Análise temporal da genotoxicidade e fatores ambientais relacionados à qualidade da água de uma bacia hidrográfica no Sul do Brasil

Environmental pollution is one of the main problems underlying the current scenario of degradation of aquatic ecosystems. This study aimed to determine the water quality of the Rio dos Sinos watershed in South Brazil by analyzing genotoxicity and environmental factors of four sub-basins in two periods (P1 = 2012 – 2013 and P2 = 2018 – 2019). Water genotoxicity was analyzed using the micronucleus test with Tradescantia pallida var. purpurea. In parallel, a Rapid Habitat Assessment Protocol (RHAP) was employed and data on physico-chemical parameters, land use and occupation and the number of inhabitants were collected and examined for possible relationships with genotoxicity. Genotoxicity did not differ significantly over time for three of the four studied sub-basins. There was a significant relationship between water genotoxicity and number of inhabitants. Furthermore, environments with high genotoxicity, low water quality and high environmental degradation in the first monitoring period remained in the same condition in the second monitoring period; the most preserved areas of the basin may come to resemble these environments in the future.A poluição ambiental é um dos principais problemas relacionados ao atual cenário de degradação dos ecossistemas aquáticos. O objetivo deste estudo foi determinar a qualidade da água da Bacia Hidrográfica do Rio dos Sinos, no sul do Brasil, por meio da análise da genotoxicidade e de fatores ambientais integrados de quatro sub-bacias, em dois períodos bianuais de monitoramento (P1 = 2012-2013 e P2 = 2018-2019). A genotoxicidade da água foi avaliada por meio do teste de micronúcleos em Tradescantia pallida var. purpurea. Em paralelo, um protocolo de avaliação rápida de habitats (PARH) foi realizado, análises físico-químicas, dados de uso e ocupação do solo e do número de habitantes também foram coletados e examinados para possíveis relações com a genotoxicidade. Não houve diferença significativa na genotoxicidade ao longo do tempo para três das quatro sub-bacias estudadas. Houve relação significativa entre a genotoxicidade da água e o número de habitantes. Ambientes que apresentavam alta genotoxicidade, baixa qualidade hídrica e alta degradação ambiental no primeiro período, se mantiveram na mesma condição no segundo período e futuramente as áreas mais preservadas da bacia podem vir a se assemelhar com estes ambientes

Germination and sporophytic development of Regnellidium diphyllum Lindm. (Marsileaceae) in the presence of a glyphosate-based herbicide

Regnellidium diphyllum is a vulnerable heterosporous fern which occurs in the State of Rio Grande do Sul, Brazil, and in some neighboring localities in the State of Santa Catarina, in Uruguay and Argentina. The species grows in areas subjected to flooding and humid soils which frequently are alterated by agricultural activities. Agricultural fields are commonly treated with herbicides such as glyphosate. The effects of glyphosate on in vitro germination of megaspores and initial sporophytic development of R. diphyllum under aqueous conditions were investigated. Six glyphosate concentrations (0.32, 0.64, 1.92, 4.80, 9.60 and 19.20 mg/L) and the control (0.00 mg/L) were tested using Meyer’s medium. Cultures were maintained in vitro in a growth chamber at 24±1oC and 16 hours photoperiod for five weeks. Megaspore germination was significantly reduced (67% and lower) in concentrations of 4.80 mg/L onwards compared with the control (81%), while the sporophyte formation was negatively influenced even at the lowest concentration tested (0.32 mg/L). The length of the primary root and primary and secondary leaves was significantly reduced at glyphosate concentrations of 4.80 mg/L onwards. Low concentrations of the herbicide did not affect the percentage of germination, although significantly interfered in the initial development of R. diphyllum. Concentrations of 9.60 and 19.20 mg/L inhibited the establishment of new plants. These results indicate that application of glyphosate to agricultural areas may have negative impacts on the vulnerable fern R. diphyllum.Regnellidium diphyllum é uma pteridófita heterosporada vulnerável, ocorrente no estado do Rio Grande do Sul, Brasil e em algumas localidades vizinhas no estado de Santa Catarina, no Uruguai e na Argentina. A espécie cresce em áreas alagáveis e solos úmidos que freqüentemente são alterados para atividades agrícolas. Campos de agricultura são comumente tratados com herbicidas como o glifosato. Os efeitos do glifosato sobre a germinação de megásporos e o desenvolvimento esporofítico inicial de R. diphyllum foram investigados. Seis concentrações de glifosato (0,32; 0,64; 1,92; 4,80; 9,60 e 19,20 mg/L) e o controle (0,00 mg/L), foram testados utilizando meio de Meyer. As culturas foram mantidas in vitro, em câmara de germinação a 24±1oC e fotoperíodo de 16 horas, por cinco semanas. A germinação de megásporos foi significantemente reduzida (67% e inferior) em concentrações de glifosato a partir de 4,80 mg/L, comparada ao controle (81%), enquanto que a formação de esporófitos foi negativamente influenciada mesmo na menor concentração testada (0,32 mg/L). Os comprimentos da raiz primária e das folhas primária e secundária foram significantemente reduzidos em concentrações de glifosato a partir de 4,80 mg/L. Baixas concentrações do herbicida não afetaram a porcentagen de germinação, embora tenham interferido significantemente no desenvolvimento inicial de R. diphyllum. Concentrações de 9,60 e 19,20 mg/L inibiram o estabelecimento de plantas novas. Esses resultados indicam que a aplicação de glifosato em áreas de agricultura pode ter impactos negativos sobre a pteridófita vulnerável R. diphyllum

