Separación de proteínas de suero de leche por cromatografía líquida

This paper describes and compares three chromatographic methods for the analysis and quantification of most abundant proteins in cheese whey, α-lactalbumin and β-lactoglobulin. The methods were: Reverse-phase high performance liquid chromatography, anion Exchange chromatography and size-exclusion chromatography. The reverse- phase liquid chromatography led to a better separation of whey proteins than size-exclusion chromatography and anion exchange chromatography, this method offered an excellent separation for whey proteins and presented a short time of analysis (33 min).Este artículo describe y compara tres métodos cromatográficos para el análisis y la cuantificación de las proteínas más abundantes en el suero de queso, α-lactoglobulina y β-lactoalbúmina. Los métodos fueron los siguientes: cromatografía líquida de alta eficacia en fase reversa, cromatografía de intercambio aniónico y cromatografía de exclusión molecular. La cromatografía líquida en fase reversa condujo a una mejor separación de las proteínas de suero de leche que la cromatografía de exclusión molecular y la cromatografía de intercambio aniónico, este método ofrece una excelente separación de las proteínas de suero de leche, y presentó un breve tiempo de análisis (33 min)

Identificación de Qumiotipos Cineol, Carvona por Cromatografía de capa fina, con determinación del rendimiento porcentual del aceite esencial de Planta Juanilama (Lippia alba) obtenidas en Estelí y Rivas, Nicaragua, en el período de Abril a Diciembre, 2013

La utilización de las plantas aromáticas en la medicina natural tiene sus orígenes en lo más remoto de la historia. Nicaragua posee una amplia variedad de hierbas aromáticas entre ellas: Juanilama. La Juanilama pertenece a la familia Verbenácea es un arbusto aromático de 1 a 2 metros de alto, la cual crece en laderas, orillas de camino y riveras de los ríos. Los Aceites esenciales que posee la juanilama son compuestos odoríferos naturales, los cuales contienen una variedad de quimiotipos que varían en dependencia de los factores geográficos. Entre ellos se encuentran: Cineol y Carvona, ambos pertenecen al grupo de monoterpenoides y se les atribuye las propiedades farmacológicasantimicrobiana y expectorante. La Mayor cantidad de Aceite esencial de dicha planta está presente en las hojas.Para su adecuada extracción se utilizó el método de Hidrodestilación a través del equipo Clevenger y así poder determinar el rendimiento porcentual que posee la planta Juanilama. Para la identificación de los quimiotipos Cineol y Carvona se realizó la aplicación del método cualitativo de Cromatografía de Capa fina. Las plantas Juanilama de las regiones de Rivas y Estelí en Nicaragua presentan variabilidad en el contenido de su Rendimiento porcentual. Además en su composición química contiene los quimiotipos Cineol y Carvon

Validación de la Técnica Analítica para la cuantificación de Gabapentina Cápsula de 300 mg. por Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR), realizado en el Laboratorio CEGUEL S. A; Enero-Noviembre 2014

Gabapentina con nombre químico ácido 1- (aminometil) ciclohexanoacético, es un medicamento antiepiléptico. Posee acciones farmacológicas contra el dolor neuropático, neuralgia postherpética, prevención de migrañas, nistagmo y trastorno bipolar; siendo un principio activo demandado en Hospitales y Centros de Salud. El presente estudio se llevó a cabo en el Laboratorio CEGUEL S.A, con la finalidad de validar la Técnica Analítica por Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR) para la cuantificación de gabapentina, en el preparado farmacéutico cápsula, reportado en la Farmacopea de los Estados Unidos (USP 36, 2013), introduciendo cambios significativos según la metodología interna del laboratorio. Se utilizó un cromatógrafo de líquidos Agilent, modelo 1100 Series con inyector manual, con detector de arreglo de diodo a una longitud de onda fija de 210 nm, trabajando en el rango de concentraciones de 80 % a 120 %, utilizando como fase móvil solución amortiguadora de fosfato monobásico de amonio pH 2.5:Metanol (65:35 v/v) y diluyente HCl 0.06 N. La técnica validada se le determino los Parámetros de Desempeño, Especificidad, Linealidad, Precisión, Exactitud, Robustez, Selectividad, Estabilidad y Disolución, para cumplir con los requisitos de los Reglamentos Técnicos Centroamericanos Armonizados (RTCA 11.03.39:06); “Productos farmacéuticos. Validación de métodos analíticos para la evaluación de la calidad de los medicamentos”, (RTCA 11.03.47:07) “Productos farmacéuticos. Medicamentos para uso humano. Verificación de la calidad” y RTCA (11.01.04:05) “Productos farmacéuticos. Estudios de estabilidad de medicamentos para uso humano”; siendo una prioridad antes de ser aprobados para ser comercializado

