Transferable denitrification capability of thermus thermophilus

Laboratory-adapted strains of Thermus spp. have been shown to require oxygen for growth, including the model strains T. thermophilus HB27 and HB8. In contrast, many isolates of this species that have not been intensively grown under laboratory conditions keep the capability to grow anaerobically with one or more electron acceptors. The use of nitrogen oxides, especially nitrate, as electron acceptors is one of the most widespread capabilities among these facultative strains. In this process, nitrate is reduced to nitrite by a reductase (Nar) that also functions as electron transporter toward nitrite and nitric oxide reductases when nitrate is scarce, effectively replacing respiratory complex III. In many T. thermophilus denitrificant strains, most electrons for Nar are provided by a new class of NADH dehydrogenase (Nrc). The ability to reduce nitrite to NO and subsequently to N2O by the corresponding Nir and Nor reductases is also strain specific. The genes encoding the capabilities for nitrate (nar) and nitrite (nir and nor) respiration are easily transferred between T. thermophilus strains by natural competence or by a conjugation-like process and may be easily lost upon continuous growth under aerobic conditions. The reason for this instability is apparently related to the fact that these metabolic capabilities are encoded in gene cluster islands, which are delimited by insertion sequences and integrated within highly variable regions of easily transferable extrachromosomal elements. Together with the chromosomal genes, these plasmid-associated genetic islands constitute the extended pangenome of T. thermophilus that provides this species with an enhanced capability to adapt to changing environments. © 2014, American Society for Microbiology.Spanish Ministry of Science. An institutional grant from Fundación Ramón ArecesPeer Reviewe

Functional expression of a penicillin acylase from the extreme thermophile Thermus thermophilus HB27 in Escherichia coli

Background: Penicillin acylases (PACs) are enzymes of industrial relevance in the manufacture of beta-lactam antibiotics. Development of a PAC with a longer half-life under the reaction conditions used is essential for the improvement of the operational stability of the process. A gene encoding a homologue to Escherichia coli PAC was found in the genome of the thermophilic bacterium Thermus thermophilus (Tth) HB27. Because of the nature of this PAC and its complex maturation that is crucial to reach its functional heterodimeric final conformation, the overexpression of this enzyme in a heterologous mesophilic host was a challenge. Here we describe the purification and characterization of the PAC protein from Tth HB27 overexpressed in Escherichia coli. Results: Fusions to a superfolder green fluorescent protein and differential membrane solubilization assays indicated that the enzyme remains attached through its amino-terminal end to the outer side of the cytoplasmic membrane of Tth cells. In order to overexpress this PAC in E. coli cells, a variant of the protein devoid of its membrane anchoring segment was constructed. The effect of the co-expression of chaperones and calcium supplementation of the culture medium was investigated. The total production of PAC was enhanced by the presence of DnaK/J and GrpE and even more by trigger factor and GroEL/ES. In addition, 10 mM calcium markedly improved both PAC specific and volumetric activities. Recombinant PAC was affinity-purified and proper maturation of the protein was confirmed by SDS-PAGE and MALDI-TOF analysis of the subunits. The recombinant protein was tested for activity towards several penicillins, cephalosporins and homoserine lactones. Hydrophobic acyl-chain penicillins were preferred over the rest of the substrates. Penicillin K (octanoyl penicillin) was the best substrate, with the highest specificity constant value (16.12 mM-1.seg-1). The optimum pH was aprox. 4 and the optimum temperature was 75 [DEGREE SIGN]C. The half-life of the enzyme at this temperature was 9.2 h. Conclusions: This is the first report concerning the heterologous expression of a pac gene from a thermophilic microorganism in the mesophilic host E. coli. The recombinant protein was identified as a penicillin K-deacylating thermozymeL.T., A.H. and J.B. acknowledge funding from the Spanish Ministry of Science (grants CIT 010000-2009-29, RyC2006-02441) and an institutional grant from Fundación Ramón Areces to CBMS

A modular vector toolkit with a tailored set of thermosensors to regulate gene expression in thermus thermophilus

The Supporting Information is available free of charge on the ACS Publications website at DOI: 10.1021/acsomega.9b02107Modular plasmid architectures have shown to be a very useful resource to standardize, build, share, and compare biological parts and functional vectors, and are being applied in an increasing number of microorganisms. Here, we present a modular plasmid toolkit for Thermus thermophilus, a species considered as a workhorse for biotechnology and a model for high-temperature biology. Apart from integrating improved versions of already existing parts, we have characterized specific promoters and developed a thermosensor-based palette that restricts the expression to Thermus and, at the same time, controls protein expression in this organism in a temperature-dependent mannerThis work was supported by the European Union grant H2020-BIOTEC-2014-2015/H2020-LEIT-BIO-2015-1 and grant BIO2016-77031R from the Spanish Ministry of Science, Innovation and Universities (MICIU). An institutional grant to CBMSO from Fundación Ramón Areces and an FPI contract to C.V. from the MCIU are also acknowledge