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL GENOTÓXICO DE CÁDMIO E CHUMBO POR MEIO DO BIOENSAIO COM Tradescantia pallida (Rose) D.R. Hunt var. purpurea Boom

O potencial genotóxico dos elementos-traço cádmio (Cd) e chumbo (Pb) nas concentrações máximas permitidas no Brasil pelas Resoluções CONAMA nº 357/2005 (classificação de corpos d’água, água doce de classe I) e CONSEMA nº 355/2017 (emissão de efluentes líquidos em águas superficiais no Rio Grande do Sul) foi avaliado por meio do teste de micronúcleos (MCN) com o uso de Tradescantia pallida var. purpurea. Após 24 h de adaptação em água destilada, 20 ramos com botões florais foram expostos por 8 h em 2 L em água destilada com diferentes concentrações de Cd (0,001 e 0,1 mg L-1) e Pb (0,01 e 0,2 mg L-1), seguido da recuperação por 24 h em água destilada para finalizar o ciclo da meiose. Simultaneamente, foi realizado controle negativo com exposição dos ramos apenas em água destilada. Após, as inflorescências foram fixadas em etanol/ácido acético (3:1 v:v) por 24 h e armazenadas em etanol 70% sob refrigeração. As frequências de MCN nos botões florais expostos às concentrações de 0,001 mg L-1 e 0,1 mg L-1 de Cd não diferiram significativamente entre si (2,90 e 3,43 MCN, respectivamente), mas diferiram significativamente da frequência do controle (1,93 MCN) (p=0,006). Para Pb, as frequências de MCN nos botões florais expostos às concentrações 0,01 mg L-1 e 0,2 mg L-1 diferiram significativamente entre si (3,76 e 5,03 MCN, respectivamente) e do controle (1,93 MCN) (p<0,001). Os resultados indicam que as concentrações máximas de Cd e Pb permitidas pelas Resoluções CONAMA nº 357/2005 e CONSEMA nº 355/2017 são potencialmente genotóxicas. Palavras-chave: Genotoxicidade. Elemento-traço. Trad-MCN. ABSTRACT The genotoxic potential of the trace elements cadmium (Cd) and lead (Pb) at the maximum concentrations allowed by CONAMA nº 357/2005 (classification of watersheds, class 1 freshwater) and CONSEMA nº 355/2017 resolutions (emission of effluents in superficial waters in Rio Grande do Sul) were evaluated using the micronuclei (MCN) test with the use of Tradescantia pallida var. purpurea. After 24 h of adaptation in distilled water, 20 cuttings with floral buds were exposed for 8 h in 2 L in distilled water with different concentrations of Cd (0.001 and 0.1 mg L-1) and Pb (0.01 and 0.2 mg L-1), followed by recovery for 24 h in distilled water to finish the meiosis cycle. Simultaneously, negative control was performed with exposure of the cuttings only in distilled water. After the inflorescences were fixed in ethanol/acetic acid (3:1 v:v) for 24 h and stored in ethanol 70% under refrigeration. MCN frequencies in flower buds exposed to concentrations of 0.001 mg L-1 and 0.1 mg L-1 of Cd did not differ significantly from each other (2.90 and 3.43 MCN, respectively), but differed significantly from the control (1.93) (p=0.006). For Pb, the MCN frequency in flower buds exposed to concentrations of 0.01 mg L-1 and 0.2 mg L-1 differed significantly from each other (3.76 and 5.03, respectively) and from the control (1.93) (p<0.001). The results indicate that the maximum concentrations of Cd and Pb permitted by CONAMA n° 357/2005 and CONSEMA n° 355/2017 resolutions are potentially genotoxic. Keywords: Genotoxicity. Trace element. Trad-MCN

