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Estudo do envolvimento do Sistema Nervoso Autónomo na Etiopatogenia de tumores ginecológicos – variação polimórfica em genes do sistema Adrenérgico e Serotoninérgico
Tese de mestrado, Biologia Humana e Ambiente, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2019Os leiomiomas uterinos, tambem conhecidos como fibromiomas, sao tumores ginecológicos benignos muito frequentes em mulheres durante a idade reprodutiva e desenvolvem-se a partir de uma unica celula do musculo liso uterino. Dependentemente do local onde se vao desenvolver, são classificados consoante a sua localizacao dentro do utero. Estes podem desenvolver-se no utero sob a influencia local de fatores de crescimento e hormonas. Num grande numero de mulheres, a presenca de leiomiomas uterinos passa despercebida, noutros casos, a localizacao e o tamanho destes tumores benignos pode afetar a qualidade de vida, sendo uma preocupacao para a saude de muitas mulheres. O carcinoma do colo do utero e considerado um dos cancros mais comuns em mulheres de todo o mundo e a sua alta taxa de mortalidade deve-se a falta de terapeuticas eficazes para eliminar a doenca, tornando-se assim, uma causa de morte em mulheres de todo o mundo. A infecao pelo Virus do Papiloma Humano, ou HPV, e considerada uma das infecoes de transmissao sexual mais comum a nivel mundial, podendo originar lesoes benignas e malignas (carcinoma do colo do utero), sendo este, o terceiro cancro mais frequente em mulheres de todo o mundo. O carcinoma do colo do utero esta associado a infecao pelo HPV transmitida sexualmente e a sua presenca e necessaria, mas nao suficiente para o desenvolvimento da patologia maligna. Devido a grande incidencia destes dois tipos de tumores, torna-se importante estudar os mecanismos envolvidos e investigar e identificar a suscetibilidade genetica para o seu desenvolvimento e progressao. Os efeitos do sistema nervoso autonomo na biologia do cancro foram inicialmente sugeridos por observacoes clinicas que ligavam o stresse e a progressao do cancro. Mais recentemente, os dados farmacologicos mostraram uma progressao reduzida da doenca em pacientes com cancro que foram incidentalmente expostos a bloqueadores β-adrenergicos, estes tem sido amplamente utilizados para controlar a hipertensao e, atualmente, esses agentes podem ter implicacoes significativas para a terapeutica do cancro, bloqueando adrenoceptores em tecidos tumorais. Estas influencias podem ser refletidas na modulacao da proliferacao celular, apoptose, invasao e metastase, bem como a normalizacao da vasculatura tumoral. Por outro lado, a serotonina bloqueia o sistema nervoso simpatico (SNS), tal acontece devido a serotonina travar o SNS e regular a libertacao de catecolaminas, inibindo a sua producao. Ao existir elevada serotonina na fenda sinaptica ha inibicao de catecolaminas e consequentemente reducao dos niveis de stresse. Estudos geneticos permitem concluir sobre a associacao entre polimorfismos e o risco de desenvolver uma patologia. Neste trabalho, dois tipos de tumores ginecologicos (leiomiomas uterinos e carcinoma do colo do utero) foram utilizados como modelos para avaliar a influencia dos sistemas adrenergicos e serotoninergicos no desenvolvimento de tumores ginecologicos, sejam eles benignos (leiomiomas) ou malignos (carcinoma do colo do utero). Para tal foram analisados polimorfismos funcionais dos genes SLC6A4 do transportador da serotonina e 5HT2A do transportador 2A da serotonina, e um polimorfismo do gene ADBR2 relacionado com o recetor β2-adrenergico, a fim de determinar a relevancia destes polimorfismos para a suscetibilidade de tumores atraves de vias neurotransmissoras. Deste modo foram analisadas amostras de DNA de mulheres com idades compreendidas entre os 19 e 89 anos, dos quais 136 