Screening forCronobacterSpecies in Powdered and Reconstituted Infant Formulas and from Equipment Used in Formula Preparation in Maternity Hospitals

Background/Aims: Cronobacter spp. have been identified as being of considerable risk to neonates. The occurrence of organism in infant formulas is therefore of considerable interest. Methods: The occurrence of Cronobacter spp. in infant feeds (formulas and fortified cow’s milk) was determined using most probable number (MPN) analysis, and from formula preparation utensils. Ninety nine samples were analyzed, of which 42 were unopened cans of powdered infant formula (PIF), 25 reconstituted infant formulas in feeding bottles, 27 utensils used from the preparation of infant formula, and 5 samples of fortified cow’s milk. Presumptive Cronobacter spp. isolates were identified using the 7 allele multilocus sequence typing (MLST) scheme. Results: C. sakazakii, C. malonaticus and C. muytjensii were recovered from PIF. Although the incidence of Cronobacter in PIF was 29% (12/42), the level was low with an average of 0.54 MPN/100g. According to MLST profiling, C. sakazakii was the most frequently isolated Cronobacter species, and C. sakazakii ST4 (associated with neonatal meningitis) was recovered from 2/42 PIF samples at 0.51 and 0.92 MPN/100g. Conclusions: Cronobacter spp. can be isolated from PIF and therefore strict hygienic practices during PIF preparation are important to minimize neonate exposure and reduce the risk of severe infections

Role of leptin in regulating the bovine hypothalamic-gonadotropic axis

The physiological mechanisms through which nutrition mediates its effects in controlling reproduction are not well characterized. Both neural and endocrine components have been implicated in the communication of nutritional status to the central nervous system. Leptin, a hormone synthesized and secreted mainly by adipocytes, is heavily involved in this communication network. The objectives of studies reported herein were 1) to determine the effects of short-term restriction of nutrients on circulating leptin, leptin gene expression in adipose tissue, and leptin receptor (LR) gene expression in the adenohypophysis of ovariectomized cows; and 2) to investigate the responsiveness of the hypothalamic-adenohypophyseal (AP) axis of fasted and non-fasted cattle to leptin. Studies demonstrated that circulating concentrations of leptin and leptin gene expression in subcutaneous adipose tissue are decreased by fasting. Although 2 to 3 days of fasting did not affect patterns of release of luteinizing hormone (LH), cerebroventricular infusions of leptin increased mean circulating concentrations of LH in fasted, but not normal-fed cows, without affecting frequency or amplitude of pulses of LH. In vitro studies were conducted to determine whether the in vivo effects of leptin could be accounted for at the hypothalamic and/or AP levels. Leptin did not affect the release of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) from hypothalamic-infundibular explants from either normal-fed or fasted cattle. Moreover, leptin did not affect the basal release of LH from bovine AP cells or AP explants from normal-fed cows. However, leptin induced a higher basal release of LH from AP explants of fasted cows and increased GnRH-stimulated release of LH from AP explants of normal-fed cows. Results demonstrate that leptin acts directly at the AP level to modulate the secretion of LH, and its effects are dependent upon nutritional status. Cellular mechanisms associated with the increased responsiveness of gonadotropes to leptin in fasted cows were investigated. Expression of LR and suppressor of cytokine signaling-3 (SOCS-3) in the adenohypophysis did not account for the increased responsiveness of fasted cows to leptin. Therefore, although leptin clearly stimulates the hypothalamic-gonadotropic axis in nutrient-restricted cattle, it is unclear why cattle maintained under neutral or positive energy balance are resistant to leptin

Efeitos da quercetina em células de glioma humano

Resumo: O processo invasivo e uma caracteristica importante de diversas neoplasias malignas, relacionado diretamente com o prognostico dos pacientes. O estabelecimento da invasao celular inclui a capacidade das celulas em remodelar o espaco extracelular. Os gliomas possuem essa caracteristica, e devido a complexidade anatomica desse tecido a media de sobrevida para pacientes com o grau mais agressivo desse tipo de tumor (grau IV) e de 12 . 15 meses. A invasividade, em geral, e facilitada pela acao das metaloproteases de matriz (MMPs), que degradam a matriz extracelular, favorecendo a invasao. Entre os elementos que podem regular a atividade de MMPs esta RECK, uma glicoproteina ancorada a membrana celular. A quercetina, um flavonoide de ocorrencia natural na dieta, possui a propriedade de inibir a atividade de MMPs, e desta forma tem potencial para a terapeutica anti-tumoral ou acao quimioprotetora. Neste trabalho foi avaliado o efeito da quercetina em celulas de glioma humano (U373MG e U87MG) em relacao aos processos de viabilidade, proliferacao, morte e migracao celular, correlacionando com os niveis de RNAm de RECK (e seus transcritos alternativos de splicing), MMPs e TIMPs e aos processos de viabilidade, proliferacao, morte e migracao celular. Foi verificado (por coloracao com cristal violeta e analises de citometria de fluxo) que o tratamento das celulas U373MG e U87MG com quercetina promoveu a diminuicao da proliferacao celular de maneira dose e tempo dependente. Especificamente, o tratamento destas celulas com 50 ƒÊmol/L de quercetina por 48h promoveu um aumento do numero de celulas na fase G1 do ciclo celular e diminuicao de celulas na fase G2-M. O aumento de ambas as linhagem na fase G1 pelo flavonoide nao foi acompanhado de morte celular, indicando que o tratamento com quercetina em baixas doses promove parada de proliferacao celular. A analise dos perfis de expressao genica foi investigada atraves de ensaios de PCR quantitativo em Tempo Real. Os resultados indicaram que o tratamento com quercetina levou a uma diminuicao na expressao dos transcritos alternativos de RECK (RECK B e D) e nao ocorreu modulacao no transcrito canonico RECK A. Quanto a MMP 2, o tratamento regulou negativamente os niveis deste transcrito, resultado que foi confirmado com a inibicao da atividade da enzima MMP 2 pela quercetina tanto na linhagem U87MG quanto na U373MG. Os niveis dos transcritos de TIMP 1 e TIMP 2 aumentaram significativamente apos o tratamento com quercetina nas celulas U87MG. Nas celulas U373MG ocorreu um aumento em TIMP 1 e uma diminuicao em TIMP 2. Em conjunto, nossos resultados indicam que o tratamento com quercetina e capaz de reduzir a proliferacao de celulas de gliomas, levando a parada de ciclo celular em G1 e a diminuicao da migracao, e sugerem que o gene RECK e seus transcritos alternativos possam ser alvos moleculares importantes modulados por quercetina capazes de contribuir para os efeitos beneficos deste flavonoide

A aplicabilidade da redução equitativa da indenização por excessiva desproporção entre culpa e dano

TCC(graduação) - Universidade Federal de Santa Catarina. Centro de Ciências Jurídicas. Direito.A presente monografia tem por principal objetivo analisar a aplicabilidade do parágrafo único do artigo 944 do Código Civil de 2002 no direito brasileiro. A redução equitativa da indenização por excessiva desproporção entre culpa e dano, representada pelo artigo supra citado, foi introduzida no novo Código Civil, não havendo, até o presente momento, consenso doutrinário ou jurisprudencial acerca de sua aplicação. O presente trabalho se propõe a apresentar os posicionamentos acerca do tema, através de uma discussão fundamentada nos pressupostos da responsabilidade civil. Para isso, as características da norma em questão serão analisadas, bem como a sua inserção no direito pátrio. Posteriormente, por ser o critério orientador do magistrado no momento da aplicação, a equidade será abordada. Ademais, os requisitos objetivos exigidos pelo artigo serão apresentados e caracterizados, bem como outros critérios que poderão ser úteis na aplicação da norma. Também a atuação do magistrado, intérprete da norma legal, será considerada. Já em um segundo momento, a aplicabilidade do parágrafo único do artigo 944 ganhará repercussão, apresentando-se cada uma das hipóteses de atuação do preceito legal. O dano material, o dano moral e a responsabilidade objetiva serão analisados, com suas características e pressupostos, em virtude da existência de maiores divergências acerca desses temas. Em relação a essas espécies de dano, dois posicionamentos podem ser encontrados, um pelo cabimento e outro pela inaplicabilidade da norma em comento, embora as correntes apresentem outras divisões em relação à linha argumentativa. Em análise jurisprudencial, se discutirá também a aplicabilidade do parágrafo único do artigo 944 na responsabilidade civil por ato de terceiro, além da diferenciação entre a redução equitativa e a causalidade concorrente, e sua distinção da teoria da perda de uma chance. O presente trabalho não se resume, no entanto, a apresentar posicionamentos doutrinários ou jurisprudenciais. Através de toda uma análise fundamentada, se chegará a um modelo ideal de aplicação do parágrafo único do artigo 944 do Código Civil a cada uma das hipóteses possíveis. Assim, a aplicabilidade da redução ao dano material e à responsabilidade por ato ou fato de terceiro, além da inaplicabilidade da norma em questão ao dano moral e à responsabilidade civil objetiva serão cuidadosamente demonstradas

Cellular Agriculture and Intellectual Property Law

This is the author accepted manuscript. The final version is available from ElsevierIntellectual Property (IP) rights have been inextricably intertwined with the emergence of transformative technologies as means to reward intellectual creation since the beginning of human ingenuity. Cell-cultivation technology to produce food for human consumption is no exception. From trade secrets to patents and trademarks, the production of food for human consumption using cell-cultivation technology confronts innovators, manufacturers, regulators and consumers with an array of challenges. What we understand as IP, and how we engage with it, will shape the contours of academic discourse, public policy debates and entrepreneurial success. Equally, encountering IP law at a multiplicity of levels, cellular agriculture as an emerging field of enquiry appears to challenge Lockean approaches to IP as a legal monopoly, questioning their limits to promote social progress. This chapter explores IP rights in cellular agriculture to elucidate the extent to which they are deployed to generate optimal public welfare. The central tenet of the proposition in this chapter, that ‘open science’ may be a critical element in a flourishing innovation ecosystem, reflects on the significance of calibrating IP rights to display societal benefits, and on the potential to construe cell-cultivation technology as a ‘technology of abundance’. Here, the argument is not that IP rights necessarily have to be operationalised as scarce resources to enable innovation. Rather, this long-held presumption of exhaustion is explored through a public interest lens, contending that IP law has the ability to invigorate multiple tonalities in new, sustainable global economic governance mechanisms, while being mindful of, and in fact amplify, a variety of seemingly unrelated elements uniting to address complex social challenges. It also offers reflections on reconciling diverging jurisdictional approaches to regulating IP that takes account of emerging legal risks in a post-scarcity economy

Analysis of the gene complex FANCD2/FANCI in Brazilian womem with hereditary breast cancer

Orientador: Carmen Silvia BertuzzoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: O câncer de mama (CM) é o tipo de câncer que mais comumente ocorre entre mulheres, com a estimativa de 49.240 novos casos diagnosticados em 2010 no Brasil. O CM apresenta fatores de risco conhecidos como idade, fatores sócio-econômicos, etnia, exposição excessiva a hormônios, radiação, dieta, exercícios físicos, história ginecológica e história familiar. Além dos fatores de risco, o CM apresenta fatores de prognóstico mensurados no momento do diagnóstico e que servem como preditor da sobrevida do paciente. Existem pelo menos 20 subtipos de CM distintos morfologicamente. O complexo formado pelos genes FANCD2 e FANCI tem a função chave de co-localizar o sítio nuclear de reparo para proteínas que diretamente estão relacionadas à recombinação homóloga como BRCA1, juntamente com FANCJ, RAD51, BRCA2/FANCD1 com FANCN. A descoberta de que o gene BRCA2 é, na verdade, FANCD1 atraiu pesquisadores para um novo alvo na corrida para a compreensão da história natural da doença, informação esta que permitirá avaliar a hipótese dos genes de reparo de DNA na susceptibilidade ou refratariedade para carcinogênese. O objetivo do atual estudo foi analisar as principais alterações nos genes FANCD2 e FANCI utilizando PCR e digestão enzimática e, paralelamente, rastreamento dos éxons dos genes por meio do sequenciamento automático. A casuística foi formada por 137 mulheres com CM hereditário. Foram encontradas oito alterações em 33 indivíduos e cinco variantes exônicas não relatadas, novas. Por meio de análise estatística, houve a correlação entre indivíduos mutados e dados clínicos. Esse estudo foi de grande valia para a detecção de alterações que podem funcionar como estopim para o desenvolvimento do câncer em indivíduos com CM com histórico familiar sem mutações em genes de alta suscetibilidade, como também servir para caracterizar um tipo histológico distinto auxiliando na terapêutica futuraAbstract: Breast Cancer (BC) is the cancer type more commonly occurs among women with estimative of 49.240 new cases in 2010. The BC presents risk factors as: age, social-economic factors, ethnicity, hormone exposure, radiation, diet, physical exercises and familiar history. Besides the risk factors BC has prognosis factors measured in diagnostic. There's, at least, 20 subtypes of BC morphologically different. Corcerning molecular epidemiology, the BC is associated to many genes and in mutations in various genes as BRCA1 e 2, p53, PTEN. The FANCD2/FANCI complex have a key function of co-localize motif of DNA repair to proteins that directly act on homologue recombination as BRCA1 with FANCJ, RAD51, BRCA2/FANCD1 with FANCN. The discovery the BRCA2 is, actually, FANCD1 gene has leaded researchers to the new target in knowledge of natural history of disease.The aim of this study was to analyse alterations in FANCD2 and FANCI genes through PCR followed enzimatic restriction. At same time, was performed the screening of the genes exons. The casuistic was constituted from 137 women with hereditary breast cancer. We encountered eight alterations in 25 individuals and 5 exonic variants not reported. This study was very important with the purpose to detect alterations can be responsible by the cancer evolution in BC patients without mutations in high susceptibility genes and to server to characterize a distinct histological types to future therapeuticDoutoradoCiencias BiomedicasDoutor em Ciências Médica

Padronização de protocolo para avaliação de invasividade de gliomas humanos por RT-qPCR

Orientadora : Profa. Dra. Sheila Maria Brochado WinnischoferMonografia (especialização) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Curso de Especialização em Análises ClínicasInclui referência

Influence of oxidative stress on inducing micturition dysfunction following chronic infravesical obstruction and the protective role of an antioxidant diet - association of in vivo and in vitro studies in rats

OBJECTIVE: This study was developed to determine whether the generation of free radicals, induced by ischemia followed by reperfusion in a model of chronic intravesical obstruction in rats, would lead to damage in the detrusor. It also investigates the possible protective action of the flavonoid galangin on the tissue lesion induced by lipid peroxidation. MATERIALS AND METHODS: Twenty-one male rats were divided into three groups of seven animals each. Group A was subjected to a sham procedure; group B to partial obstruction of the bladder neck; and group C to partial obstruction of the bladder neck, but also received a diet rich in the flavonoid galangin. All the animals were subjected to urodynamic evaluation and then sacrificed. The bladders were sent for enzymatic tests. RESULTS: The urodynamic showed that group B developed significantly greater numbers of involuntary contractions of the detrusor, greater post-micturition residue and lower compliance. The group A presented TEAC levels greater than to the group B. Comparative analysis of group A, B and C demonstrated significantly greater malondialdehyde levels in group B in relation to groups A and C. The group B presented smaller contraction amplitudes than did groups A and C, in electrically stimulated contractions. CONCLUSIONS: That oxidative stress is implicated in the damage to the detrusor musculature following a period of chronic intravesical obstruction. We show, for the first time, that administration of an antioxidant prior to and following the start of chronic obstruction makes it possible to avoid the cellular lesions that cause detrusor dysfunction.Federal University of São Paulo Geriatric Urology ServiceUNIFESP, Geriatric Urology ServiceSciEL