Carbon sources and polyethylene glycol on soybean somatic embryo conversion

A embriogênese somática é um eficiente método na produção de células-alvo para a transformação genética de soja. Entretanto, este método ainda apresenta baixas porcentagens de regeneração de plantas, o que pode estar relacionado ao processo de maturação e às altas anormalidades morfológicas dos embriões maturos. Este estudo visou a identificar um meio de maturação que pudesse contribuir com resultados mais eficientes de regeneração de plantas. Foram utilizados conjuntos embriogênicos derivados de cotilédones imaturos de sementes de soja das cultivares Bragg e IAS5 para o desenvolvimento de embriões. Testaram-se diferentes meios de maturação, com a utilização de 6% de maltose, 3% de sacarose ou 6% de sacarose, combinadas ou não com 25 g L-1 do regulador osmótico polietilenoglicol (PEG-8000). Os embriões histodiferenciados foram quantificados e classificados em tipos morfológicos. A porcentagem de embriões convertidos em plantas foi analisada. A cultivar Bragg apresentou maior quantidade de embriões maturos, mas foram obtidas menores porcentagens de conversão em comparação à cultivar IAS5. A adição de PEG não afetou o número de embriões convertidos em plantas. Entretanto, a concentração de 6% de sacarose aumentou significativamente a porcentagem de conversão.Somatic embryogenesis is an efficient method for the production of target cells for soybean genetic transformation. However, this method still offers low percentages of plant regeneration, and perhaps is related to the maturation process and high morphological abnormalities of the matured embryos. This study aimed to identify a maturation medium that could contribute to the outcome of more efficient plant regeneration results. Embryogenic clusters, derived from cotyledons of immature seeds of the soybean cultivars Bragg and IAS5, were used as starting material for embryos development. Different maturation media were tested by using 6% maltose, 3% sucrose or 6% sucrose, combined with or without 25 g L-1 of the osmotic regulator polyethylene glycol (PEG-8000). The histodifferentiated embryos were quantified and classified in morphological types. Percentages of converted embryos were analyzed. Cultivar Bragg resulted in higher matured embryo quantities, but lower percentages were obtained for the conversion in comparison to cultivar IAS5. While the addition of PEG did not affect the number of embryos converted into plants, 6% sucrose enhanced the conversion percent significantly

AVALIAÇÃO DO POTENCIAL GENOTÓXICO DE CÁDMIO E CHUMBO POR MEIO DO BIOENSAIO COM Tradescantia pallida (Rose) D.R. Hunt var. purpurea Boom

