A Single Dose of a Hybrid hAdV5-Based Anti-COVID-19 Vaccine Induces a Long-Lasting Immune Response and Broad Coverage against VOC

Most approved vaccines against COVID-19 have to be administered in a prime/boost regimen. We engineered a novel vaccine based on a chimeric human adenovirus 5 (hAdV5) vector. The vaccine (named CoroVaxG.3) is based on three pillars: (i) high expression of Spike to enhance its immunodominance by using a potent promoter and an mRNA stabilizer; (ii) enhanced infection of muscle and dendritic cells by replacing the fiber knob domain of hAdV5 by hAdV3; (iii) use of Spike stabilized in a prefusion conformation. The transduction with CoroVaxG.3-expressing Spike (D614G) dramatically enhanced the Spike expression in human muscle cells, monocytes and dendritic cells compared to CoroVaxG.5 that expressed the native fiber knob domain. A single dose of CoroVaxG.3 induced a potent humoral immunity with a balanced Th1/Th2 ratio and potent T-cell immunity, both lasting for at least 5 months. Sera from CoroVaxG.3-vaccinated mice was able to neutralize pseudoviruses expressing B.1 (wild type D614G), B.1.117 (alpha), P.1 (gamma) and B.1.617.2 (delta) Spikes, as well as an authentic P.1 SARS-CoV-2 isolate. Neutralizing antibodies did not wane even after 5 months, making this kind of vaccine a likely candidate to enter clinical trials.Fil: López, M. Verónica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Vinzon, Sabrina Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cafferata, Eduardo Gustavo Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Nuñez, Felipe. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Sanchez Lamas, Maximiliano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Afonso, María Jimena. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Aguilar Cortes, Diana Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Rios, Gregorio David. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Maricato, Juliana T.. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Torres Braconi, Carla. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Barbosa da Silveira, Vanessa. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Montes de Andrade, Tatiane. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Carvalho de Souza Bonetti, Tatiana. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Ramos Janini, Luiz M.. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Castello Girão, Manoel J. B.. Universidade Federal de Sao Paulo; BrasilFil: Llera, Andrea Sabina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Gomez, Karina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Ingeniería Genética y Biología Molecular "Dr. Héctor N. Torres"; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Berguer, Paula Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Podhajcer, Osvaldo Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

Cross-protection and cross-neutralization capacity of ancestral and VOC-matched SARS-CoV-2 adenoviral vector-based vaccines

COVID-19 vaccines were originally designed based on the ancestral Spike protein, but immune escape of emergent Variants of Concern (VOC) jeopardized their efficacy, warranting variant-proof vaccines. Here, we used preclinical rodent models to establish the cross-protective and cross-neutralizing capacity of adenoviral-vectored vaccines expressing VOC-matched Spike. CoroVaxG.3-D.FR, matched to Delta Plus Spike, displayed the highest levels of nAb to the matched VOC and mismatched variants. Cross-protection against viral infection in aged K18-hACE2 mice showed dramatic differences among the different vaccines. While Delta-targeted vaccines fully protected mice from a challenge with Gamma, a Gamma-based vaccine offered only partial protection to Delta challenge. Administration of CorovaxG.3-D.FR in a prime/boost regimen showed that a booster was able to increase the neutralizing capacity of the sera against all variants and fully protect aged K18-hACE2 mice against Omicron BA.1, as a BA.1-targeted vaccine did. The neutralizing capacity of the sera diminished in all cases against Omicron BA.2 and BA.5. Altogether, the data demonstrate that a booster with a vaccine based on an antigenically distant variant, such as Delta or BA.1, has the potential to protect from a wider range of SARS-CoV-2 lineages, although careful surveillance of breakthrough infections will help to evaluate combination vaccines targeting antigenically divergent variants yet to emerge.Fil: Vinzon, Sabrina Eugenia. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lopez, Maria Veronica. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cafferata, Eduardo Gustavo Alfredo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Berguer, Paula Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentina. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Vazquez, Luciana Mariel. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Nusblat, Leonora. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Pontoriero, Andrea. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Belotti, Eduardo Matías. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Salvetti, Natalia Raquel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; Argentina. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Viale, Diego Luis. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vilardo, Ariel E.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Avaro, Martin M.. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Benedetti, Estefanía. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Russo, Mara Laura. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Dattero, María Elena. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Carobene, Mauricio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones Biomédicas en Retrovirus y Sida; ArgentinaFil: Sánchez Lamas, Maximiliano. Securitas Bioscienses; UruguayFil: Afonso, Jimena. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Heitrich, Mauro Oscar. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Cristófalo, Alejandro Ezequiel. Universidad Nacional de San Martin. Centro de Rediseño E Ingenieria de Proteinas.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Otero, Lisandro Horacio. Universidad Nacional de San Martin. Centro de Rediseño E Ingenieria de Proteinas.; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Baumeister, Elsa. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Ortega, Hugo Hector. Universidad Nacional del Litoral; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral; ArgentinaFil: Edelstein, Alexis. Dirección Nacional de Instituto de Investigación. Administración Nacional de Laboratorio e Instituto de Salud "Dr. C. G. Malbrán"; ArgentinaFil: Podhajcer, Osvaldo Luis. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

