Mimicking chromosomal instability observed in cancer: a study in mouse embryonic fibroblasts

Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2015O ciclo celular é o período de vida de uma célula que é definido como uma sequência de etapas bem caracterizadas que levam ao seu crescimento e divisão. Neste rigoroso processo participam inúmeros componentes que asseguram que o mesmo ocorre com a maior acuidade possível. A proteína MAD2 é um componente principal do checkpoint mitótico, um processo que integra o ciclo celular assegurando a correta segregação de cromossomas durante a mitose. Esta proteína participa numa via responsável por bloquear a progressão do ciclo celular para a anafase caso, aquando da metafase (fase em que os cromossomas estão dispostos na placa equatorial da célula) os cinetocoros não fiquem correctamente ligados aos microtúbulos. Sabe-se que a sobre-expressão de MAD2 ocorre frequentemente em vários tipos de cancro, sendo responsável pela iniciação e progressão tumoral. Estudos in vitro e também in vivo provam que a sobre-expressão deste gene origina um fenótipo de instabilidade cromossómica. Isto ocorre principalmente porque na ausência de um checkpoint mitótico funcional, as células entram prematuramente em anafase, originando erros mitóticos de segregação, como cromossomas lag, pontes em anafase ou micronúcleos. Consequentemente, geram-se células-filhas com mais ou menos cópias de cromossomas do que a célula-mãe, conhecidas como células aneuplóides. HER2 é um proto-oncogene cuja sobre-expressão já se mostrou ter um papel importante no desenvolvimento e progressão de vários tipos de cancro tendo, tal como no caso de MAD2, influência na iniciação de um fenótipo de instabilidade cromossómica. No laboratório onde este trabalho foi desenvolvido é usado um modelo animal de roedor em que através do sistema condicional Tet-On se induz, após a adição de doxiciclina, a expressão de transgenes de interesse, como é o caso de Mad2 e Her2. Este sistema auxilia num melhor entendimento dos mecanismos moleculares que levam à instabilidade cromossómica e das consequências desta na iniciação tumoral, particularmente em dois tipos específicos de cancro: de mama e pulmonar. Dados clínicos mostram que o nível de sobre-expressão em particular de MAD2 varia entre diferentes tipos de cancro e também entre doentes. De forma a garantir que os estudos realizados com o auxílio do sistema Tet-On possam conduzir a conclusões válidas e úteis para o futuro, é necessário garantir que a situação biológica é de facto mimetizada e que o sistema está optimizado de forma a recapitular a mesma. O sistema Tet-On é modulado através da administração de um antibiótico pertencente à classe das tetraciclinas, sendo o mais comum a doxiciclina. O componente mais regulável deste sistema é este composto que é administrado com o objectivo de, no caso do sistema Tet-On, activar a expressão génica do transgene de interesse. Assim, a melhor forma de optimizar o sistema, para que a expressão do transgene mimetize o que se observa in vivo, é através da regulação da dose de doxiciclina administrada, Foi previamente mostrado no laboratório que a concentração de doxiciclina normalmente utilizada no modelo animal não mimetiza a situação biológica que ocorre em doentes. Isto porque induz uma expressão demasiado elevada dos transgenes de interesse, não recapitulando o mecanismo de iniciação e progressão tumoral provocado pela aneuploidia. Numa tentativa de concluir qual a concentração ideal de doxiciclina que deve ser usada para que os estudos efectuados sejam recapitulativos, neste estudo foi feita uma titulação de doxiciclina em fibroblastos embriónicos de roedor já contendo as construções genéticas de interesse no seu genótipo, referidas mais adiante neste resumo. Os fibroblastos embriónicos foram escolhidos como modelo celular neste estudo porque para além de serem um modelo clássico para estudar alterações genéticas-chave durante a tumorigénese, oferecem inúmeras vantagens temporais comparativamente com culturas celulares humanas. Estas células foram extraídas de fêmeas cruzadas com machos de forma a originar o genótipo TetO-Mad2/Rosa26-rtTA e TetO-Her2/Rosa26-rtTA. Em cultura celular, após a administração de doxiciclina, os fibroblastos, neste caso, sobre-expressam então Mad2 ou Her2 sob a acção do factor de transcrição rtTA, activado pelo promotor Rosa26. Neste trabalho, testaram-se duas concentrações distintas: 50 ng/ml e 1000 ng/ml, sendo que a última é a que é normalmente usada em todas as experiências que fazem uso do sistema Tet-On no laboratório. Observou-se que na concentração mais baixa há uma melhor correlação entre a viablidade celular, comparada através do número de células vivas após vários dias de cultura, e a expressão do transgene de interesse. Por