605 research outputs found

    Sejam racionais!

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    Trata-se de uma história para crianças e jovens que versa os números racionais

    Long-term hypercaloric diet consumption exacerbates age-induced metabolic dysfunction: Beneficial effects of CSN denervation

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    RESUMO: A crescente incidência de distúrbios metabólicos, como resistência à insulina, diabetes tipo 2 (T2D), dislipidemia, doença hepática gordurosa não alcoólica (NAFLD), obesidade e síndrome metabólica (SM), atingiu proporções epidêmicas. A expectativa de vida está a aumentar mundialmente e o envelhecimento está associado a uma alta prevalência desses distúrbios, sendo crucial parar esta epidemia. Os corpos carotídeos (CB) são quimiorreceptores periféricos, classicamente definidos como sensores de O2 implicados na homeostase energética. Trabalhos anteriores mostraram em animais jovens com 25 semanas de dietas hipercalóricas, que a abolição da atividade do CB restaurava a sensibilidade à insulina e a tolerância à glucose. Sabendo que a idade contribui para a resistência à insulina, o objetivo geral deste trabalho foi investigar em ratos velhos o impacto de dietas hipercalóricas perlongadas e abolição da atividade do CB, através da ressecção do nervo do seio carotídeo (CSN) na homeostase da glucose. Sabendo que a NAFLD é uma das principais comorbidades associadas ao dismetabolismo, focamos no metabolismo hepático. Ratos idosos foram alimentados com dieta hipercalórica (HFHSu) por 44 semanas, após esse período, metade foi submetido à ressecção do CSN e a outra à cirurgia sham. Os animais foram acompanhados durante 9 semanas, avaliando-se a sensibilidade à insulina, tolerância à glucose, glicemia em jejum, variação de peso e gordura. Após o procedimento terminal o perfil lipídico, conteúdo lipídico hepático e análise hepatocelular foram avaliados. A abolição da atividade CB/CSN em ratos idosos reduziu o ganho de peso, restaurou a sensibilidade à insulina e a tolerância à glucose, diminuiu os triglicerídeos plasmáticos e teve um impacto benéfico na função hepática. Concluindo, este estudo demonstrou pela primeira vez que a modulação da atividade do CB pode ser uma potencial intervenção terapêutica em disfunções metabólicas induzidas pela idade, exacerbadas pela dieta, assim como dismetabolismo associado ao fígado em animais jovens e velhos.ABSTRACT: The increasing incidence of metabolic disorders, like insulin resistance, type 2 diabetes (T2D), dyslipidemia, non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), obesity and metabolic syndrome (MS), has reached epidemic proportions. Knowing that life expectancy is increasing worldwide and that ageing is associated with a high prevalence of these disorders, it is crucial to stop this epidemic. The carotid bodies (CB) are peripheral chemoreceptors, classically defined as O2 sensors, also implicated in energy homeostasis. Our previous work showed in young animals submitted to 25 weeks of hypercaloric diets that the abolition of the CB activity restored the insulin sensitivity and glucose tolerance. Knowing that age is associated with the development of insulin resistance, the general aim of this work was to investigate the impact of long-term hypercaloric diet consumption and the abolishment of CB activity, through the CB sensitive nerve resection, the carotid sinus nerve (CSN) on glucose homeostasis in older rats. Also, knowing that NAFLD is one of the core comorbidities associated with dysmetabolism, we have focus on liver metabolism. Aged rats were fed with high-fat high-sucrose (HFHSu) diet for 44 weeks and after this period half was submitted to CSN resection and the other to a sham surgery. Animals were followed-up during 9 weeks for insulin sensitivity, glucose tolerance, fasting plasma glucose, weight and fat variation. After a terminal experiment lipid profile, liver lipid content and hepatocellular analysis were assessed. Abolishment of the CB/CSN activity in old rats reduced weight gain, restored insulin sensitivity and glucose tolerance, decreased plasma triglycerides and had beneficial impact on liver function. Concluding, this study demonstrated for the first time that the modulation of the CB activity might be a potential therapeutic intervention in age-induced and diet exacerbated metabolic dysfunctions, as well in liver-associated metabolic dysfunction in young and old animals