correspondem a mulheres com leiomiomas, 135 correspondem a mulheres com carcinoma do colo do utero e 777 correspondem a mulheres sem qualquer patologia associada, sendo estas parte integrante do grupo controlo. Os resultados deste estudo mostraram uma associacao estatisticamente significativa entre algumas variantes geneticas e ambas as patologias. Nomeadamente o alelo Arg do gene ADBR2 esta associado a um maior risco de leiomiomas (OR = 2,310), IC (95%) = [1,568 – 3,403], p < 0,001) e o alelo Gly do mesmo gene esta associado a um efeito protetor (OR = 0,433), IC (95%) = [0,293 – 0,637], p <0,001. O mesmo se verificou no carcinoma do colo do utero, em que o alelo Arg do gene ADBR2 se mostrou de risco (OR = 3,521), IC (95%) = [1,862 – 6,654], p < 0,001) e o alelo Gly se mostrou protetor (OR = 0,284), IC (95%) = [0,150 – 0,536 ], p <0,001. No polimorfismo 5-HTTVNTR, no carcinoma do colo do utero verificou-se que o genótipo 12/10 teve um risco tres vezes superior de desenvolver carcinoma do colo do utero (OR = 3,194; (IC (95%) = [1,581 – 6,452], p < 0,001) e o genotipo 12/12 teve efeito protetor associado (OR = 0,433 (IC (95%) = [0,206 – 0,907]; p = 0,027). Os resultados apontaram para um papel proeminente do stresse no crescimento e desenvolvimento de tumores benignos e malignos, sendo que o sistema nervoso simpatico e a ativação do eixo hipotalamo-hipofise-suprarrenal, tem de facto impactos funcionais e biologicos no microambiente tumoral. Relativamente a analise epistatica, verificou-se que nesta interacao um dos genes pode melhorar a expressao do/s outro/s (epistasia antagonista) ou por outro lado pode reforcar a expressao do outro gene (epistasia sinergica). Este estudo pode ser um ponto de partida para outras equipas de investigacao pesquisarem ou adaptarem terapeuticas ja existentes, a novas tecnologias.Uterine leiomyomas, also known as fibroids, are benign gynecological tumors very common in women during reproductive age that develop from a single uterine smooth muscle cell. Depending on where they will develop, they are classified according to their location within the uterus. These can develop in the uterus under the local influence of growth factors and hormones. In a large number of women, the presence of uterine leiomyomas goes unnoticed. In other cases, the location and size of these benign tumors can affect the quality of life, being a concern for the health of many women. Cervical carcinoma is considered one of the most common cancers in women worldwide and its high mortality rate is due to the lack of effective therapies to eliminate the disease, thus becoming the second leading cause of death in women all over the world. Human papillomavirus (HPV) infection is considered to be one of the most common sexually transmitted infections in the world. It can lead to benign lesions and malign (cervical carcinoma), the third most frequent cancer in women worldwide. Cervical carcinoma is associated with sexually transmitted HPV infection, and its presence is necessary, but not sufficient for the development of the disease. Due to the high incidence of these two types of tumors, it is important to study their involved mechanisms and to research and identify their genetic susceptibility for its development and progression. The effects of the autonomic nervous system on cancer biology were initially suggested by clinical observations linking stress and cancer progression. More recently, pharmacological data showed a reduced progression of the disease in cancer patients who were incidentally exposed to β-adrenergic blockers. In fact, β-adrenergic blockers have been widely used to control hypertension, and currently such agents may have significant implications for cancer therapy by blocking adrenoceptors in tumor tissues. These influences may be reflected in modulation