Metodologí­a de las investigaciones en Contabilidad

Esta investigación tuvo como objetivo revisar las tendencias metodológicas que se manifiestan en las investigaciones reportadas en Contabilidad y publicadas en revistas cientí­ficas reconocidas.Se realizó para ello una revisión en Google Académico para la aparición de las palabras “metodologí­a” y “contabilidad” en el tí­tulo de los documentos se obtuvieron un total de 74 documentos. Tambí­en se revisó la Base de Datos Especializada de Scopus para el término “Accounting Research” en el titulo de los artí­culos con lo que obtuvieron un total de 820 referencias. Esta base de Datos se filtró nuevamente para la aparición de los términos: “Research Methods & Literature review” en el titulo con lo que se obtuvo un total de 28 referencias.Se pudo constatar en base con el promedio de citas para un artí­culo que existe un mayor impacto de las publicaciones en idioma inglés pero que más allá de esta comparación   bibliométrica se trata   de dos visiones diferentes en relación con las investigaciones en Contabilidad. En relación con la revisión de la literatura en idioma español se pudieron determinar dos lí­neas de investigación   deseables:a) El análisis del método de casos, su aplicación y la clasificación de los mismos en casos: descriptivos, ilustrativos, y exploratorios.b) Investigaciones teóricas que permitan precisar la multidimensionalidad de esta.La revisión de la literatura en idioma permitió establecer dos preguntas de importancia ¿Debe ser la inferencia causal el objetivo de la investigación contable? ¿Cuál debe ser, la relación entre la teorí­a y la investigación empí­rica en la contabilidad

Teorías, modelos y estrategias de desarrollo en Ecuador. Períodos presidenciales: Sixto Duran, Abdala Bucarán, Fabian Alarcón, Rosalía Arteaga

Los países se fundamentan en gestiones de Estado basadas en estrategias políticas, de manera que para precisar los progresos que una determinada nación tiene en el proceso de consolidación de aspectos claves como su economía, la gestión social, entre otros. El presente trabajo ha sido desarrollado con el fundamento del estudio de algunas de las estrategias implementadas en años pasados por los mandatarios presidenciales de países como Ecuador en el contexto de América Latina y los progresos que estos pudieron dejar en el desarrollo económico y social de la nación. El objetivo de la investigación presentada fue Conocer los principales aspectos de la gestión de los presidentes Sixto Duran, Abdala Bucarán, Fabián Alarcón, Rosalía Arteaga. El método y materiales empleados fue la revisión bibliográfica, con un arqueo de fuentes documentales, un registro de estudios previos sobre los progresos y aspectos cruciales en la gestión presidencial del Ecuador en los años 1992 hasta el año 1998. Las conclusiones obtenidas fueron que los periodos presidenciales en general se caracterizaron por la desatención de elementos trascendentales del gobierno como fue la deuda social y la inversión en fuentes de empleo y progreso para los ciudadanos. De tal forma que, los propios intereses particulares y la ubicación de cargos esencialmente favorita e individualista redujeron la posibilidad de crecimiento y un mejor posicionamiento de los ciudadanos respecto a las demandas de mejoras sociales

E-learning y oficinas virtuales durante la pandemia del Covid-19

The Covid 19 pandemic has triggered worldwide the implementation of strategies that help to do at home what is normally done in a work office and in a classroom, this as a consequence of quarantine and isolation, which has caused the closure of non-essential businesses and shops, universities, schools and high schools. The research methodology is of a bibliographic review type. The general conclusions reached in the research is that each country, based on its circumstances, has applied the best available strategies to avoid a collapse in its educational and production systems, encouraging work from home, either as education. remote or telework. However, up to the date of this research, there were no real world figures by region for the number of people who are doing work and homeschooling, more than anything they are estimates, the information has to be collected by country and then aggregated. Another conclusion is that there cannot be a job and distance education, if internet access is limited in the countries, if there are not enough mobile lines for every x number of people and of course the ability of people to acquire them.La pandemia del Covid 19 ha desencadenado a nivel mundial la implementación de estrategias que ayuden a hacer en casa lo que normalmente se hace en una oficina de trabajo y en un aula de clase, esto como consecuencia de la cuarentena y el aislamiento, que ha provocado el cierre de empresas y comercios no esenciales, universidades, escuelas y liceos. La metodología de la investigación es de tipo revisión bibliográfica. Las conclusiones generales a las que se llegan en la investigación, es que cada país, en base a sus circunstancias ha aplicado las mejores estrategias disponibles para evitar un colapso en sus sistemas educativos y de producción, incentivando el trabajo desde casa, ya sea como educación a distancia o tele trabajo. Sin embargo hasta la fecha de esta investigación no había cifras mundiales reales por región de la cantidad de personas que están haciendo trabajo y educación en casa, más que todo son estimaciones, la información tiene que ser recabada por país para luego ser totalizada. Otra conclusión es que no puede haber un trabajo y educación a distancia, si el acceso a internet es limitado en los países, si no hay líneas móviles suficientes por cada x cantidad de personas y por supuesto la capacidad de las personas para adquirirlos

