Secretion of Bacillus amyloliquefaciens Transglutaminase from Lactococcus lactis and Its Enhancement of Food Gel Properties

(1) Background: Microbial transglutaminases (MTGase) catalyze protein crosslink. This is useful in the food industry to improve gelation, water holding capacity, and emulsifying capacity during foodstuff manufacturing. The production of MTGase in wild-type strains renders low yield and high costs of downstream purification, limiting its industrial applications. (2) Methods: In this work, MTGase from Bacillus amyloliquefaciens BH072 (BaMTGase) has been heterologously expressed in Lactococcus lactis, using the signal peptide Usp45 to direct the secretion of recombinant BaMTGase out of the cell for easier purification. (3) Results: In these conditions, MTGase was purified with a high yield (48.7 +/- 0.2 mg/L) and high enzyme activity (28.6 +/- 0.5 U/mg). Next, BaMTGase was tested for industrial applications. Recombinant BaMTGase and commercial MTGase were used for SPI solution crosslinking. BaMTGase formed a harder gel with higher water-holding capacity and a dense and smooth gel microstructure. (4) Conclusions: This work provides an attractive food-grade cell factory for the food industry and offers a suitable chassis for MTGase production.Major Project of Science and Technology of Anhui Province 201903a06020007 202103b06020009 202003b06020017Natural Science Foundation of Anhui Province 2108085MC123Fundamental Research Funds for the Central Universities PA2021KCPY0048China Postdoctoral Science Foundation 2019M65101

Feasability of Introducing a Thioether Ring in Vasopressin by nisBTC Co-expression in Lactococcus lactis

Introducing one or more intramolecular thioether bridges in a peptide provides a promising approach to create more stable molecules with improved pharmacodynamic properties and especially to protect peptides against proteolytic degradation. Lanthipeptides are compounds that naturally possess thioether bonds in their structure. The model lanthipeptide, nisin, is produced by Lactococcus lactis as a core peptide fused to a leader peptide. The modification machinery responsible for nisin production, including the Ser/Thr-dehydratase NisB and the cyclase NisC, can be applied for introducing a thioether bridge into peptides fused to the nisin leader peptide, e.g., to replace a disulfide bond. Vasopressin plays a key role in water homeostasis in the human body and helps to constrict blood vessels. There are two cysteine residues in the structure of wild type vasopressin, which form a disulfide bridge in the mature peptide. Here, we show it is possible to direct the biosynthesis of vasopressin variants in such a way that the disulfide bridge is replaced by a thioether bridge using the nisin modification machinery NisBTC, albeit at low efficiency. Vasopressin mutants were fused either to the nisin leader peptide directly (Type A), after the first three rings of nisin (Type B/C), or after full nisin (Type D). The type B strategy was optimal for expression. LC-MS/MS data verified the formation of a thioether bridge, which provides proof of principle for this modification in vasopressin. This is a first step prior to the necessary increase of the production yield and further purification of these peptides to finally test their biological activity in tissue and animal models.Chinese Scholarship Council (No. 201306770012)MM-L was supported by a grant of the EU FW7 Project SynPeptide

Sociological review of European fascism in the interwar period

Después de la Primera Guerra Mundial se produjeron una crisis socioeconómica y política, destacando la caída del sistema liberal democrático y el surgimiento de una nueva forma de dictadura, el fascismo. En este artículo se realiza una revisión crítica de las aportaciones de los investigadores sociales al análisis de las condiciones sociales y al comportamiento de los actores que favorecieron el ascenso del fascismo, a través de una metodología de Historia Comparada. Con ello, se pretende responder a interrogantes como la definición y caracterización del fascismo, así como comprender el apoyo sociológico que consiguió aglutinar en los países que triunfó y determinar su fracaso en otros. La actualidad del tema se refleja mediante la comparación con la crisis que atraviesa Europa desde 2008. Entre las conclusiones destaca que el fascismo germinó entre un espectro social interclasista desesperado ante la situación de crisis. Si bien, sólo logró movilizarse y triunfar en aquellos Estados en los que fracasaron las alianzas democráticas.After World War I there was a socioeconomic and political crisis, highlighting the fall of the liberal democratic system and the emergence of a new form of dictatorship, fascism. In this article, a critical review of the contributions of social researchers to the analysis of social conditions and the behavior of the actors which stimulated the rise of fascism, through a methodology of Comparative History. The aim is to answer questions such as the definition and characterization of fascism, as well as to understand the sociological support that managed to win in the countries that was succeeded and determine their failure in others. The validity os the topic is reflected in the comparison with the current European crisis since 2008. Among the conclusions emphasise that fascism germinated between a desperate inter-class social spectrum in the face of crisis. However, it only managed to mobilise and succeed in those states in which democratic alliances have failed