outro lado, a concentração mais elevada e mais comumente utilizada, não terá qualquer vantagem uma vez que tem um efeito tóxico nas células. Para além disto, detetou-se expressão dos transgenes Mad2 e Her2, quando a concentração mais baixa era administrada, o que corrobora a hipótese de que esta concentração é suficiente para activar o sistema Tet-On. Ainda se analisou qual o fenótipo das células plaqueadas com diferentes concentrações de doxiciclina, de forma a que fosse possível correlacionar a concentração deste composto com o número de células presas/sequestradas em mitose, o número de erros mitóticos e também de cromossomas. Os dados obtidos durante este estudo mostram que uma concentração de 50 ng/ml de doxiciclina, tal como uma concentração elevada do mesmo composto, também é capaz de induzir um fenótipo de instabilidade cromossómica, caracterizado por diferentes erros mitóticos e ganho ou perda de cromossomas. A administração de diferentes concentrações de doxiciclina, permitiu correlacionar a possível existência de um valor-limite mínimo de doxiciclina que permite a melhor sobrevivência celular associada à sobre-expressão de Mad2 e Her2. A administração deste valor-limite mínimo permitiria realizar todos os estudos futuros nesta área de uma forma mais recapitulativa, mimetizando a situação biológica que ocorre em doentes. Os resultados deste estudo revelaram que não é necessário comprometer a viabilidade celular utilizando uma concentração elevada de doxiciclina, quando uma concentração mais baixa permite representar uma realidade mais próxima da biológica: ao não ser tão tóxica para as células e ao mesmo tempo, ao recapitular similarmente o que ocorre no organismo de doentes. Este estudo é extremamente útil, na medida em que auxilia na optimização de futuros estudos que façam uso deste sistema induzível por tetraciclina. Particularmente, estudos que visem testar a influência da sobre-expressão de determinados genes, importantes nas mais diversas vias celulares e na iniciação e progressão tumoral.MAD2 is a main component of the spindle assembly checkpoint, a pathway that ensures accurate chromosome segregation. This network is responsible for blocking cell cycle progression in case, upon metaphase, the kinetochores do not become correctly attached to the microtuble spindles. It is known that the overexpression of MAD2 occurs frequently in a number of human cancers. In vitro and also in vivo studies proved that the overexpression of this gene leads to a chromosomal instability (CIN) phenotype and that this phenotype is likely to be responsible for the initiation and progression of different types of cancer. HER2 is a proto-oncogene which overexpression has been shown to play an important role in the development and progression of certain types of cancer, having also influence in initiating CIN. In the lab where this work was developed, a Tet-On mouse model is used in order to, by overexpressing certain transgenes, understand the molecular mechanisms that lead to chromosomal instability and the consequences it may have in tumor initiation. It has been briefly shown before with this model that the concentration of doxycycline commonly used in the experiments in the lab (1000 ng/ml) to activate the system, might not mimic the biological situation, since it induces an overexpression of the transgenes of interest above the overexpression observed in cancer patients. To better address this matter and attempting to conclude what is the optimal concentration of doxycycline to be used, an in vitro titration of doxycycline in Mouse Embryonic Fibroblasts (MEFs) was done. For this study, both Mad2 and Her2 were overexpressed. This mainly permits to understand if there is a minimum threshold of doxycycline that allows cell survival along with Mad2 and Her2 overexpression. It was concluded that of the two tested concentrations, 50 ng/ml and 1000 ng/ml, the lower one shows a better correlation between cell viability and the expression of the transgenes of interest, while the higher concentration does not have any advantage, once it has a toxic effect on cells. Moreover, it was checked what was the phenotype of the cells grown under both concentrations of doxycycline to be able to correlate the concentration of this compound with the number of cells arrested in mitosis, mitotic errors and also the number of chromosomes. The data collected during the course of this study shows that the concentration of doxycycline of 50ng/ml also induces a CIN phenotype characterized by mitotic errors and a lower number of chromosomes in MEFS. This corroborates the hypothesis that it is not necessary to compromise the cell viability with a high concentration of doxycycline, when a lower concentration allows having similar results without risking the cell survival