    Impacts of warming on aquatic decomposers along a gradient of cadmium stress

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    We evaluated the effects of cadmium and temperature on plant-litter decomposition by examining diversity and activity of aquatic fungi and leaf consumption by Limnephilus sp., a typical invertebrate shredder of Iberian streams. Freshly fallen leaves were immersed in a stream to allow microbial colonization, and were exposed in microcosms to a gradient of cadmium (≤11 levels, ≤35 mg L-1 ). Microcosms were kept at 15 ºC, a temperature typically found in Iberian streams in autumn, and at 21 ºC to simulate a warming scenario. The increase in temperature stimulated leaf decomposition by microbes, fungal reproduction and leaf consumption by the shredder. Conversely, increased cadmium concentrations inhibited fungal reproduction and diversity, and leaf consumption by the invertebrate. Cadmium concentration inhibiting 50% of fungal reproduction, microbial decomposition and leaf consumption by the shredder was higher at 15 ºC than at 21 ºC, suggesting that higher temperatures can lead to increased metal toxicity to aquatic decomposers.This study was supported by the Portuguese Foundation for Science and Technology through the projects PTDC/CLI/67180/2006 (FCOMP-01-0124-FEDER-007112) and PEst-C/BIA/UI4050/2011

    Are aquatic fungi able to evaluate microplastic impacts on leaf litter decomposition process?

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    Microplastics (MPs) have been recognized as a threat, and an ecotoxicological risk for aquatic ecosystems. MPs toxicity is determined by their physical and chemical properties, including particle size, shape, surface area or polymer type. Aquatic hyphomycetes are a group of fungi that have the greatest ecological effects on freshwater ecosystems, as they are involved in a key process on these ecosystems, the decomposition of plant litter in streams. These fungi have the ability to degrade and consequently transform leaf material into a more suitable food source for stream detritivores, being important mediators in the energy and nutrient transfer to higher trophic levels. The knowledge on the impacts of MPs on aquatic fungi and the processes they driven is very scarce, so the main goal of this study was to assess the impacts of different sizes of MPs (fragments, FR; and pellets, PE) on the leaf litter decomposition, measuring functional aspects such as leaf mass loss, fungal reproduction and activity of plant litter degrading enzymes. A microcosm experiment was used with monocultures and combinations up to three aquatic hyphomycetes species (Articulospora tetracladia, Tricladium splendens, and Heliscus lugdunensis), where concentrations of FR (0.5 and 2 g L-1) and PE (2 g L-1) were added. We expected that: i) the presence of FR could negatively affect all functional aspects; ii) the impacts of the PE could not be so strong as FR impacts, as PE has a bigger size than FR; iii) the traits of the fungal species would matter to face MP exposure because the traits of certain fungal species may be of greater importance than species number to maintain ecological processes. FR or PE led to a stimulation of leaf mass loss especially in combinations of two aquatic hyphomycetes. Consequently, the activity of degrading enzymes increased in the presence of 0.5 g L-1 FR and PE. Fungal sporulation rate increased in the presence of FR, especially for monocultures and combinations of three aquatic hyphomycetes, while the presence of PE decreased fungal sporulation in combinations of the three aquatic hyphomycetes. Our results showed the MPs influence in the activity and diversity of microbial decomposers, putting at risk the processes they drive in freshwaters. This suggest the aquatic hyphomycetes as potential microorganisms to be used to evaluate the MPs impacts on leaf decomposition process

    Análise fatorial confirmatória da versão portuguesa da escala multidimensional de perfecionismo de Frost

