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    Caracterização funcional de um sistema de bombas de efluxo na virulência e resistência de Arcobacter butzleri

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    O género Arcobacter foi proposto pela primeira vez em 1991 por Vandamme e, até à data, compreende 29 espécies reconhecidas, incluindo Arcobacter butzleri. Esta espécie é considerada o quarto organismo Campylobacter-like mais frequentemente encontrado em amostras de fezes diarreicas no homem, sendo responsável por causar cólicas abdominais, náusea e diarreia. De facto, foi incluída na lista de microrganismos considerados um sério risco para a saúde humana pela Comissão Internacional de Especificações Microbiológicas de Alimentos. Arcobacter spp. tem demonstrado um aumento da resistência a vários antimicrobianos, que podem estar associados a diversos mecanismos, um dos quais através das bombas de efluxo. As bombas de efluxo são estruturas proteicas que representam importantes elementos pertencentes ao repertório microbiano das bactérias e são consideradas responsáveis pela resistência a muitas substâncias. Em bactérias de Gram-negativo, as bombas de efluxo da família resistance-nodulation-division cell (RND) têm um papel relevante na resistência a múltiplos fármacos. Vários genes que codificam para este tipo de sistema foram identificados no genoma de A. butzleri. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de mutantes para a bomba de efluxo do tipo RND (AreDEF) na resistência e virulência de A. butzleri. Como tal, foram construídos mutantes, usando duas estirpes diferentes de A. butzleri, DQ40A1 e AB28/11, por deleção do gene areE do operão da bomba de efluxo. Em seguida, foram testados os efeitos desta deleção na resistência a antimicrobianos, crescimento, robustez bacteriana, motilidade, hidrofobicidade e sobrevivência sob condições adversas, como stress oxidativo, osmótico, biliar e resistência na presença de clorexidina. Quando comparados os mutantes com as estirpes parentais correspondentes, o mutante AB28/11?areE apresentou um aumento na suscetibilidade a cefalosporinas, aminoglicosídeos, tetraciclina, macrólidos, levofloxacina, colato de sódio e cloreto de benzalcónio; no entanto, este fenótipo não foi observado para o mutante DQ40A1?areE. Não foram observadas diferenças no crescimento bacteriano entre as estirpes parentais e mutantes; contudo, A. butzleri AB28/11?areE apresentou uma redução na robustez quando comparada com a estirpe parental. Ambas os mutantes mostraram alterações no valor da hidrofobicidade, porém apenas AB28/11?areE apresentou uma motilidade diminuída. Além disso, A. butzleri AB28/11?areE exibiu um aumento na suscetibilidade às condições de stress testadas quando comparada com a correspondente estirpe parental, mas A. butzleri DQ40A1?areE mostrou alteração apenas em relação ao stress biliar. No ensaio de sobrevivência à clorexidina, verificou-se uma tendência para o aumento da suscetibilidade para ambos os mutantes em estudo. Em conclusão, este trabalho mostrou um potencial papel da bomba de efluxo AreDEF na resistência e virulência de Arcobacter butzleri, no entanto mais estudos serão necessários.The Arcobacter genus was first proposed in 1991 by Vandamme, and to date comprises 29 recognized species, including Arcobacter butzleri. This species is considered the fourth most frequent Campylobacter-like organism found in human diarrheic stool samples, being responsible for causing abdominal cramps, nausea and diarrhea. In fact, it was included on the list of microorganisms considered a serious hazard to human health by the International Commission on Microbiological Specifications for Foods. Arcobacter spp. is showing an increased resistance to various antimicrobials, which can be associated with several mechanisms, such as efflux pumps. Efflux pumps are protein structures representing important elements belonging to the microbial repertoire of bacteria and are considered responsible for the resistance to many substances. In Gram negative bacteria, efflux pumps from the resistance nodulation cell division (RND) family have a relevant role for multidrug resistance. Various genes coding for this type of systems were identified in the genome of A. butzleri, among them the complete operon AreDEF. The aim of this study was to examine the effect of areE mutants in resistance and virulence of A. butzleri. So, to evaluate the role of AreDEF, we constructed mutants, using two different A. butzleri strains, DQ40A1 and AB28/11, by deletion of the gene areE from the efflux pump operon. Next, the effect on resistance to antimicrobials, growth, strain fitness, motility, hydrophobicity, and survival under adverse conditions, such as oxidative stress, osmotic, bile and survival to chlorhexidine were tested. When we compared mutants with the correspondent wild-type strains, AB28/11?areE displayed an increase in the susceptibility to cephalosporins, aminoglycosides, tetracycline, macrolides, levofloxacin, sodium cholate and benzalkonium chloride; nonetheless the same profile was not observed for A. butzleriDQ40A1?areE. No differences in growth kinetics were recorded between parental and mutant strains; however, the mutant A. butzleri AB28/11?areE showed a reduction in the fitness cost when compared with the parental wild-type strain. Both mutants had modification in the value of hydrophobicity, however only AB28/11?areE had a decreased motility. In addition, A. butzleri AB28/11?areE exhibited higher susceptibility to all stresses when compared to its correspondent parental strain, but A. butzleri DQ40A1?areE showed alteration only concerning bile stress. In the chlorhexidine assay, a tendency for increased susceptibility was observed for both strains, although more studies are needed. In conclusion, the results obtained point to a potential role of the efflux pump AreDEF in the resistance and virulence of Arcobacter butzleri

