Développements de méthodes analytiques pour l'identification et la caractérisation de nouveaux pesticides d'origine végétale (mécanismes de dégradation : applications à des produits de l'agroalimentaire)

De nos jours, les pesticides sont largement utilisés dans différents domaines : agricole, domestique etc. et peuvent être de deux types : ceux qui sont issus de la synthèse industrielle et ceux qui sont d'origine naturelle. Vu la diversité de ces produits et de leurs métabolites ainsi que leurs effets peu ou pas connus sur la santé et sur l'environnement, un contrôle rigoureux dans les différentes matrices s'impose. Dans ce travail, nous avons présenté dans une première partie un rappel bibliographique sur les différentes familles de pesticides et leurs principaux métabolites ainsi que sur les méthodes d'analyse couramment utilisées dans les laboratoires. Puis dans une deuxième partie, nous nous sommes intéressés à la caractérisation d'un insecticide d'origine végétale commercialisé sous le nom de Neem Azal T/S et nous avons mis au point des méthodes analytiques qui nous ont permis d'identifier neuf produits contenus dans la formulation commerciale. Après purification du produit majoritaire l'Azadirachtin-A par chromatographie semi-préparative, nous avons étudié sa cinétique de disparition sous différentes contraintes environnementales telles que le pH (de 2 à 8) et la luminosité (à l'obscurité, à la lumière du jour et sous radiation UV). L'identification des principaux produits de dégradation de l'Azadirachtin-A a été réalisée par HPLC-MS, HPLC-MS-MS et par RMN liquide.La troisième partie de ce travail a porté sur l'étude de deux cas d'application sur des pesticides de synthèse à savoir l'analyse des pesticides résiduels contenus dans l'huile d'olive ainsi que dans l'huile essentielle d'agrumes. La chromatographie d'exclusion stérique CES a été mise en œuvre comme méthode d'extraction des pesticides à partir de l'huile d'olive. Une méthode d'extraction en phase solide SPE a été mise au point pour extraire les pesticides des huiles essentielles d'agrumes. L'analyse des pesticides résiduels a été réalisée par GC-MS et HPLC-MS. A partir de ces données, nous avons pu déterminer les limites de détection d'un certain nombre de pesticides utilisés.LYON1-BU.Sciences (692662101) / SudocSudocFranceF

A complementary LC-ESI-MS and MALDI-TOF approach for screening antibacterial proteomic signature of farmed European Sea bass mucus

International audienceAntibacterial protection in the mucus is provided by antimicrobial compounds and till now few numbers of AMP and proteins were identified. Herein, mass spectral profiling of fresh mucus from farmed sea bass (Dicentrarchus labrax) using Matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight mass spectrometer (MALDI-TOF) and liquid chromatography mass spectrometry is investigated in order to survey the infective/healthy status of the mucus. We identify AMP peptides of 2891.7, 2919.45 and 2286.6 Da molecular weight respectively and characterize Chrysophsins in the mucus of Dicentrarchus labrax. These peptides display broad-spectrum bactericidal activity against Gram-negative (Minimum Inhibitory Concentrations namely MICs < 0.5 μM) and Gram-positive bacteria (MICs < 0.5 μM) including Escherichia coli and Bacillus subtilis. Furthermore, sensitivity to yeast Candida albicans is reported for the first time and shows interesting MICs of less than 2 μM. We also demonstrate that the fish pathogen Aeromonas salmonoicida is sensitive to Chrysophsins (MICs ranging between 5 and 14 μM). Our mucus molecular mass mapping developed approach allows for fast exploration of immune status. Our data provides evidence that Chrysophsins are secreted by immune cells and are released in mucus of non-challenged farmed European sea bass. These results suggest that Chrysophsins, secreted by gills of red sea bream, are an important widespread component of Teleostei defense against disease