Circovirosi porcina, patogènesi i estudis ultraestructurals

El treball desenvolupat en aquesta tesi doctoral suposa un pas important en la lluita contra la circovirosi porcina. Aquesta malaltia, provocada essencialment pel circovirus porcí tipus 2 (PCV2), provoca el retardament en el creixement i la mort durant els primers mesos de vida del porc. Aquesta innnovadora recerca consitueix el primer estudi morfogenètic del PCV2 en cultius cel·lulars, aporta descripcions ultraestructurals dels teixits afectats i desvetlla la relació de la malaltia amb les mitocòndries.El trabajo desarrollado en esta tesis doctoral supone un paso importanteen la lucha contra la circovirosis porcina. Esta enfermedad, provocada esencialmente por el circovirus porcino tipo 2 (PCV2), provoca el retraso en el crecimiento y la muerte durante los primeros meses de vida del cerdo. Esta innovadora investigación constituye el primer estudio morfogenético del PCV2 en cultivos celulares, aporta descripcion ultraestructurales de los tejidos afectados y desvela la relación de la enfermedad con las mitocondriasThis PhD thesis is an important step in the fight against post-weaningmulti systemic wasting syndrome. The disease, in which the porcine circovirus type 2 (PCV2) is the causative agent, produces growth delayand death during the first months of life of the piglet. This innovativere search is the first morphogenetic study of PCV2 in cell cultures and provides ultrastructural descriptions of the affected tissues and revealsthe relationship of the disease with mitochondries

Differential interactions of virulent and non-virulent H. parasuis strains with naïve or swine influenza virus pre-infected dendritic cells

Pigs possess a microbiota in the upper respiratory tract that includes Haemophilus parasuis. Pigs are also considered the reservoir of influenza viruses and infection with this virus commonly results in increased impact of bacterial infections, including those by H. parasuis. However, the mechanisms involved in host innate responses towards H. parasuis and their implications in a co-infection with influenza virus are unknown. Therefore, the ability of a non-virulent H. parasuis serovar 3 (SW114) and a virulent serovar 5 (Nagasaki) strains to interact with porcine bone marrow dendritic cells (poBMDC) and their modulation in a co-infection with swine influenza virus (SwIV) H3N2 was examined. At 1 hour post infection (hpi), SW114 interaction with poBMDC was higher than that of Nagasaki, while at 8 hpi both strains showed similar levels of interaction. The co-infection with H3N2 SwIV and either SW114 or Nagasaki induced higher levels of IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-12 and IL-10 compared to mock or H3N2 SwIV infection alone. Moreover, IL-12 and IFN-α secretion differentially increased in cells co-infected with H3N2 SwIV and Nagasaki. These results pave the way for understanding the differences in the interaction of non-virulent and virulent strains of H. parasuis with the swine immune system and their modulation in a viral co-infection

Incidence of lesions in pigs at slaughterhouse in Venezuela (I): Lungs and heart's lesions