    Terapêutica farmacológica na depressão do adulto e equivalentes teraoêuticos em ambiente hospitalar

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    Dissertação de mestrado, Ciências Farmacêuticas, Faculdade de Ciências e Tecnologia, Universidade do Algarve, 2014A depressão é uma doença com elevada prevalência nos países ocidentais, estimando -se que cerca de 60 milhões pessoas/ano são diagnosticadas com perturabção depressiva major. A perturbação depressiva é caracterizada pela alteração negativa do humor, tristeza e astenia, aspetos que fazem da depressão uma das doenças mais incapacitantes. É uma doença multifatorial que apresenta várias opções de tratamento que podem recorrer à farmacoterapia, à psicoterapia ou à combinação das duas

    Effect of Atmospheric Conditions on Pathogenic Phenotypes of Arcobacter butzleri

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    This article belongs to the Special Issue Foodborne Pathogens: Infections and Pathogenesis.Arcobacter butzleri is an emergent gram-negative enteropathogenic bacterium widespread in different environments and hosts. During the colonization of the gastrointestinal tract, bacteria face a variety of environmental conditions to successfully establish infection in a new host. One of these challenges is the fluctuation of oxygen concentrations encountered not only throughout the host gastrointestinal tract and defences but also in the food industry. Oxygen fluctuations can lead to modulations in the virulence of the bacterium and possibly increase its pathogenic potential. In this sense, eight human isolates of A. butzleri were studied to evaluate the effects of microaerobic and aerobic atmospheric conditions in stressful host conditions, such as oxidative stress, acid survival, and human serum survival. In addition, the effects on the modulation of virulence traits, such as haemolytic activity, bacterial motility, biofilm formation ability, and adhesion and invasion of the Caco-2 cell line, were also investigated. Overall, aerobic conditions negatively affected the susceptibility to oxygen reactive species and biofilm formation ability but improved the isolates’ haemolytic ability and motility while other traits showed an isolate-dependent response. In summary, this work demonstrates for the first time that oxygen levels can modulate the potential pathogenicity of A. butzleri, although the response to stressful conditions was very heterogeneous among different strains.This work was developed within the scope of the CICS-UBI projects UIDB/00709/2020 and UIDP/00709/2020, funded by national funds through the Portuguese Foundation for Science and Technology/MCTES.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

    Determinantes de saúde e estilo de vida em estudantes do ensino superior

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    info:eu-repo/semantics/publishedVersio

    Satisfação dos Utentes da Unidade de Saúde de Tondela

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    A qualidade dos serviços de saúde prestados tem uma importância fulcral na satisfação dos utentes em geral, uma vez que as suas opiniões são baseadas nas experiências. Com este estudo pretendemos identificar o grau de satisfação dos utentes, utilizando os indicadores EUROPEP e os das áreas específicas; determinar em que medida as variáveis do estado de saúde influenciam a satisfação dos utentes; descrever o nível de satisfação dos utentes em relação às dimensões de enfermagem, médicas, administrativas e funcionamento geral da Unidade de Saúde; determinar em que medida as variáveis sociodemográficas influenciam a satisfação; compreender de que modo os fatores sociodemográficos interferem na satisfação dos utentes face aos cuidados de saúde; compreender a influência das variáveis do estado de saúde sobre a satisfação e promover a melhoria dos cuidados de saúde aos utentes da Unidade de Saúde de Tondela. Este é um estudo quantitativo, descritivo-correlacional e transversal, envolvendo uma amostra de 1343 utentes (idade média=53,32 anos; desvio padrão=19,498 anos). Fez-se a colheita de dados com base no EUROPEP. Concluiu-se que não existem diferenças significativas entre o sexo e a satisfação dos utentes. Relativamente à idade e à satisfação, verificou-se que existem diferenças significativas entre os indicadores, Continuidade e Cooperação, Atitudes após Experiência e Dimensão Interpessoal e Instrumental; a Pertinência revela diferenças altamente significativas. Quanto ao nível de literacia, existem diferenças bastante significativas no indicador Relação de Ajuda e diferenças altamente significativas nos indicadores Profissionais e Pertinência. Em relação ao estado geral de saúde e satisfação, constatou-se que não existem diferenças significativas