Fully non-invasive pressure drop measurements and post treatment prediction in congenital heart diseases via cardiac magnetic resonance and computer flow dynamics

Tese de mestrado integrado em Engenharia Biomédica e Biofísica, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2017De acordo com os dados de 2017 da Organização Mundial da Saúde, as doenças cardiovasculares são a principal causa de morte a nível mundial. Se estes tipos de doenças não forem diagnosticadas e tratadas atempadamente, podem levar a insuficiências cardíacas ou outras complicações irreversíveis. As duas doenças cardiovasculares congénitas estudadas neste trabalho são a coarctação aórtica (CoA), caracterizada por uma estenose, habitualmente, na zona do arco da artéria aorta, e a doença da válvula aórtica (AvD), uma malformação ao nível da válvula aórtica. Estas doenças são responsáveis por cerca de 50,000 intervenções por ano. Deste modo, a melhoria métodos de diagnóstico e de intervenção adequados e eficientes é uma prioridade e pode levar ao decréscimo no número das intervenções, bem como reduzir a morbilidade e a mortalidade. A área de imagiologia médica de diagnóstico tem tido uma evolução significativa ao longo dos anos e é de extrema importância nas tentativas de substituição de métodos de diagnóstico invasivos. As imagens médicas são adquiridas e posteriormente processadas e analisadas, com recurso a programas adequados. Atualmente, é possível obter os valores de gradientes de pressão relativa a partir de Ecocardiografia Doppler e Ressonância Magnética. Contudo, os gradientes de pressão medidos no cateterismo cardíaco, o método gold standard para o diagnóstico de CoA e AvD, são gradientes de pressão absoluta. Nesta dissertação desenvolveu-se um método de diagnóstico de CoA e AvD, a partir dos mapas de pressão relativa no estreitamento da aorta e na válvula aórtica, respectivamente. O método matemático desenvolvido tem por base as equações de Poisson, resolvida com a condição de fronteira de Neumann utilizando os métodos de elementos finitos, e a de Navier Stokes para a conservação do momento. O método desenvolvido também tem em conta a informação proveniente da função de Windkessel da artéria aorta, uma artéria distensível. Esta função dá-nos o comportamento da propagação do pulso de pressão com uma velocidade de pulso de propagação. Deste modo, é observado um desfasamento temporal entre as curvas de fluxo da pressão e da velocidade, entre as duas regiões de interesse escolhidas. Deste modo, o método, denominado de Time-shift Corrected Pressure Maps (TCPM, sigla em inglês), permite obter os mapas de pressão absoluta, isto é, mapas de pressão que têm em conta o intervalo de tempo entre os picos de pressão na aorta descendente e ascendente, no caso do primeiro estudo, e antes e depois da válvula aórtica, no caso do segundo estudo. Os pacientes de ambos os estudos tinham indicação clínica para cateterismo cardíaco e foram submetidos a ressonância magnética cardiovascular de contraste de fase em tempo real (4D PC MRI, em inglês), para recolher as imagens ao nível da aorta e da válvula aórtica e os respectivos campos de velocidade da corrente sanguínea. O primeiro estudo tem como objetivo a aplicação do método TCPM a 27 pacientes de CoA (n=16 masculinos, n=11 femininos, faixa etária de 4 a 52 anos, idade média de 20±15 anos). Após aquisição das imagens, estas foram processadas usando programas específicos. Em primeiro lugar foi necessário segmentar a aorta, seguiu-se a seleção das regiões de interesse e, finalmente, a obtenção dos campos de velocidade e dos mapas de pressão relativa entre as duas regiões de interesse selecionadas. Após aplicação do método TCPM, foram aplicados testes estatísticos (correlação, teste t e Bland-Altman) para comparar os valores obtidos a partir de TCPM com os valores obtidos no cateterismo cardíaco. Após processamento das imagens dos 27 pacientes, 6 pacientes foram retirados do estudo. N=3 pacientes foram retirados porque a percentagem de fluxo que passa pelo estreitamento é insuficiente para calcular o gradiente de pressão a partir de TCPM e N=3 pacientes foram retirados porque a aorta não estava inserida por completo no FOV. As medições obtidas a partir de TPCM e cateterismo cardíaco têm uma correlação linear significante (R²=0,90; p<0,001). A partir dos gráficos Bland-Altman é possível verificar uma boa concordância entre as medições de ambos os métodos, com bias de -2,69 mmHg e os limites de concordância de ±4,74 mmHg. O teste de equivalência mostrou uma relação significante entre os métodos (p=0,007). O segundo estudo tem como objetivo a aplicação do método TPCM e o método da Área de Gorlin a 4 pacientes de AvD (n=4 masculinos, faixa etária 17 a 36 anos, idade média 27±7 anos). O método da Área de Gorlin permite obter o gradiente de pressão absoluta a partir da área geométrica da válvula e do fluxo total que passa nessa área. Após a aquisição das imagens, foi feito o processamento das mesmas. Numa primeira fase, as imagens foram segmentadas na região da válvula aórtica. Depois, as