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    This study aimed to analyse the psychometric properties and dimensionality of the Portuguese version of the Multidimensional Scale of Frost Perfectionism (FMPS) using the confirmatory factor analysis. The sample consisted of 832 high school and college students (65.0% female) with a mean age of 19.5. The adjustment indexes of confirmatory factor analysis permitted to consider the multidimensional model of six factors the best representation of the data, replicating the original solution. The results showed good reliability and appropriate validity. The internal consistency of the scale presented satisfactory coefficients (Cronbach's alpha=.853). The test-retest method suggested a good temporal stability of the scale (r=.779). Globally the FMPS is a reliable and validated instrument for the study of perfectionism in Portugal.Este estudo teve como objetivo analisar as propriedades psicométricas e a dimensionalidade da versão portuguesa da Escala Multidimensional de Perfecionismo de Frost (FMPS) recorrendo à análise fatorial confirmatória. A amostra foi constituída por 832 estudantes do ensino secundário e universitário (65.0% do sexo feminino), com uma média de idades de 19.5 anos. Os índices de ajustamento da análise fatorial confirmatória permitiram considerar o modelo multidimensional de seis fatores a melhor representação dos dados, replicando a solução original. Os resultados mostraram boas propriedades psicométricas. A consistência interna da escala apresentou coeficientes bastante satisfatórios (alfa de Cronbach=.853). O método teste-reteste sugeriu uma boa estabilidade temporal da escala (r=.779). Globalmente a FMPS é um instrumento fiável e validado para o estudo do perfecionismo em Portugal

    O Modelo de Gerenciamento do Capital Intelectual: uma ilustração hipotética focando a análise da operacionalidade do Capital Humano

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    TCC (Graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro Socioeconômico. Curso de Ciências ContábeisO Capital Intelectual nos últimos anos tornou-se objeto de estudo de vários autores como, por exemplo Sveiby (1998), Stewart (1998), Edvinsson & Malone (1998), Antunes (2000), Oliveira (2000), Lev (2001), entre outros. Observa-se que nos estudos desenvolvidos por esses autores que existem semelhanças em suas obras, bem como divergências na forma de caracterizar o Capital Intelectual. Contudo, é unânime, entre os autores, que cada vez mais estes ativos denominados intangíveis, estão se tornando imprescindíveis no gerenciamento organizacional. Dessa forma verifica-se a necessidade da contabilidade, mais especificamente no âmbito gerencial, de acompanhar a evolução desses ativos a fim de auxiliar no seu gerenciamento. Assim sendo, este trabalho se propõe a abordar essas formas de gerenciamento, para isso foram pesquisados os autores citados da area e ainda Kaplan & Norton (1997), sendo apresentada a abordagem de cada um deles. Complementando este estudo, foi abordado também o Modelo de Gerenciamento do Capital Intelectual proposto por Ensslin, S. & lgarashi, D. (2005) uma vez que este encapsula as potencialidades das abordagens anteriormente apresentadas. 0 modelo proposto foi formulado apenas teoricamente. Assim este trabalho pretende verificar a sua operacionalização, por meio da construção de uma ilustração hipotética, focando o Capital Humano das organizações

    Avaliação da expressão das enzimas envolvidas no metabolismo da adenosina em linhas celulares de glioblastoma e em astrócitos

