Variabilidade nos genes da insulina e pax4 em crianças com diabetes mellitus tipo 1

Orientadora : Profª. Drª. Fabiane G. M. RegoCoorientador : Prof. Dr. Geraldo PichethDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 15/12/2016Inclui referências : f. [81-95]Área de concentração: Análises clínicasResumo: Diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma doença grave que afeta um grande número de pacientes jovens. É caracterizada pela incapacidade do organismo para produzir insulina devido a destruição auto-imune das células beta pancreáticas. Corresponde cerca de 10% do número de diabéticos e tem aumentado cerca de 3% a cada ano, ocorrendo principalmente em crianças. O objetivo do trabalho foi avaliar a associação de polimorfismos de nucleotídeo único dos genes da Insulina (rs3842752) e PAX4 (Paired Box4) (rs 2233575 e rs712701) com o DM1 em um estudo de caso-controle e a correlação destas variações com os marcadores bioquímicos de perfil glicêmico (glicose, Hemoglobina glicada , 1,5-AG), perfil lipídico (colesterol total, colesterol-HDL, colesterol-LDL, triglicerídeos), função renal (ureia, creatinina) e, dados clínicos das crianças estudadas (idade, peso, IMC, Z-score, histórico familiar de DM, histórico de cetoacidose diabética). Foram estudadas 316 crianças Euro-brasileiras, não relacionadas, sendo 148 crianças com DM1 e 168 crianças saudáveis (grupo controle). As genotipagens dos polimorfismos selecionados para o estudo foram realizadas por PCR-RFLP (rs3842752 e rs2233575) e por TaqMan® (rs712701). O projeto teve aprovação do comitê de ética da UFPR (CAAE: 24676613.6.0000.0102). Crianças com DM1 apresentaram Z-score significativamente menor (P<0,05) quando comparado ao grupo controle. As concentrações séricas de glicemia em jejum, HbA1c, colesterol total, HDL, LDL, ureia e creatinina foram significativamente maiores no grupo com DM1. Entretanto, o grupo controle apresentou concentrações séricas significativamente maiores quanto a 1,5-AG, triglicérides, ácido úrico e proteínas totais. Os polimorfismos em estudo estão no equilíbrio de Hardy-Weinberg. Para o grupo saudável os alelos de menor frequência apresentaram respectivamente 15,8% (95%IC 12-20) para o rs3842752, 26,5% (95%IC 22-31), para o rs712701. Já o rs2233575 não se detectou o alelo de menor frequência. O polimorfismo rs712701 do gene PAX4 não foi associados ao DM1. O polimorfismo rs3842752 foi associado ao aumento de glicose e creatinina no grupo DM1. As frequências genotípicas e alélicas do polimorfismo rs3842752 do gene da insulina apresentaram diferenças significativas (P<0,05) entre os grupos estudados, sendo associado ao DM1. Portadores do alelo T possuem risco reduzido para desenvolver DM1 em cerca de um terço com OR: 0,31 (95%IC 0,17-0,55) e os portadores do alelo C possuem risco aumentado em cerca de 3 vezes de desenvolver DM1 com OR: 3,28 (95%IC 1,83-5,87). Palavras chave: Diabetes mellitus tipo 1; Polimorfismos de único nucleotídeo; Variabilidade genética.Abstract: Type 1 diabetes mellitus (T1DM) is a severe disease affecting a large number of young patients. It is characterized by the body's inability to produce insulin due to the autoimmune destruction of the beta cells in the pancreas. It corresponds to about 10% of the number of diabetics and has increased about 3% per year, occurring mostly in children. The aim of the study was to evaluate the association of single nucleotide polymorphisms of Insulin gene (rs3842752) and PAX4 (Paired Box4) (rs 2233575, and rs712701) with T1D in a case-control study, and the correlation of these changes with biochemical markers of glycemic profile (glucose, HbA1c, 1,5- AG), lipid profile (total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol, triglycerides), renal function (urea, creatinine), total protein, albumin, uric acid, and clinical data of the children (age, weight, BMI, Z-score, DM family history, diabetic ketoacidosis history). Have been studied 316 Euro-Brazilian children, and the subjects were classified as T1D patients (T1DM, n= 148), and healthy children (control, n= 168). The genotyping of the polymorphisms was performed by RFLP-PCR (rs3842752, and rs2233575), and by the method TaqMan® (rs712701). The project was approved by the Ethics Committee UFPR (CAAE: 24676613.6.0000.0102). Children with T1DM presented Z-score lower compared to the control group. Serum concentrations of fasting glucose, HbA1c, total cholesterol, HDL, LDL, urea and creatine were significantly higher in the group with T1D. However, the control group had significantly higher serum concentrations as 1,5-AG, triglycerides, uric acid and total protein. The studied variants were in the Hardy- Weinberg equilibrium. For the control group, the frequency of minor alleles was 15.8% (95% CI 12-20) for rs3842752, 26.5% (95% CI 22-31) for rs712701 respectively, while for the rs2233575 was not observed allele lower frequency. The rs712701 polymorphism, in the PAX4 gene was not associated with T1D. The rs3842752 polymorphism was associated with increased glucose and creatinine in T1DM group. The genotype and allelic frequencies of the rs3842752 polymorphism of the insulin gene, differed significantly between the study groups (P<0.05), being associated with T1D. Carriers of the T allele of rs3842752 have a reduced risk to develop T1D in about one third OR: 0.31 (95% CI 0.17 to .55). However, carriers of the C allele have an increased risk by about 3 times to develop T1DM, OR: 3.28 (95% CI 1.83 to 5.87). Key-words: Type 1 diabetes mellitus; Single nucleotide polymorphisms; Genetic variability