Se estudiaron quinientos grupos de vísceras torácicas de 27 granjas ubicadas en diferentes zonas de Venezuela, provenientes de cerdos faenados en una planta beneficiadora del estado Aragua, en el año 1995. Los animales fueron seleccionados al azar, y las vísceras provenían de cerdos de engorde. Los órganos evaluados fueron pulmones y corazón. El estudio de las lesiones macroscópicas observadas fueron evaluadas de acuerdo a diferentes métodos referidos en la literatura; y los métodos seleccionados para el estudio microscópico de los órganos fueron las descritas por Dungworth, Robinson y Grant. La frecuencia de lesiones en los órganos inspeccionados fue: pulmones 95,6% y corazón 59,6%. Las lesiones observadas más relevantes fueron: Neumonía enzoótica en primer lugar de incidencia con un 93,6%, mientras que la Degeneración muscular cardíaca y hemorragias inespecíficas coexistieron en un 32,6% de los casos estudiados; la incidencia de Pleuritis alcanzó un 27,0%, Neumonía enzoótica crónica activa 21,4%, Pericarditis 12,8%, Pleuroneumonía 8,8% y Abscesos 1,6%. Se estimó el porcentaje de granjas con animales afectados y el promedio de cerdos con lesiones por las granjas; la incidencia de Neumonía enzoótica fue del 100% de granjas con animales afectados, al igual que Degeneración muscular cardíaca y Hemorragias in específicas.243 - 250BimestralFive hundreds of slaughtered fattering pigs thoracic viscera from 27 farm, of different place of Venezuela, during 1995 were studied. The viscera came from pigs ready to market, at slaughterhouse of Aragua state and were picked up at random. The evaluated organs were: lungs and heart. Gross lesions observed in the affected organs were evaluated according to differents methods and the microscopy methods used: Dungworth, Robinson and Grant. The frecuency of lesions in inspected organs were as follows: lungs 95.6% and heart 59.6%. Among the described lesions, the first place was occuped for Chronic Enzootic Pneumonia with 93.6% of incidence, followed by Heart muscle degeneration additional to non specific haemorhages both of them had 32.6% of all the studied samples. The Pleuritis occurrence reached 27.0%, Active Chronic Enzootic pneumonia 21.4%, Pericarditis 12.8%, Pleuropneumonia 8.8% and Abscess 1.6%. The affected farms percentage was estimated, and average of lesioned pigs in this farms which incidence of Enzootic pneumonia reached 100% as well as heart muscle degeneration and inespecific haemorhages

Primary germinal cell tumors of the ovary in bitches

Se estudiaron 8 neoplasmas de las células germinales primarias de ovario. Ellos incluyeron 6 (75%) Teratomas y 2 (25%) Disgerminomas. La edad promedio de los animales afectados fue de 4.6 años. Las características clínicas y morfológicas más importantes fueron descritas. Los 6 Teratomas se diagnosticaron como benignos y en 1 de los 2 Disgerminomas se evidenció metástasis a varios órganos y tejidos. Los neoplasmas fueron clasificados de acuerdo al criterio de la Organización Mundial de la Salud.40 - 46BimestralEight primary germinal cell tumors of the ovary were studied. They included 6 (75%) Teratomas and 2 (25%) Dysgerminomas. The mean age of the animals affected was of 4.6 years old. The most important clinical and morphologycal features were described. Six Teratomas were diagnosed as benigns and 1 of the 2 Dysgerminomas showed metastasis to various organs and tissues. The neoplasms were classified according to the criteria of the World Health Organization

Porcine reproductive and respiratory syndrome. Tissue antigens detection. Clinical, anatomopathological and serological aspects in Aragua and Carabobo states, Venezuela

