Mycoparasitism of Trichoderma spp. on the soilborne plant pathogen Sclerotinia sclerotiorum : Preliminary assays on biological control of this disease

En este trabajo se estudió la capacidad de algunas especies de Trichoderma, en particular T. harzianum, como antagonistas del patógeno vegetal Sclerotinia sclerotiorum. En las pruebas de antagonismo "in vierto" se comprobé dicha capacidad en términos de la disminución del crecimiento de la colonia del patógeno y la reducción tanto de la viabilidad de los esclerocios como del desarrollo de otros nuevos. También se describió el proceso del micoparasitismo por parte del antagonista Trichoderma spp. sobre dos fases somóticas del patógeno: sus esclerocios y el micelio. En el primer caso se observó, con microscopía óptica, la colonización de los tejidos de los esclerocios infectados por parte del antagonista, comprobándose la total destrucción de la médula de los mismos. En el segundo, se observaron las interacciones hifales entre el micoparásito (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) y el hospedante, tanto en cultivo dual como en un suelo estéril, con microscopía óptica y de barrido. En los cultivos duales, las hifas de T. harzianum crecieron hacia las de S. sclerotiorum enrollándose alrededor de ellas. En los últimos estadíos del proceso micoparasítico, se observaron enrollamientos o "coilings" muy densos y una degradación parcial de las paredes celulares de las hifas del patógeno. En suelo estéril, los conidios de T. harzianum germinaron y el micelio en desarrollo alcanzó al de S. sclerotiorum. Trichoderma formó ramificaciones cortas y cuerpos similares a apresorios los cuales podrían contribuir con la penetración de la pared del hospedante. Por otro lado se comprobé la capacidad del aislamiento de T. harzianum BAFC cult. N§ 742 para producir enzimas extracelulares que degradan las paredes celulares de S. sclerotiorum. Paralelamente se verificó la presencia de lectinas en una medio de cultivo líquido de S. sclerotiorum. En este trabajo se estudió además, la supervivencia de esclerocios de S. sclerotiorum en un suelo inoculado con T. harzianum en función de la concentración de inóculo del antagonista, de la temperatura y del pH. Posteriormente se llevaron a cabo pruebas preliminares sobre control biológico. Primero se desarrolló un sistema "in vierto" para evaluar la habilidad de Trichoderma para controlar la marchitez producida por S. sclerotiorum en plantas de pepino y lechuga: el recubrimiento de semillas con conidios de T. harzianum result¢ en reducciones del efecto de S. sclerotiorum sobre la emergencia y post-emergencia de las plantas de ambos hospedantes. Luego se realizó una búsqueda o "screening" en invernadero, con lechuga, en el cual se ensayaron varios aislamientos de Trichoderma spp. algunos de los cuales aumentaron los porcentajes de semillas germinadas y la supervivencia de las plantas, aunque no significativamente desde el punto de vista estadístico. Uno de estos aislamientos, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, indujo además un incremento significativo en el peso seco del vástago de las plantas. Se realizaron dos ensayos independientes con lechuga en los cuales se empleó el aislamiento mencionado anteriormente como antagonista, obteniéndose, en uno de los ensayos, una reducción no significativa en la incidencia de la enfermedad. Sin embargo, se observaron aumentos en la mayoría de los parámetros de crecimiento de la planta medidos, todos estadísticamente significativos. Se efectuaron otros dos ensayos empleando plantas de soja como hospedante, uno en invernadero y el otro a campo. En ambos se verificó un control significativo de la enfermedad en los tratamientos con la aplicación de T. harzianum BAFC cult. N§ 742. En cambio, no se registraron diferencias significativas en el desarrollo de las plantas en ninguno de los dos casos. Se realizaron dos ensayos de biocontrol más, empleando girasol como hospedante, de los cuales se extrajeron resultados significativos referentes al aumento en el desarrollo de las plantas y la reducción de la incidencia de la enfermedad producida por S. sclerotiorum. Los resultados se discuten en forma independiente por capítulos y finalmente en forma global.In this work, the ability of some species of Trichodema, particularly T. harzianum, as antagonists of the soilborne plant pathogen Sclerotinia sclerotiorum, was studied. Such hability was demonstrated in "in vierto" assays, in terms of the reduction of the pathogen colony, the sclerotia viability, as well as the development of new ones. The process of mycoparasitism by the antagonist Trichoderma spp. is also described on two somatic phases: the sclerotia and the mycelium. In the first case, the colonization of infected tissues of the sclerotia by the antagonists was observed with light microscopy, and verified the total destruction of the sclerotia medulla. In the second, hiphal interactions between the mycoparasite (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) and its host, were observed in dual cultures and also in sterilized soil, with both light and scanning microscopy. In dual cultures, hyphae grew towards and coiled around the S. sclerotiorum hyphae. Dense coils and partial degradation of the Sclerotinia cell wall were observed in later stages of the parasitism. In sterile soil, T. harzianum conidia germinated and the developing mycelium made contact with that of S. sclerotiorum. Trichoderma formed short branches and appressorium-like bodies which propably aid in holding and penetrating the host cell wall. On the other hand, the capacity of the isolate BAFC N§ 742 of T. harzianum to produce enzimes degrading cell wall of mycelium and sclerotia of S. sclerotiorum, was demonstrated. Parallely, the presence of lectins in a liquid culture medium of S. sclerotiorum was also shown. In this work, the survival of sclerotia of S. sclerotiorum in soil inoculated with T. harzianum was studied, versus the concentration of the antagonist inoculum, the temperature and the pH. Later, preliminary assays on biological control were carried out "in vierto", in greenhouse and in the field. An "in vierto" system was developed to test the Trichoderma ability to control Sclerotinia wilt in cucumber and lettuce: coating seeds with T. harzianum conidia resulted in a reduction in the pre- and post-emergence effect of S. sclerotiorum in both hosts. Several isolates of Trichodema spp. were assayed in a greenhouse screening of antagonists, using lettuce plants as the host. Some isolates increased seeds germination and plants survival, although the differences were not significant at statistical level. One of these isolates, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, also induced a significant increase of the aerial dry weight of plants. Two independent assays with lettuce were performed in which the above mencioned isolate was employed as antagonist. A reduction of the diseases incidence was obtained in one of the experiments but it was not significant. However, most of the growth parameters measured in the plants increased significantly. Another two experiments were carried out with soybean as the host, one in greenhouse and the other in the field. A significant control of the disease was verified when T. harzianum BAFC cult. N§ 742 was applied, in both experiments. In contrast, there were not significant differences regarding growth parameters of the plants in any of the two experiments. Sunflower plants were employed as hosts in two biocontrol assays, from which significant results, related to increase of plants development and disease control were obtained. Results are discused separatly in each chapter and globaly at the end.Fil:Menéndez, Ana Bernardina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Micoparasitismo de Trichoderma spp. sobre el patógeno vegetal de suelo Sclerotinia sclerotiorum : Pruebas preliminares sobre el biocontrol de esta enfermedad