imagens segmentadas foram analisadas em dois programas distintos. O primeiro foi utilizado de forma a obter os campos de velocidade e os mapas de pressão relativa entre dois pontos antes e depois da válvula aórtica. O segundo permitiu definir a região da válvula como região de interesse e exportar os valores de velocidade, área, pressão relativa e fluxo absoluto nessa região. Os resultados mostram uma correlação linear significativa entre os valores de cateterismo cardíaco e de TCPM (R²=0,99; p<0,001). Os gráficos de Bland-Altman mostram uma boa concordância entre os valores de TCPM (24,75±22,50 mmHg) e de cateterismo (20,88±19,51 mmHg), com um bias de -3,87 mmHg e limites de concordância de ±3,64 mmHg. Os resultados também sugeriram uma ligeira subestimação dos valores do cateterismo cardíaco a partir do método da Área de Gorlin (14,47±13,00 mmHg), com um bias de 6,41 mmHg e limites de concordância de ±7,15 mmHg. Este estudo foi feito com uma amostra diminuta de 4 pacientes, o que não é suficiente para retirar conclusões com significância. Contudo, foi uma primeira abordagem positiva, que mostra a potencialidade que este método pode vir a apresentar. O método TCPM proposto neste projeto permite a medição não invasiva de gradientes de pressão absoluta a partir de mapas de pressão relativa em pacientes de CoA e AvD. Vários aspectos têm que ser tidos em conta de forma a garantir a eficácia deste método. Por exemplo, as regiões de interesse escolhidas têm que se cuidadosamente selecionadas de forma a serem perpendicular à direção do fluxo naquele local. Só desta maneira é possível obter o fluxo, os campos de velocidade e as pressões relativas corretas. Também, se o raio da estenose for menor que 2 voxéis, a relação sinal-ruído aumenta substancialmente, e a resolução especial da aquisição é insuficiente. Contudo, a aplicação do método TPCM a casos de grande estreitamento não é necessária visto que estes casos já são tipicamente identificados em imagens anatómicas de ressonância magnética e que o paciente segue automaticamente para intervenção quando a área do estreitamente representa cerca de 50% do valor de área típico da aorta. O método não invasivo TCPM apresenta uma boa concordância com o cateterismo cardíaco em termos da medição dos gradientes de pressão em CoA e AvD. Os bias e os limites de concordância entre cateterismo e TCPM foram substancialmente mais pequenos que os bias e os limites de concordância entre cateterismo e ecocardiografia Doppler e entre o cateterismo e o método da Área de Gorlin. Com os resultados apresentados já é possível ver o potencial desta técnica no processo de diagnóstico e decisão de intervenção em casos de CoA e AvD. Contudo, estudos com populações maiores será extremamente benéfico para validar clinicamente este método.This dissertation aims to validate MRI-based time-shift corrected pressure mapping (TCPM) against cardiac catheterization in CoA and AvD patients. Also, in AvD patients, catheterization will be compared against Gorlin Area method. This project is divided in two independent studies: the first one for CoA patients and the second one for AvD patients, all with clinical indication for cardiac catheterization. In both CoA and AvD, clinical guidelines recommend treatment in the presence of a relevant pressure gradient. While reliable non-invasive measurement approaches would be crucial, the accuracy of currently available methods has been limited. In both studies, 4D PC-MRI was performed to compute relative pressure maps via Pressure-Poisson equation. To consider the patient-specific peak pressure time-shift from the ascending to the descending aorta and before and after the aortic valve, relative pressure gradient maps were corrected by the inertial term. Comparison between TCPM and invasive peak-to-peak measurements was performed using correlation, Bland-Altman plots and mean-equivalence t-test. In the first study, with a cohort of 21 patients with CoA, TCPM and catheter measurements showed significant linear correlation (R²=0.90; p<0.001). Bland-Altman plots demonstrated good agreement between TCPM and catheter derived pressure gradients with mean differences of -2.69 mmHg and 95% limits of agreement between -6.38 and 1.00 mmHg between methods. The mean-equivalence test was significant (p=0.007). In the second study, with a cohort of 4 patients with AvD, the catheterization measurements were compared against TPCM measurements. The results showed significant linear correlation (R²=0.99; p<0.001). Bland Altman plots showed a good agreement between TCPM (24.75±22.50 mmHg) and catheter derived peak-to-peak pressure gradients (20.88±19.51 mmHg), and suggested slight underestimation of the pressure gradients by the Gorlin Area method (14.47±13.00 mmHg). Non-invasive TCPM showed equivalence to pressure gradients from invasive heart catheterization in patients with CoA and AvD. However, in the AvD study, they were obtained for a very small cohort of patients and do not have sufficient statistical significance to validate the method for AvD patients