La chromatographie liquide. Application de TLC à la séparation de colorants

Se describen las principales modalidades de cromatografía líquida, siguiendo tres clasificaciones distintas: según la fase estacionaria, según los fenómenos que intervienen en la separación y según el método de operativo. Se estudia con más detalle la cromatografía en capa fina (TLC) por tratarse de una técnica muy simple, tanto desde el punto de vista de procedimiento experimental como del equipo y material requerido. Se aplica la cromatografía en capa fina (TLC) a la separación de los diversos colorantes contenidos en 6 tintes comerciales con eluyentes específicos de los diversos grupos tintóreos. Los resultados obtenidos indican que la mayoría de los tintes estudiados están compuestos por mezclas de 3-5 colorantes, principalmente de tipo disperso. Esta técnica cromatográfica es una herramienta útil desde el punto de vista cualitativo. También permite, en algunos casos concretos, seleccionar el eluyente más adecuado para un posterior análisis cuantitativo por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).The main types of liquid chromatography are described, following three different classifications: according to the stationary phase, according to the phenomena which occur in the separation and according to the operative method. The thin layer chromatography (TLC) is studied in more detail since it is a very simple technique from the point of view of experimental procedure as also from the equipment and material required. The thin layer chromatography (TLC) is applied to the separation of the diverse dyes contained in 6 commercial tints and to the identification of the dyeing group of the dyes. The results obtained indicate that most of the studied tints are constituted by 3-5 dyes, mainly of disperse type. This chromatographic technique is a useful tool from the qualitative point of view. In some cases, it also allows to select the most appropriate eluent for a later quantitative analysis using high resolution liquid chromatography (HPLC).Les principales modalités de chromatographie en phase liquide sont décrites, en suivant trois classifications différentes: d'après la phase stationnaire, d'après les phénomènes qui interviennent dans la séparation et d'après la méthode d'opération. La chromatographie sur couche mince (TLC) est étudiée avec plus de détail, car il s’agit d’une technique très simple, tant du point de vue de procédure expérimentale comme de l'outillage employé. La chromatographie sur couche mince (TLC) est appliquée à la séparation de divers colorants contenus dans 6 teintes commerciales et à l'identification du groupe de teinture de ces colorants. Les résultats obtenus indiquent que la plupart des teintes étudiées sont composées par 3-5 colorants, principalement de type dispersé. Cette technique chromatographique est très utile du point de vue qualitatif. Aussi, dans quelques cas concrets, elle permet de sélectionner l'éluent le plus approprié pour une analyse quantitative postérieure par chromatographie liquide à haute résolution (HPLC)

Validación de la técnica analítica para cuantificación de carboximetilcisteína solución oral 50mg/ml por cromatografía Líquida de alta resolución (CLAR), laboratorios Solka S.A; Enero-Marzo 2016