Se realizó un estudio en 12 granjas porcinas ubicadas en dos estados centrales de Venezuela: Aragua y Carabobo. Se evaluaron clínicamente 706 cerdos entre Octubre de 1996 y Diciembre de 1997, detectándose síntomas de afección respiratoria y falta reproductiva. Se tomaron 706 muestras de sangre de 204 cerdos, 472 de lechones destetados y 30 de crecimiento y engorde. De las 12 granjas evaluadas, en dos había brotes sugestivos de Síndrome Reproductivo y Respiratorio Porcino (PRRS), en siete granjas había historia de enfermedad respiratoria persistente, en 2 había desórdenes reproductivos y en 3 no existía historia de PRRS. La prueba serológica para PRRS se realizó con un Kit comercial de ELISA. Cincuenta animales fueron estudiados por anatomía patológica realizándose la necropsia y el estudio macroscópico, microscópico, así como la detección de antígeno tisular. Las muestras fueron colectadas de cerdos con signos de fiebre, debilidad, secreción nasal y disnea, tejidos de los pulmones y tonsilas fueron procesados utilizando el procedimiento de inmunoperoxidasa. Los resultados revelaron seropositividad en la prueba de ELISA para PRRS de un 88% en el estado Aragua (819) y del 100% (313) en Carabobo. El estudio anatomopatológico permitió demostrar variedad de lesiones pulmonares y presencia de antígeno tisular en tonsilas y macrófagos alveolares en todos los casos de animales afectados. En esta investigación se señala la presencia de antígeno de PRRS por primera vez en granjas porcinas de estos Estados en Venezuela. Se pudo asumir que todos los casos de PRRS eran debidos a infección natural, en razón de no existir vacunas para esa enfermedad para el periodo bajo estudio.215 - 222BimestralAn study was carried out in 12 pig farms located in two central states of Venezuela: Aragua and Carabobo. Seven hundred and six pigs were clinically evaluated between October 1996 and December 1997. The clinical signs of animals were respiratory and reproductive disorders. A total of 706 blood samples from 204 pigs, 472 from weanling piglets and 30 growingfinishing pigs. Two of 12 farms, had outbreaks that suggested PRRS, in 7 farms there was history of persistent respiratory disease, in 2 farms there was reproductive disorders, and in 3 farms there was no history of PRRS. A serologic test for PRRS was performed using an ELISA commercial Kit. Fifty pigs were submitted to the necropsy laboratory, for gross and microscopic evaluation. Tissue samples were taken for histopathologic observations as well as for tissue antigen detection. These samples were collected from pigs with clinical signs such as: fever, weakness, nasal discharge and dyspnea. The tissue from lung and tonsils were processed using the immunoperoxidase procedure. Results were: 88% PRRS seropositive in Aragua State (819), and 100% in Carabobo State (313) by the use of Elisa Test. The anatomopathological study allowed to find a variety of lung lesions, as well as the presence of tissue PRRS antigens in tonsils and alveolar macrophages in all affected animals. This aspect is the first report of PRRSV in Venezuela by antigen detection using the immunoperoxidase method. Since no autogenous nor commercial vaccines were used in Venezuela at the time period when this study was performed, it can be assumed that all cases of PRRS were due natural infection

ESTUDIO RETROSPECTIVO DE NEOPLASIAS DE PIEL EN CANINOS, CON REFERENCIA PARTICULAR A SU EDAD, RAZA, SEXO Y LOCALIZACIÓN

Se estudiaron 244 tumores de piel y subcutis, procedentes del Servicio de Diagnóstico Anatomopatológico de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UCV, desde 1992 a 2002; durante este período se recibieron 526 biopsias, de las cuales, 379 casos fueron diagnosticados como neoplasias. Se reseñaron 53 tipos de tumores distintos, consistiendo en mayor número de neoplasias malignasque las benignas. El más común fue el Tumor de células mastocíticas, seguido en orden de frecuencia por el histiocitoma cutáneo canino. La región ventral del cuerpo fue la localización mas frecuente. Los caninos reseñados como mestizosrepresentaron un número importante de la muestra; de las razas puras, el Bóxer fue la que registró la mayor casuística, seguida de Pastor alemán, Cocker spaniel y Dobermann Pinscher. El rango etario fue de 4 meses a 20 años, con una media de 6 a 7 años de edad.Skin Neoplasms in Canine, Retrospective Study with Particular Reference of Age, Breed, Sex and LocationAbstractTwo hundreds and forty four tumors of canine skin and subcutaneous tissues were studied at the Pathology Department, Veterinary School, Universidad Central de Venezuela, from 1992 to 2002. During this period 526 biopsies were submitted to histopathological study, 379 were diagnosed as tumors. Fifty three different types of neoplasm were registered, being the number of malignant tumors cases larger than benign tumors. The most frequent neoplasm was Mast cell tumor, followed by Canine cutaneous histiocytoma. Body ventral region was the most frequent tumor location. Crossbred dogs represented an important number of the sample; the boxer was the most common pure-bred dogs, followed by German Shepherd, Cocker Spaniel and Doberman Pinscher. Age range was between 4 months and 20 years, with a statistical average of 6 to 7 years