Floração e frutificação da pitaia (Hylocereus undatus)

O Algarve apresenta condições edafoclimáticas adequadas para o cultivo de algumas espécies frutícolas oriundas de climas tropicais ou subtropicais. Muitos destes frutos estão associados a inúmeros benefícios para a saúde humana. A pitaia é o exemplo perfeito disso e tem perfil para atender a um dos principais objetivos da agricultura algarvia: dinamização da fruticultura, com destaque para o uso de espécies com baixas necessidades hídricas. O cultivo comercial da pitaia é recente em Portugal e carece de informação quanto às suas preferências. O objetivo deste trabalho passa por avaliar as necessidades da cultura utilizando dois sistemas diferentes para o estudo das mesmas: ar livre e estufa. Ao ar livre, estudaram-se o espaçamento entre plantas, a cobertura do solo para controlo de infestantes, e potenciais técnicas de indução floral como o sombreamento e a iluminação artificial. Também se avaliou o efeito da polinização livre e manual no vingamento, no peso e nas características químicas dos frutos. As plantas estudadas completam três anos após plantação no final do verão de 2022 e o espaçamento que se revelou como mais produtivo até agora foi o de 0,5 m entre plantas. A cobertura de solo com recurso ao mulching foi a que apresentou teores de matéria orgânica e azoto mais elevados, razão pela qual a produção desta modalidade foi superior. Nas condições de campo deste ensaio, verificou-se que quer a implantação do sombreamento, quer a do sistema de iluminação artificial não produziram efeitos assinaláveis. As polinizações livre e manual resultaram em frutificação abundante e boas características físicas e químicas dos frutos. Em estufa pretendeu-se estabelecer a preferência da cultura quanto ao tipo de solo. De entre os vários estudados, o solo argiloso foi o que influenciou positivamente a produção das plantas, sendo que a inclusão de matéria orgânica se confirmou como uma mais-valia para a cultura.Algarve presents suitable edaphoclimatic conditions for the cultivation of some fruit species from tropical or subtropical climates. Many of these fruits are associated with numerous benefits to human health. The pitaya is the perfect example of this and has the profile to meet one of the main objectives of Algarve agriculture: dynamization of fruit growing, with emphasis on the use of species with low water requirements. The commercial cultivation of pitaya is recent in Portugal and there is a lack of information about its preferences. The objective of this work is to evaluate the needs of the culture using two different systems for their study: open field and greenhouse. In open field conditions, plant spacing, ground cover for weed control, and potential floral induction techniques such as shading and artificial lighting were studied. The effect of free and manual pollination on fruit set, weight and chemical characteristics was also evaluated. The studied plants complete three years after planting at the end of the summer of 2022 and the spacing that proved until now to be the most productive was 0.5 m between plants. The soil cover using mulching was the one that presented the highest levels of organic matter and nitrogen, which is why the production of this treatment was higher. Under the field conditions of this experiment, it was found that both the implementation of shading and the artificial lighting system did not produce any noticeable effects. Free and manual pollination resulted in abundant fruiting and good physical and chemical characteristics of the fruits. In a greenhouse, it was intended to establish the preference of the crop regarding the type of soil. Among the several studied, the clayey soil was the one that positively influenced the production of plants, and the inclusion of organic matter was confirmed as an asset for the culture

Hábitos parafuncionais e disfunções temporomandibulares - à luz do conhecimento atual

Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Universitário Egas MonizUma disfunção refere-se ao insucesso de um mecanismo interno de realizar uma função natural que lhe era delineado, sendo que uma disfunção temporomandibular (DTM) apresenta-se como um fenómeno caracterizado por dores miofaciais, que envolve os músculos mastigadores, a região craniocervical e a região da articulação temporomandibular. Por outro lado, um hábito parafuncional é todo um comportamento que não tem um propósito funcional, contrariamente a comportamentos como a fala, mastigação e deglutição. Dentro dos fatores abrangidos na patogénese da DTM, o papel dos hábitos parafuncionais tem sido estudado, sendo que o bruxismo tem sido considerado um importante fator de associação às DTM’s. Na articulação temporomandibular (ATM), os reflexos deste hábito estão intimamente relacionados às mudanças que ocorrem nos músculos, tendo sido reconhecidos como fatores de risco significante para artralgia temporomandibular, e associados à dor miofascial mastigatória, podendo também ser responsáveis por dor ou tensão na região cervical. A etiologias de ambas as patologias, bem como a sua possível relação ainda não estão totalmente esclarecidas, pelo que são necessários mais estudos dentro desta temática. A importância e o papel do médico dentista nas disfunções temporomandibulares e hábitos parafuncionais começa na procura de um correto diagnóstico individual para cada paciente, classificando o problema e identificando os sinais e sintomas. A abordagem terapêutica deve incluir técnicas de abordagem multidisciplinar, tendo como objetivo comum garantir o controlo da dor e reequilíbrio funcional do indivíduo.A dysfunction refers to the failure of an internal mechanism to perform a natural function that was delineated, and a temporomandibular disorder (TMD) presents as a phenomenon characterized by myofacial pain, involving the chewing muscles, the craniocervical region and the temporomandibular joint. On the other hand, a parafunctional habit is a behavior that does not have a functional purpose, contrary to behaviors like speech, chewing and swallowing. Among the factors covered in the pathogenesis of TMD, the role of parafunctional habits has been studied, and bruxism has been considered an important TMD association factor. In the temporomandibular joint (TMJ), the reflexes of this habit are closely related to the changes that occur in the muscles, being recognized as significant risk factors for temporomandibular arthralgia, being associated with masticatory myofascial pain, being also responsible for pain or tension in the cervical region. The etiologies of both pathologies, as well as their possible relation are still not totally clarified, reason why more studies within this subject are necessary. The importance and role of the dentist in temporomandibular disorders and parafunctional habits begins with the search for a correct individual diagnosis for each patient, classifying the problem and identifying the signs and symptoms. The therapeutic should include techniques of multidisciplinary approach, with the common goal of ensuring pain control and functional balancing of the individual