Treatment with tocilizumab or corticosteroids for COVID-19 patients with hyperinflammatory state: a multicentre cohort study (SAM-COVID-19)

Objectives: The objective of this study was to estimate the association between tocilizumab or corticosteroids and the risk of intubation or death in patients with coronavirus disease 19 (COVID-19) with a hyperinflammatory state according to clinical and laboratory parameters. Methods: A cohort study was performed in 60 Spanish hospitals including 778 patients with COVID-19 and clinical and laboratory data indicative of a hyperinflammatory state. Treatment was mainly with tocilizumab, an intermediate-high dose of corticosteroids (IHDC), a pulse dose of corticosteroids (PDC), combination therapy, or no treatment. Primary outcome was intubation or death; follow-up was 21 days. Propensity score-adjusted estimations using Cox regression (logistic regression if needed) were calculated. Propensity scores were used as confounders, matching variables and for the inverse probability of treatment weights (IPTWs). Results: In all, 88, 117, 78 and 151 patients treated with tocilizumab, IHDC, PDC, and combination therapy, respectively, were compared with 344 untreated patients. The primary endpoint occurred in 10 (11.4%), 27 (23.1%), 12 (15.4%), 40 (25.6%) and 69 (21.1%), respectively. The IPTW-based hazard ratios (odds ratio for combination therapy) for the primary endpoint were 0.32 (95%CI 0.22-0.47; p < 0.001) for tocilizumab, 0.82 (0.71-1.30; p 0.82) for IHDC, 0.61 (0.43-0.86; p 0.006) for PDC, and 1.17 (0.86-1.58; p 0.30) for combination therapy. Other applications of the propensity score provided similar results, but were not significant for PDC. Tocilizumab was also associated with lower hazard of death alone in IPTW analysis (0.07; 0.02-0.17; p < 0.001). Conclusions: Tocilizumab might be useful in COVID-19 patients with a hyperinflammatory state and should be prioritized for randomized trials in this situatio

Toxoplasma gondii infection modulate systemic allergic immune response in BALB/c mice

The increased prevalence of allergies in developed countries has been attributed to a reduced exposure to some microbes. In agreement with epidemiological studies, we previously showed that Toxoplasma gondii infection prevents allergic airway inflammation. The mechanisms would be related to the strong Th1 response induced by the parasite and to regulatory cell induction. Herein we further characterized whether T. gondii allergy modulation extents to a systemic level or if it is limited to the lung. Parasite infection before allergic sensitization resulted in a diminished Th2 cytokine response and, when sensitized during acute infection, an increased in TGF-β production was detected. Allergen specific T cell proliferation was also reduced. Sensitization during both acute and chronic phases of infection resulted in a decreased anaphylaxis reaction. Our results extend earlier work and show that, in addition to lung airway inflammation, T. gondii infection can suppress allergic responses at systemic level. These results open the possibility that this protozoan infection could modulate other allergic disorders such as atopic dermatitis or oral allergies. Understanding the mechanisms by which different microorganisms regulate inflammation may potentially lead to the development of strategies aimed to control atopic diseases.Fil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Picchio, Mariano Sergio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentin

Homologous prime-boost strategy with TgPI-1 improves the immune response and protects highly susceptible mice against chronic Toxoplasma gondii infection

Subunit-based vaccines are safer than live or attenuated pathogen vaccines, although they are generally weak immunogens. Thus, proper combination of immunization strategies and adjuvants are needed to increase their efficacy. We have previously protected C3H/HeN mice from Toxoplasma gondii infection by immunization with the serine protease inhibitor-1 (TgPI-1) in combination with alum. In this work, we explore an original vaccination protocol that combines administration of recombinant TgPI-1 by intradermal and intranasal routes in order to enhance protection in the highly susceptible C57BL/6 strain. Mice primed intradermally with rTgPI-1 plus alum and boosted intranasally with rTgPI-1 plus CpG-ODN elicited a strong specific Th1/Th2 humoral response, along with a mucosal immune response characterized by specific-IgA in intestinal lavages. A positive cellular response of mesentheric lymph node cells and Th1/Th2 cytokine secretion in the ileon were also detected. When immunized mice were challenged with the cystogenic Me49 T. gondii strain, they displayed up to 62% reduction in brain parasite burden. Moreover, adoptive transfer of mesenteric lymph node cells from vaccinated to naïve mice induced significant protection against infection. These results demonstrate that this strategy that combines the administration of TgPI-1 by two different routes, intradermal priming and intranasal boost, improves protective immunity against T. gondii chronic infection in highly susceptible mice.Fil: Sánchez, Vanesa Roxana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Picchio, Mariano Sergio. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Arcon, Nadia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Golgman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentin

A TLR4 agonist improves immune checkpoint blockade treatment by increasing the ratio of effector to regulatory cells within the tumor microenvironment

Brucella lumazine synthase (BLS) is a homodecameric protein that activates dendritic cells via toll like receptor 4, inducing the secretion of pro-inflammatory cytokines and chemokines. We have previously shown that BLS has a therapeutic effect in B16 melanoma-bearing mice only when administered at early stages of tumor growth. In this work, we study the mechanisms underlying the therapeutic effect of BLS, by analyzing the tumor microenvironment. Administration of BLS at early stages of tumor growth induces high levels of serum IFN-γ, as well as an increment of hematopoietic immune cells within the tumor. Moreover, BLS-treatment increases the ratio of effector to regulatory cells. However, all treated mice eventually succumb to the tumors. Therefore, we combined BLS administration with anti-PD-1 treatment. Combined treatment increases the outcome of both monotherapies. In conclusion, we show that the absence of the therapeutic effect at late stages of tumor growth correlates with low levels of serum IFN-γ and lower infiltration of immune cells in the tumor, both of which are essential to delay tumor growth. Furthermore, the combined treatment of BLS and PD-1 blockade shows that BLS could be exploited as an essential immunomodulator in combination therapy with an immune checkpoint blockade to treat skin cancer.Fil: Farias, Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Puttur, F.. Imperial College London; Reino UnidoFil: Goldin, Carla Jimena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Sosa, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Gil, C.. Fundación Instituto Leloir; ArgentinaFil: Goldbaum, Fernando Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Berguer, Paula Mercedes. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

Bone-Marrow Derived Dendritic Cells From Toxoplasma Gondii Chronically Infected Mice Exhibit Alterations In Monoclonal And Polyclonal T Cell Priming