    CHARACTERIZATION OF SPONTANEOUS NUCLEI OF Clidemia urceolata DC. IN DISTURBED AREAS OF THE ATLANTIC FOREST

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    A Clidemia urceolata DC. e uma especie pioneira da familia Melastomataceae, que coloniza espontaneamente pastagens abandonadas. Ela forma nucleos de tamanhos variados, onde podem ser observadas outras especies de grupo sucessional mais avancado, podendo constituir uma especie facilitadora. O presente estudo objetivou quantificar e caracterizar os nucleos na bacia hidrografica do rio Barra Mansa - RJ (6.839 ha) (22\ub032'40''22\ub040'60''S e 44\ub012'44\ub006'20''W), tributario do rio Paraiba do Sul. Eles foram georreferenciados e caracterizados quanto ao porte dos individuos de Clidemia urceolata (baixo: H < 0,60 m; medio: 0,60 < H < 1,20 m; e alto: H 651,20 m), adensamento (esparso, medio e adensado), area do nucleo (pequeno: 64500 m2; medio: 500 a 2000 m2; e grande: 652000 m2) e estagio de desenvolvimento (inicial, intermediario e avancado). Foram identificados 26 nucleos, totalizando 7,9 ha. Desses, houve predominio de nucleos com individuos de porte medio (76,92%), pouco adensado (42,31%), tamanho grande (42,31%) e estagio intermediario de desenvolvimento (46,16%), evidenciando que se encontram em formacao, e que a estrategia de colonizacao, reproducao e dispersao da Clidemia urceolata pode contribuir para dinamizar a sucessao ecologica, podendo atuar como agente espontaneo de restauracao florestal das areas perturbadas.Clidemia urceolata DC. is a pioneer species of the family Melastomataceae which colonizes spontaneously abandoned pastures. It forms nuclei of different sizes, where other species of advanced successional groups can be observed, constituting a facilitative species. The present study aimed to quantify and characterize the nuclei in the watershed of Barra Mansa river, Rio de Janeiro state (6.839 ha) (22\ub032'40''22\ub040'60''S e 44\ub012'44\ub006'20''W), which is a tributary of Paraiba do Sul river. They were geographically referenced and characterized regarding to the size of Clidemia urceolata individuals (low: H <0,60 m; medium: 0,60 <H <1,20 m; and high: H 651,20m), densification (scattered, medium and dense), area of the nuclei (small: 64500 m2; medium: 500 to 2000 m2; and large: 652000 m2) and development stage (initial, intermediate and advanced). 26 nuclei were identified, adding up to 7,9 ha. There was the prevalence of nuclei with medium sized individuals (76,92%), slightly dense (42,31%), big area (42,31%) and intermediate developmental stage (46,16%), evidencing that they are in progress and that colonization strategy, reproduction and dispersion of Clidemia urceolata can contribute to boost the ecological succession, being able to act as a spontaneous agent of forest restoration of the disturbed areas

    Produção de forragem e atributos químicos e físicos do solo em sistemas integrados de produção agropecuária

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    The objective of this work was to evaluate the forage production of 'Marandu' palisade grass (Urochloa brizantha) and the soil chemical and physical attributes in integrated agricultural systems. Croplivestock and crop-livestock-forest integrated systems were evaluated in single (200 trees per hectare) and triple planting lines (500 trees per hectare), besides the exclusive planting of eucalyptus. Soil mechanical resistance to penetration and forage production did not differ between systems. Soil-water infiltration was lower in the agroforestry systems. After two years of the implementation of the systems, the levels of organic matter, calcium, magnesium, and phosphorus increased in the 0–20-cm soil depth.O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de forragem de capim-marandu (Urochloa brizantha) e os atributos químicos e físicos do solo, em sistemas integrados de produção. Foram avaliados os sistemas de integração lavoura-pecuária e lavoura-pecuária-floresta, em linhas simples (200 árvores por hectare) e linhas triplas (500 árvores por hectare), além do plantio exclusivo de eucalipto. A resistência mecânica à penetração do solo e a produção de forragem não diferiram entre os sistemas. A infiltração de água no solo foi menor nos sistemas agrossilvipastoris. Após dois anos da implantação dos sistemas, os teores de matéria orgânica, cálcio, magnésio e fósforo, na camada de 0–20 cm, aumentaram
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