En este trabajo se estudió la capacidad de algunas especies de Trichoderma, en particular T. harzianum, como antagonistas del patógeno vegetal Sclerotinia sclerotiorum. En las pruebas de antagonismo "in vierto" se comprobé dicha capacidad en términos de la disminución del crecimiento de la colonia del patógeno y la reducción tanto de la viabilidad de los esclerocios como del desarrollo de otros nuevos. También se describió el proceso del micoparasitismo por parte del antagonista Trichoderma spp. sobre dos fases somóticas del patógeno: sus esclerocios y el micelio. En el primer caso se observó, con microscopía óptica, la colonización de los tejidos de los esclerocios infectados por parte del antagonista, comprobándose la total destrucción de la médula de los mismos. En el segundo, se observaron las interacciones hifales entre el micoparásito (T. harzianum BAFC cult. N§ 742) y el hospedante, tanto en cultivo dual como en un suelo estéril, con microscopía óptica y de barrido. En los cultivos duales, las hifas de T. harzianum crecieron hacia las de S. sclerotiorum enrollándose alrededor de ellas. En los últimos estadíos del proceso micoparasítico, se observaron enrollamientos o "coilings" muy densos y una degradación parcial de las paredes celulares de las hifas del patógeno. En suelo estéril, los conidios de T. harzianum germinaron y el micelio en desarrollo alcanzó al de S. sclerotiorum. Trichoderma formó ramificaciones cortas y cuerpos similares a apresorios los cuales podrían contribuir con la penetración de la pared del hospedante. Por otro lado se comprobé la capacidad del aislamiento de T. harzianum BAFC cult. N§ 742 para producir enzimas extracelulares que degradan las paredes celulares de S. sclerotiorum. Paralelamente se verificó la presencia de lectinas en una medio de cultivo líquido de S. sclerotiorum. En este trabajo se estudió además, la supervivencia de esclerocios de S. sclerotiorum en un suelo inoculado con T. harzianum en función de la concentración de inóculo del antagonista, de la temperatura y del pH. Posteriormente se llevaron a cabo pruebas preliminares sobre control biológico. Primero se desarrolló un sistema "in vierto" para evaluar la habilidad de Trichoderma para controlar la marchitez producida por S. sclerotiorum en plantas de pepino y lechuga: el recubrimiento de semillas con conidios de T. harzianum result¢ en reducciones del efecto de S. sclerotiorum sobre la emergencia y post-emergencia de las plantas de ambos hospedantes. Luego se realizó una búsqueda o "screening" en invernadero, con lechuga, en el cual se ensayaron varios aislamientos de Trichoderma spp. algunos de los cuales aumentaron los porcentajes de semillas germinadas y la supervivencia de las plantas, aunque no significativamente desde el punto de vista estadístico. Uno de estos aislamientos, T. harzianum BAFC cult. N§ 742, indujo además un incremento significativo en el peso seco del vástago de las plantas. Se realizaron dos ensayos independientes con lechuga en los cuales se empleó el aislamiento mencionado anteriormente como antagonista, obteniéndose, en uno de los ensayos, una reducción no significativa en la incidencia de la enfermedad. Sin embargo, se observaron aumentos en la mayoría de los parámetros de crecimiento de la planta medidos, todos estadísticamente significativos. Se efectuaron otros dos ensayos empleando plantas de soja como hospedante, uno en invernadero y el otro a campo. En ambos se verificó un control significativo de la enfermedad en los tratamientos con la aplicación de T. harzianum BAFC cult. N§ 742. En cambio, no se registraron diferencias significativas en el desarrollo de las plantas en ninguno de los dos casos. Se realizaron dos ensayos de biocontrol más, empleando girasol como hospedante, de los cuales se extrajeron resultados significativos referentes al aumento en el desarrollo de las plantas y la reducción de la incidencia de la enfermedad producida por S. sclerotiorum. Los resultados se discuten en forma independiente por capítulos y finalmente en forma global

