Condiciones experimentales para la obtención de registros electrofisiológicos de ovocitos de anfibios con la técnica Patch clamp

La mayoría de este tipo de trabajos se han realizado en ovocitos de Xenopus laevis, rana surafricana perteneciente a la familia PIPIDAE, de hábitos acuáticos y con la técnica voltage clamp. Sin embargo, al ser esta especie de zonas templadas presenta problemas y elevados costos para el adecuamiento de un microhábitat que conllevase a producción de ovocitos de calidad. Además este modelo presenta en nuestro medio, problemas por la importación de especimenes. Bajo estas circunstancias es de vital importancia para el desarrollo de estudios de canales iónicos tener varios modelos experimentales de fácil adquisición en nuestro medio donde se puedan obtener los ovocitos. La rana Chaunus marinus es miembro de la familia BUFONIDAE, nativa de Centro y Suramérica siendo también plaga en varios lugares del mundo como Australia. Es de hábitos terrestres con características similares en tamaño y peso a X. laevis además de presentar una gran producción de ovocitos de hasta 32000 (Cochran & Goin, 1970; Zug & Zug, 1979; Acosta-Galvis, 2000). Estas características hacen de C. marinus una especie ideal para ser modelo experimental y además una fuente nativa de ovocitos para estudios electrofisiológicos. Vargas et a/.(2004) demostraron que ovocitos de C. marinus son un buen modelo para estudios de expresión de canales iónicos y registros con voltage clamp. Sin embargo, este organismo se desarrolla en un medio ambiente muy diferente a las condiciones ambientales de altura, temperatura y presión atmosférica que presenta Bogotá. Por tanto en el laboratorio de fisiología animal de la Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá, hace 1 año se está montando una colonia de C. marinus pero no se han establecido las mejores condiciones para su mantenimiento en términos de dieta, temperatura, pH y otros. En el caso de estudios de electrofisiología celular para el caso de C. marinus solo se han realizado con la técnica de voltage clamp con dos electrodos y hay muy pocos estudios en X. laevis con patch clamp. Por tanto en el presente trabajo se buscó optimizar las condiciones para el mantenimiento de C. marinus en cautiverio y optimización de las condiciones de extracción de ovocitos y se inició la estandarización de registros de patch clamp en ovocito

Ecofisiología

Los anfibios y reptiles son vertebrados con una riqueza de especies relativamente alta en ambientes extremos. Esto se debe a que a través de su historia evolutiva han desarrollado diversas adaptaciones comportamentales, fisiológicas y morfológicas que les han permitido   colonizar desde ambientes con temperaturas congelantes (bosques estacionales, estepas, páramos, etc.), hasta ambientes desérticos. En Colombia los anfibios y reptiles están presentes en varios ambientes extremos, siendo uno de los más importantes   el bosque seco tropical (bs-T); este ecosistema es considerado como extremo y debido a que presenta altas temperaturas (pudiendo llegar a temperaturas mayores a 45ÊC) y una mar- cada estacionalidad en la precipitación, Factores que promueven condiciones de estrés térmico e hídrico en los organismos.  Los anfibios y reptiles son especialmente susceptibles a estas condiciones al ser organismos ectotermos y, en el caso de los primeros, con piel permeable. Este capítulo pretende recopilar aspectos comportamentales, fisiológicos y morfológicos de la herpetofauna presente en hábitats con altas temperaturas. De esta Forma, se busca ofrecer una guía para la investigación de potenciales estrategias ecofisiológicas presentes en la herpetoIauna del bs-T en el norte de Colombia

Biología de los anfibios y reptiles en el bosque seco tropical del norte de Colombia.

Los anfibios y reptiles son animales asombrosos y su biología es mucho más Fascinante y variada de lo que originalmente se consideraba. Esta afirmación se soporta fácilmente en múltiples aspectos, entre los cuales sobresale, su reproducción (Duellman & Trueb 1994; Wells 2007; Balshine 2012; Gómez-Mestre et al. 2012; Vitt & Caldwell 2014; Pough et al. 2016). En los anfibios, por ejemplo, muchas especies no dejan sus huevos en charcas y lagunas, como tradicionalmente ha creído el común de las personas, sino que las hembras los depositan en ambientes terrestres, tales como la superficie de hojas o en ambientes húmedos que se dan a nivel del suelo entre hojarasca y bajo troncos caídos, piedras o raíces de árboles (Duellman & Trueb 1994; Crump 2015). Más aún, hay especies cuya reproducción es tan especializada que los padres o madres transportan a los renacuajos en diferentes partes de su cuerpo , ya sea, por pocas horas o días, mientras los depositan en ambientes específicos, o hasta que las crías terminan su ciclo de metamorfosis y se desarrollen como un adulto, pero en miniatura  (Noble 1927; Mendelson et al. 2000; Castroviejo-Fisher et al. 2015). Con respecto a los reptiles, hay ejemplos de especies, donde, - las hembras no requieren que un gameto masculino fertilice sus óvulos para producir crías, o especies, donde el sexo de la progenie no está determinado genéticamente, sino por la temperatura ambiental, lo cual, permiten la incubación de huevos (Tinkle & Gibbons 1977; Shine 1995; Vitt & Caldwell 2014). Los factores o procesos asociados a la evolución de este último aspecto en la reproducción de reptiles, es todo un enigma para los científicos (BlacNburn 2006; Shine 2015). Estos y muchos más ejemplos, que se encuentran a lo largo de este libro, contradicen la imagen que durante décadas se tuvo de los anfibios y reptiles, incluso, por científicos y naturalistas tan prestigiosos como, Carlos Linneo, quien afirmó que estos vertebrados eran animales repulsivos, en los cuales el creador no había ejercido toda su sabiduría y poder (Halliday & Adler 1986)