Devido à importância desta via para a estabilidade/homeostasia da estrutura membranar, as várias enzimas da biossíntese de ácidos gordos e fosfolípidos podem teoricamente ser consideradas como alvos eficazes de antibióticos. O presente trabalho tem por objetivo a construção de novas ferramentas para a descoberta de compostos antimicrobianos através da modificação genética da estirpe MRSA JE2, de forma a construir novas estirpes repórter fluorescentes. Deste modo, as estirpes repórter construídas serão capazes de detetar a inibição ou dano de vias metabólicas ou estruturas essenciais para a célula bacteriana. Como a resposta bacteriana a vários estímulos ambientais tem por base a indução da expressão de genes específicos, neste trabalho foram escolhidos os sistemas ou vias que respondem à diminuição ou perda de potencial de membrana e à inibição da biossíntese de ácidos gordos para construção das estirpes repórteres. Desta forma as bactérias repórter construídas ficam fluorescentes após deteção de compostos que causam os fenótipos anteriores, e a sua resposta é quantificável com base na fluorescência apresentada. Para construção dos repórteres, o gene que codifica a proteína mNeonGreen foi colocado sob o controlo dos promotores do operão lrg e do regulão fap, que respondem à redução do potencial de membrana e inibição da síntese de ácidos gordos, respetivamente. Nesta dissertação, concluímos que a indução da expressão de mNeonGreen sob o controlo do promotor de lrg após diminuição do potencial de membrana era demasiado reduzida para este repórter ser considerado adequado num screening de bibliotecas de compostos naturais. Todavia, os resultados da indução do repórter fap apontam para uma duplicação dos níveis de fluorescência das células, o que indica que esta estirpe é uma ferramenta promissora para a descoberta de compostos antimicrobianos que atuam através da inibição da via de biossíntese dos ácidos gordos.The global threat of multidrug resistant Staphylococcus aureus to healthy individuals poses a pressing need to develop new tools and explore alternative targets for the discovery of new antibiotics derived from natural compounds against this human pathogen. In this work we aimed to construct new tools for antibiotic discovery by constructing reporter strains, in the background of methicillin-resistant S. aureus strain JE2, which sense inhibition/damage of essential metabolic pathway/structures in the bacterial cell. Bacteria respond to various environmental stresses by triggering the expression of specific genes. We have focused on the response to loss of membrane potential and inhibition of fatty acid biosynthesis and constructed reporter S. aureus strains that become fluorescent upon detection of compounds causing these phenotypes. This was achieved by placing the gene encoding the fluorescent protein mNeonGreen under the control of the lrg and fap promoters that respond to loss of membrane potential and inhibition of fatty acid biosynthesis, respectively. The lrg operon takes part in the response of LytSR, a two-component regulatory system that senses the decrease of membrane electric potential due to the ever-changing environmental conditions. This response is based on the activity of Lrg proteins, which attempt to prevent cell membrane permeabilization and therefore ensure survival of stressed bacterial cells. The fap regulon is monitored by FapR, a repressor which controls the status of fatty acid biosynthesis and phospholipid metabolism. When a compound interferes with this pathway, intracellular levels of malonyl-CoA increase and FapR repression is inhibited, allowing fap genes expression. We concluded that induction of mNeonGreen expression driven by the lrg promoter upon loss of membrane potential was too weak for these reporter strains to be used in high-throughput screenings. However, induction of fap led to a two-fold increase of cells fluorescence, indicating that this is a promising tool for the discovery of antimicrobial compounds that act through inhibition of fatty acid biosynthesis

Storage of water molecules into biomimetic heterostructures: the role of roughness

The development of devices based on heterostructured thin films of biomolecules conveys a huge contribution on biomedical field. However, to achieve high efficiency of these devices, the storage of water molecules into these heterostructures, in order to maintain the biological molecules hydrated, is mandatory. Such hydrated environment may be achieved with lipids molecules which have the ability to rearrange spontaneously into vesicles creating a stable barrier between two aqueous compartments. Yet it is necessary to find conditions that lead to the immobilization of whole vesicles on the heterostructures. In this work, the conditions that govern the deposition of open and closed liposomes of 1.2-dipalmitoyl-sn-Glycero-3-[Phospho-rac-(1-glycerol)] (sodium Salt) (DPPG) onto polyelectrolytes cushions prepared by the layer-by-layer (LbL) method were analyzed. Electronic transitions of DPPG molecules as well as absorption coefficients were obtained by vacuum ultraviolet spectroscopy, while the elemental composition of the heterostructures was characterized by x-ray photoelectron spectroscopy (XPS). The presence of water molecules in the films was inferred by XPS and infrared spectroscopy. Quartz crystal microbalance (QCM) data analysis allowed to conclude that, in certain cases, the DPPG adsorbed amount is dependent of the bilayers number already adsorbed. Moreover, the adsorption kinetics curves of both adsorbed amount and surface roughness allowed to determine the kinetics parameters that are related with adsorption processes namely, electrostatic forces, liposomes diffusion and lipids re-organization on surface. Scaling exponents attained from atomic force microscopy images statistical analysis demonstrate that DPPG vesicles adsorption mechanism is ruled by the diffusion Villain model confirming that adsorption is governed by electrostatic forces. The power spectral density treatment enabled a thorough description of the accessible surface of the samples as well as of its inner structural