Influence of Triflumurón on arbuscular mycorrhizal fungi and root colonization of soybean (Glycine max var. sojae)

Se evaluó el efecto de tres concentraciones diferentes (0,02; 0,2 y 2 ppm) del insecticida Triflumurón sobre la micorrización por Glomus mosseae y hongos arbusculares, nativos de un suelo en plantas de soja (Glycine max var. sojae Nidera cultivar 4656). Para ello se llevó a cabo un experimento en macetas, que contenían una mezcla de suelo tamizado (tipo Argiudol) y cuarzo 2:3 (V/V). Las macetas se llevaron a capacidad de campo (140 ml) con soluciones acuosas de Triflumurón 2, 0,2 y 0,02 ppm. Los controles se realizaron sin el agregado del insecticida. El inóculo de G. mosseae consistió de 5g de suelo rizosférico conteniendo 41 esporas y/o esporocarpos (mayormente uniesporados) por gramo de suelo, el cual fue agregado simultáneamente con la siembra de semillas. Las plantas se cultivaron 8 semanas en invernadero a 20-25 ºC, al cabo de las cuales se registró el porcentaje de micorrización y el peso seco de tallos y raíces. Por otro lado se realizó un ensayo en cajas de Petri destinado a evaluar el efecto del Triflumurón sobre la germinación de Glomus mosseae (Nicol. & Gerd.) Gerdemann & Trappe, Gigaspora rosea Nicolson & Schenck y Scutellospora castanea Walker. El Triflumurón no afectó el crecimiento general de las plantas ni el porcentaje de micorrización por parte de G. mosseae. En cambio, disminuyó el porcentaje de micorrización de las raíces por parte de las micorrizas nativas del suelo utilizado. En el ensayo de germinación en cajas de Petri, el Triflumurón no afectó la germinación de esporas en ninguna de las tres especies de micorrizas arbusculares.Three different concentrations (0,02; 0,2 and 2 ppm) of the insecticide Triflumurón were assessed for their effect on mycorrhizal root colonization by Glomus mosseae and indigenous arbuscular fungi soybean (Glycine max var. sojae Nidera cv 4656). A greenhouse experiment was carried out in pots containing a mixture of sieved soil (Argiudol) and quartz 2:3 (V/V), additioned with water solutions of Triflumurón 2, 0,2 and 0,02 ppm. Controls were made without the addition of insecticide. G. mosseae inoculum consisted of 5 g of rhizospheric soil containing 41 spores or sporocarps (mostly one spored) per gram of soil, which was added during seeding. Plants were cultivated for 8 weeks in the greenhouse at 20-25 C° and mycorrization percentage and dry weight of shoot and root registered. On other hand, the effect of Triflumurón on spore germination of Glomus mosseae, Gigaspora rosea and Scutellospora castanea was evaluated in vitro on Petri dishes experiment. The insecticide did not affect total plant growth and root colonisation by Glomus mosseae, but decreased root infection by indigenous arbuscular mycorrhizal population. Spore germination rates of Glomus mosseae, Gigaspora rosea and Scutellospora castanea were not affected by the addition of Triflumurón to the Petri dishes.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Influence of Triflumurón on arbuscular mycorrhizal fungi and root colonization of soybean (Glycine max var. sojae)