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    O glioblastoma é um tumor de grau IV do sistema nervoso central e é caracterizado pelo seu crescimento infiltrativo. A falta de oxigenação, também conhecida por hipóxia, promove a invasão tumoral nos tecidos saudáveis do cérebro, como forma de mecanismo de escape a este ambiente adverso. Nestas condições, há um aumento na concentração de nucleótidos e nucleósidos extracelulares, particularmente a adenosina (Ado), sendo este considerado um mecanismo de proteção endógeno durante a hipóxia. A concentração extracelular basal de Ado encontra-se normalmente entre 30 – 200 nM, no entanto esta pode aumentar por dois mecanismos: hidrólise enzimática do ATP extracelular a AMP e posterior hidrólise deste a Ado através da ação da ecto-5’-nucleotidase (NT5E), ou efluxo da Ado pelos transportadores de nucleósidos bidirecionais (ENTs) após a sua produção intracelular. Intracelularmente, a Ado pode ser formada a partir do AMP através da acção da 5’-ectonucleotidase, ou hidrólise da S-adenosil-L-homocisteína catalisada pela Sadenosil-homocisteinase (AHCY). A adenosina pode ser consumida intracelularmente por fosforilação a AMP catalisada pela cinase da adenosina (ADK), no entanto, também pode ocorrer a hidrólise a inosina através da desaminase da adenosina (ADA). As concentrações intra- e extracelulares da Ado são mantidas em equilíbrio pelos ENTs – ENT1 e ENT2, que transportam este metabolito de acordo com o gradiente de concentração. Resultados anteriores indicam que a produção de adenosina está aumentada no glioblastoma (GBM), onde pode desempenhar um papel na progressão do tumor. O principal objetivo deste trabalho é avaliar a expressão das enzimas envolvidas no metabolismo da Ado, quer em situação de concentrações de adenosina basais quer aumentadas, em linhas celulares de glioblastoma e compará-la com a expressão observada em astrócitos humanos (HA). O efeito do aumento da concentração de adenosina na proliferação/viabilidade celular será também avaliado. Foram testadas 3 linhas de GBM: U87, SNB19 e U373. A expressão enzimática foi analisada por qPCR e a viabilidade/proliferação celular foi avaliada pelo método do MTT. Os resultados obtidos mostram que a Ado (30 µM) adicionada exogenamente diminui a proliferação/viabilidade celular em astrócitos apenas quando os recetores da adenosina são bloqueados pela presença de um cocktail de antagonistas (CA), enquanto o aumento da concentração de adenosina por inibição do seu consumo utilizando um inibidor da ADK, o ABT-702 (30 µM), diminui a viabilidade/proliferação celular tanto nos astrócitos como nas linhas celulares de GBM, quer na presença quer na ausência de CA, sugerindo um efeito não mediado por recetor. Relativamente à expressão do mRNA, comparativamente a HA, a expressão de ADK está aumentada nas linhas U373 e SNB19 enquanto a ADA está aumentada apenas na linha SNB19. Relativamente à expressão dos ENTs, o ENT1 está aumentado em células U373 e U87 enquanto o aumento da expressão do ENT2 foi observado apenas em U373, comparativamente a HA. Observou-se ainda uma diminuição da expressão de NT5E em U373 e SNB19 e um aumento em U87, relativamente a HA. Não foi observada diferenças de expressão da AHCY em qualquer das linhas comparativamente a HA. Comparativamente com o controle, o aumento da concentração de adenosina produziu uma diminuição na expressão da ENT2, nas linhas celulares U373 e U87, e na ENT1, nas células U373. Em HA e em células U373 a expressão de NT5E foi aumentada, enquanto nas células U87 foi reduzida pelos níveis elevados de adenosina. Um aumento da concentração de adenosina produziu aumento da expressão de AHCY em HA. Não foi observada modificação na expressão de nenhum dos genes analisados na linha celular SNB19 por aumento da concentração de adenosina. Em conclusão, observam-se diferenças significativas entre os astrócitos e as linhas celulares de glioblastoma, quer nos