O potencial genotóxico dos elementos-traço cádmio (Cd) e chumbo (Pb) nas concentrações máximas permitidas no Brasil pelas Resoluções CONAMA nº 357/2005 (classificação de corpos d’água, água doce de classe I) e CONSEMA nº 355/2017 (emissão de efluentes líquidos em águas superficiais no Rio Grande do Sul) foi avaliado por meio do teste de micronúcleos (MCN) com o uso de Tradescantia pallida var. purpurea. Após 24 h de adaptação em água destilada, 20 ramos com botões florais foram expostos por 8 h em 2 L em água destilada com diferentes concentrações de Cd (0,001 e 0,1 mg L-1) e Pb (0,01 e 0,2 mg L-1), seguido da recuperação por 24 h em água destilada para finalizar o ciclo da meiose. Simultaneamente, foi realizado controle negativo com exposição dos ramos apenas em água destilada. Após, as inflorescências foram fixadas em etanol/ácido acético (3:1 v:v) por 24 h e armazenadas em etanol 70% sob refrigeração. As frequências de MCN nos botões florais expostos às concentrações de 0,001 mg L-1 e 0,1 mg L-1 de Cd não diferiram significativamente entre si (2,90 e 3,43 MCN, respectivamente), mas diferiram significativamente da frequência do controle (1,93 MCN) (p=0,006). Para Pb, as frequências de MCN nos botões florais expostos às concentrações 0,01 mg L-1 e 0,2 mg L-1 diferiram significativamente entre si (3,76 e 5,03 MCN, respectivamente) e do controle (1,93 MCN) (p&lt;0,001). Os resultados indicam que as concentrações máximas de Cd e Pb permitidas pelas Resoluções CONAMA nº 357/2005 e CONSEMA nº 355/2017 são potencialmente genotóxicas.Palavras-chave: Genotoxicidade. Elemento-traço. Trad-MCN.ABSTRACTThe genotoxic potential of the trace elements cadmium (Cd) and lead (Pb) at the maximum concentrations allowed by CONAMA nº 357/2005 (classification of watersheds, class 1 freshwater) and CONSEMA nº 355/2017 resolutions (emission of effluents in superficial waters in Rio Grande do Sul) were evaluated using the micronuclei (MCN) test with the use of Tradescantia pallida var. purpurea. After 24 h of adaptation in distilled water, 20 cuttings with floral buds were exposed for 8 h in 2 L in distilled water with different concentrations of Cd (0.001 and 0.1 mg L-1) and Pb (0.01 and 0.2 mg L-1), followed by recovery for 24 h in distilled water to finish the meiosis cycle. Simultaneously, negative control was performed with exposure of the cuttings only in distilled water. After the inflorescences were fixed in ethanol/acetic acid (3:1 v:v) for 24 h and stored in ethanol 70% under refrigeration. MCN frequencies in flower buds exposed to concentrations of 0.001 mg L-1 and 0.1 mg L-1 of Cd did not differ significantly from each other (2.90 and 3.43 MCN, respectively), but differed significantly from the control (1.93) (p=0.006). For Pb, the MCN frequency in flower buds exposed to concentrations of 0.01 mg L-1 and 0.2 mg L-1 differed significantly from each other (3.76 and 5.03, respectively) and from the control (1.93) (p&lt;0.001). The results indicate that the maximum concentrations of Cd and Pb permitted by CONAMA n° 357/2005 and CONSEMA n° 355/2017 resolutions are potentially genotoxic.Keywords: Genotoxicity. Trace element. Trad-MCN

GERMINAÇÃO DE ESPOROS ARMAZENADOS EM FRIO E DESENVOLVIMENTO GAMETOFÍTICO IN VITRO DE CYATHEA ATROVIRENS (LANGSD. & FISCH.) DOMIN (CYATHEACEAE) NA PRESENÇA DE ANTIBIÓTICOS.

Cyathea atrovirens (Langsd. & Fisch.) Domin (Cyatheaceae) é uma samambaia arborescente de ampla distribuição no Brasil. Devido ao seu valor ornamental, a espécie é alvo de intensa exploração. Foi avaliada a germinação de esporos armazenados em temperaturas baixas e o desenvolvimento de gametófitos em meio de cultura suplementado com antibióticos. Esporos foram armazenados em tubos eppendorfs em 7 e -20°C por 30 dias, desinfestados com hipoclorito de sódio e semeados em meio Meyer suplementado com um dos antibióticos: estreptomicina (200 mg/L) e cefotaxima (200 mg/L) (três repetições/temperatura e antibiótico). Mensalmente, a contaminação foi avaliada e 300 indivíduos por tratamento foram classificados conforme seu estádio de desenvolvimento. A contaminação foi significativamente menor em esporos semeados em meio com cefotaxima e armazenados a -20°C do que em esporos armazenados a 7°C e cultivados na presença de estreptomicina. Nos tratamentos com cefotaxima, 99,7% dos esporos germinaram, enquanto que, nos tratamentos com estreptomicina, a porcentagem de germinação foi de 87,6%, estatisticamente menor. As porcentagens de gametófitos laminares nos tratamentos com cefotaxima foram cerca de duas vezes superiores às porcentagens de gametófitos nesse estádio quando cultivados em meio com estreptomicina. Gametófitos cordiformes, no estádio mais avançado, foram observados em todos os tratamentos

Translocação da bromélia epifítica Vriesea incurvata: uma eficiente ferramenta para a restauração da biodiversidade na Floresta Atlântica

