Controle biológico de Sclerotinia sclerotiorum e Fusarium oxysporum f. sp. phaseoli e promoção de crescimento do feijoeiro com Trichoderma

Tese (doutorado)—Univesidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Fitopatologia, 2011.O objetivo deste trabalho foi selecionar isolados de Trichoderma harzianum para supressão de Sclerotinia sclerotiorum e Fusarium oxysporum f.sp. phaseoli em sementes de feijão comum, promoção do crescimento inicial de plantas, rizocompetência e biocontrole do mofo branco e da murcha de fusário do feijoeiro, em condições de campo. A partir de 40 isolados pertencentes à Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia, selecionaram-se cinco isolados (CEN287, CEN 288, CEN289, CEN290 e CEN316), com bases em ensaios de cultura pareada e verificação de hiperparasitismo, para serem testados quanto aos itens apresentados. Para avaliar a capacidade de suprimir os patógenos em sementes, empregaram-se as cultivares ‘Jalo Precoce’ e ‘BRS Valente’ contaminadas por S. sclerotiorum e F. oxysporum, respectivamente, as quais foram microbiolizadas com os antagonistas. Para promoção de crescimento, os isolados foram avaliados em casa de vegetação (cv) e campo, com a rizocompetência avaliada em cv, mediante coleta de raízes. Para controle do mofo branco em campo, os antagonistas foram aplicados (2,4 x 1012 conídios ha-1) aos 42 e 52 DAS de feijão Pérola, em dois ensaios (2009 e 2010), com avaliações de severidade aos 72 DAS. Para a murcha de fusário, os isolados foram aplicados nos sulcos de plantio (1,2 x 1012 conídios ha-1), semeando-se a cultivar ‘BRS Valente’ (safras 2009/2010 e 2010). Aos 64 DAS, avaliou-se a severidade da murcha de fusário. Os isolados CEN287 e CEN316 foram efetivos na supressão de S. sclerotiorum e F. oxysporum em sementes (redução de 90 e 92%; e 40 e 31% de incidência, respectivamente). CEN289 e CEN290 se destacaram quanto à promoção do crescimento do feijoeiro em cv, com resultados reproduzidos em campo. CEN290 foi o melhor isolado nos testes de rizocompetência, colonizando 80-90% dos fragmentos das raízes coletadas. Nos testes em campo, CEN287, CEN316 foram os isolados que proporcionaram a maior redução da severidade do mofo branco nas duas safras (6,7 e 2,3%; 7,5 e 11,7%, respectivamente), comparativamente à testemunha (28,5 e 58,7%). Não houve diferença significativa para produtividade, cujos valores médios variaram entre 1820 e 2162 (2009) e 2285 e 3471 (2010) kg ha-1. Com relação ao controle da murcha de fusário, CEN287 e CEN316 apresentaram índices de murcha (24,3% e 21,0%, respectivamente) e inferiores à testemunha (40,4%) na safra 2010. Não houve diferença significativa para produtividade, cujos valores variaram entre 2878 e 3664 (safra 2009/2010) e 3336 e 3948 (safra 2010) kg ha-1 .The objective of this study was to select isolates of Trichoderma harzianum for suppression of Sclerotinia sclerotiorum and Fusarium oxysporum f.sp. phaseoli in common bean seeds, initial growth-promoting activity, rhizosphere competence and biocontrol of white mold and Fusarium wilt in common bean, under field conditions. As from 40 isolates belonging to the Embrapa Genetic Resources and Biotechnology, five T. harzianum isolates were selected (CEN287, CEN288, CEN289, CEN290 and CEN316) based on hyperparasitism and dual culture assays, aiming to evaluate this isolates as the presented goals. Aiming to evaluate the ability to suppress pathogens in seeds, were used Jalo Precoce and BRS Valente cultivars contaminated with S. sclerotiorum and F. oxysporum, respectively, which were treated with the antagonists. For plant growth promotion, the isolates were evaluated in greenhouse and field conditions, with rhizosphere competence evaluated in greenhouse, using collected roots. Concerning the effect of the isolates in controlling white mold under field conditions, antagonists were applied (2.4 x 1012 conidia ha-1) at 42 and 52 DAS on ‘Perola’ cultivar, in trials conducted in 2009 and 2010, with evaluations of severity (72 DAS). In field testes with Fusarium wilt, isolates were sprayed in the furrows (1.2 x 1012 conidia ha-1), using ‘BRS Valente’ cultivar (2009/2010 and 2010). At 64 DAS, Fusarium wilt severity was evaluated. CEN287 and CEN316 isolates were effective in suppressing S. sclerotiorum and F. oxysporum on seeds (reduction of 90 and 92%, and 40 and 31% of incidence, respectively). CEN289 and CEN290 stood out for promoting the growth of common bean plants in the greenhouse experiments, with results confirmed in the field. CEN290 was the best isolate in the rhizosphere competence assays, colonizing 80-90% of collected root fragments. In field assays, CEN287 and CEN316 were the isolates that provided the greatest reduction of the white mold severity in the two harvests (6.7 and 2.3%; 7.5 and 11.7%, respectively), compared to control (28.5 and 58.7%). No significant difference was verified for yield, which ranged from 1820 to 2162 kg ha-1 and from 2285 to 3471 kg ha-1, for 2009 and 2010 seasons, respectively. Regarding the control of Fusarium wilt, CEN287 and CEN316 presented wilt indexes (24.3% and 21.0%, respectively) and lower in comparison to the control (40.4%) in 2010 season. There were no significant differences in yield, with values ranging between 2,878 to 3,664 kg ha-1 (harvest 2009/2010) and 3,336 to 3,948 (harvest 2010) kg ha-1