níveis de expressão das enzimas envolvidas no metabolismo da adenosina quer na resposta dessa expressão face ao aumento da concentração de adenosina.Glioblastoma is a grade IV type tumor of the central nervous system and is characterized by its infiltrative growth. The lack of oxygenation, also known as hypoxia, promotes the tumor cell invasiveness in the healthy tissues of the brain as an escape mechanism to this adverse environment. Under these conditions, there is an extracellular nucleotides and nucleosides increase in concentration, particularly adenosine (Ado), which is considered an endogenous protection mechanism during hypoxia. Ado basal concentration is usually between 30 – 200 nM, however it can be increased by two mechanisms: extracellular ATP enzymatic hydrolysis into AMP followed by its hydrolysis to Ado by ecto-5’-nucleotidase (NT5E), or Ado export by equilibrative nucleoside transporters (ENTs) after its intracellular production. Intracellularly, Ado can be formed from AMP hydrolysis catalyzed by 5’-ectonucleotidase, or from S-adenosylhomocysteine hydrolysis by catalyzed by the S-adenosylhomocysteinase (AHCY) enzyme. Adenosine can be consumed intracellularly by phosphorylation into AMP catalysed by adenosine kinase (ADK), however it may also be hydrolyzed into inosine by adenosine deaminase (ADA). Intracellular and extracellular Ado concentrations are maintained in equilibrium by ENTs – ENT1 and ENT2, which carry this metabolite according to the concentration gradient. Previous reports indicate that adenosine production is increased in glioblastoma where it might play a role on tumor progression. The main goal of this work is to evaluate enzymes expression involved in Ado metabolism, either under basal and increased adenosine concentrations, in human glioblastoma cell lines and compare it with the expression observed in human astrocytes (HA). The effect of increasing adenosine concentration on cell proliferation/viability will also be assessed. Three lines of GBM were tested: U87, SNB19 and U373. Enzymatic expression was analyzed by qPCR and cell viability/proliferation was evaluated by the MTT method. The results obtained suggest that Ado (30 µM) added exogenously decreases cell proliferation/viability in astrocytes only when adenosine receptors are blocked by the presence of a cocktail of antagonists (CA), while increasing the concentration of adenosine by inhibiting their consumption using an ADK inhibitor, ABT-702 (30 µM), decreases cell viability/proliferation in both astrocytes and GBM cell lines, either in the presence or in the absence of CA, suggesting a non-receptor mediated effect. Regarding mRNA gene expression, compared to HA, ADK expression is increased in the U373 and SNB19 cell lines while ADA is increased only in the SNB19 line. Considering the expression of ENTs, ENT1 is increased in U373 and U87 cells while increased expression of ENT2 was observed only in U373, compared to HA. There was also a decrease in NT5E expression in U373 and SNB19 and an increase in U87, relative to HA. There were no differences in expression of AHCY in any of the lines compared to HA. Compared to the control, the increase in adenosine concentration produced a decrease in the expression of ENT2, in the U373 and U87 cell lines, and in ENT1, in the U373 cells. In HA and U373 cells, NT5E expression was increased, while in U87 cells it was reduced by increased levels of adenosine. An increase in the concentration of adenosine produced an increase in AHCY expression in HA. There was no change in the expression of any of the genes analyzed in the SNB19 cell line by increasing the concentration of adenosine. In conclusion, there are significant differences between astrocytes and glioblastoma cell lines, both in the levels of expression of the enzymes involved in the metabolism of adenosine and in the response of that expression to the increase in the concentration of adenosine