Immunodominance: a new hypothesis to explain parasite escape and host/parasite equilibrium leading to the chronic phase of Chagas' disease?

Intense immune responses are observed during human or experimental infection with the digenetic protozoan parasite Trypanosoma cruzi. The reasons why such immune responses are unable to completely eliminate the parasites are unknown. The survival of the parasite leads to a parasite-host equilibrium found during the chronic phase of chagasic infection in most individuals. Parasite persistence is recognized as the most likely cause of the chagasic chronic pathologies. Therefore, a key question in Chagas' disease is to understand how this equilibrium is established and maintained for a long period. Understanding the basis for this equilibrium may lead to new approaches to interventions that could help millions of individuals at risk for infection or who are already infected with T. cruzi. Here, we propose that the phenomenon of immunodominance may be significant in terms of regulating the host-parasite equilibrium observed in Chagas' disease. T. cruzi infection restricts the repertoire of specific T cells generating, in some cases, an intense immunodominant phenotype and in others causing a dramatic interference in the response to distinct epitopes. This immune response is sufficiently strong to maintain the host alive during the acute phase carrying them to the chronic phase where transmission usually occurs. At the same time, immunodominance interferes with the development of a higher and broader immune response that could be able to completely eliminate the parasite. Based on this, we discuss how we can interfere with or take advantage of immunodominance in order to provide an immunotherapeutic alternative for chagasic individuals.Millennium Institute for Gene TherapyConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Escola Paulista de Medicina Centro Interdisciplinar de Terapia GênicaUNIFESP, EPM, Centro Interdisciplinar de Terapia GênicaFAPESP: 2006/1983-4||FAPESP: 2003/09675-9FAPESP: 2003/09672-0FAPESP: 2004/110106-6CNPq: 420067/2005-1CNPq: 307151/2006-9SciEL

PREVALÊNCIA DE DOENÇAS OPORTUNISTAS EM PACIENTES COM HIV/AIDS ATENDIDOS NO SERVIÇO DE ATENDIMENTO ESPECIALIZADO (SAE) DO MUNICIPÍO DE QUIXADÁ-CE

A Síndrome da Imunodeficiência Humana Adquirida (AIDS) é obtida através do ataque do vírus da imunodeficiência humana (HIV), deixando o organismo suscetível às infecções oportunistas