Carboximetilcisteína con nombre químico (2R)-2-amino-3-[(carboximetil) sulfanil] ácido propanóico, es un medicamento mucolítico y mucoregulador con efecto fluidificante, indicado como coadyuvante en el tratamiento de desórdenes agudos y crónicos del tracto respiratorio alto y bajo, en la prevención de cuadros agudos asociados a bronquitis obstructiva crónica. El presente trabajo se llevó acabo en Laboratorios SOLKA S.A, con el objetivo de validar la técnica analítica por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) para la cuantificación de carboximetilcisteína, partiendo de trabajos anteriores ya que no existe una metodología de análisis para producto terminado de carboximetilcisteína en las Farmacopeas de referencia, ajustando las condiciones cromatográficas de trabajo. Se utiliza un Cromatógrafo de líquidos marca YLClarity, modelo 9100 con Número de serie 9110, con inyector manual, con detector de arreglo de diodos a longitud de onda fija de 210 nm, trabajando en el rango de concentraciones 80% a 120%, utilizando como fase móvil Dihidrógeno fósfato monobásico de sodio 0.02M y metanol (95:5). Para la validación de la técnica se evalúan los parámetros estadísticos de desempeño, aptitud del sistema, linealidad, precisión, exactitud, robustez, especificidad, para cumplir con los requisitos del Reglamento Técnico Centroamericano Armonizado (RTCA 11.03.39:06), “Productos farmacéuticos. Validación de Métodos Analíticos para la evaluación de la Calidad de los Medicamentos”. La técnica analítica demuestra ser lineal, precisa y exacta, obteniéndose resultados para r2= 0.9999, con un coeficiente de variación < 2% y con porcentajes de recuperación de 99.94%, por lo tanto, puede emplearse como método de rutina en el control de calidad del medicamento

Determinación de compuestos del aceite de oliva virgen relacionados con enfermedades cancerígenas y neurodegenerativas

El aceite de oliva virgen (AOV) es el zumo extraído del fruto del olivo, uno de los alimentos más populares y recomendados en el marco de una dieta saludable. La actividad biológica y sus propiedades antioxidantes desempeñan un papel importante en la prevención de la oxidación continua, proceso importante en el desarrollo de distintas enfermedades. En este trabajo se ha planteado evaluar las distintas técnicas analíticas empleadas para la determinación de los compuestos del AOV relacionados con enfermedades, tanto neurodegenerativas como cancerígenas. Las enfermedades neurodegenerativas se caracterizan por un aumento del estrés oxidativo, siendo minimizado por la presencia de fenoles y ácidos grasos, cuya determinación se lleva a cabo por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y cromatografía de gases (GC), respectivamente. Por otra parte, en el AOV podemos encontrar clorofilas, carotenoides, tocoferoles y compuestos triterpénicos cuya determinación se realiza mediante HPLC, entre los que predomina su actividad frente a las enfermedades cancerígenas. Además, el AOV puede sufrir un deterioro o una contaminación debido a la presencia de trazas metálicas o plaguicidas, cuya detección se realiza mediante técnicas atómicas y GC, respectivamente. Asimismo, puede soportar grandes cambios químicos o físicos debido a un mal almacenamiento o por calentamiento mediante la fritura, que da lugar a la aparición de la acroleína y los compuestos polares. También podría darse la presencia de hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAPs) por contaminación ambiental. El método de determinación de la acroleína se basa en una cromatografía líquida con detección electroquímica pulsada. Mediante la GC se pueden evaluar los distintos compuestos polares contenidos en la muestra de AOV, mientras que los HAPs se determinan en HPLC sobre fase inversa con detector de fluorescencia (HPLC-FLD), pudiendo originar una notable repercusión en la salud de los seres humanos.Universidad de Sevilla. Grado en Farmaci

Biochemical characterization of the enzyme a-galactosidase from Saccharomyces cerevisiae and its mutant R412L

Traballo fin de mestrado (UDC.CIE). Biotecnoloxía avanzada. Curso 2012/201

Validación de dos técnicas analíticas para la cuantificación de metronidazol base en tableta e inyectable por Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR) y espectrofotometría (UV/VIS) realizado en el laboratorio nacional de control de calidad de medicamentos (MINSA), agosto 2011-Julio 2013