Micropropagation of epiphytic bromeliads associated to translocation may act as an important tool for conservation, restauration or mitigation initiatives. Vriesea incurvata is an epiphytic tank-forming bromeliad endemic to the Atlantic Forest, being an important species in gallery forest environments. Seeds of V. incurvata were germinated in vitro, and plants were acclimatized and translocated to each of two microhabitats (gallery forest and forest interior) of an Atlantic Forest fragment in South Brazil that harbors few individuals of the species. The 152 plants (76 per microhabitat) were monitored for survival and development, and abiotic data were recorded. There was increased development of morphometric parameters of the plants in the gallery forest, and survival rate ensured an 800% increase in the original population of V. incurvata in the study area. Plant survival and development parameters were positively related to light and relative air humidity. In gallery forest, plants flowered and set fruit, indicating their relationship with pollinators, since V. incurvata provides food for fauna. Further, the establishment of the individuals increased the availability of water in the canopy by accumulation in the rosettes, as well as the complexity of the canopy structure, providing a site for the occurrence of detritivorous, predatory and herbivorous arthropods. Thus, based on the method applied to V. incurvata, inserting epiphytic species into forest environments can be an efficient tool for artificial habitat regeneration, incrementing functional diversity and improving environmental quality.A micropropagação associada à translocação de bromélias epifíticas pode atuar como importante ferramenta para iniciativas de conservação, restauração e mitigação. Vriesea incurvata é uma bromélia epifítica formadora de tanque, endêmica à Floresta Atlântica, sendo uma espécie importante em ambientes de floresta de galeria. Sementes de V. incurvata foram germinadas in vitro e plantas foram aclimatizadas e translocadas para dois micro-hábitats (floresta de galeria e interior florestal) de um fragmento de Floresta Atlântica no Sul do Brasil que abriga poucos indivíduos da espécie. As 152 plantas (76 por micro-hábitat) foram monitoradas para sobrevivência e desenvolvimento, e dados abióticos foram registrados. Houve maior desenvolvimento dos parâmetros morfométricos das plantas na floresta de galeria, e a taxa de sobrevivência assegurou 800% de aumento da população original de V. incurvata na área de estudo. A sobrevivência e os parâmetros de desenvolvimento das plantas relacionaram-se positivamente com luz e umidade relativa do ar. Na floresta de galeria, as plantas floresceram e produziram frutos, indicando sua relação com polinizadores, uma vez que V. incurvata provê alimento para a fauna. Além disso, o estabelecimento de indivíduos aumentou a disponibilidade de água na copa por meio do acúmulo nas rosetas e a complexidade da estrutura da copa, fornecendo um sítio para a ocorrência de artrópodes detritívoros, predadores e herbívoros. Assim, com base no método aplicado em V. incurvata, inserir espécies epifíticas em ambientes florestais pode ser uma eficiente ferramenta para a regeneração artificial de hábitats, incrementando a diversidade funcional e melhorando a qualidade ambiental

Active monitoring of urban air with a simple short-term Tradescantia pallida var. purpurea bioassay under different temperature conditions

The aim of this study was to investigate the influence of temperature regimes on the formation of micronuclei, and to assess the efficiency of a simple short-term exposure of Tradescantia pallida var. purpurea cuttings maintained in distilled water for in situ monitoring of air genotoxicity during different climatic seasons. The first experiment tested the effect of four temperature regimes and a reference temperature on the formation of micronuclei in growth chambers. For the second experiment, plant cuttings kept in distilled water were periodically exposed for 24 hours, from spring 2010 to winter 2011, in an urban site in the municipality of Novo Hamburgo, in the Sinos River Basin, State of Rio Grande do Sul (Brazil); in addition an indoor control was carried out. Micronuclei frequencies (MCN) were determined in young tetrads of pollen mother cells and expressed as MCN/100 tetrads. The MCN frequencies varied from 0.70 to 1.17, however there was no significant difference between the different temperature regimes (minimum and maximum temperatures of 6 and 38 °C) and the temperature of 26 °C. Under field conditions, MCN frequencies were significantly higher in samples from the urban site than in those from the control and did not vary significantly among seasons (4.0 in spring, 2.9 in summer, 3.1 in autumn and 4.3 in winter). The results indicated the validity of this simple method as a suitable experimental model for active air monitoring under the environmental conditions of the study.(Monitoramento ativo simples de curta duração do ar urbano com o bioensaio de Tradescantia pallida var. purpurea sob diferentes condições de temperatura). O estudo objetivou investigar a influência de regimes de temperatura sobre a formação de micronúcleos e verificar a eficiência de um bioensaio de simples e rápida exposição de ramos de Tradescantia pallida var. purpurea mantidos em água destilada para o monitoramento in situ da genotoxicidade do ar ao longo das diferentes estações climáticas. No primeiro experimento, quatro regimes de temperatura e uma temperatura de referência foram testados quanto ao efeito sobre a formação de micronúcleos em câmaras de crescimento. No segundo experimento, ramos de plantas em água destilada foram periodicamente expostos por 24 horas, da primavera de 2010 ao inverno de 2011, a um ponto urbano no município de Novo Hamburgo, na Bacia do Rio dos Sinos, Rio Grande do Sul (Brasil), além de um controle em ambiente interno. As frequências de micronúcleos (MCN) foram determinadas em tétrades jovens de células-mãe de grãos de pólen e expressas como MCN/100 tétrades. Não foram observadas diferenças significativas entre frequências de MCN sob diferentes regimes de temperatura (temperaturas mínima e máxima de 6 e 38 °C) e a temperatura de 26 °C, variando de 0,70 a 1,17. Sob condições de campo, as frequências de MCN foram significativamente mais altas nas amostras do ponto urbano do que naquelas do controle e não variaram significativamente ao longo das estações (4,0 na primavera, 2,9 no verão, 3,1 no outono e 4,3 no inverno). Os resultados indicaram a validade desse método simples como um modelo experimental adequado para o monitoramento ativo do ar nas condições ambientais do presente estudo