Desenvolvimento e Validade de Conteúdo do IFERA-II para Adultos

Considering the importance of the functional assessment, a scale was developed to evaluate Executive Functions (EFs), State Regulation (SR) and Delay Aversion (DA) in adults, based on a children’s scale, and evidence of content validity was investigated. In Phase 1, items from the children’s version were adapted to generate the Inventory of Difficulties in Executive Functions, Regulation and Delay Aversion for Adults (IFERA-II), with 28 items of EFs (inhibition, working memory and flexibility), RS and DA. Analysis by judges verified the representativeness of the contents of the items. After adaptations, 18 adult participants responded to the IFERA-II and were interviewed regarding comprehension, need for examples and clarity of vocabulary. A new revision led to the preliminary version of the IFERA-II, the psychometric properties of which should be investigated.Diante da importância da avaliação funcional, foi elaborada uma escala para avaliar Funções Executivas (FE), Regulação do Estado (RE) e Aversão ao Adiamento (AA) em adultos, baseada em uma escala infantil, e foram investigadas evidências de validade de conteúdo. Na Fase 1, itens da versão infantil foram adaptados gerando o Inventário de Dificuldades em Funções Executivas, Regulação e Aversão ao Adiamento para Adultos (IFERA-II), com 28 itens de FE (inibição, memória de trabalho, flexibilidade), RE e AA. Análise pelos juízes verificou representatividade de conteúdo dos itens. Após adequações, 18 participantes adultos responderam ao IFERA-II e à entrevista sobre compreensão, necessidade de exemplos e clareza de vocabulário. Nova revisão resultou na versão preliminar do IFERA-II, cujas propriedades psicométricas devem ser investigadas futuramente

Concordância entre instrumentos de avaliação da fragilidade em idosos na atenção primária à saúde

Objetivo: Avaliar o nível de concordância entre a Avaliação Subjetiva da Fragilidade (SFA) e o Índice de Vulnerabilidade Clínico-Funcional (IVCF-20) para rastreio da fragilidade em idosos.Métodos: Estudo descritivo, comparativo e transversal realizado em 2018/2019 com 492 idosos, em 09 Estratégias Saúde da Família no município de Três Lagoas-MS. A Fragilidade foi avaliada utilizando a SFA e IVCF-20 e entrevista estruturada. Para comparações, utilizou testes de Wilcoxon e qui-quadradode Pearson.Resultados: Concordância foi de 35,4%, com coeficiente Kappa de 0,11. Dicotomizando em idosos frágeis e não-frágeis, a concordância foi de 70,1%, com coeficiente Kappa foi 0,41 e o alfa de Cronbach para IVCF-20 foi 0.61 e SFA 0.74. A prevalência da fragilidade foi menor do IVCF - 20 (17,1%) e maiorna SFA (59,8%).Conclusão: A concordância entre os dois instrumentos variou de baixa a moderada, destacando a necessidade de padronizar o instrumento para aferir a fragilidade em idosos comunitários. Palavras-chave: Idoso fragilizado. Reprodutibilidade dos testes. Atenção primária à saúde. Vulnerabilidade em saúde

LOCALIZADORES APICAIS NA PRÁTICA ODONTOLÓGICA

O conhecimento da anatomia dental interna e externa aliado ao uso de localizadores apicais e tomadas radiográficas corretas, qualificam o tratamento endodôntico, uma vez que conferem uma maior precisão técnica durante a fase de preparo e obturação dos canais. Estes localizadores apresentam um índice de acerto bastante elevado independente da solução irrigadora utilizada durante a instrumentação ou da presença de outros fluídos no interior do canal. Neste sentido, os localizadores apicais eletrônicos servem como grandes auxiliares no tratamento endodôntico, para localizarem o local de menor diâmetro do canal radicular que servirá de ponto de referência para o final das manobras de preparo e obturação. Na atualidade os localizadores apicais eletrônicos vêm sendo utilizados com a finalidade de determinar o local da constrição apical, obtendo em diversos estudos relatam alta taxa de acurácia. Existe apenas uma contraindicação formal que é o uso em pacientes com marca- passo. Tais aparelhos funcionam em uma gama de situações na prática clínica, como nos tratamentos de dentes vitais e não-vitais, retratamentos e em casos de fraturas. Tais aparelhos, ainda conseguem localizar possíveis fraturas na raiz do elemento dentário bem como perfurações. Desta forma, o objetivo desta revisão de literatura é de promover uma atualização sobre os conhecimentos que envolvem o uso de localizadores apicais nos cursos de graduação de Odontologia