properties. These outcomes proved that surface roughness influences the adsorption of DPPG liposomes onto surfaces covered by a polyelectrolyte layer. Thus, low roughness was shown to induce liposome rupture creating a lipid bilayer while high roughness allows the adsorption of whole liposomes. In addition, the fraction of open liposomes calculated from the normalized maximum adsorbed amounts decreases with the cushion roughness increase, allowing us to conclude that the surface roughness is a crucial variable that governs the adsorption of open or whole liposomes. This conclusion is fundamental for the development of well-designed sensors based on functional biomolecules incorporated in liposomes. Indeed, LbL films composed of polyelectrolytes and liposomes with and without melanin encapsulated were successfully applied to sensors of olive oil.Fundação para a Ciência e a Tecnologia (FCT)- PEst-OE/FIS/UI0068/2011 ; SFRH/BD/62229/200

Dissertação apresentada para a obtenção do grau de Mestre em Desporto com especialização em Treino Desportivo

Orientadora: Professora Doutora Ana Conceição Coorientador: Professor Doutor Hugo LouroRESUMO: A natação pura é das modalidades mais estudadas (Vilas-Boas, 2010). Contudo, no âmbito das estafetas em NPD existe uma escassez de investigação e mais concretamente em rendições. Um dos desafios é minimizar o tempo de saída do atleta do bloco com o outro que toca na parede, assim focamo-nos no estudo das habilidades visuais nas rendições em NPD, parecendo-nos relevante estudar a análise cognitiva para a ação motora, verificando a aplicação de um programa de treino de perceção visual nas rendições. O objetivo é verificarmos em que medida é que através da utilização de um programa de treino em seco/complementar, a técnica da rendição nas estafetas de 4x100m livres existem melhorias no tempo ao bloco durante a competição. A amostra foi composta por 28 nadadores portugueses (N=28) com idade 15.71±2.10 anos, 12 do sexo masculino (17± 1.83 anos; 72.64±7.04 kg; altura: 177.5±4.37 cm; anos de prática: 8.08±2.36) e 16 do sexo feminino (14.75±1.75 anos; 52.88±6.64 kg; altura: 160.56±5.83 cm; anos de prática: 5.94±2.01). O programa de treino das rendições foi desenvolvido com base num estudo piloto previamente testado. Foi aplicado um programa de treino com recurso a um software durante quatro semanas antes da competição, testando antes e após o programa, com o objetivo de verificar os efeitos do treino. Os procedimentos da recolha avaliam os principais efeitos da intervenção do programa de treino (1-4) e a distância de oclusão (2.5m, 5m e 7.5m) na diferença de tempos, e os efeitos de treino no ao bloco de partida (antes e depois do programa de treino) em ambos os géneros, assegurados pela análise de variância ANOVA. A distribuição normal foi confirmada com o teste de D’Agostino-Pearson. A variação da variável dependente pela variável independente baseou-se no uso do tamanho parcial do efeito sugerido de eta-squared, Cohen (1988) f de 0.1, 0.25 e 0.4, como pequeno, médio e grande, respetivamente. Anaconda e IPython foram utilizados para todos os cálculos (Continuous Analytics, 2016), com exceção das análises ANOVA realizadas com o Pacote Estatístico para Ciências Sociais (IBM SPSS 23.0). Os dados foram armazenados e organizados usando Pandas (McKinney & outros, 2010) e NumPy (Walt, Colbert & Varoquaux, 2011). O nível de significância foi definido em p≤ .05. Rendições em Natação Pura Desportiva- Estafetas e Programa de Treino | 2018 ESDRM ||| Mestrado em Desporto, Especialização em Treino Desportivo v No que concerne à diferença de tempos entre o tempo real e o tempo estimado, as nadadoras apresentaram um efeito significativo no treino para a diferença de tempo (F (3.45) = 4.204, p ≤ 0.05, ɳ2p = 0,219) e um efeito significativo na distância de oclusão (F (2.30) = 4.761, p ≤.05, ɳ2p = 0.241), no entanto, não houve diferenças significativas na interação destes dois fatores tanto na distância como no efeito de treino em relação à diferença de tempo (F (6.66) = 1.353, p> .05). Por outro lado, nos nadadores não houve um efeito significativo no treino para a diferença de tempo (F (3.33) = 0.716, p> 0.05), mas entre as distâncias de oclusão existiram diferenças (F (2.22) = 4.438, p ≤.05, ɳ2p = .287), a interação dos dois fatores não revelou efeito significativo (F (6.66) = 1.439, p> .05). No que toca à diferença do tempo ao bloco durante a competição, após o desenvolvimento do treino não foram observadas diferenças significativas (F (1.47) = 0.562, p> 0.05, ɳ2p = 0.012) nas nadadoras, embora tenha havido uma diminuição do tempo ao bloco de partida (TB antes: 0.69±0.17 s para TB após: 0.67±0.10 s), representando uma melhoria de 0.02 s ou 2.89% em relação ao TB antes. Os nadadores do sexo masculino apresentaram uma melhoria maior no tempo ao bloco após o treino com diferenças significativas (F (1.35) = 4.069, p = 0.05, ɳ2p = 0.102), onde foi observada uma diminuição de 0.11 s ou 18.6% em relação ao tempo ao bloco antes (TB antes: 0.59±0.20 s para TB após: 0.48±0.23 s). De forma a esclarecer a dinâmica do programa de treino e as suas componentes evidencia-se que este poderá auxiliar os treinadores reduzindo o tempo de treino na água e constituindo-se como uma alternativa para os atletas explorarem autonomamente, sendo possível aplicá-lo no treino em seco ou em casa.ABSTRACT: Swimming is one of the most studied sports (Vilas-Boas, 2010). However, in the context of swimming relays there is a shortage of research and more precisely in relay. One of the challenges is to minimize the time of exit of the swimmer of the block with the other one that touches the wall, we focus on the study of the visual abilities in the relays in swimming, because it seems to us relevant to study on the cognitive analysis for the motor action, verifying the application of a training program of visual perception in relay. The aim of this study was to verify to what extent, through the use of an additional training program, the technique of relay in the 4x100m freestyle improves the block time to the swimming during the competition. The sample was composed by 28 Portuguese swimmers (N = 28) aged 15.71±2.10 years, 12 males (17±1.83 years, 72.64±7.04 kg, height: 177.5±4.37 cm, years of practice: 8.08 ± 2.36) and 16 females (14.75±1.75 years, 52.86± 6.64 kg, height: 160.56±5.83 cm, years of practice: 5.94±2.01). The Swimming Relay Training Program was developed on the basis of a pilot study previously tested. The training program was applied using software for four weeks before the competition (McLean et al., 2000), by testing before and after the program with the aim of checking the effects of the training. A two-way repeated measure ANOVA as conducted to assess the effects of training (1 to 4) and distance (2.5m, 5m and 7.5m) in the difference time, and the training effects in the block time (before and after the training program) on both genders. Normal distribution was confirmed with D'Agostino–Pearson test. The variation of the dependent variable by the independent variable was based on the use of partial etasquared, Cohen (1988) suggested effect sizes f of 0.1, 0.25, and 0.4 as small, medium and large, respectively. The Anaconda and IPython were used for all calculations (Continuum Analytics, 2015), except for the ANOVA analyses that were conducted with Statistical Package for Social Sciences (IBM SPSS 23.0). The data was stored and organized using Pandas (McKinney & others, 2010) and NumPy (Walt, Colbert, & Varoquaux, 2011). The significance level was set at p ≤ .05. In the female swimmers there was a significant training effect for the difference time (F (3.45) = 4.204, p ≤.05, ɳ2p = 0.219) and an effect for the occlusion distance in Rendições em Natação Pura Desportiva- Estafetas e Programa de Treino | 2018 ESDRM ||| Mestrado em Desporto, Especialização em Treino Desportivo vii the difference time (F (2.30) = 4.761, p ≤.05, ɳ2p = 0.241), however there was no significant difference in the two-factor interaction of both distance and training effect in the difference time (F (6.66) = 1.353, p >.05). Regarding the male swimmers there wasn’t a significant effect of the training in the difference time (F (3.33) =.716, p>.05), in opposition to the significant effect of the distances in difference time (F (2.22) = 4.438, p ≤.05, ɳ2p = .287), the two factors interaction didn’t reveal a significant effect (F (6.66) = 1.439, p >.05) as occurred in the female swimmers. In what concerns to the block time (BT) during the competition, after the development of training was not observed significant differences (F (1.47) = 0.562, p >.05, ɳ2p = 0.012) on the female swimmers, although there was a decrease of the BT (from BT before: 0.69±0.17 s to BT after: 0.67±0.10 s), representing an improvement of 0.02s or 2.89% in relation to the BT before. The male swimmers had a higher improvement in the block time after the training with significant differences (F (1.35) = 4.069, p=0.05, ɳ2p = 0.102), where it was observed a decrease of 0.11 s or 18.6% comparing to the BT before (BT before: 0.59±0.20 s to BT after: 0.48±0.23 s). In order to clarify the dynamics of the training program and its components, it seems that this training program can help the coaches reducing the training time in the water, becoming an alternative for the swimmers to explore, giving them autonomy to apply it in the dry workout or at home.N/

Natural compounds as new antibacterials to control Campylobacter spp

As doenças de origem alimentar continuam a ser um problema comum em todo o mundo. Ainda que possam ser provocadas por diversos agentes, são as bactérias, os vírus ou os parasitas a principal causa das infeções alimentares. O consumo ou processamento de alimentos contaminados têm sido descritos como as principais vias de transmissão para os humanos. Campylobacter jejuni e Campylobacter coli têm sido descritos como a principal causa de gastroenterite bacteriana em seres humanos em todo o mundo e em 2013, na União Europeia, a campilobacteriose, infeção causada por Campylobacter, foi a zoonose mais relatada. Nos seres humanos, as espécies de Campylobacter têm sido associadas a uma variedade de condições gastrointestinais, tais como gastroenterite, doenças inflamatórias do intestino, cancro colon-rectal, síndrome do intestino irritável, entre outras e também podem provocar manifestações extra-gastrointestinais, como bacteremia, infeções pulmonares e abcessos. As complicações pós-infeção por este microrganismo incluem a artrite reativa e podem conduzir a doenças auto-imunes, tais como a síndrome de Guillain-Barré. A maioria das infeções por Campylobacter não necessita de intervenção terapêutica sendo apenas necessária reidratação. No entanto, em pacientes imunodeprimidos, pacientes cujos sintomas são severos ou persistentes e aqueles com infeções extra-intestinais é utilizado tratamento antimicrobiano, sendo os antibióticos mais utilizados a eritromicina e a ciprofloxacina. No entanto, em todo o Mundo tem-se verificado que as estirpes de Campylobacter são cada vez mais resistentes a antibióticos, incluindo os usados em humanos. Para além disso também têm sido descritas estirpes de Campylobacter resistentes a desinfetantes, o que se deve, principalmente, à sua capacidade de formar biofilmes. Estes biofilmes são um problema emergente na indústria alimentar, aumentando a possibilidade de contaminações ao longo da cadeia alimentar. Assim, e como os estudos relativos a Campylobacter são escassos, é da maior relevância estudar a epidemiologia de espécies de Campylobacter isoladas em Portugal, a sua resistência a antibióticos e procurar alternativas, aos antimicrobianos convencionais, para o seu controlo. Devido à escassez de estudos relativos à epidemiologia de Campylobacter em Portugal procedeu-se neste trabalho ao estudo da distribuição epidemiológica de isolados de Campylobacter de seres humanos, entre 2009 e 2012, em Portugal. Para isso, foram analisadas 837 estirpes obtidas através do Instituto Nacional de Saúde Dr. Ricardo Jorge. Destas 837 estirpes, 84,5% foram identificados como C. jejuni, 14,8% como C. coli, 0,2% como C. upsaliensis, 0,1% como C. concisus e 0,2% das amostras foram identificadas como Arcobacter butzleri. Em relação à sua distribuição por faixas etárias, observou-se que 61,5% das