COINFECCIÓN DE CIRCOVIRUS PORCINO TIPO 2 CON EL VIRUS DEL SÍNDROME RESPIRATORIO Y REPRODUCTIVO PORCINO EN VENEZUELA

El circovirus porcino tipo 2 (PCV2) que ha sido asociado al síndrome de emaciación multisistémico postdestete (PMWS), generalmente es diagnosticado conjuntamente con otros agentes infecciosos en cerdos. El virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRSV) es probablemente el más frecuentemente asociado a estos casos. Aunado a ello, se ha sugerido una potencial relación entre ambos agentes, basándose en infecciones experimentales. Tomando en cuenta que ambos virus, PRRSV y PCV2, han sido detectados en Venezuela, es posible que la coinfección por estos agentes ocurra de forma natural bajo condiciones de campo en el país; en razón de lo cual, el objetivo del presente trabajo fue describir los signos clínicos, las lesiones macroscópicas y microscópicas, así como la detección de ambos virus en cerdos naturalmente coinfectados en Venezuela. Entre noviembre del 2001 y noviembre del 2002, fueron estudiados 27 cerdos entre 6 y 12 semanas de edad, provenientes de 11 granjas, las cuales presentaron capacidades entre 300 y 1.500 madres, estando ubicadas en los estados Aragua, Carabobo, Cojedes, Mérida, Yaracuy y Zulia. Los signos clínicos y las lesiones macro y microscópicas de los cerdos seleccionados fueron registradas. Muestras de tonsila, pulmón, nódulos linfáticos, bazo, hígado, intestino y riñón, fueron fijadas en formalina bufferada al 10% para la realización del examen histopatológico. Los casos compatibles con PMWS fueron procesados según la técnica de hibridación in situ (HIS) para detectar PCV2, realizándose inmunohistoquímica (IHQ) para PRRSV a las muestras positivas a PCV2, de manera de detectar aquellos casos de co–infección viral. De los 27 cerdos con signos clínicos como retraso en el crecimiento y disnea, 10 evidenciaron lesiones microscópicas consistentes con PMWS, de estos últimos, cinco resultaron positivos a la prueba de HIS, tres de ellos (dos con PMWS y uno con infección subclínica de PCV2) se encontraron positivos a PRRSV mediante la prueba de IHQ, siempre con identificación del agente en macrófagos alveolares.Coinfection of Porcine Circovirus Type 2 with Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome virus in VenezuelaABSTRACTPorcine circovirus type 2 (PCV2) is usually found concomitantly with other agents in postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Among them, porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) is probably the most frequent one. Furthermore, a potential synergy between those agents has been suggested based on experimental infections. Taking into account that both PRRSV and PCV2 have been detected in Venezuela, it is possible that coinfections by these viral agents occur under field conditions. Therefore, the purpose of this work was to describe the clinical signs, gross lesions observed, histopathological findings and detection of both PCV2 and PRRSV in pigs naturally co-infected with these viruses in Venezuela. Between november 2001 and november 2002, twenty seven 6-12 weekold pigs, taken from eleven farms with 300 to 1500 sows were studied. Herds were located in the states of Aragua, Carabobo, Cojedes, Mérida, Yaracuy and Zulia. Clinical signs and macroscopic lesions of selected pigs were registered. Samples of tonsil, lung, lymph nodes, spleen, liver, intestine and kidney were fixed by immersion in 10% buffered formalin for histopathological examination. Those cases compatibles with PMWS were further processed by in situ hybridization (ISH) to detect PCV2. Finally immunohystochemestry (IHC) for PRRSV detection was only performed in the PCV2 positives samples in order to detect those cases of viral co-infection. Ten out of 27 pigs with clinical signs, growth retardation and respiratory signs, showed microscopic lesions compatible with those of PMWS, five out of these last 10 were positive to ISH to detect PCV2. IHC to detect PRRSV antigen was performed in those 5 PCV2 positive cases. Three of them (two with PMWS and the third with a PCV2 subclinical infection) were found positive to the PRRSV IHC test; labeled cells consisted of alveolar macrophages