Nursing intervention in adolescents energy drinks

O consumo de bebidas energéticas é muito recente e nos últimos anos tem-se vindo a verificar um aumento na sua popularidade, principalmente entre os mais jovens. Este fenómeno tem suscitado apreensão na medida em que a evidência científica demonstra que o seu consumo poderá acarretar riscos para a saúde e não é recomendado a crianças e adolescentes. Neste âmbito foi desenvolvido um projeto de intervenção comunitária que teve como objetivo contribuir para a adoção de comportamentos saudáveis que conduzam à prevenção e redução do consumo de bebidas energéticas em alunos do 2º e 3º ciclo e secundário dos agrupamentos da rede escolar pública, no ano letivo 2019/2020, no concelho da área de influência da Unidade de Cuidados na Comunidade onde decorreu o estágio final. A intervenção comunitária foi desenvolvida de acordo com a metodologia de Planeamento em Saúde e como referencial teórico foi adoptado o Modelo de Promoção da Saúde de Nola J. Pender. Na etapa de diagnóstico de saúde foi realizado um estudo quantitativo descritivo transversal com a aplicação de um inquérito aos hábitos de consumo de bebidas energéticas e refrigerantes na população alvo. Após a análise dos resultados selecionou-se como problema prioritário o consumo de bebidas energéticas pelos adolescentes. A estratégia selecionada de modo a atingir os objetivos fixados foi a Educação para a Saúde. Foram desenvolvidas sessões de Educação para a Saúde em turmas do 6º, 9º e 12º ano de escolaridade e atividades dirigidas aos profissionais de saúde da Unidade de Cuidados na Comunidade e a toda a comunidade escolar. Pela avaliação dos resultados obtidos pode-se considerar que os objetivos propostos para a intervenção comunitária foram alcançados com sucesso. A realização das atividades necessárias à consecução desta intervenção foram fundamentais para a aquisição de competências na área da enfermagem de Saúde Pública e Saúde Comunitária.The consumption of energy drinks is very recent and in the last few years there has been an increase in its popularity, especially among young people. This phenomenon has raised apprehension in that scientific evidence demonstrates that its consumption may pose health risks and is not recommended for children and adolescents. In this context, a community intervention project was developed with the objective to contribute to the adoption of healthy behaviors that lead to the prevention and reduction of energy drink consumption in middle and secondary school students in the public school system, in the school year 2019/2020, in the municipality of the Community Care Unit area of influence where the final stage took place. The community intervention was developed according to the Health Planning methodology and as a theoretical framework, Nola J. Pender’s Health Promotion Model was adopted. In the health diagnosis stage, a descriptive cross-sectional quantitative study was conducted with the application of a survey of the consumption habits of energy drinks and soft drinks in the target population. Following the analysis of the results, the consumption of energy drinks by adolescents was selected as a priority problem. The strategy selected in order to achieve the objectives set was Health Education. Health Education sessions were developed with the 6th, 9th and 12th year of schooling. Activities were aimed also at health professionals in the Community Care Unit and the entire school community. By evaluating the results obtained, it can be considered that the objectives proposed for community intervention have been successfully achieved. The performance of the activities necessary to achieve this intervention were fundamental for the acquisition of competencies in the nursing area of Public and Community Healt

The usefulness of calcium/magnesium ratio in the risk stratification of early onset of renal replacement therapy