Incidência e caracterização morfológica de Cladosporium herbarum em feijão comum cv. ‘Pérola’

Cladosporium spp. has been associated to the common bean seeds during storage, causing losses in the vigor and germination. The aim of this study was to estimate the incidence and perform micromorphological characterization of Cladosporium herbarum found on seeds of common bean cv. ‘Pérola’ in Ipameri, Goiás State, Brazil. Common bean seeds were obtained from plantations located at experimental areas of the Universidade Estadual de Goiás (UEG), Ipameri, were submitted to health analysis by the blotter test method and, later examined under a stereomicroscope aiming to prepare semi-permanent slides mounting by removing fungal mycelia and structures found on the infected plant tissue. After microscopic analysis of the cultural characteristics and measurement of the conidia, it was verified that they measured (length × width) of 7.2–10.4 × 3.6–4.2 μm (8.1 × 4 μm). These characteristics indicated that the fungus is C. herbarum, which occurred with an incidence of 59.5% on naturally contaminated seeds. Preparations on lactic acid, containing the structures and fungal spores were deposited in the slide collection of plant pathogens of the UEG. The common bean ‘Pérola’ provide high incidence of C. herbarum on the seeds.O fungo Cladosporium está associado às sementes de feijão comum durante o armazenamento, sendo capaz de infligir danos na germinação e vigor. O objetivo deste trabalho foi estimar a incidência e realizar a caracterização micromorfológica de Cladosporium herbarum encontrado em sementes de feijão comum cv. ‘Pérola’ no município de Ipameri, Goiás, Brasil. Para tanto, as sementes provenientes de plantios localizados em áreas experimentais da Universidade Estadual de Goiás (UEG), campus Ipameri, foram submetidas a análise sanitária pelo método blotter test e examinadas em estereomicroscópio para confecção de lâminas semi-permanentes para observação microscópica, mediante remoção de micélio e estruturas fúngicas encontradas sobre o tecido vegetal infectado. Após observações das características culturais e mensuração dos conídios, verificou-se que estes mediam (comprimento × largura) 7,2–10,4 × 3,6–4,2 μm (média 8,1 × 4 μm). Estas características indicaram o fungo tratar-se de C. herbarum, o qual ocorreu com incidência de 59,5% nas sementes naturalmente contaminadas. As preparações em ácido láctico contendo estruturas e esporos do fungo foram depositadas no Laminário Fitopatológico da UEG. A cultivar de feijão ‘Pérola’ proporciona alta incidência de C. herbarum nas sementes