PRIMER REPORTE EN VENEZUELA DEL SÍNDROME DE EMACIACIÓN MULTISISTÉMICO POST-DESTETE PORCINO

En años recientes el Síndrome Multisistémico de Emaciación Post Destete Porcino (PMWS) ha tenido importancia en la industria porcina en muchos países, particularmente en Canadá, Europa, Estados Unidos de América, Asia y Sur América. El síndrome afecta cerdos jóvenes, principalmente entre 6 y 14 semanas de edad. El PMWS está caracterizado por emaciación, neumonía, diarrea, ictericia y aumento de volumen de los linfonódulos. El síndrome ha sido asociado con un circovirus porcino tipo 2 (PCV2) y, simultáneamente pueden ocurrir otras enfermedades: parvovirus porcino, virus del síndrome respiratorio y reproductivo porcino (PRRS), etc. El diagnóstico del PMWS se basa en la edad de los cerdos afectados, la típica apariencia de emaciación, hallazgos de necropsia, histopatológicos, y exámenes de Hibridación in situ (HIS) en tejidos que revelan la presencia de PCV2. El presente estudio se realizó en 12 lechones de 8 a 12 semanas de edad, ubicados en 3 granjas porcinas de estados centrales de Venezuela (Aragua/Carabobo). Los lechones presentaban signos de consunción, palidez generalizada, disnea, diarrea e hipertrofia de linfonódulos superficiales inguinales. A la necropsia se evidenció neumonía con pulmones no colapsables e incremento de tamaño de linfonódulos inguinales, mesentéricos y traqueobronquiales; mientras en la histopatología se evidenció depleción linfoide con pérdida de la arquitectura folicular en linfonódulos, bazo y placas de Peyer, con presencia de infiltración histiocitaria, células sincitiales y corpúsculos intensamente basófilos intracitoplasmáticos en histiocitos, lo cual es altamente sugestivo de PMWS. Adicionalmente se procesaron muestras de estos mismos tejidos mediante una técnica de HIS, que permitió demostrar la presencia de PCV2 en los tejidos linfoides afectados y confirmar el diagnóstico de PMWS. Esta es la primera descripción de esta entidad patologica en Venezuela.Postweaning Multisystemic Wasting Swine Syndrome, First Report in VenezuelaAbstractIn recent years Post Weaning Multisystemic Wasting Syndrome has become of significant concern in the swine industry in many countries, particularly Canada, United States of America, Europe, Asia and South America. The syndrome affects pigs mainly between 6 and 14 weeks of age. It is characterized by wasting, pneumonia, diarrhea, jaundice and enlarged lymph nodes. The syndrome has been associated with a porcine circovirus type 2 (PCV2) and simultaneous infections with porcine parvovirus (PPV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRS) etc. The diagnosis of PMWS syndrome is based on the age of affected pigs, typical wasting appearance and necropsy lesions, histopathologic study and in situ hybridization (ISH) of affected tissues, showing the presence of PCV2 by HIS methods. The present study was performed in 12 piglets between 8 and 12 weeks of age, located in 3 porcine farms from Central States of Venezuelan (Aragua/Carabobo). The pigs showed signs of comsumption, pallor, dispnea, diarrhea, and enlarged superficial inguinal lymph nodes. At necropsy there was evidence of pneumonia with noncolapsable lungs as well as inguinal, mesenteric and tracheobronchial lymph nodes enlargement The histopathology study showed lymphoid depletion, with loss of follicles architecture in lymph nodes, spleen, and Peyer´s patches, histiocytic infiltration, sincitial cells and basophilic cytoplasmic inclussions in histiocytic cells. The findings described are suggestive of PMWS. The same tissues specimen were processed by a technique of IHS and revealed the presence of PCV2 in the affected lymphoid tissues to confirm the diagnosis of PMWS. This is the first description of the syndrome in Venezuela