    Mercury (II) removal from aqueous solutions by microporous materials

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    Doutoramento em QuímicaO Mercúrio é um dos metais pesados mais tóxicos existentes no meio ambiente, é persistente e caracteriza-se por bioamplificar e bioacumular ao longo da cadeia trófica. A poluição com mercúrio é um problema à escala global devido à combinação de emissões naturais e emissões antropogénicas, o que obriga a políticas ambientais mais restritivas sobre a descarga de metais pesados. Consequentemente o desenvolvimento de novos e eficientes materiais e de novas tecnologias para remover mercúrio de efluentes é necessário e urgente. Neste contexto, alguns materiais microporosos provenientes de duas famílias, titanossilicatos e zirconossilicatos, foram investigados com o objectivo de avaliar a sua capacidade para remover iões Hg2+ de soluções aquosas. De um modo geral, quase todos os materiais estudados apresentaram elevadas percentagens de remoção, confirmando que são bons permutadores iónicos e que têm capacidade para serem utilizados como agentes descontaminantes. O titanossilicato ETS-4 foi o material mais estudado devido à sua elevada eficiência de remoção (>98%), aliada à pequena quantidade de massa necessária para atingir essa elevada percentagem de remoção. Com apenas 4 mg⋅dm-3 de ETS-4 foi possível tratar uma solução com uma concentração igual ao valor máximo admissível para descargas de efluentes em cursos de água (50 μg⋅dm-3) e obter água com qualidade para consumo humano (<1.0 μg⋅dm-3), de acordo com a legislação Portuguesa (DL 236/98). Tal como para outros adsorbentes, a capacidade de remoção de Hg2+ do ETS- 4 depende de várias condições experimentais, tais como o tempo de contacto, a massa, a concentração inicial de mercúrio, o pH e a temperatura. Do ponto de vista industrial as condições óptimas para a aplicação do ETS-4 são bastante atractivas, uma vez que não requerem grandes quantidades de material e o tratamento da solução pode ser feito à temperatura ambiente. A aplicação do ETS-4 torna-se ainda mais interessante no caso de efluentes hospitalares, de processos de electro-deposição com níquel, metalúrgica, extracção de minérios, especialmente ouro, e indústrias de fabrico de cloro e soda cáustica, uma vez que estes efluentes apresentam valores de pH semelhantes ao valor de pH óptimo para a aplicação do ETS-4. A cinética do processo de troca iónica é bem descrita pelo modelo Nernst-Planck, enquanto que os dados de equilíbrio são bem ajustados pelas isotérmicas de Langmuir e de Freundlich. Os parâmetros termodinâmicos, ΔG° and ΔH° indicam que a remoção de Hg2+ pelo ETS-4 é um processo espontâneo e exotérmico. A elevada eficiência do ETS-4 é confirmada pelos valores da capacidade de remoção de outros materiais para os iões Hg2+, descritos na literatura. A utilização de coluna de ETS-4 preparada no nosso laboratório, para a remoção em contínuo de Hg2+ confirma que este material apresenta um grande potencial para ser utilizado no tratamento de águas. ABSTRACT: Mercury is one of the most toxic heavy metals, exhibiting a persistent character in the environment and biota as well as bioamplification and bioaccumulation along the food chain. Natural inputs combined with the global anthropogenic sources make mercury pollution a planetary-scale problem, and strict environmental policies on metal discharges have been enforced. The development of efficient new materials and clean-up technologies for removing mercury from effluents is, thus, timely. In this context, in my study, several microporous materials from two families, titanosilicates and zirconosilicates were investigated in order to assess their Hg2+ sorption capacity and removal efficiency, under different operating conditions. In general, almost all microporous materials studied exhibited high removal efficiencies, confirming that they are good ion exchangers and have potential to be used as Hg2+ decontaminant agents. Titanosilicate ETS-4 was the material most studied here, by its highest removal efficiency (>98%) and lowest mass necessary to attain it. Moreover, according with the Portuguese legislation (DL 236/98) it is possible to attain drinking water quality (i.e. [Hg2+]< 1.0 μg⋅dm-3) by treating a solution with a Hg2+ concentration equal to the maximum value admissible for effluents discharges into water bodies (50 μg⋅dm-3), using only 4 mg⋅dm-3 of ETS-4. Even in the presence of major freshwater cations, ETS-4 removal efficiency remains high. Like for other adsorbents, the sorption capacity of ETS-4 for Hg2+ ions is strongly dependent on the operating conditions, such as contact time, mass, initial Hg2+ concentration and solution pH and, to a lesser extent, temperature. The optimum operating conditions found for ETS-4 are very attractive from the industrial point of view because the application of ETS-4 for the treatment of wastewater and/or industrial effluents will not require larges amounts of adsorbent, neither energy supply for temperature adjustments becoming the removal process economically competitive. These conditions become even more interesting in the case of medical institutions liquid, nickel electroplating process, copper smelter, gold ore tailings and chlor-alkali effluents, since no significant pH adjustments to the effluent are necessary. The ion exchange kinetics of Hg2+ uptake is successfully described by the Nernst-Planck based model, while the ion exchange equilibrium is well fitted by both Langmuir and Freundlich isotherms. Moreover, the feasibility of the removal process was confirmed by the thermodynamic parameters (ΔG° and ΔH°) which indicate that the Hg2+ sorption by ETS-4 is spontaneous and exothermic. The higher efficiency of ETS-4 for Hg2+ ions is corroborate by the values reported in literature for the sorption capacity of other adsorbents for Hg2+ ions. The use of an ETS-4 fixed-bed ion exchange column, manufactured in our laboratory, in the continuous removal of Hg2+ ions from solutions confirms that this titanosilicate has potential to be used in industrial water treatment