Aspectos relevantes para o conhecimento de Cephaleuros sp.: morfologia, fisiologia e ecologia

This review aimed to perform a survey about plant parasitic algae, mainly the genus Cephaleuros sp., focusing on the most relevant aspects: morphology, physiology and ecology. Algae of Trentepohliaceae family has six genus, being Cephaleuros sp. of great importance for being parasites of plants and cause orange or ferruginous leaf spots with felt texture, mainly in the basal part of the plants. The morphological characterization of Cephaleuros sp. is frequently performed for identification, but there is a lack of standardization of characters that need to be measured. There is a difficulty in the cultivation of algae in culture medium due to limited nutrition knowledge and its growth physiology. The asexual reproduction of Trentepohliaceae family organisms is by four-flagelate zoospores produced in sporangia. High temperature and humidity are ideal for breaking the envelope membrane of sporangia and release of zoospores in the environment. The management of this pathogen consists of integrating cultural methods with the use of fungicides.Esta revisão objetivou realizar um levantamento sobre algas parasitas de plantas, principalmente o gênero Cephaleuros sp., enfocando os aspectos mais relevantes: morfologia, fisiologia e ecologia. As algas da família Trentepohliaceae possuem seis gêneros, sendo Cephaleuros de grande importância, por ser parasita de plantas e causar manchas foliares alaranjadas ou ferruginosas com textura de feltro, principalmente na parte basal das plantas. A caracterização morfológica de Cephaleuros sp. é frequentemente realizada para identificação, sendo que existe uma falta de padronização dos caracteres que necessitam ser mensurados. Há dificuldade no cultivo da alga em meio de cultura devido a um conhecimento nutricional limitado e de sua fisiologia de crescimento. A reprodução assexuada de organismos da família Trentepohliaceae é por zoósporos quadriflagelados produzidos em esporângio. Temperatura e umidade elevadas são ideais para o rompimento da membrana envoltória do esporângio e liberação dos zoósporos no ambiente. O manejo deste patógeno consiste na integração de medidas culturais com o uso de fungicidas

GROWTH PROMOTION OF Schizolobium parahyba var. amazonicum SEEDLINGS USING STRAINS OF Trichoderma spp. UNDER PHOSPHORUS RATES

Fungi of the genus Trichoderma are significantly important for promoting the growth of different plant species. Moreover, they have been connected to high nutrient absorption. Thus, the objective of this study was to evaluate the initial development of seedlings of Brazilian firetree [Schizolobium parahyba var. amazonicum (Huber ex Ducke) Barneby] with application of Trichoderma spp. and phosphorus (P) rates. A randomized block design with seven replications was used, in a 4×5 factorial arrangement (strains and P rates); the P rates were applied using 0, 64, 128, 192, and 256 mg dm-3 of P2O5 (triple superphosphate). The characteristics evaluated were plant height (PH), stem diameter (SD), leaf fresh weight (LFW), leaf dry weight (LDW), stem fresh weight (SFW), stem dry weight (SDW), shoot fresh weight (SHFW), and shoot dry weight (SHDW). The results showed that Trichoderma spp. promotes satisfactory conditions for growing Schizolobium parahyba var. amazonicum, and the strain Trichoderma harzianum IBLF 006 WP at P2O5 rate of approximately 128 mg dm-3provided the highest increase in the evaluated variables

Antagonismo de Trichoderma harzianum a Sclerotium rolfsii nas culturas do feijoeiro e soja.