Germinação de esporos e desenvolvimento gametofítico de Cyathea atrovirens (Langsd. & Fisch.) Domin (Cyatheaceae) em diferentes temperaturas e fotoperíodosSpore germination and gametophytic development of Cyathea atrovirens (Langsd...

Cyathea atrovirens (Langsd. & Fisch.) Domin (Cyatheaceae) é uma samambaia arborescente de ampla distribuição geográfica que ocorre no Nordeste, Centro-Oeste, Sudeste e Sul do Brasil, no Paraguai, na Argentina e no Uruguai. A espécie habita ambientes diversos como florestas, áreas abertas e mesmo locais impactados pela ação humana. O estudo teve por objetivo avaliar a influencia da temperatura e do fotoperíodo na germinação de esporos e no desenvolvimento de gametófitos de C. atrovirens. Esporos foram semeados em frascos contendo meio de Meyer líquido e mantidos nas temperaturas de 15, 20, 23, 26, 29 e 32±1 ˚C (Experimento 1) e nos fotoperíodos de 8, 12, 16, 24 h de luz e no escuro (Experimento 2). As maiores porcentagens de germinação (84 a 99%) foram observadas nas temperaturas de 20 a 32 °C, enquanto que em 15 °C 43% dos esporos germinaram. Em 32 °C, a maior parte dos gametófitos ainda se encontrava em estádio inicial, com clorócito e rizoide (72%), enquanto que nas temperaturas de 20 a 29 °C, 61 a 73% dos gametófitos já estavam em estádio laminar aos 28 dias. Não houve germinação no escuro. As porcentagens de germinação e de gametófitos laminares foram igualmente altas em todos os fotoperíodos com presença de luz, variando de 91 a 97% e de 74 a 87%, respectivamente. Os dados obtidos podem contribuir para o entendimento da distribuição geográfica e da ocorrência de Cyathea atrovirens em diversos habitats.Abstract Cyathea atrovirens (Langsd. & Fisch.) Domin (Cyatheaceae) is a widely distributed arborescent fern, grown in the Northeast, Midwest, Southeast and South of Brazil, Paraguay, Argentina and Uruguay. The species is found in different environments such as forests, open areas and even in locations impacted by human action. The study aimed to evaluate the influence of temperature and the photoperiod on spore germination and on the gametophyte development of C. atrovirens. Spores were seeded in flasks containing liquid Meyer medium and maintained at temperatures of 15, 20, 23, 26, 29 and 32±1 ˚C (Experiment 1) and at photoperiod cycles of light and dark of 8, 12, 16, 24 h (Experiment 2). The highest germination percentages (84 to 99%) were observed at temperatures of 20 to 32 °C, while at 15 °C, 43% of the spores germinated. At 32 °C, most gametophytes still remained at the early stage, with chlorocyte and rhizoid (72%), whereas at temperatures from 20 to 29 °C, 61 to 73% of the gametophytes were already in laminar stage at 28 days. There was no germination in the dark. The percentages of germination and laminar gametophytes were equally high in all photoperiods with the presence of light, ranging from 91 to 97% and from 74 to 87%, respectively. The data obtained may contribute to the understanding of the geographical distribution and the occurrence of Cyathea atrovirens in diverse habitats