of cell proliferation, apoptosis, invasion and metastasis, as well as normalization of tumor vasculature. Serotonin blocks the sympathetic nervous system (SNS), this happens because serotonin decelerates the SNS and regulates the release of catecholamines, inhibiting their production. When there is high serotonin levels in the synaptic cleft there is inhibition of catecholamines and then reduction of stress levels. Genetic studies allow us to conclude about the association between polymorphisms and the risk of developing a pathology. In this project, two types of gynecological tumors (cervical carcinoma and uterine leiomyomas) will be used as models to evaluate the influence of the adrenergic and serotonergic systems in the development of gynecological tumors, whether benign (leiomyomas) or malignant (cervical carcinoma). Functional polymorphisms of the serotonin transporter SLC6A4 and 5HT2A genes of serotonin transporter 2A and a polymorphism of the β2-adrenergic receptor-related ADBR2 gene were analyzed to determine the relevance of these polymorphisms for the susceptibility of tumors through neurotransmitter pathways. For this, DNA samples from women aged 19-89 years were analyzed, of which 136 corresponded to women with leiomyomas, 135 corresponded to women with cervical carcinoma, and 777 corresponded to women without any associated pathology, part of the control group. The results of this study showed a statistically significant association between some genetic variants and both pathologies. In particular, the presence of the Arg allele of the ADBR2 gene is associated with a higher risk of leiomyomas (OR = 2,310), CI (95%) = [1,568 – 3,403], p <0.001) and the Gly allele of the same gene is associated with a protective effect (OR = 0.433), CI (95%) = [0.293 – 0.637], p <0.001. The same was observed in cervical carcinoma, where the Arg allele of the ADBR2 gene was shown to be at risk (OR = 3,521), CI (95%) = [1,862 – 6,654], p <0.001), and the Gly allele was protective (OR = 0,284), CI (95%) = [0,150 – 0,536], p <0.001. In the 5-HTTVNTR polymorphism, in cervical carcinoma, 12/10 genotype was found to have a three-fold increased risk of developing carcinoma (OR = 3,194 (CI = 95%) = [1,581 – 6,452], p <0.001) and genotype 12/12 had associated protective effect (OR = 0,433 (CI (95%) = [0,206 – 0,907], p = 0,027). The results pointed that stress has a prominent role in the growth and development of benign and malignant tumors. The sympathetic nervous system and activation of the hypothalamic-pituitaryadrenal axis have functional and biological impacts on the tumor microenvironment. Taking into account the epistatic analysis, it has been found that in this interaction one of the genes may enhance the expression of the other/s (antagonist epistasis) or on the other hand may enhance the expression of the other gene (synergistic epistasis). This study may be a starting point for other research teams to research or adapt existing therapies, to new technologies
VÃdeo-arte e cinema: cruzamento de linguagens contemporâneas
Mestrado em Criação ArtÃstica ContemporâneaO presente trabalho propõe-se iluminar diferenças, vistas como significativas entre a vÃdeo-arte e o cinema, assim como os pontos fulcrais de semelhança e proximidade. Estas duas formas artÃsticas contemporâneas assistem-se uma à outra numa conformidade que muitas vezes se torna difÃcil explicar na prática e na lógica. Numa tentativa de clarificar alguns pontos que permanecem na obscuridade, interpreto objectivamente o que ambos têm em comum e também onde divergem declaradamente. É minha intenção criar uma ligação entre vÃdeo-arte e cinema para a sua compreensão sem que para isso se extinga a essência de cada forma de arte, mas antes a sua integração e inclusão numa sociedade cada vez mais complexa como é a nossa.