Realidad de los Microcréditos para los Emprendimientos Femeninos en la Zona Noroeste de Guayaquil, Ecuador

Entrepreneurship is a very relevant tool to help people out of a difficult economic situation. There are many countries whose economies have worsened due to the arrival of the Covid-19 pandemic. Part of the most vulnerable population are women, who in many cases have to raise a family, sometimes alone, and seeing an opportunity to start a business do not have the necessary resources, this is where microcredit comes into play, an instrument offered by both public and private institutions, which come to offer an opportunity to those who generally have been excluded from the financial system, this research is limited to the northwest area of the city of Guayaquil, Ecuador. The objective of this research is to analyze the reality of microcredit for women's entrepreneurship in the northwest area of Guayaquil. The results tell us that microcredits for women's entrepreneurship in the northwest area of the city of Guayaquil are a great opportunity, but as a conclusion we have that these are not necessarily the magic solution that will solve poverty, if care is not taken with the other situations surrounding an enterprise.El emprendimiento es una herramienta muy pertinente para ayudar a las personas a salir de una situación económica complicada. Muchos son los países que por la llegada de la pandemia del Covid-19 han empeorado su economía. Una parte de la población más vulnerable son las mujeres, que en muchos casos tienen que sacar adelante a una familia, a veces sola, y que viendo una oportunidad de emprender un negocio no tienen los recursos necesarios, es aquí donde entra en juego el microcrédito, instrumento ofrecido tanto por instituciones públicas como privadas, que vienen a ofrecer una oportunidad a quienes generalmente han estado excluidas del sistema financiero, esta investigación está circunscrita a la zona noroeste de la ciudad de  Guayaquil, Ecuador. El objetivo de esta investigación es analizar la realidad de los microcréditos para los emprendimientos femeninos en la zona noroeste de Guayaquil. Los resultados nos dicen que los microcréditos para los emprendimientos femeninos en la zona noroeste de la ciudad de Guayaquil sí son una gran oportunidad, pero como conclusión tenemos que no necesariamente estos sean la solución mágica que va a resolver la pobreza, si no se tiene cuidado con las demás situaciones que rodean a un emprendimiento.El emprendimiento es una herramienta muy pertinente para ayudar a las personas a salir de una situación económica complicada. Muchos son los países que por la llegada de la pandemia del Covid-19 han empeorado su economía. Una parte de la población más vulnerable son las mujeres, que en muchos casos tienen que sacar adelante a una familia, a veces sola, y que viendo una oportunidad de emprender un negocio no tienen los recursos necesarios, es aquí donde entra en juego el microcrédito, instrumento ofrecido tanto por instituciones públicas como privadas, que vienen a ofrecer una oportunidad a quienes generalmente han estado excluidas del sistema financiero, esta investigación está circunscrita a la zona noroeste de la ciudad de  Guayaquil, Ecuador. El objetivo de esta investigación es analizar la realidad de los microcréditos para los emprendimientos femeninos en la zona noroeste de Guayaquil. Los resultados nos dicen que los microcréditos para los emprendimientos femeninos en la zona noroeste de la ciudad de Guayaquil sí son una gran oportunidad, pero como conclusión tenemos que no necesariamente estos sean la solución mágica que va a resolver la pobreza, si no se tiene cuidado con las demás situaciones que rodean a un emprendimiento

Proposal of associativity in informal businesses related. Single mothers case from Northwest Guayaquil