Os fungicidas sintéticos embora sejam eficientes no controle de fungo fitopatogênicos, apresentam potencial efeito tóxico à saúde humana e ao meio ambiente. Nesse contexto, o controle biológico tem sido utilizado como alternativa para reduzir os prejuízos causados por Sclerotium rolfsii em diversas culturas de importância econômica no Brasil. Sendo assim, objetivou-se com este trabalho estudar o potencial de 23 isolados de Trichoderma harzianum provenientes de solo de Cerrado como agente de controle biológico de S. rolfsii, importante patógeno nas culturas do feijoeiro e soja. A ação antagonista dos isolados foi verificada por meio do pareamento de culturas sob três temperaturas (22ºC, 25ºC e 28ºC) e em experimentos conduzidos em casa de vegetação, com as culturas de feijoeiro e soja. Os isolados CEN155, CEN158, CEN169, CEN170, CEN194 e CEN197 destacaram-se quanto à inibição do crescimento micelial de S. rolfsii, nas três temperaturas empregadas nos experimentos in vitro, ocupando pelo menos 66% da superfície do meio em placa de Petri (90 mm) e também na supressão in vivo de S. rolfsii nos experimentos com as duas culturas em casa de vegetação, proporcionando percentual médio de plantas sadias acima de 88%, aos 15 dias após as inoculações de patógeno e antagonistas no solo

Indução de tolerância à murcha bacteriana em híbridos de tomates por aplicação de giberelina

The bacterial wilt (Ralstonia solanacearum) is a serious problem to produce Solanaceae plants in several Brazilian regions, mainly under protected environments. The gibberellin (GA3) is a hormone that has its proven efficiency to increase several traits in tomato plants, however, there is no study about the potential of this hormone for the induction of disease tolerance. Thus, the objective of the work was to study the effect of the application of gibberellin to increase tolerance in tomato hybrids to bacterial wilt. The experimental design was a randomized block design, in a factorial scheme 8 x 5 (hybrids and application times), with three replications. The variables of plant height, number of flowers, fresh shoot mass, transverse diameter of fruits, number of fruits and fruit weight were studied after 120 days of sowed. It was verified that there is significant difference for all variables studied and for the sources of variation. The gibberellin can induce increased tolerance in tomato plants to bacterial wilt, however, the time of application is dependent on the hybrid and the desired variable to obtain the best performance. The application on the 24th day, after planting, was the one that presented the high gains in the different hybrids and variables, followed by the 32nd day.A murcha-bacteriana (Ralstonia solanacearum) é um sério problema para a produção de solanáceas em diversas regiões brasileiras, principalmente, sob ambientes protegidos. A giberelina (GA3) é um hormônio que tem sua eficiência comprovada para o aumento de diversas características em plantas de tomate, porém não há estudo a respeito do potencial desse hormônio para a indução de tolerância à doença. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar o efeito da aplicação de giberelina para aumentar a tolerância em híbridos de tomate à murcha bacteriana. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, em esquema fatorial 8x5 (híbridos e épocas de aplicação), com três repetições. Foram estudadas as variáveis de altura de planta, número de flores, diâmetro transversal dos frutos, massa fresca da parte aérea, número de frutos e peso dos frutos após 120 dias do plantio. Verificou-se que existe diferença significativa para todas as variáveis estudadas e, também, para as fontes de variação. A giberelina é capaz de induzir aumento da tolerância em plantas de tomate à murcha-bacteriana, entretanto a época de aplicação depende do híbrido e da variável desejada para se obter o melhor desempenho. A aplicação feita no 24° dia, após o plantio, foi a que mais apresentou ganhos elevados nos diferentes híbridos e variáveis, seguido do 32° dia

Trichoderma harzianum no tratamento de sementes de Cladosporium herbarum, Sclerotinia sclerotiorum e no aumento de crescimento do feijoeiro no Brasil