Metronidazol (MTZ) con nombre químico 2-(2-metil-5-nitro-1H-imidazol-1-il) etanol, es un medicamento frecuentemente usado para el tratamiento de infecciones producidas por Trichomonas vaginalis, además de ser útil en algunas infecciones parasitarias es un antibiótico con gran actividad bactericida frente a un gran número de bacterias anaerobias y algunas microaerófilas, tiendo propiedades farmacológicas como antibacteriano, antiprotozoario y antihelmíntico. El presente estudio se llevó a cabo en el Laboratorio Nacional de Control de Calidad de Medicamentos del Ministerio de Salud de Nicaragua (LNCCM-MINSA), con la finalidad de validar dos técnicas analíticas como son Cromatografía de Líquidos de Alta Resolución (CLAR) y Espectrofotometría ultravioleta visible (UV/Vis) para la cuantificación de metronidazol base, en los preparados farmacéuticos tableta e inyectable, reportado en la Farmacopea de los Estados Unidos (USP 34, 2011). Se utilizó un cromatógrafo de líquidos Agilent modelo 1260 con inyector automático, y un espectrofotómetro ultravioleta Agilent modelo 8453, ambos con detectores de arreglo de diodo a una longitud de onda fija de 320 nm, trabajando en el rango de concentraciones de 15.46 a 49.47 μg/mL, utilizando como fase móvil y diluyente Agua:Metanol (60:40 v/v) para ambas técnicas. Las técnicas validadas se le determinaron los parámetros de desempeño, especificidad, linealidad, exactitud y precisión. La curva de calibración para cada técnica, demostraron ser lineales r2 = 0.9995 (CLAR), r2 = 0.9990 (UV/Vis). Se obtuvo porcentaje de recuperación en tableta de 104.351 % (CLAR) y 103.441 % (UV/Vis), y para inyectable 102.532 % (CLAR) y 105.783 % (UV/Vis). En los estudios de la repetibilidad y precisión intermedia los coeficientes de variación fueron menores al 2%. Ambas técnicas resultaron ser específicos, lineales, precisos y exactos, por lo tanto pueden usarse para la rutina de control de calidad en productos farmacéuticos. Palabras claves: Metronidazol, Cromatografía de Liquidos de Alta Resolución, Espectrofotometria UV y Validación

Documentación de la técnica de cromatografía de gases en el análisis de hidrocarburos alifáticos en aguas residuales

En el presente documento se compilan los aportes bibliográficos en el estudio de la técnica de cromatografía de gases aplicada al análisis de hidrocarburos alifáticos en aguas residuales. Además se hace énfasis en las distintas técnicas de extracción de hidrocarburos alifáticos de aguas residuales, principalmente extracción en fase sólida. También se exponen algunas investigaciones en cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas. Se muestran otras tendencias en cuanto al proceso de extracción previo de los hidrocarburos alifáticos en muestras de agua como lo son la extracción asistida por microondas, microextracción en fase sólida, extracción asistida por ultrasonido, extracción mediante barra de agitación (stir bar), y la técnica headspace. Se indican informes a nivel internacional y nacional sobre el efecto de la contaminación de agua con hidrocarburos alifáticos. Así mismo se trata sobre los problemas generados a los organismos vivos, y los riesgos que ellos conllevan. También se muestran los conceptos estadísticos de precisión, exactitud, linealidad, límite de detección, límite de cuantificación y sensibilidad, que se requieren cuando se desea estandarizar o validar una técnica cromatográfica

Desarrollo de la técnica de cromatografía de gases (GC-FID) para la determinación de contaminantes emergentes tipo productos farmacéuticos

Algunos productos farmacéuticos y de higiene personal están siendo considerados como contaminantes emergentes debido a su liberación continua en el medio ambiente acuático, su persistencia y el aumento de evidencias de los efectos ecotoxicológicos (Cunningham et al., 2006). Una de las características de este grupo de contaminantes es que no necesitan ser persistentes en el medio ambiente para causar efectos negativos, ya que si bien existen sistemas que los remueven o bien se transforman fácilmente en subcompuestos, su continuo consumo y, por ende, su consiguiente excreción, deriva en su continua introducción y constante presencia en el medio ambiente (Barceló, 2003). Las actividades antrópicas en ecosistemas naturales se generan a través de los vertimientos de aguas en el medio ambiente gracias a las actividades de cuidado de salud, de lo que resulta interesante abordar el tema de los contaminantes emergentes respecto a fármacos dado que el uso y venta de estos no es medido ni necesariamente adquirido a través de recetas médicas incrementando la liberación y acumulación en el ambiente. Además en muchos casos, las consecuencias de su presencia en el medio ambiente no están aún claras, pero en otros el riesgo parece evidente, y alarmante. Así, por ejemplo, el diclofenaco, aparte de afectar a los riñones en los mamíferos, se ha asociado (como consecuencia de su uso en veterinaria) con la desaparición de los buitres blancos en la India y Pakistán (Dalterio, 2014)