A growing number of studies have reported a close relationship between high serum calcium (Ca)/low serum magnesium (Mg) and vascular calcification. Endothelial dysfunction and vascular inflammation seem plausible risk factors for the enhanced progression of kidney disease. The aim of this study was to evaluate the role of the Ca/Mg ratio as a predictor of the early onset of renal replacement therapy (RRT). Methods: This was a prospective study conducted in an outpatient low-clearance nephrology clinic, enrolling 693 patients with stages 4–5 of CKD. Patients were divided into two groups according to the start of renal replacement therapy (RRT). Results: The kidney’s survival at 120 months was 60% for a Ca–Mg ratio < 6 and 40% for a Ca–Mg ratio ≥ 6 (p = 0.000). Patients who started RRT had lower levels of Hb, Ca, Mg, albumin, and cholesterol and higher values of phosphorus, the Ca/Mg ratio, and PTH. High values of phosphorus and the Ca/Mg ratio and low levels of Mg and GFR were independent predictors of entry into RRT. A high Ca/Mg ratio, high phosphorus levels, and low levels of GFR were associated with a cumulative risk for initiation of RRT. Conclusions: In our population, the Ca/Mg ratio is an independent predictive factor for the initiation of a depurative technique.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Effects of Glyphosate-Based Herbicide on Primary Production and Physiological Fitness of the Macroalgae Ulva lactuca

The use of glyphosate-based herbicides (GBHs) worldwide has increased exponentially over the last two decades increasing the environmental risk to marine and coastal habitats. The present study investigated the effects of GBHs at environmentally relevant concentrations (0, 10, 50, 100, 250, and 500 g L1) on the physiology and biochemistry (photosynthesis, pigment, and lipid composition, antioxidative systems and energy balance) of Ulva lactuca, a cosmopolitan marine macroalgae species. Although GBHs cause deleterious effects such as the inhibition of photosynthetic activity, particularly at 250 g L1, due to the impairment of the electron transport in the chloroplasts, these changes are almost completely reverted at the highest concentration (500 g L1). This could be related to the induction of tolerance mechanisms at a certain threshold or tipping point. While no changes occurred in the energy balance, an increase in the pigment antheraxanthin is observed jointly with an increase in ascorbate peroxidase activity. These mechanisms might have contributed to protecting thylakoids against excess radiation and the increase in reactive oxygen species, associated with stress conditions, as no increase in lipid peroxidation products was observed. Furthermore, changes in the fatty acids profile, usually attributed to the induction of plant stress response mechanisms, demonstrated the high resilience of this macroalgae. Notably, the application of bio-optical tools in ecotoxicology, such as pulse amplitude modulated (PAM) fluorometry and laser-induced fluorescence (LIF), allowed separation of the control samples and those treated by GBHs in different concentrations with a high degree of accuracy, with PAM more accurate in identifying the different treatmentsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersio

A comparison between pure active pharmaceutical ingredients and therapeutic deep eutectic solvents: solubility and permeability studies

THEDES, so called therapeutic deep eutectic solvents are here defined as a mixture of two components, which at a particular molar composition become liquid at room temperature and in which one of them is an active pharmaceutical ingredient (API). In this work, THEDES based on menthol complexed with three different APIs, ibuprofen (ibu), BA (BA) and phenylacetic acid (PA), were prepared. The interactions between the components that constitute the THEDES were studied by NMR, confirming that the eutectic system is formed by H-bonds between menthol and the API. The mobility of the THEDES components was studied by PFGSE NMR spectroscopy. It was determined that the self-diffusion of the species followed the same behavior as observed previously for ionic liquids, in which the components migrate via jumping between voids in the suprastructure created by punctual thermal fluctuations. The solubility and permeability of the systems in an isotonic solution was evaluated and a comparison with the pure APIs was established through diffusion and permeability studies carried out in a Franz cell. The solubility of the APIs when in the THEDES system can be improved up to 12 fold, namely for the system containing ibu. Furthermore, for this system the permeability was calculated to be 14 105 cm/s representing a 3 fold increase in comparison with the pure API. With the exception of the systems containing PA an increase in the solubility, coupled with an increase in permeability was observed. In this work, we hence demonstrate the efficiency of THEDES as a new formulation for the enhancement of the bioavailability of APIs by changing the physical state of the molecules from a solid dosage to a liquid system.he European Union’s Seventh Framework Programme (FP7/2007- 2013) under grant agreement nREGPOT-CT2012-316331- POLARIS and from Project ‘‘Novel smart and biomimetic materials for innovative regenerative medicine approaches (Ref.: RL1 - ABMR - NORTE-01-0124-FEDER-000016)” co-financed by North Portugal Regional Operational Programme (ON.2 – O Novo Norte), under the National Strategic Reference Framework (NSRF), through the European Regional Development Fund (ERDF). Funding was also provided by Fundação para a Ciência e a Tecnologia, through contracts LAQV-REQUIMTE: UID/QUI/50006/2013 and UCIBIOREQUIMTE: UID/Multi/04378/2013. This work was co-financed by the ERDF under the PT2020 Partnership Agreement (POCI-01- 0145-FEDER-007728).info:eu-repo/semantics/publishedVersio