O potencial de uso de Trichoderma para o controle biológico de patógenos em sementes, assim como no controle de doenças do feijoeiro em condições de campo, tem sido constatado. Além de possuir diferentes mecanismos de controle, tais como antibiose, competição e hiperparasitismo, o fungo Trichoderma possui habilidade para colonizar a rizosfera e as radículas das plântulas, podendo também atuar na promoção do crescimento inicial do feijoeiro. Esta revisão tem por finalidade levantar as recentes pesquisas realizadas no Brasil, acerca deste fungo como agente de biocontrole de Cladosporium sp., um importante patógeno de sementes e de Sclerotinia sclerotiorum, causador do mofo branco, abordando também seu efeito promotor sobre o crescimento do feijoeiro

Resistance of commercial and wild genotypes of Passiflora spp. to Meloidogyne incognita under greenhouse conditions

Os fitonematóides estão entre os patógenos de solo de maior importância para a cultura do maracujazeiro. Portanto, levando em conta a escassez de medidas viáveis de controle e, diante da variabilidade genética em Passiflora spp. parece promissor o uso de resistência genética para controlar esses patógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar a reação de diferentes genótipos de Passiflora a uma população do nematóide de galhas sob condições de casa de vegetação. Nove genótipos (P. capsularis, P. setacea, P. nitida, P. alata (N), P. alata (J), BRS Sol do Cerrado, BRS Gigante amarelo, BRS Ouro vermelho e maracujá azedo obtido no comércio local) foram avaliados para resistência a M. incognita seguindo o delineamento inteiramente ao acaso, avaliando-se os nove genótipos na presença e ausência do nematóide, empregando-se 10 e 4 repetições, respectivamente. Cada repetição foi constituída de uma planta em vaso contendo solo esterilizado. Após 96 dias do plantio das mudas, as plantas foram inoculadas com 2200 ovos/juvenis (J2) do nematóide. Após 62 dias da inoculação foram avaliadas as seguintes variáveis: comprimento e diâmetro da parte aérea, número de folhas, massa fresca e seca da parte aérea, massa fresca da raiz, número de galhas por planta, número de massas de ovos por planta, número de ovos por massa de ovos e o fator de reprodução (FR=Pf/Pi). Todos os genótipos, de acordo com o fator de reprodução, comportaram-se como resistentes. P. capsularis, mesmo não permitindo multiplicação adequada do nematóide, apresentou sintomas radiculares e perda de vigor da parte aérea, na presença de M. incognita. _______________________________________________________________________________ ABSTRACTPlant-parasitic nematodes are among the soil pathogens of greatest importance for cultivation of passion fruit. Therefore, taking into account the scarcity of feasible measures to control and, given the genetic variation in Passiflora spp., it looks promising the use of genetic resistance to control these pathogens. This study aimed to evaluate the reaction of nine different commercial and wild genotypes of Passiflora to a population of the root-knot nematode M. incognita under greenhouse conditions. The evaluations were carried out following a complete randomized design, wherein nine genotypes (P. capsularis, P. setacea, P. nitida, P. alata (N), P. alata (J), BRS Sol do Cerrado, Gigante amarelo, BRS Ouro vermelho and commercial) were evaluated in the presence and absence of the nematode, using 10 and 4 replications, respectively. The experiment unit was one plant per pot, containing sterilized soil. Ninety-six days after planting, the plants were inoculated with 2200 J2 of the nematode. Sixty-two days after inoculation, the experiment was evaluated as follows: length and diameter of stem; number of leaves, fresh and dry shoot weight, fresh root weight, number of galls per plant, number of egg mass per plant, number of eggs per egg mass and reproductions factor (RF). According to the factor of reproduction, all plant genotypes reacted as resistant. However, P. capsularis presented galls on the roots and loss of the shoot vigor, in the presence of M. incognita

Controle biológico do mofo-branco por Trichoderma harzianum em feijão em condições de campo