Barreiras e facilitadores da adesão ao tratamento de tuberculose em crianças e adolescentes

INTRODUCTION: Tuberculosis (TB), an infectious and contagious disease, requires prolonged treatment and usually affects socially vulnerable patients, which increases the risk of abandonment during its course. Children and adolescents are susceptible to this infection, requiring adequate treatment for a favorable clinical outcome. It is known that adherence to TB treatment is the main obstacle to cure the disease, and it is important to know the factors that could influence this adherence. The aim of this review is to analyze the factors that interfere with adherence to TB treatment in children and adolescents. METHODS: This systematic literature review was conducted by searching the descriptors Tuberculosis (OR Tuberculosis) AND Adherence (OR Adhesion) in the PubMed, Scielo and Lilacs databases. Articles about the adherence of children and adolescents to TB treatment were included. Duplicates were excluded. The selection of articles for review was conducted in the following steps: analysis of titles, reading of abstracts and full articles. At the end of the selection, 28 articles were reviewed. RESULTS: The main barriers to adherence to TB treatment were: prolonged treatment time, adverse effects, caregivers lack of knowledge about the disease and latent infection and socioeconomic status. The main facilitators were: shorter treatment, directly observed, financial support and advice from patients and caregivers. HIV-TB co-infection can increase adherence due to routine medication intake, or decrease due to the increase in adverse effects. CONCLUSION: The acknowledgement of the facilitators and barriers to adherence allows directing the necessary efforts to promote best response to TB treatment

Subclinical intramammary infection does not affect bovine milk ethanol stability

Neste trabalho investigou-se a hipótese de que a infecção intramamária (IIM) poderia reduzir a estabilidade do leite ao etanol (ELA), principalmente quando a IIM é causada por agentes primários. Assim, em um experimento de exposição natural, foi avaliado o efeito da IIM sobre a ELA em bovinos. Noventa e quatro vacas em lactação de cinco rebanhos leiteiros foram selecionadas por apresentar IIM, segundo resultados de cultura bacteriológica de amostras compostas de leite (isolamento positivo) e contagem de células somáticas (CCS) &gt; 200×103 células/mL em pelo menos duas de três coletas semanais consecutivas. Após essa seleção, as vacas foram amostradas pela segunda vez (dentro de duas semanas) para avaliação da IIM em amostras de leite coletadas por quarto mamário (n = 326): produção de leite (kg/quarto/dia), ELA, composição (gordura, proteína, lactose, caseína, sólidos totais e sólidos não gordurosos) e cultura bacteriológica. O efeito da mastite subclínica sobre a ELA foi testada por dois modelos: 1) comparação de quarto sadio versus infectado; e 2) comparação de quartos mamários contralaterais. A única variável de composição do leite associada à ELA foi a lactose (r = 0,18; P &lt; 0,01). A IIM subclínica não afetou a ELA quando a comparação foi realizada utilizando-se os dois modelos (1 e 2); bem como a ELA não foi alterada quando os quartos infectados foram classificados em grupos de agentes patogênicos (primários, secundários e infrequentes; ou contagiosos, ambientais, secundários e infrequentes) e comparados com os quartos mamários sadios. Os resultados obtidos com os dois modelos empregados demonstraram que a IIM subclínica não afetou a ELA de vacas leiteiras.The present study hypothesized that intramammary infection (IMI) might reduce milk ethanol stability (MES), mainly when IMI is caused by major pathogens. Thus, this study evaluated the effect of IMI on bovine MES using a natural exposure experimental design. Ninety-four lactating cows from five dairy herds were selected once they were determined to have an IMI, based on milk bacteriological culturing with positive isolation and somatic cell count (SCC) &gt; 200×103 cells/mL in two out of three composite milk samples collected during three consecutive weeks. After selection, cows were sampled a second time (within two weeks) for evaluation at mammary quarter level (n = 326): milk yield (kg/quarter/day), MES, composition (fat, protein, lactose, casein, total solids and solids-non-fat), and bacteriologic culture. The effect of subclinical mastitis on MES was tested by two models: 1) comparison of healthy vs. infected quarters; and 2) comparison of contralateral mammary quarter within cow. The only milk composition variable associated with MES was lactose (r = 0.18; P &lt; 0.01). Subclinical IMI did not affect MES when the comparison was performed using both models (1 and 2). Likewise, MES did not change when infected quarters were sorted into two groups of pathogens (major, minor and infrequent; and contagious, environmental, minor and infrequent) and compared with healthy mammary quarters. Considering the results of both models, subclinical IMI did not affect MES of dairy cows