    Nanoemulsão de glucosamina e condroitina para o tratamento tópico das condropatias do joelho, avaliadas em ensaio clínico randomizado

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    Tese (Doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Nanociência e Nanobiotecnologia, 2018.O tratamento das condropatias, ou lesões de cartilagens, ainda é um grande desafio na reabilitação, principalmente pelas próprias características da cartilagem, que promovem um baixo potencial de regeneração. A degeneração das cartilagens, acompanhada de alterações das estruturas ósseas vizinhas, é conhecida como osteoartrite. Essa afecção trata-se de uma causa frequente de dor, limitação funcional e pode levar à incapacidade, ocasionando considerável perda da qualidade de vida. A alternativa de tratamento com agentes modificadores de estrutura – como os sulfatos de Glucosamina (GS) e a Condroitina (CS) – é comumente prescrita para os pacientes e vem sendo muito pesquisada. Meta-análises apontam que esses fármacos, usados via oral, têm efeitos incertos como modificadores da estrutura articular. O objetivo do estudo foi propor uma nova abordagem terapêutica para a recuperação das lesões condrais e osteocondrais do joelho de humanos. Essa abordagem é formada por aplicação transdérmica (nanoemulsão associada ao ultrassom e oclusão) e exercícios terapêuticos. O delineamento metodológico iniciou-se, primeiramente, com o desenvolvimento e a caracterização da Nanoemulsão de GS e CS, seguidos das análises in vitro do potencial citotóxico, de irritabilidade e de permeação da nanoemulsão. O ensaio clínico, por meio de estudo piloto, foi a fase final do processo metodológico. Uma nanoemulsão transparente, do tipo óleo-em-água (O/A), mostrou estabilidade por 150 dias na temperatura ambiente e a 4ºC. Seus reagentes foram o Cremophor ELP (9%), o Óleo de Rícino (3%), Água Ultrapura (78%), GS (5%) e CS (5%). Seu diâmetro hidrodinâmico de 29,3 nm, potencial zeta de -2,44 mV, índice de polidispersão de 0,11 e pH de 4,23 evidenciaram características desejáveis para realização de análises seguintes. A Cryo-Tem mostrou morfologia esférica e diâmetros menores do que 100 nm. O sistema em estudo não apresentou citotoxicidade in vitro na linhagem NIH-3T3, por um período de 24 horas, utilizando o ensaio MTT. No teste de membrana corioalantóide, tanto a nanoemulsão como seu homólogo em branco apresentaram-se no limite inferior da faixa considerada “moderadamente irritante”. A Análise Elementar (CHN) foi utilizada para quantificação dos fármacos após teste de permeação em célula de difusão. Quando utilizado a Nanoemulsão, houve menor retenção de carbono no estrato córneo, maior retenção de carbono na pele viável e maior dose de carbono foi quantificada no líquido receptor. Esses índices foram significativamente maiores em comparação à formulação controle. O estudo piloto foi de fundamental importância para detectar algumas necessidades de ajustes na metodologia da pesquisa, como a alteração no número de sessões por semana, no tempo total de intervenção, na rotina de aplicação dos instrumentos de avaliação e na forma de avaliação dos dados numéricos. Além disso, o estudo piloto mostrou relevância clínica da proposta terapêutica, mesmo que ainda não tenha sido possível identificar significância estatística no resultado entre os grupos. O Grupo-Nano teve superioridade em 4 dos 5 domínios (grupos de sintomas) avaliados, quando comparado com o Grupo-Controle. Além do mais, o Grupo-Nano mostrou em Ressonância Nuclear Magnética uma recuperação total de lesão de cartilagem patelar. Mediante os fatos expostos, a Nanoemulsão O/A de GS e CS, não tóxica e estável, associada ao ultrassom, à cinesioterapia e à oclusão, foi capaz de melhorar a absorção transdérmica e mostrar uma relevância clínica no