estirpes pertenciam ao grupo com idades entre 1 e 15 anos. Após este estudo preliminar, a partir deste grupo de isolados humanos, escolheram-se aleatoriamente 125 estirpes de Campylobacter (C. jejuni e C. coli) isoladas de seres humanos. A este grupo de estirpes, adicionaram-se 39 isolados de retalho alimentar e 32 de animais. As 196 amostras foram então caracterizadas através da tipagem por sequenciamento multilocus e da tipagem do gene flaA. Através destes métodos de tipagem, observou-se que as estirpes de C. coli eram geneticamente mais conservadas do que C. jejuni e que dentro de cada espécie, existiam isolados geneticamente relacionados provenientes de fontes diferentes. Em seguida, o fenótipo de resistência ao ácido nalidíxico, amoxicilina, ciprofloxacina, eritromicina, gentamicina e tetraciclina foi avaliado pelo método de diluição em agar. Observaram-se elevadas taxas de resistência para todos os antibióticos com exceção à gentamicina, incluindo para os antibióticos utilizados no tratamento de campilobacteriose grave em humanos. Além disso, observou-se um fenótipo de resistência a múltiplos antibióticos (resistência a 3 ou mais classes de antibióticos) em 86% dos isolados. Perante os elevados níveis de resistência observados, estudaram-se os mecanismos moleculares subjacentes a essas resistências. Verificou-se que todos os isolados resistentes à ciprofloxacina possuíam a mutação Thr-Ile-86 na região que determina resistências às quinolonas no gene gyrA. Para a resistência à eritromicina apenas foi detetada a mutação A2075G no gene 23S rRNA. Em relação à resistência à gentamicina, observou-se que as três estirpes resistentes à gentamicina possuíam o marcador de resistência aos aminoglicosídeos aphA-3, sendo que uma das estirpes tinha uma mutação neste marcador. Foi ainda evidenciado neste estudo, que as bombas de efluxo cmeABC também podem desempenhar um papel na resistência a múltiplas drogas e no fenótipo da resistência a gentamicina. Assim, neste estudo foi possível obter uma visão geral da epidemiologia de Campylobacter em Portugal e descrever pela primeira vez a elevada taxa de multirresistência a antibióticos, assim como realçar o surgimento de estirpes de Campylobacter resistentes aos antibióticos de uso humano. Com base nos resultados deste estudo foram selecionadas estirpes com diferentes perfis genéticos e de resistência a antibióticos para serem utilizadas no decurso deste trabalho. Como o género Campylobacter é a principal causa de gastroenterite bacteriana e a via alimentar é a principal via de contaminação, a elevada percentagem de estirpes resistentes a antibióticos aumenta o potencial zoonótico da infeção com estirpes multirresistentes. Logo, torna-se necessário controlar o crescimento de Campylobacter nas vias mais comuns de contaminação, que são os alimentos. Assim, o objetivo seguinte deste trabalho foi avaliar o potencial do resveratrol para controlar as estirpes de Campylobacter previamente caracterizadas. Apesar do resveratrol possuir várias propriedades biológicas, incluindo antimicrobianas, a sua baixa solubilidade em água e alta instabilidade comprometem a sua aplicação. Assim, para ultrapassar estes problemas, estudou-se o encapsulamento do resveratrol com metil-β-ciclodextrina. Verificou-se que a complexação do resveratrol com esta ciclodextrina provocou um aumento de 400 vezes na sua solubilidade. Em seguida o complexo de inclusão foi caracterizado através de Espectroscopia de Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), Calorimetria Exploratória Diferencial (DSC), Difração de Raios-X (XRD) e Microscopia Eletrónica de Varrimentos (SEM), confirmando-se efetivamente a sua formação. Seguidamente foram avaliadas algumas propriedades biológicas do resveratrol e do seu complexo de inclusão com metil-β-ciclodextrina, tendo-se verificado que ambos os compostos tinham atividade antioxidante muito forte, baixa toxicidade e ainda capacidade de reduzir a viabilidade das células Caco-2 (linha celular constituída por células epiteliais de adenocarcinoma colorectal heterogéneo). Além disso, também foi demonstrada a sua atividade antibacteriana contra estirpes de Campylobacter previamente selecionadas: duas estirpes de referência (C. jejuni ATCC 33560 e C. coli ATCC 33559), duas estirpes isoladas de fezes de pacientes com gastroenterite aguda (C. coli 53 e C. coli 873) e duas estirpes isoladas de carne de aves fresca (C. jejuni 225421 e C. coli 219872). Estes resultados sugerem que o resveratrol e o seu complexo de inclusão podem ser usados para controlar Campylobacter e que o resveratrol encapsulado em metil-β-ciclodextrina mantem as suas propriedades antioxidantes e antibacterianas. Uma vez que os resultados com o resveratrol e o complexo de inclusão foram bastante promissores, estudou-se ainda outro complexo de inclusão (resveratrol-hidroxipropil-γ-ciclodextrina), previamente formado e caraterizado pelo grupo de investigação, que revelou ainda ter um potencial antimicrobiano mais elevado contra Campylobacter e A. butzleri, um patogéneo de origem alimentar relacionado a Campylobacter. Dado isto, inicialmente avaliou-se a atividade antibacteriana em células planctónicas e mostrou-se que tanto o resveratrol como o complexo de inclusão têm um efeito bactericida contra as estirpes multirresistentes C. coli 873 e C. jejuni 225421. Com o objetivo de esclarecer o potencial mecanismo de ação do complexo de inclusão do resveratrol em hidroxipropil-γ-ciclodextrina sobre as estirpes de Campylobacter, começou por se avaliar a despolarização das membranas celulares e a atividade metabólica por citometria de fluxo. Através desta técnica, observou-se que complexo de inclusão pode atuar induzindo a despolarização da membrana e afetando a atividade metabólica das células. Dado que os biofilmes bacterianos são um problema emergente na indústria alimentar, também foi avaliado o potencial destes dois compostos para inibir a formação de biofilmes e eliminar biofilmes estabelecidos. Tanto o resveratrol como o complexo de inclusão foram capazes de inibir a formação de biofilmes e diminuir biofilmes previamente estabelecidos, mesmo em concentrações sub-inibitórias. O