Neuroinflammation and Parkinson’s disease - from neurodegeneration to therapeutic opportunities

Parkinson’s disease (PD) is the second most prevalent neurodegenerative disorder worldwide. Clinically, it is characterized by a progressive degeneration of dopaminergic neurons (DAn), resulting in severe motor complications. Preclinical and clinical studies have indicated that neuroinflammation can play a role in PD pathophysiology, being associated with its onset and progression. Nevertheless, several key points concerning the neuroinflammatory process in PD remain to be answered. Bearing this in mind, in the present review, we cover the impact of neuroinflammation on PD by exploring the role of inflammatory cells (i.e., microglia and astrocytes) and the interconnections between the brain and the peripheral system. Furthermore, we discuss both the innate and adaptive immune responses regarding PD pathology and explore the gut–brain axis communication and its influence on the progression of the disease.The present work was supported by Prémios Santa Casa Neurociências— Prize Mantero Belard for Neurodegenerative Diseases Research (MB-28-2019), the Portuguese Foundation for Science and Technology (FCT) to S.M. (CEECIND/01902/2017) and F.G.T. (2021.00643.CEECIND), the European Regional Development Fund (FEDER), the Competitiveness Internationalization Operational Programme (POCI), national funds through the Foundation for Science and Technology (FCT), under the scope of projects UIDB/50026/2020, UIDP/50026/2020, POCI-01-0145-FEDER-029751, and EXPL/MED-PAT/0931/2021, project NORTE-01-0145-FEDER-000023, supported by the Northern Portugal Regional Operational Programme (NORTE 2020), and under the Portugal 2020 Partnership Agreement, through the European Regional Development Fund (FEDER)

Levels and degradability of crude protein in digestive metabolism and performance of dairy cows

Two experiments were conducted to evaluate the effect of the level and degradability of crude protein (CP) on the digestive metabolism and productive performance of dairy cows. In both experiments, 15 Holstein cows with 585 ± 40 kg of body weight were distributed in a Latin square design with five contemporary squares, three periods of 21 days and three treatments. In experiment 1, treatments consisted of three CP levels (130, 160 or 180 g CP/kg DM), while in experiment 2, the treatments consisted of three levels of rumen degradable protein (RDP; 80, 100 or 120 g RDP/kg DM) in diets with average of 163 g CP/kg DM. Variables evaluated in both experiments were dry matter intake (DMI), total apparent digestibility, milk yield (MY) and composition, ruminal fermentation and N balance. In experiment 1, the increase of CP from 130 to 180 linearly increased the organic matter, CP, neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) intake (kg) and the apparent total digestibility coefficient of DM and CP. In addition, a linear increase of MY, fat corrected milk (FCM) and daily production of fat, protein, lactose, casein and total solids was observed. A linear increase in ruminal ammoniacal nitrogen (NH 3 -N) concentration and nitrogen excretion in milk, feces and urine was also observed. However, there was no observed effect on SCFA concentration. In experiment 2, the increase of the RDP from 80 to 120 increased the DMI, MY, FCM, milk protein content and digestibility coefficient of the NDF, ADF and ethereal extract. Additionally, there was an increase in NH 3 -N concentration and milk nitrogen excretion. The studies indicated that the increase of CP content up to 100 g RDP/kg DM increased the DMI and the productive performance of the cows, but also increased urine N. Thus, it is desirable that the increase of the CP through the increase of the RDP is carried out up to 100 g of RDP/kg DM, since there is elimination of nitrogen, decrease of milk yield and decrease of propionic acid in values above that level