O objetivo deste trabalho foi avaliar isolados de Trichoderma harzianum para o controle biológico do mofo-branco em feijão (Phaseolus vulgaris). Cinco isolados foram avaliados para o biocontrole do mofo-branco em feijão 'Pérola', em condições de campo, nos anos agrícolas 2009 e 2010. Um isolado comercial (1306) e um tratamento testemunha foram incluídos. Aplicações foliares a 2x109 conídios mL-1 foram realizadas aos 42 e 52 dias após a semeadura (DAS), em 2009, e aos 52 DAS em 2010. Os isolados CEN287, CEN316 e 1306 reduziram o número de apotécios por metro quadrado de Sclerotinia sclerotiorum, em comparação à testemunha, nos dois anos agrícolas. CEN287, CEN316 e 1306 reduziram a severidade do mofo-branco no período experimental, quando comparados à testemunha.The objective of this work was to evaluate Trichoderma harzianum isolates for biological control of white mold in common bean (Phaseolus vulgaris). Five isolates were evaluated for biocontrol of white mold in 'Perola' common bean under field conditions, in the 2009 and 2010 crop seasons. A commercial isolate (1306) and a control treatment were included. Foliar applications at 2x109 conidia mL-1 were performed at 42 and 52 days after sowing (DAS), in 2009, and at 52 DAS in 2010. The CEN287, CEN316, and 1306 isolates decreased the number of Sclerotinia sclerotiorum apothecia per square meter in comparison to the control, in both crop seasons. CEN287, CEN316, and 1306 decreased white mold severity during the experimental period, when compared to the control

Biocontrol of seed pathogens and growth promotion of common bean seedlings by Trichoderma harzianum

O objetivo deste trabalho foi avaliar isolados de Trichoderma harzianum quanto ao biocontrole de patógenos veiculados por sementes de feijoeiro comum, à promoção do crescimento de plantas e à rizocompetência. Cinco isolados foram avaliados e comparados com um isolado comercial (Ecotrich), com Carboxin+Thiram, e com um controle negativo. Sementes de feijão da cultivar Jalo Precoce, contaminadas por Aspergillus, Cladosporium e Sclerotinia sclerotiorum, foram microbiolizadas com antagonistas e, em seguida, foram realizados testes de sanidade de sementes. Os isolados foram avaliados em substrato autoclavado e em condições de campo. Aos 10 dias após o semeio (DAS), mediu-se o comprimento das plantas. Para os testes de rizocompetência, os isolados foram pulverizados sobre caixas contendo areia lavada autoclavada, e a colonização das raízes foi avaliada aos 10 DAS, tendo-se utilizado cinco plantas por caixa. Os isolados mais efetivos nos testes de sanidade de sementes foram: CEN287 e CEN289 para controle de Aspergillus; o isolado comercial para Cladosporium; e CEN287 e CEN316 para S. sclerotiorum. Os isolados CEN289 e CEN290 promoveram o crescimento do feijoeiro em casa de vegetação e em campo. O tratamento de sementes com T. harzianum reduz a incidência de Aspergillus, Cladosporium e S. sclerotiorum em sementes do feijoeiro comum 'Jalo Precoce'.The objective of this work was to evaluate isolates of Trichoderma harzianum regarding biocontrol of common bean seed-borne pathogens, plant growth promotion, and rhizosphere competence. Five isolates of T. harzianum were evaluated and compared with commercial isolate (Ecotrich), Carboxin+Thiram, and an absolute control. Bean seeds of the cultivar Jalo Precoce, contaminated with Aspergillus, Cladosporium, and Sclerotinia sclerotiorum, were microbiolized with antagonists, and seed health tests were carried out. Isolates were evaluated on autoclaved substrate and in field conditions. Ten days after sowing (DAS), plant length was measured. To test rhizosphere competence, isolates were applied in boxes containing autoclaved washed sand, and root colonization was evaluated at 10 DAS, using five plants per box. The most effective isolates in the seed health tests were: CEN287 and CEN289 to control Aspergillus; the commercial isolate to control Cladosporium; and CEN287 and CEN316 to control S. sclerotiorum. Isolates CEN289 and CEN290 promoted bean growth in greenhouse and field. Seed treatment with T. harzianum reduces the incidence of Aspergillus, Cladosporium, and S. sclerotiorum in 'Jalo Precoce' common bean seeds