ABSTRACT: This thesis proposes to to illuminate differences, seen as significant differences between video art and cinema, as well as the focal points of similarity and proximity. These two contemporary art forms, are assisting each other in a in a line that often becomes difficult to explain in practice or logic. Attempting to clarify some points that remain in the dark, I objectively take what both have in common and where they clearly diverge. It is my intention to create a link between video art and cinema for their understanding, without extinguish their essence, but to promote their integration and inclusion in an increasingly complex society such as ours
Optimizing feeding formulations to improve fish farming protocols
The aquaculture provides millions of tonnes of food for human consumption and with the expected increase in the population it is important that aquaculture production continues to grow in a sustainable way. Gilthead seabream (Sparus aurata) is one of the most produced fish species in the Mediterranean, mainly in off-shore cages, and since it is very susceptible to low temperature, reducing feed intake and growth, it is necessary to improve formulations for the Winter, focusing on minimising the dietary protein content and the fishmeal inclusion level. Furthermore, during production gilthead seabream can be exposed to stressful events, as high densities during sorting procedures, that can affect negatively the fish. Therefore, the aim of this thesis was to optimize feed formulations that benefits gilthead seabream at low temperature (14°-15°C) in the Mediterranean Sea and assess the potential of nutritional strategies to help the fish cope with stressful events. The fish were fed with three experimental diets, the Control diet with high protein:energy ratio (48P:19L), the Low diet with low protein:energy ratio (45P:19L) and the LowMix diet with low protein:energy ratio (44P:19L) but supplemented with a mix of additives, for 84 days. At day 84, fish were exposed to a simulated sorting procedure, and blood samples were collected at different times (T=0 min, T=30 min, T=90 min). At the end of the experiment, the fish fed the LowMix diet had similar final weight and growth performance than fish fed the Control diet. The Low diet fish had a lower weight when compared with the Control fish. Furthermore, the viscerosomatic index was lower in the fish fed the LowMix diet compared with the Control fish. In the stress experiment, the stress indicators were not significantly different among diets. These results indicate that the Winter formulation for gilthead seabream juveniles may present a low protein content and a low fishmeal inclusion, provided that the adequate dietary supplements are included, without negative consequences in fish welfare and growth performance.A dourada (Sparus aurata) é uma das espécies mais produzidas em aquacultura no Mediterrâneo. Esta espécie é muito suscetÃvel a baixas temperaturas no inverno, que diminuem o consumo de alimento e consequentemente o seu crescimento, o que pode provocar efeitos negativos na produção e comércio desta espécie. Além disso, a dourada pode ser afetada por situações de stress, como a exposição a grandes densidades de cultivo, o que pode causar problemas severos durante o ciclo de produção. A produção em aquacultura tem aumentado, mas com o aumento constante da população humana é necessário que a produção continue a aumentar de forma sustentável. A otimização da formulação das dietas é fundamental para melhorar os protocolos de produção. Desta forma, o objetivo desta tese foi otimizar as formulações de dietas para que estas possam beneficiar a dourada a baixas temperaturas (14-15°C) e avaliar o potencial da modulação nutricional como uma estratégia para ajudar a dourada a lidar com eventos adversos. Para tal, as douradas foram alimentadas com três dietas diferentes, a dieta Control com uma razão alta de proteÃna:energia (48P:19L), a dieta Low com uma razão baixa de proteÃna:energia (45P:19L) e a dieta LowMix com uma razão baixa de proteÃna:energia (44P:19L) mas suplementada com uma mistura de aditivos, durante 84 dias. No dia 84 as douradas foram expostas a um evento de stress (simulação de um procedimento de triagem) e foram recolhidas amostras de sangue a tempos diferentes (T=0 min, T=30 min e T=90 min). No final da experiência, os peixes da dieta LowMix apresentaram um peso final assim como outros indicadores de crescimento similares aos peixes da dieta Control. Os peixes alimentados com a dieta Low apresentaram um peso mais baixo quando comparado com o peso dos peixes da dieta Control. Além disso, os peixes da dieta LowMix apresentavam um Ãndice viscero-somático mais baixo que os do Control. Em relação ao stress, a alimentação com as diferentes dietas não resultou em diferenças significativas nos indicadores de stress em peixes expostos a elevadas densidades, apenas se verificaram diferenças entre tempos de amostragem. Os resultados obtidos indicam que é possÃvel alimentar as douradas, durante o inverno, com dietas com reduzido teor proteico assim como com um reduzido nÃvel de inclusão de farinha de peixe, sem que se verifiquem consequências negativas no crescimento e no bem-estar dos peixes