alívio dos sintomas e na recuperação da estrutura articular em humanos com lesões condrais do joelho.The treatment of chondropathy, or lesions in cartilage, is still a major challenge in rehabilitation, principally due to the characteristics of cartilage itself, which promote low regeneration potential. The degeneration of cartilage, accompanied by alterations in the neighboring bone structures, is known as osteoarthritis. This condition is a frequent cause of pain and of functional limitations, and it can lead to incapacity, occasioning a considerable loss in the quality of life. The treatment option with structure-modifying agents, such as sulfates of Glucosamine (GS) and Chondroitin (CS), is commonly prescribed for patients and has been researched frequently. Meta-analyses indicate that these drugs, used via oral, have uncertain effects as articular structure modifiers. The objective of this study was to propose a new therapeutic approach to recovery from chondral and osteochondral lesions in the human knee. This approach consists of transdermal application (nanoemulsion associated with ultrasound and occlusion) and therapeutic exercises. The methodological design started with the development and characterization of the Nanoemulsion of GS and CS, followed by in vitro analyses of cytotoxic potential, irritability and nanoemulsion permeation. The clinical assay, by means of a pilot study, was the final phase of the methodological process. A transparent nanoemulsion, of the oil-in-water type (O/W), showed stability for 150 days at ambient temperature and at 4ºC. Its reagents were Cremophor ELP (9%), and Castor Oil (3%), Ultrapure Water (78%), GS (5%) and CS (5%). Its hydrodynamic diameter was 29.3 nm, polydispersion index 0.11, zeta potential -2.44 mV and pH 4.23, and these values demonstrated desirable characteristics for carrying out the next analyses. Cryo- Tem showed spherical morphology and diameters smaller than 100 nm. The system under study did not present cytotoxicity in vitro in the NIH-3T3 lineage, for a period of 24 hours, using the MTT assay. In the Hen's Egg Test – Chorioallantoic Membrane (HET-CAM) method, both the nanoemulsion and its blank homologue were at the lowest limit of the category considered “moderate irritability”. Elemental Analysis (CHN) was used to quantify the drugs after the permeation test in a diffusion cell. When the Nanoemulsion was used there was less retention of carbon in the stratum corneum, greater retention of carbon in the viable skin, and a greater dose of carbon was quantified in the receiver liquid. These indices were significantly higher than those for the control formulation. The pilot study was of fundamental importance in detecting some of the adjustments needed in the research methodology, such as the alteration in the number of sessions per week, in the total intervention time, in the routine for applying evaluation tools and in the way in which numerical data should be evaluated. In addition, the pilot study showed the clinical importance of the therapeutic proposal, although it has still not been possible to identify statistical significance in the result between groups. The Nano-Group was superior in 4 of the 5 domains (groups of symptoms) evaluated, when compared with the Control-Group. Moreover, the Nano-Group showed complete recovery of the patellar cartilage lesion, grade II, in nuclear magnetic resonance imaging. In this context, the O/W Nanoemulsion of GS and CS, which is non-toxic and stable, when associated with ultrasound, kinesiotherapy and occlusion, was capable of improving transdermal absorption and showed clinical significance in relieving symptoms and in improving articular structure in humans with chrondral lesions of the knee
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