Rationale: We previously showed that splenocytes from chronic T. gondii infected mice have a diminished capacity to activate and differentiate OVA-specific Th1 and Th2 cells. Moreover, BMDCs from infected animals presented phenotypic alterations as shown by increases in CD80 and CD86 maturation markers and fewer secretion levels of IL-6 and IL-10, with no differences in IL-12. To extend these previous results, herein, we studied the ability of BMDC from chronically infected mice to activate and differentiate effector T cells. Methods: Bone-marrow derived dendritic cells (BMDCs) were obtained from naive and chronically infected mice, by culturing bone-marrow precursors for nine days with GM-CSF-conditioned medium. Afterward, BMDC were fed with OVA and matured during 18h with LPS. Subsequently, BMDC were cultured with DO11.10 OVA-specific CD4+T cells. Also, a mixed lymphocyte reaction (MLR) was performed by co-culturing BMDC with naive C57BL/6 mice splenocytes. Results: OVA specific CD4+ T cells co-cultured with BMDCs from infected mice showed lower levels of IFN-γ and IL-5 and increased levels of IL-10 (p<0.05). When analyzing polyclonal T cell responses in MLR assays, T lymphocytes incubated with BMDCs from infected mice showed decreased secretion of IFN-γ and IL-10 (p<0.01). No significant differences were observed for Th2 cytokines. Conclusion: The data obtained with BMDCs show that mice chronically infected with T. gondii present alterations of bone-marrow precursors. Interestingly, the diminished Th1/Th2 profiles observed in antigen specific co-culture assays are in line with results previously observed in splenocytes from T. gondii infected mice. These results suggest that infection with T. gondii results in long-lasting alterations in hematopoietic cells that could be involved in the lower susceptibility to developing allergic and autoimmune disorders.Fil: Perrone Sibilia, Matias. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Tecnologías Emergentes y Ciencias Aplicadas. - Universidad Nacional de San Martin. Instituto de Tecnologías Emergentes y Ciencias Aplicadas; ArgentinaFil: Katan Piñeiro, Joel. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Arcon, Nadia. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fenoy, I. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaLXVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), LXIX Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI), LIII Reunión Anual de La Asociación Argentina de Farmacología Experimental (AAFE) y XI Reunión Anual de La Asociación Argentina de Nanomedicinas (NANOMED-AR)Buenos AiresArgentinaSociedad Argentina de Investigación ClínicaSociedad Argentina de InmunologíaAsociación Argentina de Farmacología ExperimentalAsociación Argentina de Nanomedicina

Regulatory cells induced by acute toxoplasmosis prevent the development of allergic lung inflammation

The increased prevalence of allergies in developed countries has been attributed to a reduction of some infections. Supporting epidemiological studies, we previously showed that both acute and chronic Toxoplasma gondii infection can diminish allergic airway inflammation in BALB/c mice. The mechanisms involved when sensitization occurs during acute phase would be related to the strong Th1 response induced by the parasite. Here, we further investigated the mechanisms involved in T. gondii allergy protection in mice sensitized during acute T. gondii infection. Adoptive transference assays and ex vivo co-cultures experiments showed that not only thoracic lymph node cells from infected and sensitized mice but also from non-sensitized infected animals diminished both allergic lung inflammation and the proliferation of effector T cells from allergic mice. This ability was found to be contact-independent and correlated with high levels of CD4+FoxP3+ cells. IL-10 would not be involved in allergy suppression since IL-10-deficient mice behaved similar to wild type mice. Our results extend earlier work and show that, in addition to immune deviation, acute T. gondii infection can suppress allergic airway inflammation through immune suppression.Fil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Picchio, Mariano Sergio. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Maglioco, Andrea Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Corigliano, Mariana Georgina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Dran, Graciela Isabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Medicina Experimental. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Synergistic effect of GRA7 and profilin proteins in vaccination against chronic Toxoplasma gondii infection