sistema quorum sensing (QS) tem sido associado à resistência antimicrobiana e formação de biofilmes, portanto, o potencial anti-QS destes dois compostos também foi estudado através da utilização de uma estirpe biossensor (Chromobacterium violaceum ATCC 12472). Verificou-se que ambos, o resveratrol e o complexo de inclusão, foram capazes de inibir o sistema QS, o que pode explicar o efeito anti-biofilme destes compostos. Assim, nestes estudos foram demonstradas as propriedades antimicrobianas e anti-biofilme do resveratrol e complexo de inclusão em estirpes de Campylobacter. Este aspeto associado ao facto de o resveratrol ser um composto de origem natural, e de também apresentar forte atividade antioxidante, encorajam futuros estudos com vista à sua aplicação como potencial conservante alimentar. Finalmente, uma vez que tem havido um interesse crescente na utilização de compostos naturais para aplicação em produtos alimentares, também foi avaliado o potencial do óleo essencial de coentros (Coriandrum sativum L.) e do seu principal composto, o linalool, para controlar Campylobacter. Ambos os compostos exibiram um efeito bactericida contra as quatro estirpes testadas (C. jejuni ATCC 33560, C. coli ATCC 33559, C. jejuni 225421 e C. coli 873) com valores de concentração mínima inibitória entre 0,5 e 1 μL/mL e observou-se que os compostos voláteis do óleo essencial de coentros também inibiram o crescimento de Campylobacter. Observou-se ainda que ambos os compostos inibiram a formação de biofilmes e promoveram a dispersão de biofilmes de Campylobacter. Como descrito anteriormente, também foi estudado o efeito destes compostos sobre o sistema QS. Foi demonstrada a atividade anti-QS do óleo essencial de coentros e do linalool através da inibição da produção de violaceína pela estirpe biossensor C. violaceum. Assim, mais uma vez, esta atividade anti-QS pode estar associada com a atividade anti-biofilme dos compostos, uma vez que o QS tem um papel importante na regulação da formação e desenvolvimento de biofilmes. Para além do potencial anti-bacteriano e anti-biofilme do óleo essencial e do linalool, também se avaliou a sua atividade antioxidante, uma vez que o processo de oxidação está relacionado com a perda da qualidade dos alimentos. Assim, observou-se que ambos os compostos têm uma elevada capacidade para inibir a peroxidação de lípidos. Em suma, os resultados demonstraram que estes compostos naturais podem ser utilizado para controlar Campylobacter e também como agentes antioxidantes para melhorar a qualidade dos alimentos. Em conclusão, neste trabalho, foram apresentados, dados recentes referentes à epidemiologia de Campylobacter em Portugal, bem como a sua diversidade genética e respetivos perfis de resistência a antibióticos. Diante disto, são necessários novos agentes antimicrobianos para controlar este patogéneo emergente de origem alimentar. Neste trabalho mostrou-se que o resveratrol e o óleo essencial de coentros, ambos compostos naturais, têm a capacidade de reduzir células planctónicas e biofilmes de Campylobacter, possuindo também várias atividades biológicas, incluindo propriedades antioxidantes. Este trabalho permitiu alargar o conhecimento sobre a epidemiologia e taxas resistência de estirpes de Campylobacter isoladas em Portugal e desenvolver novas estratégias de controlo deste microrganismo baseadas na utilização de compostos de origem natural.Foodborne diseases remain common around the world and can be caused by a variety of agents, being bacteria, viruses or parasites the main causes of such infections. Moreover, the major cause of foodborne diseases is consumption or handling of contaminated food. Campylobacter jejuni and Campylobacter coli are the major cause of bacterial gastroenteritis in humans worldwide and are increasingly resistant to antimicrobial agents mainly due to its ability to form biofilms. Furthermore, campylobacteriosis was the most commonly reported zoonosis in the European Union in 2013. So, the main objective of this work was to study the epidemiology of Campylobacter species in Portugal and to explore the potential of natural compounds as new antibacterials to control this foodborne pathogen and to increase the shelf life of food products. We started this work with an epidemiological study of Campylobacter in Portugal. Firstly we studied the epidemiological distribution of Campylobacter isolates from humans, between 2009 and 2012, in Portugal. For this, 837 strains from the National Institute of Health Dr Ricardo Jorge were analyzed, of which 84.5% were identified as C. jejuni, 14.8% as C. coli, 0.2% as C. upsaliensis, 0.1% as C. concisus and 0.2% of the samples were identified as Arcobacter butzleri. Concerning the distribution per age groups, we observed that 61.5% of the strains belonged to the group aged between 1 and 15 years. Afterward, from the group of 837 strains, we randomly choose 125 Campylobacter isolates from humans. In addition to these isolates, we added strains isolated from different sources: 39 from retail food and 32 from animals. All the 196 strains were then characterized by multilocus sequence typing (MLST) and flaA typing. We found that the C. coli isolates were genetically more conserved than C. jejuni, and within each species, genetically related isolates were recovered from different sources. Then, the resistance phenotype to six antibiotics was evaluated by the agar dilution method. We observed high resistance rates to several antibiotics, including the ones used in the treatment of severe campylobacteriosis. We also identified a multidrug resistance phenotype in 86% of the isolates. Once this high resistance to antibiotics was confirmed, we decided to study the underlying molecular mechanisms. In all the ciprofloxacin resistant isolates we found the Thr-86-Ile mutation in the quinolone-resistance-determining regions (QRDR) in the DNA gyrase gene (gyrA). For the erythromycin resistance only the mutation A2075G was detected. Regarding gentamicin resistance, we found the three gentamicin-resistant isolates harboured the aphA-3 aminoglycoside resistance marker, with one strain having a point mutation. In addition, we showed that cmeABC efflux pumps may also play a role in the multidrug resistance phenotype and in the gentamicin resistance. In sum, the results obtained in this first part of the study gave an overview of the Campylobacter epidemiology in Portugal and worrying antibiotic multi-resistance rate. This part also highlighted the emergence of Campylobacter strains resistant to antibiotics commonly used in humans. Then, we select a group of strains with different genetic and antibiotic profiles to be used in the subsequent steps of our work. Since the main source of Campylobacter infection is through contaminated food, it is necessary to find new strategies to control the growth of Campylobacter in the most common way of contamination, which are foods. So, in the next step we assessed the potential of resveratrol to control the strains of Campylobacter that were characterized previously. However, despite resveratrol having several biological properties, its low aqueous solubility and high instability compromise its application. So, to overcome these limitations, we studied the encapsulation of resveratrol with a methyl-β-cyclodextrin. We found that resveratrol complexation caused a 400 fold improvement in its solubility. The inclusion complex was characterized by several techniques. After the formation of the inclusion complex, we compared the biological properties of resveratrol and its inclusion complex. We showed that both compounds had very strong antioxidant activity and low toxicity, together with the ability to reduce the viability of Caco-2 cells (heterogeneous human epithelial colorectal adenocarcinoma cell line). In addition, we also demonstrated their antibacterial activity against the previously selected Campylobacter strains. These results suggest that resveratrol and its inclusion complex can be used to control Campylobacter, since the biological properties are maintained. Due to the very good results obtained with resveratrol and this inclusion complex, we decided to study another inclusion complex (resveratrol-hydroxypropyl-γ-cyclodextrin) and its potential to control Campylobacter and A. butzleri, a closely related foodborne pathogen. Firstly we evaluated the antibacterial activity against planktonic cells, demonstrating that both resveratrol and inclusion complex have a bactericidal effect against the two microorganisms. The inclusion complex may act by inducing membrane depolarization and by affecting the metabolic activity of the cells. Since bacterial biofilms are an emerging problem in the food industry, we also evaluated the potential of these two compounds against biofilms. We showed that resveratrol and the inclusion complex inhibit biofilm formation and diminish established biofilms, even at sub-inhibitory concentrations. Since the quorum sensing (QS) system has been associated with the antimicrobial resistance and biofilm formation, we also evaluated the potential anti-QS effect of these two compounds by using a biosensor strain. We found that both resveratrol and inclusion complex were able to inhibit the QS system, which could explain their anti-biofilm effect. The results showed that resveratrol could be used as antibacterial and anti-biofilm agent in the food industry, allowing an improve shelf life and an increase in food safety. Finally, since there has been a growing interest in the use of natural compounds for application in food products, we also evaluated the potential of coriander (Coriandrum sativum L.) essential oil and its major compound linalool to control Campylobacter. Both compounds showed a bactericidal effect against all the tested strains and we observed that the volatile compounds of the coriander essential oil also inhibited the growth of Campylobacter. Then, since biofilms are a growing problem in the food industry, we also evaluated the anti-biofilm activity of these compounds. Both coriander oil and linalool inhibited biofilm formation and promoted biofilm dispersion of Campylobacter biofilms. As previously described, we also studied the effect of these compounds on the QS system and we observed an anti-QS activity by inhibiting the violacein production. So, once more, this anti-QS activity could be associated with the anti-biofilm activity, since QS has been described to regulate the biofilm formation and development. Moreover, in addition to the antibacterial and anti-biofilm potential, we evaluated the antioxidant activity of coriander oil and linalool, since the oxidation process is also associated with the loss of food quality. We observed that both compounds showed an exceptional ability to inhibit lipid peroxidation. Those results demonstrate that these natural compounds could be used to control Campylobacter and as antioxidant to enhance food quality. In sum, in this thesis, we described the recent epidemiology of Campylobacter in Portugal, as well as its genetic diversity and worrying antibiotic resistance rates. In addition, we also demonstrated that resveratrol and coriander essential oil, which are both natural compounds, have the ability to reduce planktonic cells and biofilms of Campylobacter, including the multiresistant strains characterized in the first part of the work. Clearly, the results obtained in this work encourage the future use of these natural compounds to control Campylobacter

Tidal pools as nursery areas for marine fish larvae and juveniles: habitat use and trophic ecology

Tese de mestrado. Biologia (Ecologia Marinha). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2013As poças de maré, em zonas rochosas, são um importante refúgio e áreas de viveiro para as larvas e juvenis de peixes de várias espécies com interesse comercial. Os objectivos deste trabalho foram: 1) determinar a diversidade de espécies de larvas e juvenis de peixes marinhos que usam as poças de maré, em zonas rochosas, localizadas a oeste da costa portuguesa, 2) a sazonalidade do uso destes habitats por estas espécies, 3) a condição desses indivíduos através da determinação do índice K de Fulton, 4) a estrutura de tamanhos ao longo do ano, 5) a composição da dieta das larvas e juvenis dos peixes marinhos transientes mais abundantes, Diplodus sargus e Atherina spp., e o seu papel trófico nestes habitats. Para este estudo, foram seleccionadas quatro poças de maré em zona rochosa. Estas poças localizam-se em duas praias rochosas expostas (praia A e praia B) na costa ocidental Portuguesa. Cada poça foi caracterizada em termos de profundidade e área. As amostragens foram realizadas mensalmente, durante dois anos, de Janeiro de 2011 a Dezembro de 2012, na primeira baixa-mar do mês, com uma altura de cerca de 0,7 m, sempre em período de marés-vivas. A temperatura da água de cada poça de maré foi registada, bem como se procedeu à caracterização do substrato e formas de vida dominantes. As larvas e juvenis dos peixes marinhos transientes foram capturados utilizando camaroeiros de malha fina. Os peixes capturados foram colocados em sacos de plástico devidamente identificados e transportados numa pequena arca congeladora para o laboratório onde foram armazenados à temperatura de -20 °C. Os procedimentos laboratoriais incluíram a medição das larvas e dos juvenis dos peixes capturados com precisão de 1 mm, a sua pesagem com precisão de 0,01 g, excisão dos estômagos das larvas e juvenis, preservação em álcool a 70% e identificação dos conteúdos estomacais. O estágio de desenvolvimento das larvas pós-flexão das espécies de peixes transientes foi classificado como larva a, b, c, d e e para D. sargus e larva a, b e c, para Atherina spp.. Os procedimentos analíticos incluíram o cálculo de índices alimentares (índice numérico, índice volumétrico e índice de ocorrência) e do índice de condição K de Fulton. Neste estudo foram identificadas 6 espécies de peixes transientes que utilizam as poças de maré das zonas rochosas: o sargo legítimo, Diplodus sargus, o peixe-rei, Atherina spp., a taínha, Liza ramada, o bodião de Bailloni, Symphodus bailloni, o sargo-veado, Diplodus cervinus e a sardinha Europeia, Sardina pilchardus. Uma elevada variabilidade inter-anual, tanto nas densidades, como na altura de colonização das poças, foi observada. Enquanto que em 2011 as poças foram colonizadas em Março, em 2012 apenas foram colonizadas em Maio. O número de meses de colonização também foi inferior em 2012. A colonização das poças, tanto por D. sargus, como por Atherina spp. começou na Primavera e terminou no Outono. As densidades mais elevadas foram registadas para D. sargus em todas as poças, seguidas das de Atherina spp. com a excepção da poça 2 da praia B onde Atherina spp. estiveram ausentes. O número de espécies que colonizou as poças de maré variou entre dois (D. sargus e Atherina spp.) na poça 1 da praia A e cinco, tanto na poça 2 da praia A (D. sargus, Atherina spp., L. ramada, S. bailloni, D. cervinus), como na poça 1 da praia B (D. sargus, Atherina spp., L. ramada, D. cervinus and S. pilchardus). Os picos de densidade de D. sargus foram mais pronunciados na primavera enquanto que os de Atherina spp. foram mais pronunciados no Verão. Os picos de densidade foram ainda mais elevados em 2011 do que em 2012, quer para D. sargus, quer para Atherina spp. em todas as poças e meses. As espécies transientes raras (L. ramada, S. bailloni, D. cervinus e S. pilchardus) estiveram presentes principalmente na Primavera-Verão, com uma grande variabilidade entre poças, e num maior número de meses em 2012 do que em 2011. As larvas pós-flexão de D. sargus colonizaram as poças em Março e Abril de 2011 e em Maio de 2012, no primeiro estágio (larva a), os juvenis apareceram em Junho, em ambos os anos. Atherina spp., nas poças 1 e 2 da praia A, apareceram pela primeira vez no segundo estágio de desenvolvimento (larva b), enquanto que na poça 1 da praia B todos os estágios de desenvolvimento estiveram presentes, os juvenis começaram a aparecer em Junho de 2011 e Agosto de 2012. A condição de D. sargus aumentou ao longo do ano, em ambos os anos, com excepção da poça 2 da praia B. Para Atherina spp. a condição manteve-se na poça 2 da praia A e decresceu na poça 1 da praia B. O tamanho médio de D. sargus e Atherina spp. mostrou frequentemente um aumento contínuo da Primavera para o Outono, em ambos os anos. Relativamente à dieta de D. sargus, esta apresenta uma grande variabilidade de grupos de presas: algas, cnidários, platielmintes, entoproctas, anelídeos, crustáceos, insectos, acarídeos, moluscos e teleósteos. Por outro lado, Atherina spp. consumiram uma menor diversidade de presas que D. sargus, as suas presas incluem apenas crustáceos, insectos, acarídeos e moluscos. Sendo, tanto D. sargus como Atherina spp., consideradas espécies generalistas. A dieta das larvas a e b de D. sargus é principalmente constituída por copépodes harpacticoides, larvas de insecto da família Chironomidae e ostracodes; nas larvas c e nos juvenis os ostracodes foram substituídos, em termos de importância na dieta, por anfípodes e nas larvas d e e por insectos adultos da família Chironomidae. A dieta das larvas a, b e c e dos juvenis de Atherina spp. é principalmente constituída por copépodes harpacticoides, ostracodes e gastrópodes. Foram detectadas diferenças estatisticamente significativas entre as larvas e adultos de D. sargus. À medida que as larvas de D. sargus se desenvolvem, a proporção de copépodes harpacticoides na sua dieta diminui, sendo mínima nos juvenis. Além disso, os juvenis de D. sargus alimentam-se de algas, sendo D. sargus considerado uma espécie omnívora. Por outro lado, Atherina spp. não se alimentam de algas em nenhuma fase do seu desenvolvimento. Anfípodes e isópodes só começam a aparecer na dieta de D. sargus e Atherina spp. no segundo e terceiro estágio do desenvolvimento larvar, respectivamente. Este resultado pode estar relacionado com a dimensão destas presas relativamente ao tamanho das larvas destas espécies nos primeiros estágios de desenvolvimento. Ao longo do desenvolvimento ontogénico, tanto D. sargus como Atherina spp., consomem presas de maiores dimensões, o que pode estar relacionado com um aumento das necessidades energéticas. Os juvenis de D. sargus apresentam uma maior diversidade de itens alimentares que os estágios de desenvolvimento anteriores, incluindo, para além das algas, o isópode Cyathura sp., o quíton Lepidochitona cinerea (Linnaeus, 1767) e poliquetas. D. sargus e Atherina spp. são espécies oportunistas, como algumas espécies de peixes residentes nas poças de maré, tirando proveito da elevada disponibilidade de presas do ambiente em que vivem. Neste trabalho foi possível concluir que as espécies de peixes transientes D. sargus e Atherina spp. provavelmente utilizam as poças de maré de costas rochosas como zona de viveiro, dado as elevadas densidades das larvas e juvenis destes indivíduos nos meses mais favoráveis em termos de temperatura e de disponibilidade de alimento. Estudos futuros permitirão avaliar a importância da contribuição dos peixes que ocorrem nestes habitats durante a fase de pós-larva e juvenil para os mananciais de adultos das respectivas espécies.Transient marine fishes were sampled monthly in four tidal pools of a rocky reef, for two years, in the west Portuguese coast. Species diversity was higher than that found in previous studies in other parts of the world. The transient fish population was comprised of six species: Diplodus sargus, Atherina spp., Liza ramada, Symphodus bailloni, Diplodus cervinus and Sardina pilchardus. Fish abundance varied seasonally, between years and among pools, with peak numbers in spring and summer. D. sargus and Atherina spp. were present in most pools, from spring to autumn, with their size often increasing along this period, in both years. Rare species were present mostly in spring-summer. In most pools, the overall condition of D. sargus increased throughout the year, in both years; whereas in Atherina spp. it was maintained or decreased. The diet composition of larvae and juveniles of D. sargus and Atherina spp., was investigated. D. sargus consumed Algae, Cnidaria, Platyhelminthes, Entoprocta, Annelida, Crustacea, Insecta, Acari, Mollusca and Teleostei. Atherina spp. only consumed Crustacea, Insecta, Acari and Mollusca. The diet of D. sargus was composed mainly of harpacticoid copepods, chironomid larvae, ostracods, chironomid adults and amphipods; whereas the diet of Atherina spp. was composed mainly of Harpacticoid copepods, ostracods and gastropods. Along the ontogenetic development, the proportions and diversity of food items in the diet of D. sargus varied. The importance of harpacticoid copepods decreased with increasing size, while the importance of amphipods and isopods increased. The trophic role of larvae and juveniles of D. sargus and Atherina spp. occurring in tidal pools of rocky reefs is that of opportunistic consumers. The species richness, the high densities of larvae and juveniles, their continuous growth and the food items consumed, strongly emphasize the importance of these environments for larvae and juveniles of D. sargus and Atherina spp

Ganhos sensíveis aos cuidados de Enfermagem de Reabilitação a pessoa com alterações neurológicas, dependente no autocuidado - contexto domiciliário

O número de pessoas com alterações do foro neurológico, com idade superior a 65 anos de idade tem vindo a aumentar ao longo dos anos. A intervenção do enfermeiro de reabilitação visa a capacitação da pessoa para a execução dos seus autocuidados e a demonstração dos resultados sensíveis aos cuidados de enfermagem de reabilitação, permitindo comprovar a qualidade dos cuidados prestados. Este relatório desenvolveu-se através da aplicação de uma proposta estruturada de intervenção dos cuidados de enfermagem de reabilitação, seguindo a metodologia qualitativa de Robert Yin (estudos de caso múltiplos), a teoria de médio alcance de Lopes e o modelo de Fonseca e Lopes, baseado na teoria do défice do autocuidado de Orem. A intervenção realizada mostrou os ganhos sensíveis aos cuidados da enfermagem de reabilitação. Este relatório permitiu a demonstração da aquisição de competências na área de especialidade de enfermagem de reabilitação e de mestre em enfermagemThe number of people with neurological changes, over the age of 65 has been increasing over the years. The intervention of the rehabilitation nurse aims at training the person to perform their self-care and a demonstration of the results obtained in the rehabilitation nursing care, allowing to prove the quality of the care provided. This report is revealed through the application of a structured intervention proposal for rehabilitation nursing care, following the qualitative methodology of Robert Yin (multiple case studies), the medium-range theory Lopes and the model de Fonseca and Lopes, based on Orem's self-care deficit theory. The intervention shown in the gains associated with nursing. This report complements the demonstration of the acquisition of skills in the area of specialty of rehabilitation nursing and master in nursin

Do Private Labels Build Retailer Brand Equity? An Empirical Approach

This research is focused on retailer’s equity and brand equity, with an application to food retailer’s private labels. The study is supported on existing brand equity studies, namely Aaker, Keller, Yoo & Donthu and Pappu & Quester. The proposed conceptual model was tested through a survey to a sample of consumers, who do most of their food shopping in one of the two main Portuguese retailers. We obtained and validated a measurement and a structural model with appropriate model fit and factorial, convergent and discriminant validit

Finding new opportunities in the Lisbon market through Whitaker consumer lifestyle segmentation

A sample of 445 consumers resident in distinct Lisbon areas was analyzed through direct observations in order to discover each lifestyle’s current proportion, applying the Whitaker Lifestyle™ Method. The findings of the conducted hypothesis tests on the population proportion unveil that Neo-Traditional and Modern Whitaker lifestyles have the significantly highest proportion, while the overall presence of different lifestyles varies across neighborhoods. The research further demonstrates the validity of Whitaker observation techniques, media consumption differences among lifestyles and the importance of style and aesthetics while segmenting consumers by lifestyles. Finally, market opportunities are provided for firms operating in Lisbon