Endothelial Dysfunction in Type 2 Diabetes: Targeting Inflammation
Several experimental and clinical studies have indicated a prominent role of vascular inflammation in the development of endothelial dysfunction. In endothelial dysfunction, the endothelium loses its physiological features, decrements nitric oxide bioavailability, and shifts towards a vasoconstrictor, pro-thrombotic and pro-inflammatory state. Within arterial wall, the interplay between the pro-inflammatory and pro-oxidant milieus promotes vascular dysfunction, and perivascular adipose tissue seems to play an important role. Inflammation is now considered a key event in vascular dysfunction and the development of vascular disease associated with obesity and type 2 diabetes. This concept is supported by the fact that anti-inflammatory adipokines such as adiponectin protect endothelial function, and interventions resulting in reduced inflammation such as the administration of salicylates prevent vascular dysfunction and cardiovascular events. Thus, the aim of this review is to address the role of inflammation and its mechanisms in endothelial dysfunction associated with diabetes, describing the impact of these conditions on vascular function
Utilização do repiso de tomate na alimentação de coelhos em crescimento e engorda
Dissertação de Mestrado em Engenharia Zootécnica/Produção AnimalO objectivo deste trabalho foi estudar o efeito da inclusão de repiso de tomate nos regimes alimentares de coelhos em crescimento e engorda, no processo digestivo e na protecção antioxidante na carne. Formularam-se 4 regimes alimentares: um regime controlo (RCTR), um regime com 6% de repiso de tomate (RRT6) e um regime com 12% de repiso de tomate (RRT12) por substituição de igual quantidade de luzerna e um regime com 0,14% vitamina E (RVITE). As dietas foram distribuÃdas a 48 coelhos (12 x 4), alojados individualmente, dos 28 aos 70 dias de idade. Não se registaram diferenças significativas no aumento diário de peso nem na quantidade ingerida diária entre os regimes. A digestibilidade da MS e da MO foi em média de 66% e 67%, não se registando diferenças significativas entre os regimes. A digestibilidade da PB dos regimes com repiso foi cerca de 96% da do RCTR (P=0,034) e a da hemicelulose (P=0,005) foi superior nos regimes com repiso. A actividade pectinolÃtica foi significativamente superior (P=0,05) nos regimes com repiso do que nos outros. A susceptibilidade à oxidação da carne, ao abate ou após 1 ou 2 meses em congelação não foi afectada pelos regimes.ABSTRACT - Use of tomato pomace in diets for growing and fattening rabbits - This work aims to study the effect of adding tomato pomace to growing and fattening rabbit diets, respective digestibility and anti-oxidation effect in rabbit meat. Four diets were established: a control diet (RCTR), a diet with 6% tomato pomace (RRT6) and a diet with 12% tomato pomace (RRT12) replacing the same quantity of lucerne and a diet with 0,14% vitamin E (RVITE). 48 rabbits (12 x 4) aged 28 to 70 days and in separate lodging were fed with these diets. There were no meaningful differences regarding daily weight gain or daily feed intake. The DM and the OM digestibility was on average 66% and 67%, no differences were registered. The CP digestibility of the tomato pomace was approximately 96% of the RCTR (P= 0,034) and the hemicelulloses (P= 0,005) was superior in RRT6 and RRT12 diets. The pectinolitic activity was superior in the tomato pomace diets. The meat susceptibility to oxidation, at slaughter or after one or two months of freezing, was not affected by the diet
Obesidade e formação de impressões: impacto nas interações sociais
Cada vez mais somos julgados pela aparência, maneira de estar e interagir, originando a formação de impressões.
Neste sentido, esta investigação procura analisar o efeito de um estÃmulo social obeso vs. não obeso na formação de impressões e na interpretação de um conflito/interação social, com base numa imagem que transmitia uma situação laboral entre um chefe e uma secretária.
Para o efeito foi desenvolvido um estudo quantitativo com um design bifatorial (figura: obeso vs. não obeso) x 2 (género: homem vs. mulher). A amostra é constituida por 155 participantes de ambos os géneros com idade superior aos 20 anos, que avaliam os atributos sociabilidade e competência e os comportamentos sedução e amizade.
Os resultados obtidos mostraram que existe um efeito significativo da variável figura obesa na sociabilidade e na avaliação das competências, ou seja, a mulher obesa foi avaliada como mais sociável e mais competente. A variável da figura não obesa revelou efeitos significativos na interpretação de comportamentos de amizade e de sedução, o que significa que a mulher não obesa é considerada mais sedutora e amiga, tendo sido o género homem que evidenciou mais a imagem como de sedução
Estudo de genes de virulência de estirpes de Avian Pathogenic Escherichia coli de aves de produção, para preparação de uma autovacina para imunização protetora
A Colibacilose é um grave e importante problema económico em explorações aviárias. As estirpes de Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) causam uma larga variedade de infeções extraintestinais em aviários, nomeadamente: aerosaculite, colisepticémia e celulites nos frangos de carne e salpingites e peritonites nas galinhas reprodutoras.
Neste trabalho foram estudadas 127 estirpes de Escherichia coli isoladas de galinhas reprodutoras mortas com colibacilose (66) e de frangos de carne saudáveis (61). As sessenta e seis estirpes foram tipificadas com os soros O2, O18 e O78, os serogrupos mais associados com a doença. O78 foi o mais comum (58%). Todas as amostras foram analisadas para a presença/ausência de 11 genes de virulência: astA, chuA, cvaA/B, fimC, fyuA, irp2, iss, iucD, papC, tsh e vat por PCR-Multiplex.. O gene fimC foi detetado em 93% dos isolados. Todas as estirpes patogénicas possuÃam genes relacionados com a absorção de ferro. Os resultados mostram que alguns dos genes são comuns à s estirpes comensais e patogénicas; Abstract:
Title: Study of virulence genes from avian pathogenic Escherichia coli isolated from poultry farms to prepare an auto vaccine to immunization and protection
The Colibacillosis is a serious disease and an important economic problem in poultry farms. It is mainly caused by Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) strains that cause a variety of extraintestinal diseases in poultry farms. The most commonly associated pathologies are: airsacculitis, colisepticemia and cellulitis in broiler chickens, and, salpingitis and peritonitisin laying hens.
In this work a total of 127 strains of Escherichia coli isolated from dead laying hens with colibacillosis (66) and healthy broilers (61) were studied. The strains from laying hens were typified with O2, O18 and O78 serogroups that are mainly associated with disease. O78 was the most common serogroup (58%). All strains were analysed for the presence of 11 virulence genes: astA, chuA, cvaA/B, fimC, fyuA, irp2, iss, iucD, papC, tsh and vat by Multiplex-PCR. The gene fimC was detected in 93% of the isolates. All pathogenic strains harboured iron uptake-related genes. The results show that some genes are common to both commensal and pathogenic E. coli strains
Patients’ perceptions regarding handling and using of the Wii sports system in Parkinson Disease
Poster presented at the 2nd International Congress of CiiEM - Translational Research and Innovation in Human and Health Science. 11-13 June, 2017, Campus Universitário Egas Moniz, Monte de Caparica, PortugalN/
Mid-infrared spectroscopic screening of metabolic alterations in stress-exposed gilthead seabream (Sparus aurata)
Stress triggers a battery of physiological responses in fish, including the activation of metabolic pathways involved in energy production, which helps the animal to cope with the adverse situation. Prolonged exposure to stressful farming conditions may induce adverse effects at the whole-animal level, impairing welfare. Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy is a rapid biochemical fingerprinting technique, that, combined with chemometrics, was applied to disclose the metabolic alterations in the fish liver as a result of exposure to standard stressful practices in aquaculture. Gilthead seabream (Sparus aurata) adults exposed to different stressors were used as model species. Spectra were preprocessed before multivariate statistical analysis. Principal components analysis (PCA) was used for pattern recognition and identification of the most discriminatory wavenumbers. Key spectral features were selected and used for classification using the k-nearest neighbour (KNN) algorithm to evaluate whether the spectral changes allowed for the reliable discrimination between experimental groups. PCA loadings suggested that major variations in the hepatic infrared spectra responsible for the discrimination between the experimental groups were due to differences in the intensity of absorption bands associated with proteins, lipids and carbohydrates. This broad-range technique can thus be useful in an exploratory approach before any targeted analysis.FCT: SFRH/BD/138884/2018/ SFRH/BD/136319/2018/ UIDB/04326/2020/ 16-02-05-FMP-12info:eu-repo/semantics/publishedVersio
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