Se evaluó el efecto de tres concentraciones diferentes (0,02; 0,2 y 2 ppm) del insecticida Triflumurón sobre la micorrización por Glomus mosseae y hongos arbusculares, nativos de un suelo en plantas de soja (Glycine max var. sojae Nidera cultivar 4656). Para ello se llevó a cabo un experimento en macetas, que contenían una mezcla de suelo tamizado (tipo Argiudol) y cuarzo 2:3 (V/V). Las macetas se llevaron a capacidad de campo (140 ml) con soluciones acuosas de Triflumurón 2, 0,2 y 0,02 ppm. Los controles se realizaron sin el agregado del insecticida. El inóculo de G. mosseae consistió de 5g de suelo rizosférico conteniendo 41 esporas y/o esporocarpos (mayormente uniesporados) por gramo de suelo, el cual fue agregado simultáneamente con la siembra de semillas. Las plantas se cultivaron 8 semanas en invernadero a 20-25 ºC, al cabo de las cuales se registró el porcentaje de micorrización y el peso seco de tallos y raíces. Por otro lado se realizó un ensayo en cajas de Petri destinado a evaluar el efecto del Triflumurón sobre la germinación de Glomus mosseae (Nicol. & Gerd.) Gerdemann & Trappe, Gigaspora rosea Nicolson & Schenck y Scutellospora castanea Walker. El Triflumurón no afectó el crecimiento general de las plantas ni el porcentaje de micorrización por parte de G. mosseae. En cambio, disminuyó el porcentaje de micorrización de las raíces por parte de las micorrizas nativas del suelo utilizado. En el ensayo de germinación en cajas de Petri, el Triflumurón no afectó la germinación de esporas en ninguna de las tres especies de micorrizas arbusculares.Three different concentrations (0,02; 0,2 and 2 ppm) of the insecticide Triflumurón were assessed for their effect on mycorrhizal root colonization by Glomus mosseae and indigenous arbuscular fungi soybean (Glycine max var. sojae Nidera cv 4656). A greenhouse experiment was carried out in pots containing a mixture of sieved soil (Argiudol) and quartz 2:3 (V/V), additioned with water solutions of Triflumurón 2, 0,2 and 0,02 ppm. Controls were made without the addition of insecticide. G. mosseae inoculum consisted of 5 g of rhizospheric soil containing 41 spores or sporocarps (mostly one spored) per gram of soil, which was added during seeding. Plants were cultivated for 8 weeks in the greenhouse at 20-25 C° and mycorrization percentage and dry weight of shoot and root registered. On other hand, the effect of Triflumurón on spore germination of Glomus mosseae, Gigaspora rosea and Scutellospora castanea was evaluated in vitro on Petri dishes experiment. The insecticide did not affect total plant growth and root colonisation by Glomus mosseae, but decreased root infection by indigenous arbuscular mycorrhizal population. Spore germination rates of Glomus mosseae, Gigaspora rosea and Scutellospora castanea were not affected by the addition of Triflumurón to the Petri dishes.Facultad de Ciencias Agrarias y Forestale

Herbicide-mediated promotion of Lotus tenuis (Waldst. & Kit. ex Wild.) did not influence soil bacterial communities, in soils of the Flooding Pampa, Argentina