"Contra los paganos". El conflicto cristiano-pagano en la Bética tardoantigua

En este artículo se pretende realizar un acercamiento al conflicto religioso cristiano-pagano que tuvo lugar en la provincia de la Bética, en principio, una de las provincias más romanizadas y más tempranamente cristianizadas. Analizaremos el conflicto religioso que se generó desde la llegada de la nueva religión de Cristo al territorio meridional hispano, se intensificó a causa de las medidas cristianas antipaganas, y se dilató en el tiempo hasta fechas muy próximas a la invasión musulmana de la Península. Por último, aludiremos al proceso de cristianización paralelo a la persecución pagana y si pudieron subsistir persistencias paganas en la Bética.(EN) In this paper we aim realize an approach to the Christian-pagan religious conflict that took place in the province of the Baetica, in principle, one of the most Romanized and most early Christianized. We analyzed the religious conflict that it was generated since the arrival of the new religion of Christ to Hispanic Southern territory, it was increased due the anti-pagan Christian restrictions, and it expanded over time, reaching dates near to the Muslim invasion of the Iberian Peninsula. Finally, we alluded to the process of Christianization, which it must be parallel to pagan persecution and if there was a possibility that pagan survivals exist.Artículo revisado por pare

Ensayos geofísicos para la exploración de suelos en estructuras patrimoniales

En la investigación de suelos en estructuras patrimoniales se necesita emplear técnicas no destructivas que permitan investigar el suelo y determinar sus propiedades sin causar daños a la estructura del monumento ni alterar el suelo que se investiga. Aquí los métodos geofísicos se presentan como una alternativa de solución debido a que cumplen con los requisitos necesarios para investigar el suelo y en gran mayoría son métodos no destructivos. La presente investigación se centra en comprender y aplicar los métodos geofísicos con fines geotécnicos en la exploración de tres estructuras patrimoniales de interés empleando los equipos disponibles en la Pontificia Universidad Católica (PUCP). Los métodos geofísicos que se emplearon son el análisis multicanal de ondas superficiales (MASW), refracción sísmica y cociente espectral (H/V). En el desarrollo de la tesis se presenta la teoría necesaria para entender los métodos empleados, entrando más a detalle en el método MASW por ser el más complejo de analizar. También se describe las características de los equipos empleados y la metodología que se ha seguido en los ensayos para la toma de la información, el procesamiento y la posterior discusión de los resultados. El primer caso de estudio fue el Complejo Arqueológico de Huaca de la Luna localizado en la ciudad de Trujillo donde se realizaron principalmente ensayos de MASW y refracción sísmica. También se realizaron ensayos de SCPTu como una técnica de comparación de los resultados de velocidad de onda de corte (Vs). Adicionalmente se realizaron algunos ensayos geotécnicos tradicionales complementados con una breve revisión de la geología del lugar para comprobar la eficacia de los resultados y así tener una mejor estimación del perfil estratigráfico del sitio. Este primer estudio permitió confirmar que las técnicas empleadas y los equipos utilizados permitían brindar buenas aproximaciones de los parámetros del suelo. Los resultados geofísicos y el SCPTu brindaron resultados comparables de Vs, y permitieron estimar el perfil que sigue el estrato duro en el fondo que corresponde con la geología del lugar. Los otros dos casos de estudio fueron la Iglesia San Juan Bautista de Huaro y la Iglesia San Pedro Apóstol de Andahuaylillas, ambas ubicadas en la Ciudad de Cusco. Aquí se realizaron ensayos de MASW y H/V, y los resultados permitieron realizar una estimación del perfil del suelo en función de los resultados de Vs y la información geológica de la zona. Adicionalmente se estimó la frecuencia de vibración del modo fundamental del suelo en ambas zonas. Los resultados obtenidos en los casos de estudio confirmaron la eficacia de los métodos geofísicos para la exploración de suelos cuando se necesita estimar el perfil estratigráfico del suelo o estimar parámetros como el Vs, que posteriormente se puede emplear para determinar la rigidez del suelo. Otro de los objetivos logrados fue comprobar la utilidad de emplear los equipos de la PUCP sin necesidad de recurrir a equipos convencionales que se emplean en la industria, esto gracias a que se logró un buen conocimiento de los ensayos.Tesi