La investigación se enfoca al Proyecto FCI-008-2019 la cual analiza la situación de las madres solteras del Noroeste de la Ciudad de Guayaquil, en el estudio se determina como las mujeres tienen menor oportunidad en el ámbito laboral es más hasta los ingresos mensuales están por debajo de la remuneración básica mensual que perciben los hombres. Es por ello, que muchas prefieren emprender en sus propios negocios informales con la finalidad de generar sus ingresos para poder suplir las necesidades básicas que la familia acarrea. Se realiza una investigación descriptiva que permita conocer la situación de las madres solteras en los negocios informales teniendo como hallazgo la falta de conocimiento en los procesos de asociatividad, ausencia de cultura financiera y de gestión empresarial. Por lo que se propone como estrategia un modelo de asociatividad que permita llevar un control de los negocios e impulsar el crecimiento económico de sus negocios. Al realizar el modelo podemos visualizar el cambio que se obtiene al unirse en una asociatividad las madres solteras siendo esta una alternativa de desarrollo financiero y económico de sus negocios.The Research focuses on the FCI-008-2019 Project which analyzes the situation of single mothers in the Northwest of the City of Guayaquil, in the study it is determined how women have less opportunity in the workplace, even monthly income is below the basic monthly salary received by men. That is why many prefer to start their own informal businesses in order to generate their income to be able to supply the basic needs that the family carries. A descriptive investigation is carried out that allows knowing the situation of single mothers in informal businesses, having as a finding the lack of knowledge in the processes of associativity, absence of financial culture and business management. Therefore, a model of associativity is proposed as a strategy that allows control of businesses and promote the economic growth of their businesses. When making the model we can visualize the change that is obtained when single mothers unite in an association, this being an alternative for the financial and economic development of their businesses

Limb Versus Precordial ECG Leads as Improved Predictors of Electrical Cardioversion Outcome in Persistent Atrial Fibrillation

[EN] Electrical cardioversion (ECV) is an effective and low-cost rhythm control strategy for persistent atrial fibrillation (AF). Because of its limited mid- and long-term success rates, prediction of early failure could avoid patients with reduced chance to maintain sinus rhythm (SR). To this end and due to its proximity to the right atrium, several indices characterizing atrial activity have been proposed based on lead V1. However, information from other leads has been discarded to date. Hence, this work studies how effective some common indices computed over the whole set of 12 standard ECG leads are in predicting ECV outcome. Precisely, amplitude, dominant frequency, and sample entropy were computed from the fibrillatory (f-) waves extracted for each one of 12 standard leads acquired before ECV from 58 patients in persistent AF. The classification between the patients who relapsed to AF and maintained sinus rhythm after a follow-up of 4 weeks achieved by these parameters was better from limb lead II than from V1, thus reporting improvements about 6 and 12%. As a consequence, characterization of f-waves from the more accessible limb lead II has proven to be the best choice to improve AF ECV outcome prediction from the ECG.This research was funded by the projects DPI2017-83952C3 from MINECO/AEI/FEDER EU, SBPLY/17/180501/000411 from "Junta de Castilla La Mancha" and AICO/2019/036 from "Generalitat Valenciana".Cirugeda, EM.; Calero, S.; Quesada, A.; Hidalgo, VM.; Rieta, JJ.; Alcaraz, R. (2020). Limb Versus Precordial ECG Leads as Improved Predictors of Electrical Cardioversion Outcome in Persistent Atrial Fibrillation. IEEE. 1-4. https://doi.org/10.22489/CinC.2020.373S1

LA EFECTIVIDAD DE LOS MAPAS CONCEPTUALES EN LA DESCOMPOSICIÓN FACTORIAL DE POLINOMIOS

Este trabajo comenzó en Cuba y se concluyó en Angola (2011-2014), el objetivo de este artículo es mostrar cómo desarrollar una herramienta educativa a través de un mapa conceptual que apoye el proceso de enseñanza aprendizaje de la  descomposición factorial de polinomio que constituye un problema en la enseñanza media. Apoyados  en una variada bibliografía y en métodos de los niveles teórico, empíricos, matemáticos y estadísticos; se creó un mapa conceptual digitalizado, que abarca entre otros: tutoriales, entrenadores y evaluadores al mismo tiempo. Se utilizó el programa cubano “Macosoft1” para la representación del conocimiento. Aborda una explicación teórica de todos los métodos de descomposición factorial tratados en nivel medio, además contiene ejercicios resueltos, ejercicios propuestos y una evaluación  que garantizan el desarrollo de habilidades. Como ventajas el trabajo proporciona, entre otras; el desarrollo y mejora del aprendizaje, es fácil de usar, puede ser utilizado de  manera semipresencial, admite la actualización e inclusión de nuevas herramientas digitales, desarrolla la actividad independiente y consigue un  conocimiento significativo. La consulta a expertos (profesores graduados con más de 15 años de experiencia), así como la comprobación práctica, muestran lo efectivo que resulta en el  empleo en la enseñanza de la matemática