Promoting the forage Lotus tenuis is an appealing alternative to meet the needs for cattle production in the Flooding Pampa region, Argentina. This agricultural practice requires herbicides application to remove plant species competing with L. tenuis. The use of chemical compounds, in addition to the removal of native vegetation, eventually may change the diversity of other ecosystem components such as bacterial communities. The objectives of this work were to examine the effect of L. tenuis promotion on the bacterial community composition and on specific water-related soil variables, and to detect specific bacterial taxa responding to the L. tenuis promotion. In order to achieve these objectives, here we studied three different rangeland sites of the Flooding Pampa region. At each site, two paddocks were compared, one managed to promote the forage legume L. tenuis, and the other lacking of management history and hence, covered by natural grasses. To asses bacterial diversity we used 454-FLX pyrosequencing technology of the V4 region of the 16S rRNA gene, on genomic DNA extracted from soil samples. We obtained 135.918 sequences, representing 3187 Operational Taxonomic Units (OTUs) distributed in 12 phyla and 45 classes. Overall, the main identified components of the bacterial community at the Phylum level were Acidobacteria, followed by Verrucomicrobia, Planctomycetes and Chloroflexi. Our results suggest that 5-6 years of land use with L. tenuis promotion does not affect the microbial community structure in this ecosystem. NMDS ordination in two dimensions based on Bray–Curtis distances and PERMANOVA test did not show differences in bacterial community composition between paddocks promoted or not with L. tenuis, although differences among sites were detected. In parallel, Pearson’s correlation analysis suggested that L. tenuis promotion would indirectly affect members of classes Acidobacteria and Anaerolineae, through altering water-related soil properties.EEA Cuenca del SaladoFil: Nieva, Amira Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Bailleres, Matias Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Cuenca del Salado. Agencia de Extensión Rural Chascomus; ArgentinaFil: Corriale, Maria Jose. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires; ArgentinaFil: Llames, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Menéndez, Ana Bernardina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología; ArgentinaFil: Ruiz, Oscar Adolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentin

Promotion of Lotus tenuis in the flooding Pampa (Argentina) increases the soil fungal diversity

Forage promotion is an increasingly used agricultural practice that requires herbicide application to remove competing plant species. This work examined the effect of the forage legume Lotus tenuis on the fungal community composition at three sites of the Flooding Pampa, Argentina. Replicate paddocks, managed either by herbicide-mediated promotion of L. tenuis or unmanaged (dominated by grasses) were compared using 454 pyrosequencing, targeting the fungal internal transcribed spacer (ITS) gene. Our results suggest that fungal diversity in the studied area varied according to the site and the land use (natural grasses vs. L. tenuis promotion). Several factors [pH, Ca2+, P, and HCO3−] were the main soil environmental drivers of distribution of fungal classes. Herbicide-mediated L. tenuis promotion led to increased fungal diversity, with dominance of Fusarium species.EEA Cuenca del SaladoFil: Nieva, Amira Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Bailleres, Matias Andres. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Cuenca del Salado. Agencia de Extensión Rural Chascomus; ArgentinaFil: Llames, María Eugenia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); ArgentinaFil: Taboada, Miguel Angel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Suelos; ArgentinaFil: Ruiz, Oscar Adolfo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús). Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas "Dr. Raúl Alfonsín" (sede Chascomús); Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Fisiología y Recursos Genéticos Vegetales; ArgentinaFil: Menéndez, Ana Bernardina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Biodiversidad y Biología; Argentin

Identification of differentially expressed genes potentially involved in the tolerance of Lotus tenuis to long-term alkaline stress

"Soil alkalinity is one of the most serious agricultural problems limiting crop yields. The legume Lotus tenuis is an important forage acknowledged by its ability to naturally grow in alkaline soils. To gain insight into the molecular responses that are activated by alkalinity in L. tenuis plants, subtractive cDNA libraries were generated from leaves and roots of these plants. Total RNAs of non-stressed plants (pH 5.8; E.C. 1.2), and plants stressed by the addition of 10 mM of NaHCO3 (pH 9.0; E.C. 1.9), were used as source of the driver and the tester samples, respectively. RNA samples were collected after 14 and 28 days of treatment. A total of 158 unigenes from leaves and 92 unigenes from roots were obtained and classified into 11 functional categories. Unigenes from these categories (4 for leaves and 8 for roots), that were related with nutrient metabolism and oxidative stress relief were selected, and their differential expression analyzed by qRT-PCR. These genes were found to be differentially expressed in a time dependent manner in L. tenuis during the alkaline stress application. Data generated from this study will contribute to the understanding of the general molecular mechanisms associated to plant tolerance under long-term alkaline stress in plants.