Primary non-adherence in Portugal: findings and implications

The final publication will be available at Springer via http://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11096-015-0108-1"Background: Portugal is currently facing a serious economic and financial crisis, which is dictating some important changes in the health care sector. Some of these measures may potentially influence patients’ access to medication and consequently adherence, which will ultimately impact on health status, especially in chronic patients. Aims: This study aimed at providing a snapshot of adherence in patients with chronic conditions in Portugal between March and April 2012. Setting: Community pharmacy in Portugal Method: A cross-sectional pilot study was undertaken, where patients were recruited via community pharmacies to a questionnaire study evaluating the number of prescribed and purchased drugs and, when these figures were inconsistent, the reasons for this. Main outcome measures: Primary and secondary adherence measures. Failing to purchase prescription items was categorized as primary nonadherence. Secondary nonadherence was attributed to purchasing prescription items, but not taking medicines as prescribed. Results: Data were collected from 375 patients. Primary nonadherence was identified in 22.8% of patients. Regardless of the underlying condition, the most commonly reported reason for primary non-adherence was having spare medicines at home (“left-overs”), followed by financial problems. The latter appeared to be related to the class of medicines prescribed. Primary non-adherence was associated with low income (<475 €/month; p=0.026). Secondary non-adherence, assessed by the 7-MMAS was detected in over 50% of all patients, where unintentional nonadherence was higher than intentional nonadherence across all disease conditions. Conclusion: This study revealed that more than one fifth of chronic medication users report primary nonadherence (22.8%) and more than 50% report secondary nonadherence. Data indicates that the existence of spare medicines and financial constraints occurred were the two most frequent reasons cited for nonadherence (47,6-64,8% and 19-45.5%, depending on the major underlying condition, respectively)."All authors are part of the Portuguese Observatory of Health Systems (OPSS)

Intervenções de enfermagem na transição de cuidados em adultos com acidente vascular cerebral: uma scoping review

Introduction: A stroke is an event that in an acute way changes the life of a person and their family members. Scientific evidence points towards a need in the health system to establish interventions which favour continuity of care after the acute phase, with emphasis on the rehabilitation period and social and community reintegration. Taking into account the fundamental intervention of the nurse in the transition of care, this scoping review becomes relevant.&nbsp;Aim: To identify nursing interventions in the transition of care, particularly in adults with a diagnostic of stroke who usually present with problems after their hospital discharge.&nbsp;Materials and Methods: The Joanna Briggs Institute protocol was used for this revision.&nbsp;Results: In agreement with the defined criteria, 5 articles were analysed. The articles of the processes of transition of care, which were analysed, were mostly developed or generated by nurses or multidisciplinary teams in which the nurse assumes the primary role.&nbsp;Conclusion: Nursing interventions which should be developed in key moments, were identified, which show the effective transition of care of the person with a diagnosis of a stroke, namely in the preparation of discharge, the moment of discharge and the accompanying of the patient in the weeks following the hospital discharge.Introdução: O Acidente Vascular Cerebral (AVC) é um evento que, de modo súbito, muda a vida das pessoas e dos seus familiares. A evidência científica aponta para a necessidade de que os sistemas de saúde estabeleçam intervenções que possam favorecer a continuidade de cuidados após a fase aguda com ênfase no período de reabilitação e reinserção social e comunitária. Tendo em conta a intervenção fundamental do enfermeiro na transição de cuidados, torna-se pertinente a realização desta scoping review.&nbsp;Objetivo: Identificar as intervenções de enfermagem na transição de cuidados, particularmente, em adultos com diagnóstico de AVC que usualmente apresentam limitações após a alta hospitalar.&nbsp;Materiais e Métodos: A revisão foi realizada segundo o protocolo de Joanna Briggs Institute.&nbsp;Resultados: De acordo com os critérios definidos foram incluídos na análise 5 artigos. Os processos de transição de cuidados analisados nos artigos foram maioritariamente desenvolvidos ou geridos por enfermeiros ou por equipas multidisciplinares nas quais o enfermeiro assumiu um papel primordial.&nbsp;Conclusão: Identificaram-se intervenções de enfermagem que se mostraram eficazes na transição de cuidados da pessoa com diagnóstico de AVC, que devem ser desenvolvidas em momentos chave, nomeadamente, na preparação da alta, no momento da alta e no acompanhamento nas semanas seguintes à alta hospitalar