Aplicación del método intervención en la reducción del índice de accidentabilidad en la contratista minera AESA

Determina la influencia del método intervención en la reducción de índice de accidentabilidad en una contratista minera. Se desarrolló en el contexto de la inseguridad de los trabajadores de una contratista minera y las medidas para reducir accidentes y riesgos. El problema de esta investigación surge sobre los altos índices de accidentabilidad en empresas del rubro de la minería ante ello surge la pregunta “Cuál es la influencia del método intervención en la reducción de índice de accidentabilidad en la unidad minera” para el desarrollo de este problema se usó el tipo de investigación correlacional de diseño observacional transversal, la muestra usada fueron los colaboradores que se desarrollan en el área de Operaciones con un total de 24 trabajadores

Employing the promiscuity of lantibiotic biosynthetic machineries to produce novel antimicrobials

As the number of new antibiotics that reach the market is decreasing and the demand for them is rising, alternative sources of novel antimicrobials are needed. Lantibiotics are potent peptide antimicrobials that are ribosomally synthesized and stabilized by post-translationally introduced lanthionine rings. Their ribosomal synthesis and enzymatic modifications provide excellent opportunities to design and engineer a large variety of novel antimicrobial compounds. The research conducted in this area demonstrates that the modularity present in both the peptidic rings as well as in the combination of promiscuous modification enzymes can be exploited to further increase the diversity of lantibiotics. Various approaches, where the modifying enzymes and corresponding leader peptides are decoupled from their natural core peptide and integrated in designed plug-and-play production systems, enable the production of modified peptides that are either derived from vast genomic data or designed using functional parts from a wide diversity of core peptides. These approaches constitute a powerful discovery platform to develop novel antimicrobials with high therapeutic potential

Bacteriocins of lactic acid bacteria:extending the family

Lactic acid bacteria (LAB) constitute a heterogeneous group of microorganisms that produce lactic acid as the major product during the fermentation process. LAB are Gram-positive bacteria with great biotechnological potential in the food industry. They can produce bacteriocins, which are proteinaceous antimicrobial molecules with a diverse genetic origin, posttranslationally modified or not, that can help the producer organism to outcompete other bacterial species. In this review, we focus on the various types of bacteriocins that can be found in LAB and the organization and regulation of the gene clusters responsible for their production and biosynthesis, and consider the food applications of the prototype bacteriocins from LAB. Furthermore, we propose a revised classification of bacteriocins that can accommodate the increasing number of classes reported over the last years

Posttranslational Peptide-Modification Enzymes in Action:Key Roles for Leaders and Glutamate

In this issue of Cell Chemical Biology, Ortega et al. (2016) determine the structure of another lantibiotic dehydratase with a tRNA(Glu)-dependent mechanism of modification. Moreover, they identify a common recognition motif involved in leader peptide binding in a number of different peptide-modification enzymes. These findings open up new mining possibilities and allow novel approaches in peptide engineering