Toxoplasmosis is a zoonotic disease with worldwide prevalence in humans and warm-blooded animal populations. In livestock Toxoplasma gondii is the causal agent of significant economic losses since it can cause abortions in goats and sheep. It is estimated that one third of the world population is infected. Although there are effective therapies for acute infection, these are sometimes poorly tolerated, teratogenic, and have a long administration time. Considering the deficiencies that exist related to the prevention and treatment of toxoplasmosis, the development of a safe and effective vaccine would be extremely valuable in fighting against this infection. In the present work, we characterize for the first time the adjuvant and immunogenic potential of a recombinant profilin protein (rTgPF), in a vaccine formulation alone or in combination with the well-known GRA7 antigen candidate in a murine toxoplasmosis model. Since TgPF acts as a ligand for TLR11 and 12 inducing innate immune responses that promote type 1 adaptive responses, we first study the capacity of the mix rGRA7 + rTgPF to initiate an immune response by evaluating dendritic cell activation. Both rTgPF and rGRA7 induces activation of mouse BMDCs more efficiently than the single proteins, evidenced by increased expression of CD80 and CD86 co-stimulatory proteins and secretion of IL-6, IL-10 and IL-12 cytokines after in vitro stimulation. The sum of the effects of rGRA7 and rTgPF on BMDCs maturation led us to assay them in a vaccination protocol. BALB/c mice vaccinated with this mix elicited a Th1-biased immunity via the induction of lymphocyte proliferation, activation of CD4+T cells and increased IFN-γ production that resulted in enhanced protection against chronic Toxoplama gondii infection. Profilin per se induce only cellular immunity but augments the effect of rGRA7 immune responses when used together, thus allowing us to postulate rTgPF as a potential adjuvant in a protein vaccine.Fil: Arcon, Nadia. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Picchio, Mariano Sergio. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moretta, Rosalia Ester. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perrone Sibilia, Matias. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Prato, Cecilia Arahi. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Tribulatti, María Virginia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Martin, Valentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Vaccine potential of antigen cocktails composed of recombinant Toxoplasma gondii TgPI-1, ROP2 and GRA4 proteins against chronic toxoplasmosis in C3H mice

The development of an effective and safe vaccine to prevent Toxoplasma gondii infection is an important aim due to the great clinical and economic impact of this parasitosis. We have previously demonstrated that immunization with the serine protease inhibitor-1 (TgPI-1) confers partial protection to C3H/HeN and C57BL/6 mice. In order to improve the level of protection, in this work, we combined this novel antigen with ROP2 and/or GRA4 recombinant proteins (rTgPI-1+rROP2, rTgPI-1+rGRA4, rTgPI-1+rROP2+rGRA4) to explore the best combination against chronic toxoplasmosis in C3H/HeN mice. All tested vaccine formulations, administered following a homologous prime-boost protocol that combines intradermal and intranasal routes, conferred partial protection as measured by the reduction of brain cyst burden following oral challenge with tissue cysts of Me49 T. gondii strain. The highest level of protection was achieved by the mixture of rTgPI-1 and rROP2 proteins with an average parasite burden reduction of 50% compared to the unvaccinated control group. The vaccine-induced protective effect was related to the elicitation of systemic cellular and humoral immune responses that included antigen-specific spleen cell proliferation, the release of Th1/Th2 cytokines, and the generation of antigen-specific antibodies in serum. Additionally, mucosal immune responses were also induced, characterized by secretion of antigen-specific IgA antibodies in intestinal lavages and specific mesenteric lymph node cell proliferation. Our results demonstrate that rTgPI-1+rROP2 antigens seem a promising mixture to be combined with other immunogenic proteins in a multiantigenic vaccine formulation against toxoplasmosis.Fil: Picchio, Mariano Sergio. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sánchez, Vanesa Roxana. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Arcon, Nadia. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soto, Ariadna Soledad. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Perrone Sibilia, Matias. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aldirico, María de Los Ángeles. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Urrutia, Mariela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Moretta, Rosalia Ester. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Fenoy, Ignacio Martín. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Goldman, Alejandra. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Universidad Nacional de San Martín; ArgentinaFil: Martín, Valentina. Universidad Nacional de San Martín. Escuela de Ciencia y Tecnología. Centro de Estudios en Salud y Medio Ambiente; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin