Uso de epigalocatequina-3-galato e genisteína como potenciais indutores epigenéticos da hemoglobina fetal

Mestrado em Tecnologias Clínico-LaboratoriaisIntrodução: As β–hemoglobinopatias são uma das doenças autossómicas recessivas mais comuns em todo o mundo. A indução farmacológica da hemoglobina fetal (HbF) é uma estratégia terapêutica promissora e a hidroxiureia (HU) é um fármaco aprovado pela Agência Europeia do Medicamento para este efeito. No entanto, é necessária a identificação de novos agentes com maior atividade indutora, menor toxicidade celular e custo. Mecanismos como a metilação do DNA e acetilação das histonas podem regular a expressão gênica e os compostos naturais são potentes moduladores epigenéticos. A genisteína (GN), um flavonoide da soja, e a epigalocatequina-3-galato (EGCG), principal polifenol do chá verde, foram associados a efeitos epigenéticos e previamente identificados como potenciais indutores da HbF sem efeitos citotóxicos em células K562. Objetivo: Avaliar a modulação epigenética da EGCG e GN na potencial indução da HbF. Material e Métodos: O RNA total de células da linhagem K562 previamente expostas durante 72 ou 96 horas à GN e EGCG em 3 concentrações (100, 250 e 500 ƞg/mL) e à HU a 25 μg/mL, foi quantificado e convertido a cDNA. Por sua vez, este foi usado para avaliar os seus efeitos transcricionais em moduladores epigenéticos (DNMT1, DNMT3A, DNMT3B e HDAC de classe I) pelo qRT-PCR com primers específicos. Resultados: A EGCG afeta maioritariamente a transcrição da HDAC2 e HDAC8 em ambos os tempos de exposição, enquanto a GN influencia os níveis de expressão génica da metilação às 72 horas (especialmente da DNMT1) e desacetilação nos dois tempos (HDAC1, HDAC3 e HDAC8). A análise transcricional de ambos revela uma dose resposta não monotónica (DRNM). A HU aparenta ter efeitos divergentes, com impacto transcricional na metilação em ambos os tempos de exposição (DNMT3A) e da desacetilação às 96 horas (HDAC1 e HDAC8). Conclusão: Sucintamente, os nossos resultados apoiam a hipótese que a EGCG e a GN podem atuar como moduladores epigenéticos perante o seu potencial indutor da HbF e serem eventualmente, futuros candidatos a novos agentes terapêuticos nas hemoglobinopatias.ABSTRACT - Introduction: β– hemoglobinopathies are one of the most common autossomic recessive diseases in the world. The pharmacologic induction of fetal hemoglobin (HbF) is a promising therapeutic strategy and hydroxyurea (HU) is an approved drug by the European Medicine Agency with this purpose. However, it’s necessary to identify new agents with higher HbF inducing activity, less toxic, and expensive. Mechanisms like DNA methylation and histone acetylation might regulate the genetic expression and natural compounds are powerful epigenetic modulators. Genistein (GN), a soy flavonoid, and Epigallocatechin-3-gallate (EGCG), a major green tea component, were associated with epigenetic effects and previously identified as potential HbF inductors without cytotoxic effects in K562 cells. Objective: Evaluate the epigenetic modulation by EGCG and GN in their potential HbF induction. Material and Methods: Total RNA from cells of the K562 lineage previously exposed for 72 or 96 hours to GN and EGCG in 3 concentrations (100, 250, and 500 ƞg/mL) and to HU at 25 μg/mL was quantified and converted to cDNA. In turn, this one was used to evaluate their transcriptional effects in epigenetic modulators (DNMT1, DNMT3A, DNMT3B e class I HDAC) by qRT-PCR using specific primers. Results: EGCG mostly affects transcription of HDAC2 and HDAC8 at both exposure times, while GN influences the genetic expression levels of methylation at 72 hours (especially DNMT1) and deacetylation at both times (HDAC1, HDAC3, and HDAC8). The transcriptional analysis of both reveals a non-monotonic dose-response (NMDR). HU appears to have divergent effects, with an impact on methylation transcription at both exposure times (DNMT3A) and deacetylation at 96 hours (HDAC1 and HDAC8). Conclusion: Succinctly, our results support the hypothesis that EGCG and GN might act as epigenetic modulators in relation to their potential HbF induction and are might be future candidates as new therapeutic agents in hemoglobinopathies.Projeto financiado pelo Instituto Politécnico de Lisboa para o projeto “Hemofet - Natural compounds potential for reactivation of γ-globin gene expression and fetal hemoglobin induction -– An in vitro approach” , registado como IDI&CAIPL/2019/HemoFet/ESTeSL. O presente trabalho foi desenvolvido no Health & Technology Research Center (H&TRC).N/

Validación de una Técnica Analítica para la Determinación de Catequinas [(-)-Epicatequina, (-)-Epigalocatequina, (-)-Epicatequina galato, (-)-Epigalocatequina galato] por Cromatografía Líquida de Alta Performance (HPLC) En Productos Comerciales de Camellia sinensis “Té Verde”

El presente estudio tuvo como finalidad determinar el contenido de catequinas en productos de Camelia sinensis (té verde) por Cromatografía Liquida de Alta Resolución para ayudar a establecer la calidad de estos productos. Para la evaluación del contenido total de catequinas se utilizaron productos expedidos de diferentes supermercados de la ciudad de Arequipa. Se procedió a la determinación cuantitativa de éstas en 3 lotes de 6 diferentes marcas por Cromatografía Liquida de Alta Resolución (HPLC) previa validación del método analítico para asegurar que los resultados obtenidos sean reproducibles y confiables. Los parámetros evaluados para la validación fueron: selectividad, linealidad, exactitud y precisión. El primer parámetro que se evaluó fue la selectividad en donde no se evidenció interferencia de productos de degradación; la linealidad fue determinada mediante el coeficiente de correlación obteniendo valores de 0,9925 para la Epigalocatequina, 0,9935 para la Epicatequina, 0,9958 para la Epigalocatequina galato y 0,9964 para la Epicatequina galato; indicando una buena correlación entre la concentración y el área; la precisión se determinó por medio de la repetibilidad y la precisión intermedia obteniendo en promedio un CV de 1,43% y 1,34% respectivamente; la exactitud se evaluó mediante la recuperación del analito obteniendo un valor promedio cercano al 100%. Los resultados de estos parámetros de desempeño se encuentran dentro de los criterios de aceptación según la ICH demostrando así que el procedimiento analítico propuesto es selectivo, lineal, exacto y preciso. Luego de validar el método se realizó la determinación del contenido total de catequinas, expresado en mg de catequinas por g de té verde. Se uso una fase móvil en gradiente de buffer acetato de sodio y acetonitrilo a una longitud de onda de 210 nm. Se encontró que el producto A tiene un valor de catequinas totales de 99,274 mg/g como promedio, el producto B presenta el nivel más alto con 148,144 mg/g como promedio seguido por el producto C con 143,482 mg/g. Los 3 lotes del producto D promedian un total de 80,673 mg/g, el producto E tiene como promedio de sus lotes 93,673 mg/g y por último el producto F un valor promedio total de 99,202 mg/g. Estos resultados obtenidos fueron comparados con los hallados por Ji-Qiang Jin et al. y por Jankana B. et al. los cuales obtuvieron cantidades de catequinas totales de 152,9 mg/g para el trabajo realizado en China y valores entre 21,39 y 114,12 mg/g para el trabajo realizado en Tailandia, los cuales van de acorde con los hallados en el presente trabajo para cada una de las 6 marcas. Palabras clave: catequinas, té verde, Cromatografía Liquida de Alta Resolución, validación

Avaliação dos compostos fenólicos e atividade antioxidante in vitro de chás : classificação, modelagem e otimização por técnicas quimiométricas

Orientador : Prof. Dr. Charles Windson Isidoro HaminiukCo-orientador : Prof. Dr. Daniel GranatoSupervisora internacional: Profª. Drª. Trust BetaTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Tecnologia, Programa de Pós-Graduação em Engenharia de Alimentos. Defesa: Curitiba, 23/10/2015Inclui referências : fls. 105-122Resumo: Os chás são as bebidas não alcoólicas mais consumidas no mundo depois da água, e tem ganhado muita atenção por promoverem benefícios a saúde. Entre os efeitos benéficos incluem os efeitos anti-mutagênicos, anti-câncer e anti-apoptótica, neuroprotetivo, hiperglicêmico e anti-hiperglicêmico, antioxidante, antimicrobiano e anti-inflamatório. Estas atividades biológicas estão associadas em parte a atividade antioxidante dos compostos químicos presentes nos chás, especialmente flavonoides e ácidos fenólicos (Capítulo 1). O objetivo deste trabalho foi avaliar os compostos fenólicos e atividade antioxidante in vitro de chás consumidos no Brasil. No Capítulo 2, 51 chás brasileiros de oito diferentes espécies (Camellia sinensis, Peumus boldus, Matricaria recutita, Baccharis trimera, Cymbopogon citratus, Pimpinella anisum, Mentha piperita e Ilex paraguariensis) foram analisados nos termos dos compostos fenólicos, cor e atividade antioxidante in vitro medida por FRAP e DPPH. Os dados foram tratados usando PCA, HCA e LDA. Os resultados de ácido gálico, catequina, epicatequina, procianidina B2, quercitrina e cafeína mostraram uma correlação significativa (p 0,80). Uma otimização simultânea foi realizada usando a função de desejabilidade e a condição ótima para maximizar a extração de epicatequina, epigalocatequina galato, epicatequina galato, assim com a atividade antioxidante (DPPH e FRAP) foi sugerida. Portanto, no Capítulo 3 os resultados mostraram que o chá branco foi o melhor para obter o maior teor de antioxidantes, desta forma o Capítulo 4 foi destinado a otimizar a extração dos compostos antioxidantes deste (chá branco) por um planejamento Box-Behnker e os compostos foram identificados por LC-DAD-MS/MS. Todos os modelos propostos foram capazes de explicar mais de 85% da variação dos dados e a simultânea otimização realizada usando DPPH, ABTS, FRAP, (-)-epigalocatequina galato e (-)-epicatequina sugeriu o tempo de 10 min, a temperatura de 66 °C e a solução de 30% etanol como o ponto ótimo de extração. Os principais compostos identificados por espectroscopia de massa foram o ácido gálico, ácido 5-galoilquínico, cafeína, teobromina, galocatequina, epigalocatequina, epicatequina, epigalocatequina galato, e epicatequina galato. Portanto, este estudo mostrou que diferentes determinações analíticas associadas às ferramentas quimiométricas podem ser usadas para explorar e classificar as amostras, e podem ser usadas para processos de extração de compostos bioativos de plantas. Palavras-Chaves: análise multivariada, superfície de resposta, flavonoides, cromatografia líquida de alta eficiência.Abstract: Tea is the second most consumed beverage aside from water, and has gained much attention due to its health-promoting benefits. Among the benefit effects include antimutagenic, anticancer and anti apoptotic, neuroprotective, hypoglycemic and antihyperglycemic, antioxidant, antimicrobial, and anti inflammatory. These biological activities are associated in part to the antioxidant activity of chemical compounds present in teas, especially flavonoids and phenolic compounds (Chapter 1). The aim of this study was to evaluate the phenolic compounds and in vitro antioxidant activity of teas consumed in Brazil. In the Chapter 2, 51 Brazilian teas of eight different species (Camellia sinensis, Peumus boldus, Matricaria recutita, Baccharis trimera, Cymbopogon citratus, Pimpinella anisum, Mentha piperita and Ilex paraguariensis) were analyzed in terms of the phenolic compounds, color, and in vitro antioxidant activity using FRAP and DPPH. The dataset was analyzed using PCA, HCA, and LDA. Gallic acid, catechin, epicatechin, procyanidin B2, quercetrin, and caffeine displayed a significant correlation (p 0.80). A simultaneous optimization was performed using the desirability function and optimum point to maximize the extraction of epicatechin, epigallocatechin gallate, epicatechin gallate, as well as the antioxidant activity (DPPH and FRAP) was suggested. Therefore, in the Chapter 3 the results showed up that white tea was the best solution for obtaining the higher content of antioxidant compounds, then the Chapter 4 was destined to optimize the extraction of antioxidant compounds from white tea by Box-Behnken design and the compounds were identified by LC-DAD-MS/MS. All mathematical models proposed were able to explain up more that 85% of data variation and the optimization performed using DPPH, ABTS, FRAP, (-)-epigallocatechin gallate, and (-)-epicatechin gallate suggested the time of 10 min, temperature of 66 °C and the 30% ethanol solution as optimum point. The principal compounds identified in the optimum point by mass spectrometry were gallic acid, 5-galloylquinic acid, caffeine, theobromine, gallocatechin, epigallocatechin, epicatechin, epigallocatechin gallate, and epicatechin gallate. Nevertheless, this study showed that different analytical determination associated chemometrics tools can be used to explore and classify the samples, thus it can be used for extraction processes of bioactive compounds of plant samples. Keywords: multivariate analysis, response surface methodology, flavonoids, high liquid performance chromatography

Estudio de melatonina y galato de epigalocatequina frente a las degeneraciones retinianas

Retinosis Pigmentaria (RP) es el término utilizado para designar un conjunto de alteraciones hereditarias y neurodegenerativas de la retina, caracterizadas por una afectación global de las capas celulares retinianas que desemboca en una desorganización y remodelación de las mismas, causando afectación visual y pudiendo finalizar en ceguera total en los pacientes que la sufren. Independientemente de la causa primaria, el incremento de estrés oxidativo que se produce en la retina potencia la progresión de la enfermedad y favorece los procesos de inflamación y apoptosis, dañando macromoléculas como ADN, proteínas y lípidos. Además, se han observado niveles elevados de estrés oxidativo en la retina, humor acuoso y plasma en pacientes y modelos animales de la enfermedad. Asimismo, este estrés oxidativo no sólo afecta a nivel ocular, sino que también se ha demostrado una alteración del estado oxidativo hepático en el modelo animal de RP, la rata P23H.Melatonina (MT) y galato de epigalocatequina (EGCG) son dos moléculas naturales con propiedades antiinflamatorias, antiapoptóticas, neuroprotectoras y antioxidantes, que se han demostrado útiles como tratamiento en otras enfermedades oculares como degeneración macular asociada a la edad, glaucoma y retinopatía diabética, en las cuales el estrés oxidativo también tiene un papel clave en la progresión de las mismas.Las ratas P23H de la línea 1 se cruzaron con ratas Long Evans (LE) pigmentadas normales para producir descendencia P23HxLE, de modo que exhibieran las condiciones clínicas de RP. Como grupo de referencia, las ratas Sprague Dawley (SD) también se cruzaron con ratas LE para producir animales pigmentados SDxLE.Las ratas P23H evaluadas hasta los 180 días mostraron, no sólo una pérdida de la función visual, sino una desincronización de ritmos circadianos y una afectación del estado hepático oxidativo respecto a ratas sanas. Los ritmos circadianos no experimentaron grandes cambios debido, probablemente, a una buena preservación de las células ganglionares retinianas intrínsicamente fotosensibles hasta estadíos avanzados de la enfermedad.La administración de melatonina y galato de epigalocatequina, a una concentración de 10 mg/kg/día, tanto de forma individual como de forma conjunta, a ratas P23H heterocigotas pigmentadas durante 6 meses supuso una mejora en los parámetros de función visual analizados (agudeza visual, sensibilidad al contraste y registros electrorretinográficos), siendo el EGCG y la combinación con MT los mejores tratamientos a la hora de detener la progresión de la enfermedad. Éstos también mejoraron significativamente los mismos parámetros en ratas sanas, indicando un posible efecto beneficioso en los daños producidos como consecuencia de la edad. A nivel de ritmos circadianos, analizados mediante telemetría, se detectó un mayor índice de desincronización entre los animales afectos por RP y los animales de referencia, que se redujo únicamente con el tratamiento con MT. En cuanto a los parámetros bioquímicos analizados, las ratas P23H presentaron mayores niveles de estrés oxidativo y menor capacidad antioxidante comparados con las ratas de referencia. MT, de forma individual y conjuntamente a EGCG demostró ser capaz de reducir los niveles de marcadores oxidativos, mientras que el EGCG individualmente produjo menores mejorías. En el caso de los parámetros antioxidantes, MT incrementó los niveles globales antioxidantes y la actividad de las enzimas CAT y SOD, mientras que su combinación con EGCG produjo cambios menores. La administración de antioxidantes a las ratas de referencia disminuyó los niveles antioxidantes totales e incrementó algunos parámetros oxidativos respecto a aquellas con vehículo.Podemos concluir que el tratamiento con MT y/o EGCG mejora la función visual, sincronización circadiana y/o estrés oxidativo hepático en las ratas P23H, modelo de RP, además de tener efectos sobre los animales de referencia.Sin embargo, son necesarios más estudios para determinar, en los animales P23H, por qué el EGCG tiene mayor beneficio a nivel visual siendo MT la que tiene mayor beneficio a nivel circadiano y bioquímico; y también determinar, en los animales de referencia, el efecto real que produce la administración de sustancias antioxidantes sobre organismos sanos.<br /

Influencia de estrés frío en combinación con compuestos polifenólicos en la sobrevivencia y expresión de ciertos factores de virulencia de tres patotipos de Escherichia coli (EHEC, ETEC y EPEC).

El control de especies patógenas de Escherichia coli, representa un desafío ya que son responsables de infecciones entéricas relacionadas con el consumo de alimentos contaminados. El uso de compuestos naturales aunado al proceso de enfriamiento como un proceso regular de conservación ha dado nuevas esperanzas para lograr un control más adecuado de estos microorganismos, en donde algunos compuestos polifenólicos (CP) han mostrado ser efectivos, sin embargo, poco se sabe sobre la eficacia de éstos en combinación con temperaturas bajas contra cepas patógenas de E. coli. Es por lo anterior que la presente investigación se enfocó en determinar el efecto de cuatro compuestos polifenólicos: ácido tánico, ácido gálico, metil galato y galato de epigalocatequina, sobre tres patotipos de E. coli: E. coli enterohemorrágica, E. coli enterotoxigénica y E. coli enteropatógena, bajo condiciones de estrés frío evaluando la integridad de membrana, movilidad “swarming”, capacidad de formación de biopelícula, así como la expresión de genes asociados a proteínas de choque frío y a dichos factores de virulencia. Se utilizaron concentraciones sub-inhibitorias de los CP (2.6 mg/ml de ácido tánico, 3.2 mg/ml de ácido gálico, 0.8 mg/ml de metil galato y 1.0 mg/ml de galato de epigalocatequina) para los tres patotipos de E. coli. Después del estrés frío (10°C durante 4 h) y el tratamiento con ácido tánico se obtuvo el mayor porcentaje de mortalidad (50- 90%) en los tres patotipos analizados, ácido gálico fue el CP que inhibió (100%) la movilidad de EHEC y ETEC. La mayor reducción de índice de formación de biopelícula (IFB) para ETEC y EPEC después de exponerse a 10°C fue con metil galato (0.35 y 0.28, respectivamente), mientras que para EHEC fue con galato de epigalocatequina (0.40). Además, se observó que la expresión de genes que codifican para proteínas de choque frío (A y B), en su mayoría se reprimió después de incubar las cepas a 10 °C y ser tratadas con los CP. De la misma manera ocurrió con la expresión de los genes csgA y csgD, después del estrés a 10°C y del tratamiento con la mayoría de los CP, sin embargo, no fue el caso en la expresión de los genes fliA, flhC y flhD donde la expresión se aumentó después del tratamiento con ciertos CP. Por lo tanto, los CP afectan el crecimiento y factores de virulencia después del estrés frío (10°C) por lo que pueden ser usados como conservadores de alimentos

O impacto dos alimentos e das bebidas na saúde oral dos adultos: revisão da literatura

Objetivos A alimentação tem um papel fundamental na satisfação das necessidades biológicas e energé-ticas inerentes ao bom funcionamento do organismo que reflete no estado da cavidade oral. Para qualquer indivíduo, ter uma alimentação saudável não é apenas ter acesso aos alimentos e bebidas, mas também é necessário saber selecioná-los de forma a adaptá-los às diferentes necessidades no percurso das diversas fases da vida. Assim, os objetivos deste trabalho foram analisar as patologias orais que tiveram como principal fator de causa a ingestão de determi-nados alimentos e bebidas e verificar a sua influência na cavidade oral. Metodologia Realizou-se uma revisão de literatura científica, tendo por base o recurso a duas bases de pesquisa, nomeadamente a PubMed e a b-on, tendo-se utilizado as seguintes palavras-chave: “Food”, “Be-verages”, “Oral Health” e “Adults”. Do cruzamento das respectivas palavras-chaves resulta-ram 3546 artigos, dos quais 38 foram selecionados, de acordo com critérios de inclusão e de exclusão previamente definidos. Descrição As carências e manifestações nutricionais afetam as estruturas e a cavidade oral. Os micronu-trientes, de forma isolada ou em associação podem influenciar o estado periodontal e a saúde da mucosa oral. A frequência, sequência e o tempo em que os alimentos ingeridos permanecem na superfície dos dentes a interagir com as enzimas da saliva, podem alterar o pH e a saúde oral. Assim, para analisar o potencial erosivo de uma bebida, deve-se considerar além do pH, a acidez titu-lável e o conteúdo de cálcio e fosfato de sua composição. O chá verde, através da catequina epigalocatequina-3-galato mostrou-se efetivo no controlo de cáries ao reduzir a actividade enzimática da alfa-amilase no processo de formação de hi-dratos de carbono e em alguns estudos mostrou ação antimicrobiana contra alguns grupos de bactérias periodontais.Objectives Foods and beverages play an important role in satisfying biological and energy needs inherent in a well-functioning body, which can be reflected in the state of the oral cavity. For any in-dividual, having a healthy die is not just the access to food and beverages, but it is also neces-sary the ability to select and adapt them to different needs throughout the lifecycle. Therefore, study objectives were to analyze oral pathologies that had as their main factor the consumption of certain foods and beverages and to verify their influence in the oral cavity. Methodology A review of the scientific literature of made, using two search bases, namely PubMed and b-on, through the use of the following keywords: “Food”, “Beverages”, “Oral Health” AND “Adults”. From this crossover there were found 3546 articles from which 38 were then select-ed according to previous inclusion and exclusion criteria. Description Nutritional deficiencies and manifestations affect structures and oral cavity. Micronutrients, alone or in combination may influence the periodontal status and health of the oral mucosa. The frequency, sequence and time that food consumed stay in the surface of the teeth to inter-act with the enzymes of the saliva can alter the pH and the oral health. As well as analyzing the erosive potential of a beverage, the titratable acidity and the calcium and phosphate con-tent of its composition should be considered besides the pH. Green tea, through epigallocatechin-3-gallate catechin has been shown to be effective in con-trolling caries by reducing the activity of the alpha-amylase enzyme in the carbohydrate for-mation process and, in some studies showed antimicrobial action against some groups of peri-odontal bacteria. Throughout this work it was possible to analyze oral pathologies that had as main cause factor the consumption of certain foods or beverages in order to demonstrate the influence that the nutrients have on the oral cavity and adjacent structures

Interações de proteínas salivares epolifenóis

Orientadora : Profª Drª Elaine Machado BenelliDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Ciências : Bioquímica. Defesa: Curitiba, 28/03/2016Inclui referências : f. 50-66Resumo: A saliva é um fluído produzido pelas glândulas salivares maiores, menores, fluídos gengivais e nasais, composta por proteínas e glicoproteínas. As proteínas salivares adsorvem-se a superfície da hidroxiapatita logo após a higiene bucal, formando a película dental adquirida do esmalte. A sua função é proteger o esmalte contra desmineralização e permitir a adsorção de bactérias originando o biofilme dental. Os microrganismos que compõe o biofilme dental permanecem em equilíbrio em condições compatível com a saúde. Entretanto, mudanças no comportamento do hospedeiro, alteram o equilíbrio do biofilme favorecendo o aparecimento da cárie e doença periodontal. Os polifenóis podem interagir com proteínas salivares e alterar sua conformação, modificando estrutura e função da película dental adquirida do esmalte. O objetivo deste trabalho foi verificar as interações dos polifenóis resveratrol, epigalocatequina-galato, epigalocatequina e ácido gálico com saliva total. O pool de saliva estimulada coletado foi diluído e concentrações crescentes de cada um dos polifenois foram adicionados. Em seguida, o espectro emissão de fluorescência de 300 a 500 nm das amostras com excitação em 282 nm foram obtidos. Os resultados mostraram que com o aumento da concentração dos polifenois ocorreu diminuição da emissão de fluorescência do triptofano em 350 nm. Esta redução foi maior para epigalocatequina-galato, seguido do resveratrol e epigalocatequina. Ácido gálico não interagiu com as proteínas salivares nas condições testadas. A epigalocatequina-galato interage com as proteínas salivares por mecanismos dinâmicos e estáticos, enquanto que os demais polifenois interagem por mecanismo dinâmico ou colisional. Além disso, todos os polifenois foram capazes de reduzir a atividade da amilase salivar. Entretanto, as interações dos polifenois e as proteínas da saliva total só foi observada em concentrações superiores as obtidas através da dieta. Assim, este estudo sugere que provavelmente in vivo estes polifenois não seriam capazes de afetar a estrutura e atividade dos complexos de proteínas salivares e manteriam a homeostase do organismo. Palavras chaves: Polifenois, Saliva, Proteínas e Peptídios salivaresAbstract: Saliva is a fluid produced by the salivary major and minor glands, gingival and nasal fluids, composed of proteins and glycoproteins. The salivary proteins adsorb to the hydroxyapatite surface after oral hygiene, forming a dental film called the enamel acquired pellicle. Its function is to protect against the enamel demineralization and allow adsorption of bacteria forming the dental biofilm. Microorganisms in the biofilm remain in equilibrium under conditions compatible with health, however, changes in host behavior, alter the balance of the biofilm leading to caries and periodontal disease. The polyphenols can interact with salivary proteins and change their conformation by modifying the structure and function of dental enamel film acquired accordingly. The aim of this study was to study the interactions of polyphenol resveratrol, epigallocatechin gallate, epigallocatechin and gallic acid with total saliva. The stimulated saliva was collected and the pool was diluted and increasing concentrations of each polyphenol were added. Following, emission spectrums of the fluorescence of the total saliva (300 to 500 nm) with excitation at 282 nm were obtained. The results showed that with the increase of the polyphenols occurred a decreased tryptophan fluorescence emission at 350nm. This reduction was major for epigallocatechin-gallate, followed by resveratrol and epigallocatechin. Gallic acid did no interacted to total saliva protein at this experimental condition. The epigallocatechin-gallate interacts with salivary proteins by dynamic and static mechanisms, while other polyphenols interact by dynamic mechanism or collisional. Moreover, all polyphenols were able to reduce the activity of salivary ?-amilase. However, the polyphenols interactions with the total of salivary protein were observed at concentration higher than those obtained by the diet. Thus, this study suggests that probably in vivo these polyphenols are not able to alter the structure and activity of the salivary protein complex and it would keep the organism homeostasis. Key words: Polyphenols, Saliva, Proteins and Peptides salivar